首页 > 文献资料
-
决明子和山楂组分配伍对兔肝细胞膜高密度脂蛋白受体活性的影响
目的:观察决明子蒽醌苷与山楂总三萜酸配伍对实验性高血脂症兔血清低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein-cholesterol LDL-C)及肝细胞膜高密度脂蛋白受体(high density lipoprotein receptor HDLR)活性的影响.方法:雄性新西兰兔高脂饲养2周形成实验性高血脂症,继续给予高脂饮食,然后采用均匀设计法,分别给予决明子和山楂有效部位不同的比例配伍灌服,4周后高脂给量减半,继续服药至6周,免疫比浊法测定血清LDL-C变化,以125I标记的兔HDL3作为配体,用放射受体分析法对肝细胞膜HDLR活性进行测定.结果:决明子蒽醌苷与山楂总三萜酸按1:2.63配伍,可使血清LDL-C含量明显降低(P<0.01),肝细胞膜HDLR活性增加(P<0.05).结论:决明子蒽醌苷与山楂总三萜酸佳配比降低高血脂兔血清LDL-C的作用明显强于单一组分及原药对配伍,对肝细胞膜HDLR的影响呈现以受体数目显著增加为特征的受体结合活性升高.
-
化痰活血方拆方对高脂血症大鼠肝脏高密度脂蛋白受体基因表达的影响
目的:拆方观察化痰活血方中化痰与活血药对高脂血症大鼠肝脏高密度脂蛋白受体(SR.BⅠ)基因表达的影响,从分子水平明确该方防治高脂血症的有效作用部位.方法:Wistar 大鼠 50 只,随机分为空白组、模型组、全方组、化痰药组、活血药组,采用高脂饲料建立大鼠高脂血症模型.连续灌胃给药 30 d 后,应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定各组大鼠肝脏 SR-BImRNA 水平.结果:模型组大鼠肝 SR-BImRNA 表达明显低于空白组,化痰活血全方组和化痰药组大鼠肝 sR-BImRNA水平明显高于模型组,而活血药组和模型组无明显差异,结论:化痰药是化痰活血方中促进高脂血症模型大鼠肝脏 SR-BImRNA水平表达的主要组分,因而也是调节脂质代谢的主要作用部位.
-
高密度脂蛋白受体在胆固醇逆转运中的作用机制及其意义
早在100多年前就发现富含鸡蛋的饲料可引起兔形成与人类动脉粥样硬化(AS)斑块相似的脂肪条纹[1].在近一个世纪的研究表明,低密度脂蛋白(LDL)是致AS的重要原因,近几年他汀类降脂药物的使用使降低LDL进入到一个新的他汀时代,但是目前有效降低LDL-C治疗也只能减少三分之一的冠脉事件发生[2].高密度白蛋白(HDL)为AS的保护因素,它的一个主要的心血管保护功能是在胆固醇逆转运(RCT)中的作用.
-
B族Ⅰ型清道夫受体研究新进展
清道夫受体(scavenger receptor,SR)是一种细胞表面的糖蛋白,具有广泛的配基识别谱.20世纪70年代,Brown和Gol-dstein等通过实验发现一种可以和氧化低密度脂蛋白结合的受体-AcLDL受体,因其可以和多种配体结合,并且参与机体免疫功能,故将其命名为清道夫受体[1].在过去的20年里,从哺乳动物和果蝇属中先后克隆出至少九种SR的cDNA,根据其结构上的差异分为几个大族(A、B、C等),每一族又根据同一基因对mRNA的不同拼接等微小差异而分为几个类型[2].其中,B族Ⅰ型清道夫受体(SR-BⅠ)是第一个在分子水平上得到证实的高密度脂蛋白(HDL)受体,参与并介导了胆固醇的逆向转运过程,而且还具有多种其他重要的生理功能.
