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白花前胡甲素和丙素对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成影响的实验研究
目的 探讨白花前胡甲素(Pd-Ia)及白花前胡丙素(Pra-c)对鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)模型血管生成作用的影响.方法 将鸡胚随机分为生理盐水组、溶媒对照组、贝复济(bFGF)组、Pd-Ia 0.2mmol·L-1组、Pra-c 0.1mmol·L-1组、Pra-c 1mmmol·L-1组,检测各组CAM的血管增生程度.结果 在血管新生方面,实验所用浓度的Pd-Ia和Pra-c均具有较明显的作用,与生理盐水组和溶媒对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01、P<0.05),而与阳性对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 Pd-Ia和Pra-c可促进CAM血管增生,具有一定的促血管新生作用.
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应用HPLC法对肺宁合剂多成分含量测定研究
目的 建立高效液相色谱法同时对肺宁合剂中盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷、甘草苷、甘草酸、白花前胡甲素6种指标成分的含量测定.方法 采用Hedera C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为0.1％磷酸水溶液-乙腈梯度洗脱,检测波长210 nm,柱温:30℃,流速:1 mL/min.结果 盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷、甘草苷、甘草酸、白花前胡甲素的质量浓度在相应范围内呈良好的线性关系,线性范围分别为:16.20 ～518.2、9.741 ～ 311.7、37.27 ～ 1193.0、14.25～455.9、30.99～991.7、1.225 ～ 39.18 μg/mL,加样回收率分别为103.05％、95.29％、104.11％、99.78％、96.28％、105.42％.结论 所建立的HPLC方法专属性强,重复性好,可用于肺宁合剂的质量控制.
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Box-Behnken响应面法优化疏风定喘颗粒黄芩组的提取工艺研究
目的:利用Box-Behnken响应面法对疏风定喘颗粒黄芩组的提取工艺进行优化.方法:以黄芩苷、白花前胡甲素和固含转移率为考察指标,在单因素试验的基础上,考察乙醇浓度、乙醇用量、提取时间、提取次数4个因素对提取工艺的影响,再结合Box-Behnken中心组合设计试验,进一步优化醇提工艺参数.结果:单因素试验结合Box-Behnken响应面法优选黄芩组的佳工艺为:8倍量70%乙醇,提取两次,每次1.0 h,在此条件下黄芩苷、白花前胡甲素的转移率分别达到89.57%、87.90%,固含转移率为32.35%.结论:单因素试验结合响应面法可用于优化疏风定喘颗粒黄芩组的提取工艺,该工艺稳定可行,为工业化生产提供科学的依据.
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HPLC测定除痰止嗽丸中的桔梗皂苷D、桔梗皂苷E、白花前胡甲素和白花前胡乙素
目的:采用高效液相色谱法测定除痰止嗽丸(CTZSW)中桔梗皂苷D、桔梗皂苷E、白花前胡甲素和白花前胡乙素的含量.方法:Hypersil C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),流速1.0 mL·min-1,流动相乙腈-水(35∶65)(桔梗皂苷D和桔梗皂苷E),ELSD漂移管温度105℃,载气(N2)流速2.6 SLPM· min-;流动相乙腈-甲醇-水(40∶ 30∶ 30)(白花前胡甲素和白花前胡乙素),检测波长321 nm.结果:桔梗皂苷D和桔梗皂苷E分别在0.041 3～0.826 0μg(r =0.999 7),0.079 7～1.5940μg(r =0.999 8)进样量与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.32％,98.94％,RSD(n =6)分别为0.80％,0.93％;白花前胡甲素和白花前胡乙素分别在0.154 9 ～3.098 0μg(r =0.999 4),0.051 7 ～1.034 0 μg(r =0.999 8)进样量与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.72％,99.15％,RSD(n =6)分别为0.86％,0.95％.结论:该方法测定结果准确、灵敏、重复性好;可用于除痰止嗽丸的质量评价.
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白花前胡甲素的药理作用研究进展
中药前胡为伞形科植物白花前胡的干燥根,具有散风清热,降气化痰的功效[3].作为止咳化痰平喘药而广泛应用.白花前胡甲素[(±).praeruptorin A,Pd-Ia]为白花前胡根中提出的一种角型吡喃香豆精(angular.type pyranocoumarin),是白花前胡丙素[(+)-praeruptorin]的消旋体[2].
