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HPLC测定生泰胶囊中蛇床子的含量
目的测定生泰胶囊中蛇床子素的含量.方法采用HPLC法,色谱柱Shimpack CLC-ODS(150 mm×4.6 mm,5 μm);甲醇-水-四氢呋喃(70∶40∶5)为流动相;检测波长317 nm;柱温35℃.结果在0.05125～1.148 μg线性范围(r=0.9990),平均加样回收率97.2%,RSD=1.16%(n=3),3批样品平均含量为每粒2.72 mg.结论该法分离效果好,灵敏度高且准确.
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HPLC测定益肤乐中蛇床子素的含量
目的用高效液相色谱法测定益肤乐中蛇床子素的含量.方法固定相用ODS柱,流动相为乙腈-水(52∶48);检测波长322 nm.结果蛇床子素在0.003～0.025 mg*ml-1浓度范围内呈良好的线性关系(Y＝67278X-32035,r＝0.9996),回收率为101.5%,RSD＝1.3%.结论该法能使干扰峰与蛇床子素峰完全分离,专属性强.
关键词： 蛇床子素 高效液相色谱法(HPLC) 益肤乐 -
HPLC法测定风湿液中蛇床子素的含量
目的:用高效液相色谱法测定风湿液中蛇床子素的含量.方法:固定相为ODS柱,流动相为甲醇-0.1 mol·L-1硫酸铵水溶液(65:37),用硫酸溶液(1→5)调节pH为2.50;检测波长为322 nm.结果:回收率为101.1%,RSD为3.0%.结论:该法能使干扰峰与蛇床子素峰完全分离.
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HPLC测定寄生追风液中独活的有效成分蛇床子素
目的:建立寄生追风液中蛇床子素的HPLC含量测定方法.方法:采用乙醚提取样品,Synchrom ODS柱(5 μm,150 mm×4.6 mm).流动相为甲醇-0.1 mol·L-1硫酸铵溶液(70∶30),用硫酸溶液(1→5)调节pH为2.5.检测波长322 nm.结果:线性范围0.034～0.27 μg(r=0.99995),平均回收率98.08%(n=6).结论:用于寄生追风液质量控制.
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蛇床子中蛇床子素提取工艺的优化
目的 优选蛇床子中蛇床子素的提取工艺.方法 以蛇床子素转移率为指标,采用单因素、正交试验方法优化提取工艺参数.结果 选用回流法提取,60％乙醇浓度、连续回流1.5h、8倍量溶媒、提取3次的提取方法效果佳.结论 乙醇回流提取简单且效率高,适用于蛇床子中蛇床子素的提取.
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独活寄生丸的药材鉴别及蛇床子素的测定
目的 完善独活寄生丸的质量控制标准.方法 采用TLC法鉴别独活、芍药、秦艽、地黄；采用HPLC法测定独活中蛇床子素的含量.结果 在TLC中均可检出独活、芍药、秦艽、地黄的特征斑点；0.0503 ～4.024 μg蛇床子素与峰面线性关系良好,平均回收率为97. 1％,RSD =2.93％.结论 所用方法简便可行、重复性好,可用于独活寄生丸的质量控制.
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RP-HPLC测定龙凤洁身纯中苦参碱和蛇床子素的含量
目的:建立龙凤洁身纯中苦参碱和蛇床子素的含量测定方法.方法:采用RP-HPLC同时测定苦参碱和蛇床子素的含量,选用ODS柱,流动相为甲醇-水-二乙胺(65:35:0.02),检测波长为210 nm.结果:平均收回率分别为96.6%和97.8%.结论:方法可行,重复性好,可用于产品控制质量.
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蛇床子素抑制TNF-a表达及作用机制初探
目的:研究蛇床子素抗类风湿关节炎作用,并初步探索其作用机制.方法:基于肿瘤坏死因子(TNF-a)在类风湿关节炎发病中的作用,设计一种抑制TNF-a产生的抗类风湿关节炎小分子药物高通量筛选新方法.结果:与DMSO对照组相比,蛇床子素(N8)能显著抑制脾脏细胞中TNF-a的产生(P＜0.001),减少TNF-a基因的表达,降低p38磷酸化水平.结论:蛇床子素通过抑制p38的磷酸化,抑制TNF-a基因的表达,其具有开发成为治疗类风湿性关节炎药物的潜力.
