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不同纯化方法对丹参水提取液中丹酚酸B的含量影响
目的：考察不同纯化方法对丹参水提液中丹酚酸 B 含量的影响，以优选出丹参水提取液的佳纯化方法。方法：以丹酚酸 B 含量和浸膏得率为考察指标，对乙醇沉淀法、高速离心法和大孔树脂吸附法3种纯化方法进行了比较。结果：大孔树脂吸附法处理后所得到的丹酚酸 B 的含量高，浸膏得率低；乙醇沉淀法处理后丹酚酸 B 的含量低，浸膏得率居中；高速离心法处理后丹酚酸 B 的含量居中，但浸膏得率高。结论：大孔树脂吸附法为丹参水提液的佳纯化方法。
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丹参醇提过程中对丹酚酸B含量影响因数的研究
目的：研究丹参药材在醇提过程中药材粉碎度、醇浓度、提取温度及干燥过程中温度影响。方法采用正交实验法以丹酚酸 B 含量为指标，对药材粉碎度、醇浓度、提取温度进行考察。结果通过正交实验考察影响丹酚酸 B 含量的药材粉碎度、醇浓度、提取温度等因素，终得到佳提取条件为丹参药材粉碎成细粉，50%乙醇，在70℃回流提取。醇提取液减压回收温度应控制在80℃以下。结论实验结果表明丹参在提取过程中，粉碎度对其丹酚酸 B 提出量有明显影响，醇提液减压回收时温度影响也较大，希望通过本实验能为工业化大生产中丹参提取提供参考。
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用梯度渗漉法比较丹参有效成分的提取工艺研究
目的:优选丹参中脂溶性成分和水溶性成分的提取工艺.方法:比较多种提取工艺,如回流法、一般渗漉法和梯度渗漉法,应用正交设计和单因素考察法对提取工艺进行筛选,采用高效液相色谱法测定丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量及干膏收率作为评价指标.结果:佳工艺为梯度渗漉法,佳工艺条件是:取丹参药材粗粉,用适量95%乙醇溶胀2 h,装筒,用95%乙醇浸渍24 h后,以4 mL/min的速度开始渗漉,收集10倍药材量的渗漉液,提取丹参酮类脂溶性成分;再用50%乙醇,以4mL/min的速度渗漉,收集12倍药材量的渗漉液,提取丹参酚酸类水溶性成分.丹参酮ⅡA和丹酚酸B的提取率都较高.结论:优选得到的工艺条件简便易行,稳定性好.
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丹酚酸B对间歇性高糖诱导的JNK活化和INS-1细胞凋亡的影响
目的观察丹酚酸B（Salvianolic acid B，Sal B）对间歇性高糖诱导的大鼠胰岛素瘤细胞（INS-1）c-Jun氨基末端激酶（JNK）活化和细胞凋亡的影响。方法 INS-1细胞与丹酚酸B预孵24 h后暴露于间歇性高糖（11.1 mmol·L－112 h，33.3 mmol·L－112 h）72 h。MTT法测定细胞活力，ELISA 法测定葡萄糖刺激的胰岛素分泌能力，荧光探针DCFH-DA检测细胞内活性氧（ROS）水平，流式细胞术检测细胞凋亡水平，Western blot法检测胰十二指肠同源盒-1（PDX-1）蛋白表达和JNK活化水平。结果丹酚酸B可明显减轻间歇性高糖诱导的INS-1细胞损伤和凋亡（P＜0.05，P＜0.01），提高葡萄糖刺激的胰岛素分泌能力（P＜0.05，P＜0.01）；与丹酚酸B预孵可明显降低细胞内ROS水平、抑制JNK活化，并提高PDX-1蛋白表达水平（P＜0.05，P＜0.01）。结论丹酚酸B可有效减轻间歇性高糖诱导的INS-1细胞损伤和凋亡，提高胰岛素分泌水平，其机制可能与降低细胞内ROS水平、抑制JNK活化和上调PDX-1蛋白表达有关。
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丹酚酸B在心血管疾病中药理作用研究进展
心血管疾病严重威胁人类的健康和生活质量，目前已成为导致人类死亡的头号杀手。因此，寻找有效的治疗药物以降低该病的致死率和致残率成为亟待解决的问题。丹参因其具有较好的活血化瘀功效，目前已被广泛的用于心血管疾病的治疗且取得较好的疗效。丹酚酸 B 是丹参提取物中的主要水溶性成分之一，研究证实丹酚酸 B 具有多种药理活性，不仅对心肌梗死（myocardial infarction，MI）具有很好的保护作用，同时也能够明显的改善心肌缺血／再灌注（myo-cardial ischemia-reperfusion，MI ／R）的损伤。该文就近年来丹酚酸 B 在心血管疾病中的药理研究进展进行综述，阐述丹酚酸 B 调控心血管疾病的药理作用机制及其与心血管疾病治疗的关系，为丹酚酸 B 的临床应用及后续研究提供参考。
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反相高效液相色谱法同时测定丹参中5种成分含量