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白花前胡质量标准研究
目的:为<中国药典>(2005年版)白花前胡药材的质量标准制定提供参考依据.方法:以白花前胡甲素为对照品,采用TLC和HPLC分别进行定性鉴别及含量测定.结果:含量测定中,白花前胡甲素在0.176 96～0.884 80 μg线性关系良好(r=0.999 9),回收率为99.7%,RSD为0.40%.结论:TLC鉴别方法专属性强;含量测定方法精密度高,重复性好,简便快速,可用于白花前胡的质量控制.
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HPLC同时测定前胡中3种香豆素成分的含量
目的:建立了用HPLC法对前胡药材中白花前胡甲素、乙素和E素同时定量的方法.方法:高效液相色谱法,色谱柱Agilent TC-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相甲醇-水(75:25);检测波长321 nm;柱温30 ℃;流速0.8 mL·min~(-1);进样量20μL.结果:白花前胡甲素、乙素和E素的浓度与峰面积,分别在3.20～28.80μg(r=0.999 9),1.60～14.40μg(r=0.999 5),1.64-14.76μg(r=0.999 4)呈良好的线性关系;平均加样回收率分别为98.92%,99.66%,99.72%,RSD分别为1.6%,1.5%,1.4%.结论:不同产地前胡所含的香豆素成分含量存在一定的差异,安徽宁国和祈门的前胡中白花前胡甲素含量高于药典的规定,且这3种香豆素含量明显高于其他2个产区.该法适合同时测定前胡样品中3种香豆素成分的含量,分离度好,快速,简便,重现性好.
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白花前胡甲素及丙素经hCAR通路诱导UGT1A1的表达
中药前胡为伞形科植物白花前胡(Peucedanum praeruptorum DUNN.)的干燥根,具有宣散风热、降气化痰等功效[1].其主要活性成分白花前胡甲素(PA)及白花前胡丙素(PC)属于香豆素类化合物,是一对外消旋体[2].尿苷二磷酸葡糖醛酸转移酶1A1 (UDPglucuronyltrans ferase lA1,UGTlAl)是重要的尿苷二磷酸葡糖醛酸转移酶(UDP-glucuronyltrans ferase,UGT)家族成员,根据序列的同源性,分为UGT1家族,如UGTlA1、UGT1A3、UGT1A4、UGT1A5、UGT1A6亚型等;以及UGT2家族,如UGT2A1、UGT2B4、UGT2B7、UGT2B 10亚型等[3].
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透皮促进剂对白花前胡甲素体外经皮渗透的影响
目的:考察透皮促进剂对白花前胡甲素( dl-praeruptorin A,Pd-Ia)体外经皮渗透的影响.方法:采用改进的Franz扩散池,以大鼠离体皮肤为渗透屏障,用高效液相色谱法对Pd-Ia进行含量测定,考察月桂氮()酮(Azone)及1％ Azone与不同浓度丙二醇(PG)混合物对Pd-Ia透皮吸收的影响.结果:使用Azone对Pd-Ia有促透作用,1％ Azone效果较好,平均渗透速率达到4.064 μg·cm-2 ·h-1；1％ Azone与15％PG合用促透效果好,平均渗透速率达到4.889 μg·cm-2·h-1,且与单用1％Azone有显著性差异(P＜0.05).结论:1％ Azone与15％ PG合用时,含0.5％ Pd-Ia溶液体外渗透具有大促透效果,体现出协同作用.
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HPLC测定白花前胡蜜炙前后3种香豆素类成分的含量
目的 对前胡蜜炙前后3种香豆素类成分进行比较研究.方法 HPLC同时测定3种香豆素类成分白花前胡甲素、白花前胡乙素、白花前胡E素的含量,Agilent TC-C_(18)(2)柱,流动相为甲醇-水(3:1),检测波长320 nm,流速0.8 mL·min~(-1),柱温35℃.结果 3个成分的线性关系较好(r>0.999 6),测定范围分别为0.204 4～2.044,0.077 6～0.776,0.077 2～0.772μg,平均回收率分别为101.66%,97.45%,97.79%.前胡不同饮片中3种香豆素类成分含量有差异.结论 所建立的方法可用于同时测定前胡不同饮片中3种香豆素的含量,为前胡不同饮片质量评价标准的制定提供了科学依据.
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HPLC法筛查百花定喘制剂中前胡投料
目的:通过测定白花前胡甲素、白花前胡乙素和紫花前胡苷的含量,建立筛查百花定喘制剂中投料为前胡还是紫花前胡的HPLC方法.方法:采用Symmentry-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相:甲醇(A)-0.1%磷酸溶液(B),梯度洗脱,检测波长为321 nm,流速为1.0 mL·min-1.结果:5批药材的标示名称与试验判断结果不一致;47批百花定喘制剂的筛查结果表明,未见紫花前胡投料,前胡存在投料不足的情况.结论:该方法专属性良好,可作为定性筛查白花定喘制剂中投料前胡的方法.