-
氨氯地平联合辛伐他汀对高脂饮食兔肝脏高密度脂蛋白受体的影响
目的：探讨高脂饮食及氨氯地平、辛伐他汀对兔肝脏高密度脂蛋白受体的影响。方法日本长耳兔50只随机分为对照组、模型组、氨氯地平组、辛伐他汀组、联合用药组，各10只。分别给予普通饲料及高脂饲料并加用药物。于实验开始、24周末测血脂水平，测定肝脏高密度脂蛋白受体(HDLR)的表达。结果模型组兔血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)高于对照组，差异具有统计学意义(P<0.01)。氨氯地平组 TC、TG、LDL-C 高于对照组，差异具有统计学意义(P<0.01)。辛伐他汀组 TC、TG、LDL-C 降低，高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)升高，较模型组差异具有统计学意义(P<0.01)。联合用药组 TC、LDL-C、TG 降低， HDL-C 升高，较对照组差异有统计学意义(P<0.05)，较模型组差异具有统计学意义(P<0.01)。结论氨氯地平不影响血脂水平，增加肝脏 HDLR 表达；辛伐他汀可明显调节血脂，增加肝脏 HDLR 表达；辛伐他汀、氨氯地平联合应用较单药更明显增加肝脏 HDLR表达。
关键词： 高脂血症 氨氯地平联合辛伐他汀 高密度脂蛋白受体 -
人高密度脂蛋白受体表达上调剂筛选模型的建立
目的建立靶向人高密度脂蛋白受体基因(CLA-1)调控序列的药物筛选模型,为筛选人高密度脂蛋白受体表达上调剂奠定基础.方法PCR扩增CLA-1上游调控序列,构建重组报告基因质粒pGL3-CLAP,瞬时转染人肝癌细胞BEL-7402,通过检测荧光素酶报告基因表达水平的变化筛选人高密度脂蛋白受体表达上调剂.结果建立了CLA-1表达上调剂筛选模型,pGL3-CLAP与阴性对照pGL3-Basic组间差异显著(P＜0.001),变异系数(CV)不超过10%.对124个化合物和800个微生物次级代谢产物进行初筛和复筛,1个化合物和3个菌株发酵液为阳性.结论该系统可有效地应用于人高密度脂蛋白受体表达上调剂的高通量筛选.
-
马齿苋脂肪油对动脉粥样硬化大鼠胆固醇逆向转运相关基因表达的影响
目的 探讨马齿苋脂肪油有效成分对肝脏卵磷脂胆固醇酯酰转移酶(LCAT)、载脂蛋白AI (apoAI)和高密度脂蛋白受体(SR-BI)基因表达的干预作用,分析马齿苋调节胆固醇逆向转运(RCT)通路的分子机制.方法 健康雄性SD大鼠24只,随机分为模型组、多烯康组、马齿苋组、正常组,每组6只.应用高脂高胆固醇膳食诱导建立动脉粥样硬化(AS)大鼠模型,用定量反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术测定LCAT、apoAI及SR-BI mRNA表达量,以免疫比浊法、沉淀法测定血清apoAI、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量.结果 模型组大鼠肝脏LCAT mRNA和apoAI mRNA的表达量明显下降,分别为0.43±0.20、2.33±0.35,与正常组(分别为1.49±0.32、6.30±0.82)、多烯康组(分别为1.15±0.16、4.32±0.69)、马齿苋组(分别为1.12±0.12、4.21±0.76)比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).模型组大鼠血清apoAI[(0.15±0.03)g/L]和HDL-C水平[(0.53-±0.25) mmol/L]明显下降,与马齿苋组[(0.39±0.09) g/L、(0.86±0.04) mmol/L]比较,差异有统计学意义(P＜0.05).除正常组外,多烯康组、马齿苋组、模型组肝脏LCAT mRNA表达量与HDL-C水平均呈明显的正相关(r值分别为0.935、0.927、0.892,P＜0.01).模型组大鼠肝脏SR-BI mRNA水平(1.33±0.57)下降,马齿苋组(3.20±0.41)高于模型组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 在转录水平阻抗高脂高胆固醇负荷下调大鼠肝脏LCAT和apoAI mRNA以及SR-BI mRNA表达的作用,促进RCT过程是马齿苋改善高脂血症、抗动脉粥样硬化的重要分子机制.
-
高密度脂蛋白受体SR-BI对细胞内胆固醇外流的影响
胆固醇逆向转运(RCT)是清除内源性胆固醇的重要途径,该过程指高密度脂蛋白(HDL)将多余的胆固醇从外周组织、细胞(包括泡沫细胞)通过载体血浆脂蛋白转运至肝脏,以胆酸的形式排泄或形成类固醇激素等再循环的过程.主要包括细胞胆固醇的流出、酯化及清除,而这些途径均需高密度脂蛋白受体中B族Ⅰ型清道夫受体(SR-BI)的参与.SRBI在HDL的代谢及胆固醇逆转运中的重要作用,是未来防治动脉粥样硬化的潜力靶点之一.