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独活寄生颗粒的质量标准研究
目的:建立完善独活寄生颗粒的质量控制标准.方法:以薄层色谱法对处方中的独活、秦艽、地黄进行定性鉴别；以高效液相色谱法对秦艽中的龙胆苦苷进行含量测定.结果:在薄层色谱中均可检出独活、秦艽、地黄的特征斑点；龙胆苦苷在0.6408～9.612 μg间线性关系良好,r=0.9994,平均加样回收率为99.91％,RSD=1.3％,结论:本方法简便可行、重复性好,可用于独活寄生丸的质量控制.
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HPLC法测定复方鹿阳酊中蛇床子素的含量
目的制订复方鹿阳酊的质量控制指标.方法采用HPLC法测定复方鹿阳酊中蛇床子素的含量.结果回收率为100.6%,RSD为1.89%.结论本法简单易行,快速,结果准确.
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蛇床子素诱导人胃癌细胞BGC-823凋亡
目的:观察蛇床子素对人胃癌细胞BGC-823凋亡作用的影响.方法:体外培养人胃癌细胞株BGC-823,予以不同浓度蛇床子素干预,MTT法检测细胞存活情况并筛选适作用药物浓度,Hochest 33258染色法观察细胞核形态改变,免疫印迹法检测凋亡蛋白Caspase3、Caspase 9的表达情况.结果:蛇床子素能显著抑制BGC-823细胞增殖,并诱导凋亡小体形成,蛇床子素干预细胞后能增加凋亡相关蛋白Caspase3、Caspase 9的表达水平.结论:蛇床子素能诱导人胃癌细胞BGC-823凋亡.
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二黄凝胶贴膏与软膏的体外释放及透皮性能比较
目的 比较二黄凝胶贴膏与软膏的体外释放及透皮性能.方法 采用Strat-M膜及改进的Franz扩散池进行体外释放及透皮试验,用高效液相色谱法定量分析制剂中君药独活的有效成分蛇床子素含量,测定两种剂型的体外释放度、透皮量及透皮率.结果 二黄凝胶贴膏的透皮方程为Ln=0.443 6t+1.350 9,r=0.964 4,体外累积释放度、透皮量、透皮率分别为62.90％、0.067 2 mg/g、20.82％;二黄软膏的透皮方程为Ln=0.205 1t-0.244 7,r=0.995 6,体外累积释放度、透皮量、透皮率分别为77.64％、0.013 1 mg/g、9.36％.结论 二黄凝胶贴膏的透皮量、透皮率均优于二黄软膏,透皮性能明显优于原剂型,且凝胶贴膏不易过敏,贴敷方便.
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蛇床子素诱导急性脊髓损伤家兔阴茎勃起的实验研究
目的 探讨蛇床子素诱导家兔阴茎勃起的作用及其机制.方法 检测蛇床子素对磷酸二酯酶5 (PDE5)的抑制活性；检测蛇床子素对离体阴茎海绵体组织产生cGMP的诱导活性；建立急性脊髓损伤家兔模型,蛇床子素静脉注射给药(3mg/kg或10mg/kg),通过测量暴露的阴茎粘膜长度评价蛇床子素体内诱导勃起的功能.结果 蛇床子素对PDE5直接抑制活性IC50为88.9nmol/L;对离体阴茎海绵体cGMP诱导活性ED50为58.2μmol/L;在一氧化氮供体硝普钠存在条件下,静脉注射蛇床子素对ASCI家兔模型具有剂量依赖性促进阴茎勃起作用.结论 蛇床子素对勃起功能障碍具有治疗价值.
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蛇床子素对脑出血大鼠脑损伤保护机制的初步研究
目的:探讨蛇床子素对脑出血大鼠脑损伤的保护作用,并研究其相关因子的作用机制.方法:将75只Wistar大鼠,随机分为假手术组、模型对照组、给药治疗组,共计3组,每组25只.在4h、16 h、1d、3d、5d分别检测脑组织SOD含量及血清IL-8含量变化.结果:给药治疗组在蛇床子素的作用下5个时间点检测血清IL-8含量相比模型对照组下调而SOD含量相对上调,并减轻脑水肿的程度,有显著差异性(P＜0.01).结论:蛇床子素能够提高脑出血大鼠脑组织中SOD含量并使血清IL-8含量减少,有保护水肿的脑组织作用.