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含化上清片中白花前胡甲素含量测定方法的研究
目的 建立高效液相色谱法测定含化上清片中白花前胡甲素的含量.方法 采用反相高效液相色谱法,对样品处理方法、色谱柱和流动相等影响分离效果的主要因素进行了优化.选用Thermo GOLDHPERSIL C18色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm);乙腈-0.1％磷酸溶液(57:43)为流动相;流速为1.0 mL·min1;检测波长为320 nm.结果 白花前胡甲素在0.0205～0.1640μg范围内呈良好的线性关系(r=0.99997),平均回收率为96.88％,RSD为0.58％(n=8).结论 该方法经方法学验证可用于含化上清片中前胡的质量控制.
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前胡香豆素类提取物的UPLC/Q-TOF-MS分析及其初步药效学研究
目的 建立UPLC/Q-TOF-MS法分析前胡香豆素类提取物的化学成分,并对其初步药效学进行研究.方法采用Acquity UPLC BEH C18色潜柱;以0.1％甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱;检测波长321 nm;采用电喷雾王离子化模式(ESI+),扫描范围m/z 100～1 000;利用链脲佐菌素(STZ)诱导的2型糖尿病大鼠模型,对前胡香豆素类提取物的调脂降糖作用进行初步药效学研究.结果前胡香豆素类提取物中的qianhucoumarin D(1)、peucedanocoumarin Ⅱ(2)、白花前胡甲素(3)、peucedanocoumarin Ⅰ (4)、白花前胡乙素(5)、praeuptorin E(6)得到良好的分离与鉴定.初步药效学实验结果表明,前胡香豆素类提取物能显著降低2型糖尿病大鼠空腹血糖、胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白及肝脏指数(p＜0.05),升高高密度脂蛋白(P＜0.05),提示前胡香豆素类提取物能改善2型糖尿病大鼠糖与脂质代谢,发挥治疗2型糖尿病的作用.结论建立了前胡香豆素类的UPLC/Q-TOF-MS的分离鉴定方法;初步药效学研究表明前胡香豆素类提取物具有显著的调脂及降糖作用.
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60Co-γ射线辐照对小儿清肺丸中5种有效成分的影响
目的 建立同时测定小儿清肺丸中葫芦素B、葫芦素E、白花前胡甲素、白花前胡乙素和白花前胡素E5种活性成分含量的方法,考察60Co-γ射线辐照前后有效成分含量的变化.方法 采用Agilent-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A为甲醇-乙腈(1∶1),B为0.5％冰醋酸水溶液,梯度洗脱,检测波长分别为230、321 nm,体积流量为1.0 mL/min,柱温25℃.分别选择辐照剂量为2、4、6、8 kGy对小儿清肺丸进行辐照,比较辐照前后小儿清肺丸中5种活性成分含量的变化,并进行成组t检验考察其显著情况.结果 葫芦素B、葫芦素E、白花前胡甲素、白花前胡乙素和白花前胡素E分别在0.049～1.247、0.079～1.973、0.056～1.406、0.028～0.705、0.028～0.693μg有良好线性关系,平均加样回收率分别为101.2％、99.7％、99.9％、98.9％、100.5％,RSD分别为0.6％、0.5％、1.2％、1.1％、1.2％;经过2、4、6、8 kGy辐照后,小儿清肺丸所含有效成分葫芦素B、葫芦素E、白花前胡甲素、白花前胡乙素和白花前胡素E均有变化,经成组t检验,在超过6 kGy后,葫芦素B辐照前后含量变化显著(P＜0.05).结论 所建立的小儿清肺丸活性成分测定方法回收率高,重复性好,简单实用,可作为小儿清肺丸质控方法.在辐照剂量不超过6 kGy时,各成分变化不显著,可为小儿清肺丸辐照灭菌手段提供参考.
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白花前胡根中白花前胡丙素的分离鉴定及其有效成分含量的HPLC分析
从白花前胡根中分离鉴定了主要有效成分白花前胡丙素,建立了利用HPLC法分析白花前胡根中白花前胡丙素及其消旋体白花前胡甲素含量的方法,并用该方法分析了不同产地白花前胡根中白花前胡丙素及其白花前胡甲素的含量,为制定中药前胡的质量标准奠定基础.