-
长期过量碘摄入对小鼠脂蛋白代谢影响
目的 观察长期过量碘摄入对小鼠血清脂蛋白代谢影响.方法 清洁级雌性断乳Balb/c小鼠60只,按体重随机分为6组(10只/组).在饮水中以KIO_3形式分别给予0(对照组),300,600,1200,2 400和4 800μg/L碘.30 d后,放射免疫法测定甲状腺激素,血清脂蛋白.PCR方法测定肝脏低密度脂蛋白受体(LDLR)、高密度脂蛋白受体(SR-B Ⅰ)基因表达水平.结果 各剂量组小鼠尿碘水平随着碘剂量升高明显增加(P＜0.01),血清四碘甲状腺原氨酸(TF4)、三碘甲状腺原氨酸(TT3)、促甲状腺激素(TSH)水平未发生明显性改变.2 400,4 800μ/L组血清总胆固醇(TC)与低密度脂蛋白一胆固醇(LDL-C)含量分别为(2.40±0.37),(2.58±0.42)和(0.39±0.11),(0.41±0.11)mmol/L,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).LDLR mRNA表达水平星碘剂量依赖性降低(r=-0.753,P＜0.01).结论 长期过量碘摄人可致小鼠血清LDL-C水平升高.LDLR受体表达降低可能是过量碘摄入导致脂蛋白代谢紊乱的机制之一.
-
糖基化终产物对U937巨噬细胞高密度脂蛋白受体蛋白表达的影响
目的研究诱导分化及糖基化终产物(AGEs)对人单核/巨噬细胞(U937细胞)高密度脂蛋白受体(SR-BI)蛋白表达的影响, 探讨AGEs和巨噬细胞SR-BI在动脉粥样硬化中的作用.方法 U937细胞经PMA诱导分化,并将不同浓度或同一浓度AGEs与诱导分化48 h后的U937细胞共同孵育, 用免疫细胞化学法和Western印迹法检测SR-BI蛋白的表达. 结果诱导分化后U937细胞SR-BI表达在24、48 h逐渐升高,72 h下降;100、200和400 μg/ml AGEs刺激后细胞表面SR-BI蛋白表达量分别是BSA组的1.44、2.38和2.77倍(P<0.05);400 μg/ml的AGEs作用6、12、24、48 h后, U937巨噬细胞SR-BI蛋白表达量分别为0 h的1.38、2.49、3.76和4.25倍(P<0 05).结论 AGEs可增加U937巨噬细胞SR-BI蛋白表达且呈浓度和时间依赖性.
-
SR-BI基因G4A多态性与脑出血的关联性研究
B族I型清道夫受体(SR-BI)为清道夫家族中的一型,是第一个在分子水平上得到证实的高密度脂蛋白受体,可以介导胆固醇及其他脂质在高密度脂蛋白和细胞之间进行双向流动,在动脉粥样硬化的发生和发展中起重要作用.
-
橄榄降脂胶囊对高脂血症大鼠血脂及其肝脏高密度脂蛋白受体基因表达的影响
目的 在基因水平上探讨中药橄榄降脂胶囊的降脂作用机制,为中药新药开发提供科学依据.方法 将48只雄性SD大鼠根据血总胆固醇水平随机分为:正常组、模型组、血脂康组,及橄榄降脂胶囊低、中、高剂量组,每组各8只.正常组普通饲料喂养,其余各组予高脂饲料,自由饮水.模型组灌胃生理盐水,血脂康组灌胃血脂康胶囊0.09g/kg,橄榄降脂胶囊低、中、高剂量组分别灌胃橄榄降脂胶囊0.675g/kg、1.35g/kg、2.7 g/kg.1次/d,连续给药6周.采用酶法检测大鼠血清TC、TG;采用磷钨酸-镁沉淀法检测HDL-c、LDL-c,RT-PCR法测定高脂血症大鼠肝脏高密度脂蛋白受体基因表达.结果 模型组大鼠血清胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇均显著高于正常组,高密度脂蛋白胆固醇显著低于正常组(P＜0.05).模型组大鼠肝SR-B1 mRNA表达降低,与正常组比较P＜0.05.经橄榄降脂胶囊治疗后肝SR-B1 mRNA表达升高与模型组比较P＜0.05,与正常组P＞0.05.结论 橄榄降脂胶囊可调节脂质代谢紊乱、治疗高脂血症,其作用机理可能与上调肝SR-B1mRNA表达水平有关.
