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激活低氧诱导因子-1的转导通路
低氧诱导因子-1(HIF-1)与心血管缺血、肺高压和癌症等有密切关系,是在低氧的肝细胞癌细胞株hep3B细胞的核提取物中发现的,是一种结合于促红细胞生成素(EPO)基因增强子的寡核苷酸序列的特异蛋白.据报道,许多类型的细胞都可被低氧诱导而产生效应,其中HIF-1起主要作用,提示细胞中普遍存在一个低氧转导机制.一些转录因子,如活化蛋白-1(AP-1)、核因子-κB(NF-κB)、HIF-1[1]都与低氧应激反应有关.哺乳动物细胞对缺氧的适应性反应主要是表达HIF-1,这一过程与某些蛋白基因如醛缩酶A、烯醇化酶α、乳酸脱氢酶LDH、丙酮酸激酶和葡萄糖转移酶-1(GLUT-1)的表达有密切关系[2].
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N-乙酰氨基葡萄糖转移酶V的调控研究
本项目属于糖生物学的研究范畴.糖生物学是继蛋白质和核酸研究的另一新兴领域,正是由于蛋白质和核酸化学的成熟才带动了在分子水平上研究生命现象时代的出现,糖生物学的成熟必将带动分子生物学的另一场突破.糖链作为信息分子,参与糖蛋白的分拣、投送、分子识别和细胞识别;糖复合物的糖链能控制细胞的分裂和分化,调节细胞的生长和衰老,在免疫性疾病治疗上也有极其广泛的应用.和分子生物学中的中心法则不同,糖复合物中的糖链的合成没有模板,它是通过一系列糖基转移酶来完成的.这些酶均有严格的底物专一性,上一个酶的产物常是下一个酶的底物.每个糖基转移酶是一个基因的产物,决定一个糖苷链,后者包括连接位置和α、β异头构象.除个别糖基转移酶(如α1,3/1,4岩藻糖基转移酶)以外,一个基因→一种糖基转移酶→一种糖苷键就形成了糖生物学的中心法则.糖基转移酶的重要作用使得它的研究是目前糖生物学研究的热点.
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肝癌组织中三种糖基转移酶基因表达水平
一、资料与方法 1. 标本:13例正常肝组织来自尸检标本;15例HCC组织和15例HCC癌旁组织取自手术患者。 2. 方法:N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ(GlcNAcT-Ⅴ)、N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅲ(GlcNAcT-Ⅲ)、(1,6核心岩藻糖转移酶(α1-6 FucT)和β-肌动蛋白(β-actin)四种扩增基因引物由Primer3引物设计程序设计。以β-actin 为内标,采用RT-PCR法检测以上三种基因mRNA的表达情况。PCR 产物经琼脂糖凝胶电泳后用ImageMaster VDS图像分析系统处理并计算基因表达值。基因表达值(%)=[各基因条带面积×(条带辉度-背景辉度)]÷[β-actin基因条带面积×(条带辉度-背景辉度)]×100。
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N-乙酰氨基葡萄糖转移酶V在恶性肿瘤中的作用
细胞膜表面的糖链在细胞识别中具有介导作用,糖链参与了细胞间相互识别、粘着、信息交换的过程.细胞的恶性转化常伴有细胞膜N-糖链的改变,其中主要包括唾液酸和β1,6分支结构含量的增多,众多研究已经证实N-乙酰氨基葡萄糖转移酶V(N-acetylglucosaminyltransferase V,GnT-V)活性增加引起β1,6分支结构增多与肿瘤细胞发生发展有密切关系[1].