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蛇床子素通过下调TGF-β1信号通路抗野百合碱所致大鼠右心室重构
目的 研究蛇床子素(Ost)对野百合碱(MCT)所致大鼠右心室重构的作用,并探讨其可能的机制.方法 200 ～220g SD大鼠随机分为正常对照组(Control组,n=8),模型组(Model组,n=8),Ost低、高剂量组(Ost10、Ost20组,10、20 mg/kg,n=8).除正常对照组外的其余大鼠均经颈背部一次性皮下注射MCT 50 mg/kg复制右心室重构模型,造模后第1天开始给药(ig,qd).给药28 d后称大鼠体重(BW),右室自由壁重量(RV),计算右室相对质量(RV/BW);通过HE染色观察右心室显微结构;透射电镜观察右心室超微结构;Western blot检测右心室转化生长因子(TGF-β1)蛋白的表达;real timeRT-PCR检测右心室结缔组织生长因子(CTGF)和纤维连接蛋白(Fn) mRNA的表达.结果 与Control组相比,Model组大鼠右室相对质量明显升高(P＜0.05);右心室心肌细胞肥大畸形且排列紊乱,胞浆肿胀明显;心肌细胞线粒体肿胀,肌浆网扩张;TGF-β1蛋白的表达明显上调(P＜0.05);CTGF和Fn mRNA的表达均明显上调(P＜0.05).与Model组相比,Ost10、Ost20组大鼠右室相对质量明显降低(P＜0.05);右心室心肌细胞排列较为整齐;心肌细胞线粒体肿胀及肌浆网扩张情况均有所减轻;TGF-β1蛋白的表达明显下调(P＜0.05);CTGF和Fn mRNA的表达均明显下调(P＜0.05).结论 Ost具有抗MCT所致大鼠右心室重构的作用,其机制至少部分与其下调TGF-β1信号通路有关.
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蛇床子素通过下调TGF-β1/Smad2信号通路抗野百合碱所致大鼠肺动脉高压
目的 观察蛇床子素(Ost)对野百合碱所致大鼠肺动脉高压(PAH)的干预作用,并探讨其可能机制.方法 200～220 g清洁级雄性SD大鼠随机分为正常对照组(n=8),模型组(n=12),Ost低、高剂量组(10、20 mg/kg,n=8).所有大鼠适应性饲养1周后,模型组和Ost低、高剂量组大鼠经颈背部一次性皮下注射野百合碱50 mg/kg建立PAH模型,Ost低、高剂量组于造模后第1天开始给药(ig,qd),正常对照组和模型组给予等量溶媒.给药期间观察大鼠一般状况,给药28 d后采用有心导管术检测肺动脉压;通过HE染色观察肺小动脉病理学变化;Western blot检测肺组织转化生长因子(TGF)-p1蛋白的表达及Smad2的磷酸化水平.结果 与正常对照组相比,模型组大鼠肺动脉压升高(P＜0.05);肺小动脉中膜明显增厚、管腔狭窄;TGF-β1蛋白的表达及Smad2的磷酸化水平均明显上调(P＜0.05).与模型组相比,Ost低、高剂量组大鼠肺动脉压降低(P＜0.05);肺小动脉中膜变薄;TGF-p1蛋白的表达及Smad2的磷酸化水平均明显下调(P ＜0.05).结论 Ost具有抗野百合碱所致大鼠PAH的作用,其机制可能与下调TGF-β1/Smad2信号通路有关.
关键词： 蛇床子素 野百合碱 SD大鼠 肺动脉高压 转化生长因子β1/Smad2 -
蛇床子素抑制核转录因子-κB的激活减轻β淀粉样蛋白25-35片段诱导的大鼠神经元结构损伤
目的 观察蛇床子素对β淀粉样蛋白25-35片段(Aβ25-35)诱导大鼠神经毒性的影响.并研究其可能机制.方法 将30只雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组、模型组和治疗组(n=10).双侧海马注射Aβ25-35制模后,治疗组每日1次灌胃蛇床子素40 mg/kg,假手术组和模型组灌胃等体积溶媒,连续15 d后处死大鼠,每组随机取3只行HE染色观察神经元损伤情况,其余大鼠分别采用Western blot法检测IL-1β、TNF-α蛋白表达及p-NF-κBp65水平.结果 模型组大鼠海马CA1区神经元较假手术组明显受损,且IL-1β、TNF-α蛋白表达及p-NF-κB p65水平增加(P＜0.01);然而,蛇床子素减轻了Aβ25 35诱导的神经元损伤,降低了IL-1β(P ＜0.05)、TNF-α蛋白表达及p-NF-κB p65水平(P＜0.01).结论 蛇床子素抑制NF-κB的激活,下调IL-1β、TNF-α蛋白表达,可能是其轻减Aβ25-35所致大鼠神经元损伤的机制之一.
