首页 > 文献资料
-
重症急性胰腺炎大鼠舌组织小窝蛋白表达及大黄素干预的实验研究
目的 探讨重症急性胰腺炎(SAP)大鼠舌组织小窝蛋白(Caveolin-1,Car-1)表达及大黄素的调节作用.方法 采用5％的牛磺胆酸钠逆行胆胰管注入制作大鼠重症急性胰腺炎模型.将SD雄性大鼠随机分为假手术组(SO组)、SAP模型组(SAP组)、大黄素治疗组(emodin组).emodin组于造模术后即予大黄素(10 mg/kg,每日2次)灌胃;SAP组及SO组予等量生理盐水灌胃.造模5天后各组选取8只大鼠处死,留取标本,采用透射电镜进行组织形态学分析,Western blot、实时定量PCR等检测Cav-1蛋白及mRNA表达水平.结果 透射电镜结果显示,与SO组比较,SAP组舌组织血管内皮细胞吞饮小泡明显增多;emodin组较SAP组明显减少.与SO组比较,SAP组舌组织中Cav-1蛋白及mRNA表达均上调,其中蛋白表达水平差异有统计学意义(P＜0.05);emodin组较SAP组Cav-1蛋白及mRNA表达明显下调,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 SAP大鼠舌组织Cav-1表达升高,大黄素干预可明显下调Cav-1的蛋白及mRNA表达.
-
芪冬活血饮对急性肺损伤大鼠Cav-1/NF-κB炎性反应信号通路的影响
目的:观察芪冬活血饮对脂多糖所致大鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用并探讨其作用机制.方法:50只SD大鼠随机分为空白组,模型组,芪冬活血饮高、中、低剂量组5组,每组10只.气道内滴注脂多糖建立ALI模型.治疗组芪冬活血饮灌胃,空白组及模型组0.9％氯化钠溶液代替.造模后24h处死大鼠收集标本.结果:芪冬活血饮减少肺损伤大鼠肺泡结构破坏、肺水肿及炎性细胞浸润.ALI大鼠TNF-α、IL-1 β、IL-10水平增高(P＜0.01),芪冬活血饮降低TNF-α、IL-13水平,升高IL-10水平,高剂量组与低剂量组比较差异有统计学意义(P＜0.01).ALI大鼠NF-κBp65、Cav-1蛋白及mRNA表达增加(P＜0.01),芪冬活血饮可减少其表达,免疫组化积分及mRNA相对表达高剂量组低于低剂量组,比较差异均有统计学意义(P＜0.01).结论:芪冬活血饮对LPS诱导的ALI有保护作用,其机制与抑制Cav-1/NF-κBp65炎性反应信号通路有关.
-
痰瘀同治方含药血清对ox-LDL损伤的人脐静脉内皮细胞产生NO,caveolin-1和eNOS的影响研究
目的:观察痰瘀同治方含药血清对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)所致人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用及探讨其抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制.方法:体外培养HUVECs,分别以痰瘀同治方和辛伐他汀含药血清预处理细胞2h,然后加入100 mg·L-1 ox-LDL作用24h.MTT法检测细胞活力;Griess法检测细胞上清中一氧化氮(NO)含量变化;Real-time RCR法检测小窝蛋白-1(Cav-1)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS) mRNA表达;Western blott检测Cav-1和eNOS蛋白表达.结果:HUVECs经100 mg·L-1ox-LDL刺激后细胞活力显著降低(P＜0.01);加入不同剂量痰瘀同治方和辛伐他汀含药血清后,细胞活力显著升高,细胞上清中NO含量明显提高(P＜0.05).此外,痰瘀同治方和辛伐他汀含药血清可下调Cav-1 mRNA和蛋白表达和上调eNOS mRNA和蛋白表达,其中以辛伐他汀和痰瘀同治方高剂量含药血清作用尤为显著(P＜0.01).结论:痰瘀同治方能够通过提高NO含量,下调Cav-1表达和上调eNOS表达起到内皮细胞保护作用,可能是其抗AS分子机制之一.