-
人血高密度脂蛋白生物活性测定方法的研究
目的:建立人血高密度脂蛋白(HDL)生物活性检测法.方法:根据受体酶联免疫检测法的原理和步骤,以超速离心制备的HDL为参考品,以每1μg apoAⅠ为一个HDL活性单位,通过HDL生物活性标准曲线双对数回归方程,求测待测HDL制剂的生物活性.结果:标准曲线在1～16个活性单位范围内呈线性关系.测定的板内及板间变异系数分别为7.6%～9.5%及12.3%.结论:此法操作简便,重复性好,且HDL以外的脂蛋白不干扰检测反应,可作为检测人血浆HDL制剂生物活性的方法.
-
山楂总三萜酸对大鼠肝细胞合成~(14)C-胆固醇及肝细胞膜HDL受体活性的影响
目的:探讨山楂降血脂有效部位-山楂总三萜酸的作用机制.方法:采用体外大鼠肝细胞培养,以液体闪烁计数法测定肝细胞中合成~(14)C-胆固醇的量、生物素-亲和素酶联(BAE)法测定肝细胞膜高密度蛋白(HDL)受体活性.结果:山楂总三萜酸对~(14)C-胆固醇的合成有一定的阻抑作用;用药组与正常对照比较,肝细胞膜HDL受体亲和常数(Kd)无明显变化,大特异性结合量(B_(max))显著增加(P<0.05).表明山楂总三萜酸可使大鼠肝细胞膜HDL受体呈现以受体数目增加为特征的活性升高.结论:山楂总三萜酸降血脂作用可能与其提高HDL受体的活性、抑制胆固醇合成有关.
-
糖基化终产物促进U937巨噬细胞高密度脂蛋白受体的表达
目的研究糖基化终产物对U937巨噬细胞高密度脂蛋白受体表达的影响.方法将糖基化终产物与诱导分化48h后的U937细胞共同孵育,用免疫细胞化学法和半定量逆转录聚合酶链反应检测细胞清道夫受体BI蛋白及mRNA的表达.结果免疫细胞化学法检测100、200和400 mg/L糖基化终产物刺激后U937巨噬细胞清道夫受体BI蛋白表达的平均积分光密度值分别为18.94±3.56、27.86±4.39及35.08±2.37,较牛血清白蛋白组明显升高(13.76±3.74,P＜0.05);400 rog/L糖基化终产物作用6、12、24及48h后,细胞清道夫受体BI表达的平均积分光密度值分别为16.84±5.65、25.68±6.97、35.08±8.37及39.68±9.37,较0 h组明显升高(12.02±3.47,P＜0.05).半定量逆转录聚合酶链反应结果显示,400mg/L牛血清白蛋白及100、200和400mg/L糖基化终产物刺激后细胞清道夫受体m mRNA相对表达量分别是0.32±0.03、0.53±0.05、0.64±0.04和0.89±0.05;400 me/L糖基化终产物作用0、6、12、24及48h后,U937巨噬细胞清道夫受体BI mRNA相对表达量分别为0.41±0.01、0.62±0.05、0.80±0.08、0.87±0.05、1.24±0.13.结论糖基化终产物可增加U937巨噬细胞高密度脂蛋白受体蛋白和mRNA的表达,且呈浓度和时间依赖性.
-
糖基化终产物AGEs对U937巨噬细胞高密度脂蛋白受体(SR-BI)蛋白表达的影响
目的研究诱导分化及糖基化终产物对人单核/巨噬细胞(U937细胞)高密度脂蛋白受体(SR-BI)蛋白表达的影响.方法U937细胞经PMA诱导分化,并将不同浓度或同一浓度AGEs与诱导分化48h后的U937细胞共同孵育,用免疫细胞化学法和Western印迹法检测SR-BI蛋白的表达.结果诱导分化后U937细胞SR-BI表达在24、48 h逐渐升高,72 h下降;100、200和400mg/L AGEs刺激后细胞表面SR-BI蛋白表达量分别是BSA组的1.44、2.38和2.77倍(P＜0.05);400mg/L的AGEs作用6、12、24、48 h后,U937巨噬细胞SR-BI蛋白表达量分别为0 h的1.38、2.49、3.76和4.25倍(P＜0.05).结论诱导分化24及48 h SR-BI蛋白表达逐渐增加,而分化72h蛋白表达下降;AGEs可增加U937巨噬细胞SR-BI蛋白表达且呈浓度和时间依赖性.