目的：建立高效液相色谱法同时测定丹参中3种水溶性和2种脂溶性成分。方法采用反相高效液相色谱法，Welchrom? C18(250 mm×4.6 mm，5μm)色谱柱，以乙腈(A)-0.1％磷酸(B)为流动相梯度洗脱：0~15 min，10％→12％A；~35 min，12％→20％A；~45 min，20％→60％A；~65 min，60％→65％A；~80 min，65％→80％A；~90 min，10％A。流速1 mL?min－1，检测波长280 nm，柱温30℃。结果丹参素、迷迭香酸、丹酚酸 B、隐丹参酮及丹参酮ⅡA 分别在0.0595~2.3800，0.3460~13.8400，0.6560~26.2400，0.4200~16.8000，0.4140~16.5600μg 范围内线性良好，r ＝0.9999，加样平均回收率98.69％~100.91％，RSD 均<1.2％(n＝6)。结论该方法快速、准确、重复性好，可用于同时测定丹参中水溶性和脂溶性成分，较全面控制丹参质量。
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加权评分正交实验优选益胃即型凝胶提取工艺
目的：优选益胃即型凝胶中丹酚酸 B 的水回流提取工艺条件。方法在单因素考察基础上,以君药丹参中水溶性成分丹酚酸 B 提取量和干膏得率进行加权评分,作为综合考察指标,采用高效液相色谱法测定丹酚酸 B 的含量,优选其正交实验提取条件。结果优选工艺为加10倍水浸泡1 h,提取2次,每次1 h。结论优选工艺所得丹酚酸B 含量和干膏得率较高,工艺稳定可行。
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丹酚酸B对自发性糖尿病大鼠合并大血管病变的保护作用
目的：探讨丹酚酸 B 对自发性糖尿病（GK）大鼠合并大血管病变的保护作用及可能的机制。方法：将32只 GK 大鼠随机分为模型组和丹酚酸 B 低、中、高剂量组（40，80，160 mg·kg －1），另选取正常8只 Wistar 大鼠作为正常对照组。所有 GK大鼠给予高糖、高脂饲料16周后以 L-N-硝基甲酯（L-NAME）10 mg·kg －1·d －1灌胃，连续8周。给药开始及结束前对大鼠的血糖和血压进行检测，麻醉后取腹主动脉血进行血常规检测，放血后取胸主动脉制作病理切片，观察血管病变，Western-blot 法检测血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达。结果：所有 GK 大鼠血糖水平持续升高，但模型组与给药组差异无统计学意义（P ＞0．05），模型组大鼠实验结束时血压显著升高，给予丹酚酸 B 可剂量依赖性降低血压，差异有统计学意义（P ＜0．05）；丹酚酸 B 可显著降低模型大鼠的白细胞总数和分类计数，明显减轻血管病变程度并减少 VEGF 的表达。结论：丹酚酸 B 对自发性糖尿病大鼠的大血管具有明显的保护作用，其可能的机制为降低血压、抗炎以及降低 VEGF 的表达。
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HPLC 法测定消脂胶囊中丹参酮ⅡA 和丹酚酸 B 的含量
目的：建立高效液相法测定消脂胶囊中丹参酮ⅡA 和丹酚酸 B 含量的方法。方法采用 Grace Smart C18（4.6 mm×250 mm，5μm）色谱柱；丹参酮ⅡA 以甲醇-水（75∶25）为流动相等度洗脱，波长为270 nm；丹酚酸B 以甲醇-甲酸-水（40∶1∶59）为流动相等度洗脱，波长为286 nm；流速为1.0 mL·min-1；柱温为30℃；进样量为10μL。结果丹参酮ⅡA 浓度在0.004～0.04 mg·L-1范围内呈良好的线性关系，平均回收率98.21%（RSD为2.817%，n=6）；丹酚酸 B 在0.03～0.3 mg·L-1范围内呈良好的线性关系，平均回收率98.86%（RSD 为2.119%， n=6）。结论该法快速，简便易行，结果可靠，专属性强，可作为消脂胶囊的质量控制指标。
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丹参药材提取液中丹参酚酸大孔树脂吸附工艺研究
目的对丹参药材提取液中丹参酚酸大孔树脂吸附工艺进行研究,为其工业化生产应用确定基础.方法以丹酚酸 B为指标,考察丹参提取液在大孔树脂吸附工艺中的动态吸附曲线以及佳洗脱条件.结果确定大上样量以丹酚酸 B计为 87.9 mg/g 干树脂,以 3倍柱体积 60 %乙醇为洗脱溶媒,吸附-洗脱过程中丹酚酸 B的平均保留率可达 93.7 %,固形物得率由过柱前的 41 %以上降低为过柱后的 8 %左右.结论该方法在有效地保留丹酚酸 B的同时,可显著降低固形物得率,有利于提高制剂载药量.