-
肝损伤时诱导肝星状细胞中小窝蛋白-1表达升高
目的 探究肝损伤介导肝星形细胞小窝蛋白-1的表达的影响.方法 通过肝总管结扎手术诱导大鼠肝损伤模型和体外培养肝星形细胞LX-2,检测肝组织和肝星形细胞小窝蛋白-1的表达水平.结果 ①与假手术组相比,胆总管结扎手术可显著诱导肝脏损伤,手术后7d,手术组大鼠体重显著减轻,肝脏重量和肝指数显著增加,以及血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶水平显著增加;②与假手术组相比,肝损伤可显著诱导小窝蛋白-1在mRNA和蛋白水平显著增加;③与胆总管结扎组相比,LPS处理可显著增加肝星形细胞小窝蛋白-1的表达水平.结果 肝损伤可显著诱导肝星形细胞小窝蛋白-1的表达.
-
大鼠骨髓间充质干细胞向血管平滑肌细胞分化过程中小窝蛋白-1表达增强
目的 探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向血管平滑肌细胞(VSMCs)分化过程中小窝蛋白-1(caveolin-1)的表达变化.方法 采用全骨髓培养法,体外分离培养SD大鼠BMSCs,成骨成脂成软骨检测干细胞的分化潜能,流式细胞仪鉴定干细胞表面标志物.体外TGF-β1诱导BMSCs向VSMCs分化,Western blot检测SM-MHC、SM22α、caveolin-1和myocardin的表达.结果 BMSCs在TGF-β1诱导下可分化为VSMCs,诱导培养组细胞caveolin-1、SM-MHC及myocardin表达的水平随诱导时间的增加而增强(P<0.05).结论 BMSCs体外诱导可以分化为VSMCs,小窝蛋白-1与干细胞来源的VSMCs的形成有关.
-
胃癌组织中Dnmt1与caveolin-1表达的关系
目的 探讨正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜及胃癌组织中Dnmt1及caveolin-1的表达以及二者间的关系.方法 应用免疫组化SP法检测20例正常胃黏膜、40例不典型增生胃黏膜及70例胃癌组织中Dnmt1、caveolin-1的表达状况.结果 在正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜及胃癌组织中Dnmt1蛋白阳性表达率呈递增趋势,组间差异极显著(χ2=34.710, P<0.01);而caveolin-1蛋白呈递减趋势,组间差异亦极显著(χ2=41.806,P<0.01).Dnmt1蛋白阳性表达率在性别、年龄、溃疡的大小、有无脉管转移和浸润深度各组间差异不显著(P>0.05),而在有无淋巴结侵犯组间差异显著(P<0.05);caveolin-1蛋白阳性表达率在性别、年龄各组间阳性表达率差异不显著,而在有无淋巴结转移、浸润深度、有无脉管转移组间阳性表达率差异显著(P<0.05).Dnmt1与caveolin-1蛋白表达呈负相关(rs=-0.929,P<0.05).结论 caveolin-1基因在胃癌组织中的沉默可能由Dnmt1高表达引起的该基因高甲基化而产生,在胃癌发生、发展中可能具有重要作用.
关键词： 胃癌 DNA甲基化转移酶1 小窝蛋白-1 免疫组化 -
高压氧对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织小窝蛋白-1、基质金属蛋白酶-9表达的影响
目的:研究高压氧(HBO)对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织小窝蛋白-1(Cav-1)、MMP-9表达的影响.方法:雄性Wistar大鼠,随机分成假手术组、脑缺血再灌注组(IR)、IR+HBO、HBO组.复制局灶性脑缺血再灌注模型.HBO和IR+HBO组经0.25MPaHBO治疗5次.采用比色法、免疫组化法及Western印迹法检测血脑屏障的通透性和Cav-1、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白的表达.结果:IR组第4、12、24、48、72小时脑组织伊文思蓝(EB)的含量与第0小时组相比明显增加,再灌注后第4小时EB的含量高.IR+HBO组脑组织EB的含量明显低于IR组.IR组第4、12、24、48、72小时Cav-1、MMP-9蛋白表达明显高于0小时组.IR+HBO组与IR组相比脑组织Cav-1、MMP-9蛋白表达显著减低.结论:HBO降低了脑缺血再灌注时增高的脑微血管内皮细胞Cav-1蛋白和MMP-9的表达.这可能是HBO对脑缺血再灌注时血脑屏障通透性起保护作用的机制之一.