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正交试验优化杏贝止咳提取物的微波干燥工艺
目的：优化杏贝止咳提取物的微波干燥工艺参数。方法以苦杏仁苷、白花前胡甲素和白花前胡乙素综合转移率为考察指标，选取微波功率、干燥时间、铺盘厚度、真空度作为优化试验考察因素，每个因素设计3个水平，采用L9(34)正交试验优化杏贝止咳浸膏的微波干燥工艺，并与常规干燥工艺进行比较。结果杏贝止咳浸膏佳微波干燥工艺为微波功率6 kW，干燥时间9 min，铺盘厚度2～2.5 cm，真空度?0.08～?0.09 MPa。结论该工艺高效节能，稳定可行，为改善杏贝止咳颗粒的干燥工艺提供实验依据。
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HPLC法测定疏表灵颗粒中芍药苷和白花前胡甲素含量
目的：建立HPLC法测定疏表灵颗粒中芍药苷和白花前胡甲素含量。方法：色谱柱为Shim－pack VP－ODS （150 mm ×4．6 mm），流动相为乙腈－0．4％磷酸水溶液梯度洗脱，流速1．0 ml／min，检测波长320 nm，进样量10μl。结果：芍药苷和白花前胡甲素分别在16．8～336．0μg／ml和2．0～40．0μg／ml范围内与峰面积呈良好线性关系，芍药苷的平均加样回收率为100．09％，RSD为1．00％（n＝9），白花前胡甲素的平均加样回收率为100．08％，RSD为1．22％（n＝9）。结论：本法简便、结果准确、重复性好，可用于疏表灵颗粒的质量控制。
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白花前胡甲素对大鼠肺动脉平滑肌细胞钙浓度的影响
目的 通过观察白花前胡甲素(praeruptorin A,Pd-Ⅰ a)对低氧引起的大鼠肺动脉平滑肌细胞基础钙及钙池操纵性钙内流(store operated calcium entry,SOCE)上调的影响,以探讨Pd-Ⅰ a是否参与低氧时细胞内钙稳态的调节.方法 原代培养肺动脉平滑肌细胞.将细胞分为常氧组、缺氧组及缺氧+Pd-Ⅰ a组,采用双波长测定法测定细胞基础钙及SOCE.结果 缺氧可使细胞基础钙浓度及SOCE升高或增加[(220.61±14.79)nmol/L vs (103.35±11.68) nmol/L;(270.02±22.66) nmol/L vs(56.41±9.04) nmol/L,P值均＜0.01].与缺氧组相比,缺氧+Pd-Ⅰ a组细胞的基础钙浓度及SOCE降低或减少[(132.19±8.35)nmol/L;(112.56±21.97) nmol/L,P值均＜0.01].结论 Pd-Ⅰ a可以明显抑制低氧引起的大鼠肺动脉细胞基础钙及SOCE的上调.
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高效液相色谱法测定前胡中白花前胡甲素和白花前胡乙素的含量
目的 对前胡中白花前胡甲素和白花前胡乙素常用的高效液相色谱法含量测定方法进行改进,用于市售前胡的分析.方法 改用甲醇作为提取溶剂,超声处理时间为30 min,提取液直接测定分析.采用Thermo ODS HYPERSIL色谱柱(4.6×250 mm,5μm),以甲醇-水(68:32)为流动相.结果 白花前胡甲素和白花前胡乙素分别在5.00～400.00 mg/L和0.50～40.00 mg/L范围内线性关系良好,回归方程分别为Y=28.478 222 4X+6.484 094(r=0.999 99)和Y=25.589 318 7X-0.328 822(r=0.999 99),精密度为0.6％～2.0％,加样回收率为90.7％～104.8％.采用建立的方法对9批市售前胡进行了测定.结论 该方法更简便、快速、重复性好,可准确测定前胡中白花前胡甲素和白花前胡乙素.
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白花前胡甲素对Ang II诱导的核转录因子c-Jun蛋白表达的影响
目的:探讨白花前胡甲素(Pd-Ia)对Ang II诱导的核转录因子c-Jun蛋白表达水平的影响.方法:体外原代培养乳鼠心肌细胞;免疫细胞化学检测核转录因子c-Jun蛋白表达情况.结果:AngII(10-6mol/L)刺激心肌细胞2h后,细胞核内c-Jun蛋白表达显著增强,为对照组的2.8倍(P<0.01);白花前胡甲素对此有显著抑制作用(P<0.05).结论:白花前胡甲素能够拮抗AngII诱导心肌细胞c-Jun蛋白表达上调.