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丹酚酸B对缺糖缺氧／复糖复氧的体外血脑屏障模型的影响
目的：探讨丹酚酸 B 对体外血脑屏障缺糖缺氧／复糖复氧的保护作用。方法利用人脑微血管内皮细胞与 C6细胞非接触共培养建立体外血脑屏障模型并分为正常组、实验组和给药组。利用无糖 Earle′s 液代替培养液在93％ N2、2％ O2和5％ CO2条件下孵育2 h 模拟缺糖缺氧环境。辣根过氧化物酶通透性实验检测血脑屏障通透性变化。免疫荧光和电子显微镜观察紧密连接变化情况。结果给药组对辣根过氧化物酶的通透性明显低于实验组（P ＜0．05）；免疫荧光和超微结构图片显示正常的紧密连接连续和致密，而实验组紧密连结中断和疏松，给药组介于二者之间。结论丹酚酸 B 能直接保护缺糖缺氧／复糖复氧引起的血脑屏破坏和降低通透性，为丹酚酸 B 对血脑屏障的保护机制提供的研究基础。
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丹酚酸B对高糖培养肾小管上皮细胞转分化的影响及意义
目的：探讨丹酚酸 B 对高糖诱导肾小管上皮细胞分化的影响及可能机制。方法：体外培养大鼠肾小管上皮细胞 NRK52E 随机分为正常糖（NG）组、高渗（HM）组、高糖（HG）组和高糖＋Sal B（HB）组，分别培养24 h；采用免疫酶细胞化学染色对 NRK52E 细胞进行鉴定，MMT 法检测丹酚酸 B 对细胞生长活性的影响，免疫荧光细胞化学和 Western blotting 检测各组 TGF-β1、E-caderin、α-SMA 和 Col-Ⅳ蛋白的表达。结果：与 NG 组相比较，HG 组肾小管上皮细胞中 TGF-β1、α-SMA 和 Col-Ⅳ蛋白表达增多（P ＜0．05），而 E-cadherin 蛋白表达降低（P＜0．05）；与 HG 组比较，HB 组肾小管上皮细胞中 TGF-β1、α-SMA 和 Col-Ⅳ蛋白表达减少（P ＜0．05），而 E-cad-herin 蛋白表达增多（P ＜0．05）。结论：丹酚酸 B 对高糖诱导肾小管上皮细胞的上皮－间充质转化（EMT）有明显抑制作用，其机制可能是通过抑制 TGF-β1的表达，改善了肾小管纤维化病变的发生发展。
关键词： 肾小管上皮细胞 高糖培养 丹酚酸 B 转化生长因子-β1 上皮 -间充质细胞转化 -
参花胶囊的 HPLC 指纹图谱研究及4种成分含量测定
目的：研究建立参花胶囊的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱分析方法，并测定该制剂中的绿原酸、羟基红花黄色素 A 、迷迭香酸、丹酚酸 B 的含量，为其质量控制提供依据。方法用 HPLC 法，采用 Kromasil C18色谱柱（250 mm ×4．6 mm ，5μm）；用乙腈-5．0 g ? L -1磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱；以254 nm 为检测波长。在参花胶囊样品的 HPLC 图中，以迷迭香酸为对照参比物，对各共有色谱峰与迷迭香酸色谱峰的相对保留时间与相对峰面积比值的 RSD 值进行分析，用中药色谱指纹图谱对10批参花胶囊进行相似度评价。采用外标法，以320 nm 为检测波长，运用绿原酸、羟基红花黄色素 A 、迷迭香酸、丹酚酸 B 的混合对照品测定其在10批该制剂中的含量。结果在选定的条件下确定39个峰构成参花胶囊的指纹特征，各批次样品均具有上述特征，且特征峰的相对含量分布基本一致；各批次样品中迷迭香酸色谱峰所对应的保留时间一致；每批样品的各色谱峰与迷迭香酸色谱峰的相对峰面积和相对保留时间的比值 RSD 均符合中药指纹图谱的相关要求，10个批次样品的指纹图谱相似度均大于0．966，4种物质在10批该制剂中的含量基本一致。结论 HPLC 指纹图谱方法与4种物质的含量测定方法准确、稳定、简便，均可用于参花胶囊的质量控制。
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高效液相色谱法同时测定丹参中6种化学成分的含量
目的：建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定丹参中迷迭香酸、丹酚酸 B、二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA 含量的方法。方法采用 Thermo C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱；以甲酸水和乙腈进行梯度洗脱；柱温30℃；流速1 mL·min-1；检测波长为270 nm。结果迷迭香酸、丹酚酸 B、二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA 的线性范围分别为：0.336~3.36μg(r=0.9999),4.772~47.72μg(r=0.9998),0.0193~0.1928μg(r=0.9998),0.072~0.72μg(r=0.9997),0.0772~0.772(r=0.9998)和0.1744~1.744μg(r =0.9999)；平均加样回收率分别为：100.2%,100.4%,98.6%,100.0%,99.3%和99.1%,RSD 值分别为1.58%,1.25%,1.09%,1.21%,1.10%和1.06%。结论该法同时测定了丹参中迷迭香酸、丹酚酸 B、二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ及丹参酮ⅡA6种化学成分的含量,结果准确可靠。