-
小窝蛋白-1和 NF-κB 在机械通气肺损伤大鼠肺组织中的表达
目的：通过观察小窝蛋白-l（cav-1）及NF-κB p65、IL-8在大潮气量机械通气大鼠肺组织中的表达变化，探讨cav-1在通过对NF-κB信号转导通路的影响而导致对肺组织的损伤作用。方法将雄性SD大鼠随机分为三组：对照组、大潮气量通气0.5 h组（H-VT0.5h组）和大潮气量通气2 h组（H-VT2h组）。光镜下观察各组大鼠肺组织病理学改变；免疫组织化学染色法检测肺组织中cav-1的蛋白含量；反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测NF-κB p65的mRNA表达；计算肺湿/干重比值（W/D）；酶联免疫吸附试验（ELISA）测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-8的含量，并对cav-1及NF-κB p65进行相关性分析。结果 H-VT2h组肺组织中肺W/D比值、cav-1的蛋白表达、NF-κB p65 mRNA的表达水平及BALF中IL-8的含量均大于H-VT0.5h组，差异有统计学意义（均P＜0.05）；H-VT0.5h组肺组织中肺W/D比值、cav-1的蛋白表达、NF-κB p65 mRNA的表达水平以及BALF中IL-8的含量均大于对照组，但差异无统计学意义（均P＞0.05）。相关性分析结果显示，各组大鼠肺组织cav-1蛋白表达水平与NF-κB p65 mRNA表达水平之间呈正相关（r＝0.820，P＜0.01）。结论 cav-1在机械通气导致肺损伤发生中可能起损伤作用。这种损伤作用可能与cav-1经过多种途径激活NF-κB炎症信号通路，使IL-8等细胞因子释放有关，终导致炎症的加重和肺组织损伤。
-
小窝蛋白1和血管内皮生长因子在结直肠癌组织中的表达及临床意义
目的:探讨小窝蛋白1(Cav-1)和血管内皮生长因子(VEGF)在结直肠癌组织中的表达,分析其与结直肠癌临床病理因素的关系及意义.方法:收集辽宁省肿瘤医院2007-01/2009-06肿瘤外科手术切除的83例结直肠癌标本及其配对正常结直肠组织（距癌灶边缘＞5 cm）.应用免疫组织化学SP法检测Cav-1和VEGF蛋白在83例结直肠癌及其配对正常结直肠组织中的表达,结果:Cav-1蛋白在正常结直肠组织中的阳性表达率为81.9％,显著高于其在结直肠癌组织中的阳性表达率(38.6％,P＜0.01).VEGF蛋白在结直肠癌组织中的阳性表达率为74.7％,显著高于正常结直肠黏膜(13.3％,P＜0.01).Cav-1与VEGF在结直肠癌组织中的表达均与结直肠癌的分化程度、浸润深度及淋巴结转移相关(均P＜0.05),而与结直肠癌患者的性别、年龄及肿瘤大小无显著关联（均P＞0.05）.在83例结直肠癌组织中Cav-1与VEGF蛋白表达呈显著负相关（r=-0.393,P＜0.01）.结论:Caveolin-1的缺失和VEGF的过表达可能在结直肠癌的发生、发展以及浸润转移中发挥重要作用,二者可能协同参与了这些过程.