关键词： 蛇床子素 β淀粉样蛋白25-35 核转录因子-κB 炎症 大鼠 -
蛇床子素降低磷酸二酯酶含量改善β淀粉样蛋白25-35片段诱导的大鼠神经毒性
目的 观察蛇床子素(Ost)抗β淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ) 25-35片段诱导的大鼠神经毒性作用并探讨其可能机制.方法 雄性SD大鼠30只随机分为假手术组、模型组、Ost(40 mg/kg)治疗组(n=10).双侧海马注射Aβ25-35建立大鼠神经毒性模型,连续Ost(40 mg/kg)灌胃15 d.每组大鼠随机选取3只进行尼氏染色观察其海马尼氏小体的变化.其余大鼠采用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定海马磷酸二酯酶(PDE)及PDE2、PDE4、PDE5、PDE7、PDE9的含量变化.结果 模型组大鼠海马的尼氏小体较假手术组皱缩,排列不整齐,甚至消失;而Ost治疗组海马神经元排列较整齐,变性神经元减少.同时,ELISA结果表明,模型组中大鼠海马PDE、PDE4及PDE5的含量较假手术组显著增高(P＜0.01);但经Ost治疗后,其水平均有所降低(P＜0.叭,P＜0.05),而对PDE2、PDE7和PDE9的含量没有影响.结论 Ost可抗Aβ25-35所致的大鼠神经毒性,其机制可能与抑制PDE4和PDE5的蛋白表达有关.
关键词： 蛇床子素 β淀粉样蛋白25-35 磷酸二酯酶 大鼠 -
蛇床子素减轻Aβ25-35诱导的大鼠学习记忆减退及海马神经元结构损伤
目的 观察蛇床子素对β-淀粉样蛋白25-35片段(Aβ25-35)诱导的大鼠学习记忆减退及海马神经元结构损伤的影响.方法40只雄性SD大鼠随机均分为假手术组、模型组、阳性药组及蛇床子素组,阳性药组每日1次灌胃多奈哌齐1 mg/kg,蛇床子素组每日1次灌胃蛇床子素40 mg/kg,连续17d,假手术组、模型组灌胃等体积的生理盐水,3d后右侧脑室注射Aβ25-35制模,制模后d10开始Morris水迷宫检测大鼠的空间记忆能力,透射电镜观察大鼠海马CA1区神经元结构损伤.结果右侧脑室注射Aβ25-35,后,大鼠在定向航行实验中的逃避潜伏期明显增加(P＜0.01),空间探索实验中的校正逃避潜伏期缩短(P＜0.01),海马CAI区神经元结构明显受损；然而,蛇床子素及多奈哌齐明显缩短了大鼠的定向航行实验中的逃避潜伏期(P＜0.01),延长了空间探索实验中的校正逃避潜伏期(P＜0.01),减轻了海马CA1区神经元结构损伤.结论蛇床子素可减轻Aβ25-35,诱导的大鼠学习记忆减退及海马神经元结构损伤.
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蛇床子素:防治中枢神经系统疾病的新希望
蛇床子素(osthole,Ost)又名甲氧基欧芹酚或欧芹酚甲醚,其化学名称为7-甲氧基-8-异戊烯基香豆素(7-methoxy-8-[3-methylpent-2-enyl]coumarin),结构式见图1,分子量:244.29,是先从伞形科植物中提取分离出的天然香豆素类化合物,存在于多属植物中,目前已知至少在15个属如蛇床属、当归属、古当归属、绵果芹属、欧防风属、欧芹属等中存在[1].因其在伞形科植物蛇床的干燥成熟果实蛇床子(Fructus cnidii)中含量较高（约2％）,故而得名.血压、抗心律失常等作用,且数见综述[1-3].