-
高密度及低密度脂蛋白受体在兔胆囊结石成石中的变化及意义
目的从脂蛋白代谢的分子受体水平探讨胆囊胆固醇结石的成因.方法采用高胆固醇膳食(HCD)诱发兔胆囊胆固醇结石模型,动态观测成石过程中高密度脂蛋白受体(HDLR)及低密度脂蛋白受体(LDLR)活性变化.结果进食HCD 1周时肝细胞HDLR活性明显升高,而LDLR活性轻微升高,随后HDLR及LDLR活性均明显下降; 血总胆固醇、LDL胆固醇、肝脏及胆汁胆固醇随进食HCD的时间增加而逐渐增高,胆汁中胆汁酸则逐渐降低.结论肝细胞HDLR及LDLR活性变化对胆汁中胆固醇的分泌影响不明显,肝细胞HDLR及LDLR活性下降均可引起肝细胞摄取用于胆汁酸合成的底物减少,并可能在胆囊结石形成中起一定的作用.
-
抗动脉粥样硬化的新靶位——高密度脂蛋白受体SR-BI
B族Ⅰ型清道夫受体(SR-BI)是惟一确认的高密度脂蛋白(HDL)受体,介导胆固醇逆转运的起始和终止步骤,即外周组织中胆固醇的流出和肝脏及类固醇激素生成组织中胆固醇的选择性摄取,在胆固醇逆转运中起着关键作用.不同组织中SR-BI的表达调控研究表明其对心血管疾病具有明显保护作用,可以作为筛选新型抗动脉粥样硬化药物的新型分子靶位或用于动脉粥样硬化的基因治疗.
-
肝细胞高密度脂蛋白受体在兔胆囊结石形成中的动态变化
采用高胆固醇膳食诱发兔胆囊胆固醇结石模型,分别对高胆固醇膳食后1、2、3、4周及对照组高密度脂蛋白受体(HDLr)活性,胆汁中胆汁酸及胆固醇变化进行了研究.结果发现:①高胆固醇膳食后1周肝细胞HDLr Bmax明显增大而Kd值明显变小,与对照组相比有显著性差异(P＜0.05),2周组两者降至对照组水平,3周及4周组Bmax明显变小而Kd值明显增大,有显著性差异(P＜0.05),②1周组胆汁中总胆汁酸含量增加,2周组与对照组相近,3周组胆汁酸含量减少(P＞0.05),4周组则明显减少(P＜0.05);③随着高胆固醇膳食进食时间增加,胆汁中胆固醇含量持续增加,3周组及4周组与对照组有显著性差异(P＜0.05).成石中肝细胞HDLr活性及胆汁中胆汁酸含量均表现为先升后降,提示肝细胞HDLr活性下降可能引起肝细胞摄取用于胆汁酸合成的底物减少,并可能在胆囊结石形成中起重要作用.
-
菊藤胶囊对高脂血症大鼠血脂及肝脏高密度脂蛋白受体基因表达的影响
目的:观察菊藤胶囊对高脂血症大鼠血脂及肝脏高密度脂蛋白受体(SR-BI)基因表达的影响,从分子水平上探讨其作用机制,为其临床应用提供依据.方法:将60只雄性SD大鼠以普通饲料喂养1 wk后测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)基础值.根据TC水平随机分为:空白对照组、模型组、血脂康组及菊藤胶囊低、中、高剂量组,每组各10只.空白对照组普通饲料喂养,其余各组予高脂饲料;自由饮水.模型组灌胃生理盐水,血脂康组灌胃血脂康胶囊0.090 g/kg,菊藤胶囊低、中、高剂量组分别灌胃菊藤胶囊1.175,2.350,4.700 g/kg.1次/d,连续给药6 wk.采用酶法检测大鼠TC,TG,HDL-C和LDL-C;分别以RT-PCR技术和Westem Blot法,对肝SR-BI在mRNA及蛋白水平进行检测.结果:模型组大鼠血TC,TG,LDL-C均显著高于空白对照组(P<0.05),HDL-C显著低于空白对照组(P<0.05),肝SR-BI mRNA及SR-BI蛋白含量与空白对照组比较显著降低(P<0.05).血脂康组及菊藤胶囊中、高剂量组大鼠血TC,TG,LDL-C均显著低于模型组(P<0.05),HDL-C显著高于模型组(P<0.05),菊藤胶囊高剂量组与血脂康组比较差异显著(P<0.05),血脂康组及菊藤胶囊中、高剂量组大鼠肝SR-BI mRNA及SR-BI蛋白含量与模型组比较显著升高(P<0.05).结论:菊藤胶囊町明显降低TC,TG,LDL-C升高HDL-C,调节脂质代谢紊乱、治疗高脂血症,其作用机制可能与上调肝SR-BI的表达相关.