-
卡托普利对大潮气量机械通气大鼠肺组织小窝蛋白-1表达的影响
目的 通过观察血管紧张素转换酶抑制剂-卡托普利干预后大鼠肺组织血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及小窝蛋白-1(Cav-1)表达量的变化,探讨卡托普利对大潮气量机械通气致大鼠急性肺损伤的防治作用.方法 24只健康雄性SD大鼠,随机分为对照组、大潮气量通气组(H-VT)和卡托普利干预组(CAP),每组8只.光镜下观察各组大鼠肺组织的病理改变,测定肺组织湿干重比值(W/D)和支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白含量(TP).采用ELISA法检测肺组织AngⅡ含量,免疫组织化学法(SABC)测定大鼠肺组织Cav-1的表达水平.结果 H-VT组大鼠肺组织病理损伤程度,肺组织W/D比值、BALF中TP含量和肺组织AngⅡ含量均明显高于对照组和CAP组(均P＜0.01),CAP组和对照组相比较,除AngⅡ含量差异无统计学意义外(P＞0.05),其余指标均增高(均P＜0.01);H-VT组大鼠肺组织Cav-1表达水平明显低于对照组和CAP组(均P＜0.01),且CAP组该指标明显低于对照组(P＜0.01);各组大鼠肺组织Cav-1与AngⅡ含量之间呈负相关(r＝-0.821,P＜0.01).结论 大潮气量机械通气通过诱导大鼠肺组织AngⅡ高表达导致Cav-1表达水平降低,可能是呼吸机所致肺损伤(VILI)发病的重要因素之一.卡托普利可通过抑制肺组织AngⅡ生成,上调Cav-1表达水平,对VILI起一定保护作用.
-
扰动剪切流场对血管内皮细胞小窝蛋白再分布和表达量的影响
目的 利用能模拟动脉粥样硬化好发部位模型的流动腔来探讨扰动剪切力对内皮细胞膜信号传导中介--小窝蛋白分布和表达量的影响.方法 将细胞接种到流动腔,取加载作用6、12、24和48 h后的细胞与静止态的细胞进行活细胞染色,利用激光共聚焦显微镜扫描,分析内皮小窝蛋白的分布情况,并在相同时间点取加载作用的细胞与静止态的细胞进行Real Time PCR,检测内皮小窝蛋白相对表达量的变化.结果 扰动剪切作用下,小窝蛋白发生明显的再分布,向细胞边缘聚集,并没有出现单边极化的现象.内皮细胞小窝蛋白-1相对表达量随着加载时间的延长逐渐减少,在扰动剪切力作用下48 h后内皮细胞小窝蛋白-1相对表达量减少了约40%.结论 扰动流影响了小窝蛋白在细胞中的再分布和相对表达量,可能进一步通过力一化学信号的耦合形式,终对细胞的生物学行为产生影响.
-
干扰小RNA沉默CAV1表达对人绒毛膜癌JEG-3细胞侵袭、迁移能力的影响及其作用机制研究
目的 探究干扰小RNA(siRNA)沉默小窝蛋白-1(CAV1)基因表达对人绒毛膜癌JEG-3细胞侵袭、迁移能力的影响及其可能的作用机制.方法 将人绒毛膜癌JEG-3细胞分为对照组(不进行转染)、阴性组(转染siRNA-NC)和siRNA-CAV1组(转染siRNA-CAV1).Transwell法检测下调CAV1表达对细胞侵袭、迁移能力的影响;实时定量PCR(qRT-PCR)检测转染细胞中CAV1 mRNA的表达水平;蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中CAV1、丝苏氨酸蛋白激酶(AKT)、雷帕霉素靶蛋白(MTOR)、核糖体p70S6激酶(p70S6K)、磷酸化AKT(p-AKT)、磷酸化MTOR(p-MTOR)、磷酸化p70S6K(p-p70S6K)蛋白的表达水平.结果 siRNA-CAV1组JEG-3细胞中CAV1 mRNA和蛋白的相对表达量均低于对照组(P﹤0.05);siRNA-CAV1组JEG-3细胞的侵袭数目、迁移数目均低于对照组(P﹤0.05);siRNA-CAV1组JEG-3细胞中AKT、MTOR、p70S6K以及磷酸化水平均低于对照组(P﹤0.05).结论 沉默CAV1表达可以抑制人绒毛膜癌JEG-3细胞的侵袭和迁移能力,该作用与AKT/MTOR/p70S6K信号通路有关.
关键词： 小窝蛋白-1 绒毛膜癌 侵袭 迁移 AKT/mTOR/p70S6K信号通路 -
小窝蛋白-1在血-脑脊液屏障中作用的研究
血-脑脊液屏障是维持中枢神经系统稳定的关键因素.内皮细胞小窝蛋白(caveolins)的重要标志物小窝蛋白-1 (caveolin-1)在血-脑脊液屏障中扮演重要角色.caveolin-1参与了血-脑脊液屏障受外界侵略和信号转导的过程.目前对caveolin-1的研究仍然较少,本次的回顾性研究认为caveolin-1对血-脑脊液屏障以及中枢神经系统疾病都具有非常重要的意义.
-
不同潮气量机械通气对大鼠肺小窝蛋白-1及其相关信号链酶表达的影响
目的 研究小窝蛋白-1(cav-1)及其相关信号链酶在不同潮气量(VT)机械通气大鼠肺组织中的表达变化.方法 按随机数字表法将SD大鼠分为5组,每组8只.对照组(A组)仅切开气管保留自主呼吸；保护性机械通气1h、2h组(B1组、B2组)VT为6 ml/kg;大VT通气1h、2h组(C1组、C2组)VT为30 ml/kg.A组在气管切开即刻,通气组分别于通气1h或2h末处死大鼠,光镜下观察肺组织病理学改变；逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测cav-1、eNOS的mRNA表达；免疫组化法检测肺组织中cav-1、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、白细胞介素-1受体相关激酶4(IRAK4)及核转录因子-κB(NF-κB)p65的蛋白表达；比色法测定髓过氧化物酶(MPO)活性；计算肺湿/干质量比值(W/D)；酶联免疫吸附试验(ELISA)测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量.结果 A组、B1组、B2组之间肺组织cav-1、eNOS的mRNA表达,cav-1、eNOS、IRAK4、NF-κBp65的蛋白表达,肺W/D比值,MPO和TNF-α水平差异均无统计学意义.与相应B1、B2组比较,C1、C2组cav-1 mRNA(A值比值)和cav-1、IRAK4、NF-κBp65蛋白表达(A值)明显增加(cav-1 mRNA:0.833±0.085比0.384 ±0.011,1.162±0.166比0.388±0.014;cav-1蛋白:0.188±0.011比0.140±0.052,0.210±0.013比0.125±0.014;IRAK4蛋白:0.181 ±0.009比0.150±0.008,0.205±0.085比0.155 ±0.012;NF-κBp65蛋白:0.294±0.011比0.236±0.015,0.304±0.012比0.239±0.005),eNOS的mRNA(A值比值)和蛋白表达(A值)明显减少(eNOS mRNA:0.174±0.016比0.278=0.021,0.107±0.014比0.262±0.045；eNOS蛋白:0.180±0.017比0.211±0.010,0.161±0.016比0.216±0.013),肺W/D比值、MPO活性(U/g)和TNF-α含量(ng/L)明显升高(W/D:5.64±0.42比4.63±0.12,6.73±0.83比4.70±0.15;MPO:1.86±0.26比0.85±0.11,2.14±0.24比0.88±0.18; TNF-α:386.53±29.12比50.57±10.98,455.77±37.78比52.11±9.92),差异均有统计学意义(均P＜0.05).随通气时间延长,C2组各指标较C1组改变更为明显(均P＜0.05).结论 cav-1及其相关信号链酶在机械通气中的表达参与了呼吸机相关性肺损伤.
-
小窝蛋白-1在脂多糖致肺微血管内皮细胞炎性损伤中的作用探讨
目的 探讨脂多糖(LPS)所致大鼠肺微血管内皮细胞(RPMVEC)炎性损伤中小窝蛋白-1(Cav-1)的作用机制.方法 将体外培养的RPMVEC,分别进行LPS刺激时效实验和蛋白激酶A(PKA)通路干预实验.①时效实验:以10 μg/mL LPS分别刺激0、1、3、6、12、24h后进行细胞单层通透性(伊文思蓝-白蛋白法)和Cav-1蛋白表达[蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)]检测;并于LPS刺激0、10、30、60、90、120 min检测细胞磷酸化小窝蛋白-1(p-Cav-1)表达(Western blotting).②干预实验:以10μmol/L蛋白激酶A特异抑制剂(PKI)与RPMVEC预孵育30m in后再加入10 μg/mL LPS继续孵育,30 min后检测p-Cav-1表达,3h后检测细胞单层通透性及Cav-1蛋白表达;设未刺激组和LPS或PKI单独刺激组为对照.结果 ①LPS刺激RPMVEC后1 h Cav-1蛋白表达(积分A值)即开始上升(2.97±0.07),3h达峰值(3.77±0.37),之后逐渐下降,但至24 h时(1.45±0.18)仍明显高于LPS刺激0h时(1.12±0.08),组间比较差异有统计学意义(F=178.047,P=0.000);LPS可呈时间依赖性(0、1、3、6、12、24h)增加RPMVEC通透性(A值),变化趋势与Cav-1蛋白表达一致,分别为(99.67±4.32)％、(118.17±2.32)％、(159.00±2.61)％、(141.17±2.64)％、(120.17±2.79)％、(108.83±2.04)％,组间比较差异有统计学意义(F=345.869,P=0.000).LPS亦可呈时间依赖性增加Cav-1磷酸化:10 min时p-Cav-1蛋白表达(积分A值)即开始升高(2.41±0.11),30 min达高峰(2.83±0.10),然后逐渐下降,120 min时(1.04±0.04)恢复到基础水平(1.03±0.04),组间比较差异有统计学意义(F=519.417,P=0.000).②PKI与LPS预孵育可使Cav-1表达(积分A值:5.07±0.22比3.81±0.23,P＜0.01)及p-Cav-1表达(积分A值:3.93±0.23比2.77±0.10,P＜0.01)较LPS刺激组进一步增加,并破坏RPMVEC屏障功能,使RPMVEC通透性增加[(184.17±5.49)％比(151.50±3.08)％,P＜0.01].结论 Cav-1及其磷酸化表达增加参与LPS诱导RPMVEC屏障损伤,PKA信号通路通过调控Cav-1蛋白及其磷酸化表达参与LPS对RPMVEC的致损效应.
-
小窝蛋白-1/血红素加氧酶-1信号链轴对机械通气所致肺损伤调控效应的研究
目的：探讨在活体动物用酪氨酸激酶抑制剂（PP2）阻断小窝蛋白酪氨酸残基14（Cav-1-Y14）磷酸化，是否会上调血红素加氧酶-1（HO-1）活性，以对抗机械通气所致的肺损伤。方法54只雄性SD大鼠按随机数字表法分为9组，每组6只。A组为正常对照组，只行气管切开；B1、B2组为保护性通气1 h、2 h组；C1、C2组为大潮气量（40 mL/kg）通气1 h、2 h组；D1、D2组为PP2预处理+大潮气量通气1 h、2 h组；E1、E2组为PP2、HO-1抑制剂锌原卟啉Ⅸ（ZnPPⅨ）预处理+大潮气量通气1 h、2 h组。各组动物在预定实验时间结束后立即放血处死并采集肺组织标本及支气管肺泡灌洗液（BALF），观察肺组织病理学改变，并计算弥漫性肺泡损伤系统评分（DAD评分），测定髓过氧化物酶（MPO）活性，计算肺湿/干质量（W/D）比值；蛋白质免疫印迹试验检测磷酸化小窝蛋白-1（P-Cav-1-Y14）、小窝蛋白-1（Cav-1）、HO-1的表达；免疫组化法检测肺组织中高迁移率族蛋白B1（HMGB1）和晚期糖基化终末产物受体（RAGE）的表达，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测BALF中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。结果与A组比较，B组各指标均无明显改变。与B1组比较，C1组肺组织DAD评分、W/D比值、MPO活性及BALF中TNF-α浓度均显著升高〔DAD评分（分）：7.97±0.59比0.55±0.13，W/D比值：5.70±1.61比5.04±0.63，MPO（U/g）：1.82±0.14比0.77±0.26， TNF-α（ng/L）：370.10±29.61比54.38±8.18，均P＜0.05〕，且通气2 h组较1 h组损伤更为严重。D组各指标较C组明显下降；E组各指标明显高于A、B、D组，与C组比较则差异无统计学意义。C组肺组织Cav-1、P-Cav-1-Y14蛋白表达（灰度值）均显著高于B组（1 h：1.49±0.02比1.26±0.13，1.34±0.02比0.87±0.04；2 h：1.58±0.02比1.27±0.27，1.31±0.01比0.95±0.02，均P＜0.05），HO-1蛋白表达（灰度值）显著低于B组（1 h：0.59±0.02比1.10±0.01；2 h：0.49±0.01比1.20±0.02，均P＜0.05）；D组、E组Cav-1蛋白表达与C组无差异，P-Cav-1-Y14蛋白表达明显低于C组；D组HO-1蛋白表达明显高于C组，而E组HO-1蛋白表达与C组无差异。与A组比较， C组及E组肺组织HMBG1和RAGE阳性表达明显增多，但B组、D组与A组比较无差异。结论 Cav-1-Y14磷酸化是肺通气损伤的关键因素，其不仅可导致血管屏障功能的完整性降低，亦可抑制HO-1活性，从而进一步加重机械通气所致肺组织炎症损伤。
关键词： 小窝蛋白-1 磷酸化 血红素加氧酶-1 机械通气相关性肺损伤 -
小窝蛋白-1在骨肉瘤中的表达及其意义
目的 通过检测小窝蛋白-1在人骨肉瘤组织中的表达,探讨小窝蛋白-1在骨肉瘤发生、发展及转移中的作用及其与临床病理相关性.方法 采用免疫组化学方法检测48例骨肉瘤组织标本及24例正常骨组织中小窝蛋白-1的表达水平.并结合临床、病理特征进行分析.结果 48例骨肉瘤组织中有38例小窝蛋白-1呈弱表达或未见表达,而在24例正常的骨组织标本中小窝蛋白-1均有表达且呈强表达,骨肉瘤组织、正常骨组织中小窝蛋白-1的平均吸光度值分别为(0.2292±0.0329)和(0.6428±0.0028),骨肉瘤组织小窝蛋白-1的表达明显低于正常骨组织(t=21.48,P＜0.01),差异具有统计学意义；小窝蛋白-1的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、病理分级等均无相关性(P均＞0.05),而小窝蛋白-1的低表达或不表达与肺转移有关(x2 =11.84,P＜0.05).结论 小窝蛋白-1异常低表达可能参与骨肉瘤侵袭、转移机制,小窝蛋白-1可能成为判断骨肉瘤患者预后新的分子标志物及肿瘤治疗的新靶点.
-
补阳还五汤对小窝蛋白-1基因敲除小鼠脑缺血后炎性因子表达的影响
目的 探讨小窝蛋白-1 (Cavl)在脑缺血后炎症反应中的作用及补阳还五汤对Cav1基因敲除小鼠脑缺血后脑组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达水平的影响.方法 将Cav1基因敲除小鼠(KO)60只及同源野生小鼠(WT) 60只分别按随机数字表法分为假手术组、模型组、补阳还五汤组.采用大脑中动脉闭塞(MCAO)法复制小鼠局灶性脑缺血模型;制模后2h各组分别给予灌胃预处理,补阳还五汤组给予补阳还五汤煎液(由黄芪120 g,当归尾6 g,川芎3 g,红花3 g,赤芍4.5 g,桃仁3 g,地龙3 g组成)5 g/kg(临床等效剂量),每日2mL;其他各组动物均给予等体积无菌生理盐水.于制模后3、7、10、14 d各组处死5只小鼠取脑组织,采用免疫组化法观察脑组织TNF-α、ICAM-1蛋白表达水平.结果 TNF-α、ICAM-1蛋白阳性细胞在整个大脑组织中均有表达,但主要表达在大脑皮质和海马区,TNF-α表达在细胞核、细胞质、细胞膜等整个细胞结构中,ICAM-1表达在细胞膜上.KO和WT两个假手术组小鼠脑组织均有TNF-α和ICAM-1蛋白的低水平表达;各时间点KO和WT两个模型组TNF-α、ICAM-1阳性细胞数均较同鼠种假手术组明显增多,制模后3d均明显增加[KO组:TNF-α(个/mm2)为102.67±22.84比38.67±8.80,ICAM-1(个/mm2)为47.33±3.89比19.33±3.14;WT组:TNF-α(个/mm2)为70.00±17.72比45.83±10.53,ICAM-1(个/mm2)为46.67±5.43比20.50±3.21],7d达高峰[KO组:TNF-α(个/mm2)为127.50±18.06比34.83±8.77,ICAM-1(个/mm2)为76.67±14.79比20.17±3.92;WT组:TNF-α(个/mm2)为89.67±2.58比29.67±4.80,ICAM-1(个/mm2)为48.33±8.09比15.50±1.52],10 d逐渐下降,14d达低[KO组:TNF-α(个/mm2)为99.67±18.33比34.00±8.10,ICAM-1(个/mm2)为47.50±8.20比12.83±2.71;WT组:TNF-α(个/mm2)为59.67±17.07比31.17±9.70,ICAM-1(个/mm2)为44.33±7.15比19.67±3.56].KO和WT两个补阳还五汤组脑组织TNF-d、ICAM-1阳性细胞表达数均较同鼠种模型组明显降低,TNF-α均于制模后14d达低[KO组为(32.33±8.87)个/mm2,WT组为(35.00±5.83)个/mm2,P＜0.01];ICAM-1在KO组于制模后7d达低[为(23.00±1.79)个/mm2],WT组于制模后14 d达低[为(21.17±5.20)个/mm2];KO模型组TNF-α阳性细胞表达较WT模型组明显增多(P＜0.01).结论 Cav1基因的缺失能导致大脑组织炎症反应增加,Cav1具有减轻大脑炎症反应的作用;补阳还五汤可通过调节TNF-α、ICAM-1的表达,抑制脑缺血后炎症反应.
-
小窝蛋白-1与肺纤维化关系的研究进展
小窝蛋白-1(Caveolin-1)是小窝标志性的蛋白,主要通过"脚手架"结构区域,参与负性调控多条信号通路,干预多种疾病进程.目前研究证实:特发性肺纤维化的肺组织中的Caveolin-1表达明显减低,而提高Caveolin-1水平抑制转化生长因子β_1/Smad、JNK、MEK/ERK、wnt/β-Catenin/Lef-1等信号转导通路因子的激活,可减少细胞外基质的合成和上皮细胞的异常修复,阻断肺纤维化进程.深入研究Caveolin-1参与肺纤维化的分子机制,有望为特发性肺纤维化提供新的分子治疗靶点.
-
小窝蛋白-1在大潮气量机械通气大鼠肺组织中的表达
目的 通过观察不同时间段机械通气大鼠肺组织中小窝蛋白-1(caveolin-1,cav-1)的表达水平,探讨cav-1在呼吸机所致肺损伤(VILI)发病中的作用.方法 雄性SD大鼠32只,随机分为对照组、通气0.5h组(H-VT0.5h组)、通气1h组(H-VT1h组)和通气2h组(H-VT2h组).采用免疫组织化学染色法测定各组大鼠肺组织cav-1的表达水平,测定其肺湿/干重(W/D)比值和支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白含量,并在光镜下观察各组大鼠肺组织的病理学改变.结果 ①肺组织cav-1表达结果显示,H-VT0.5h组和对照组均明显高于H-VT2h组和H-VT1h组(P值均＜0.001),H-VT0.5h组明显高于对照组(P＜0.001),H-VT1h组明显高于H-VT2h组(P＜0.01).②肺组织W/D比值和BALF总蛋白含量测定结果显示,H-VT2h组和H-VT1h组均明显高于对照组和H-VT0.5h组(P值均＜0.001),H-VT2h组明显高于H-VT1h组(P＜0.001),H-VT0.5h组与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).③肺组织病理学结果显示,随着机械通气时间延长,大鼠肺组织损伤程度呈逐渐加重趋势.结论 肺组织cav-1在机械通气不同时间段表达水平明显不同,表现为先增高后降低.提示肺组织cav-1高表达对VILI起一定保护作用；大潮气量机械通气可通过抑制肺组织cav-1表达,诱发和加重肺组织损伤.
