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快速核酸提取环介导等温扩增检测技术在肺结核诊断中的应用评价
目的 评估快速核酸提取环介导等温扩增检测(PURE-LAMP)技术在肺结核临床诊断中的应用价值.方法 选取2012年4月至2013年1月在河南省新乡市结核病防治所和获嘉县疾病预防控制中心就诊的初诊肺结核可疑症状者作为研究对象,共1378例.每例患者留取3份痰标本,分别进行痰涂片镜检、固体培养和PURE-LAMP检测.以临床诊断结果为标准,比较痰涂片镜检、固体培养和PURE-LAMP法检测MTB的效能;以固体培养试验结果为标准,评估PURE-LAMP检测MTB的效能.结果 以临床诊断结果为标准,痰涂片镜检、固体培养和PURE-LAMP检测MTB的敏感度分别为23.40％ (168/718)、58.91％(423/718)和49.44％ (355/718).PURE-LAMP检测敏感度高于痰涂片镜检(x2=185.02,P=0.000),但低于固体培养试验(x2=46.24,P=0.000).以固体培养试验结果为标准,PURE-LAMP检测MTB的敏感度和特异度分别为90.24％ (333/369)和96.86％(924/954),涂阴患者中检测敏感度和特异度分别为82.52％(170/206)和97.06％(924/952).结论 PURE-LAMP检测操作简单,敏感度和特异度较高,在我国县(区)级结核病防治机构具有一定的应用前景.
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脓肿分枝杆菌细胞壁通透性的研究
目的了解脓肿分枝杆菌的细胞壁的通透性.方法在含RFP的液体培养基中加入Tween 80以增加细菌细胞壁的通透性,观察对RFP具不同MIC的脓肿分枝杆菌的生长在450 nm的光吸收值(OD450)的变化,同时用电镜对脓肿分枝杆菌标准株、临床耐药株和敏感株的细胞壁进行超微结构的观察.结果临床耐药菌株在同时含1/5MIC浓度的RFP和0.05%Tween 80的液体培养基中生长的OD450值与单含RFP的OD450值比较有显著性差异(P＜0.05);临床敏感株和结核杆菌耐药株在两种培养基中的OD450值比较无显著性差异;在电镜下观察,脓肿分枝杆菌耐药株的细胞壁可见有薄层深染线,而敏感株的细胞壁结构均匀.结论脓肿分枝杆菌确实存在细胞壁的低通透性,且脓肿分枝杆菌耐药株和敏感株的细胞壁在结构上有一定差异,因此膜通透性低下可能是其耐RFP的重要原因.
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全血γ-干扰素释放试验在结核病辅助诊断中的价值
目的 评价全血γ-干扰素释放试验(interferon gamma release assay,IGRA)-QuantiFERON@-TBGold IT试验试剂盒在结核病辅助诊断中的价值.方法 搜集重庆市公共卫生医疗救治中心结核科和感染科2014年7月1日至2015年12月31日期间同步进行痰液抗酸杆菌涂片、快速培养(BACTECTM MGITTM 960)及采用IGRA测定外周血结核分枝杆菌抗原特异性γ-干扰素(IFN-γ)应答水平的1440例患者临床资料,采用卡方检验分析不同类别患者间不同检测技术阳性率的差异,以P＜0.05为差异具有统计学意义.结果 与临床诊断结果相比,IGRA检测全血诊断结核病的敏感度为77.6％(716/923),特异度为69.9％(158/226).与痰涂片[肺结核、肺外结核、HIV感染或AIDS患者并发肺结核的阳性率分别为28.5％(226/792)、5.3％(7/131)、6.1％ (6/98)]、液体培养[肺结核、肺外结核、HIV感染或AIDS患者并发肺结核的阳性率分别为40.9％ (324/792)、13.0％(17/131)、11.2％(11/98)]检测结果相比,IGRA诊断肺结核[77.0％(610/792)]、肺外结核[80.9％(106/131)]和HIV感染或AIDS患者并发肺结核[50.0％(49/98)]的阳性率更高,差异有统计学意义(与痰涂片比较,x2值分别为373.52、152.51、46.73,P值均＜0.01;与液体培养比较,x2值分别为212.03、121.38、34.68,P值均＜0.01).结论 IGRA检测快速便捷,有着较高的敏感度.IGRA对结核病辅助诊断有一定的价值,尤其对肺结核、肺外结核,以及HIV感染或AIDS并发肺结核患者的诊断有一定意义.
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脓肿分枝杆菌肺病47例临床分析
目的提高对脓肿分枝杆菌肺病临床表现的认识.方法对1998年1月-2001年12月收治的脓肿分枝杆菌肺病47例临床资料进行回顾分析.结果无合并结核分枝杆菌肺病32例(68.1%),合并结核分枝杆菌肺病15例(31.9%).有反复抗结核病治疗史31例(66%).主要症状为咳嗽、咳痰、咯血(痰).X线胸片中,病灶在3个肺野以上37例(78.7%);两侧受累者28例(59.6%),右侧15例(31.9%),左侧4例(8.5%),病灶内有空洞23例(48.9%),其中右上空洞16例(69.6%),左上空洞9例(39.1%).对H、R、S、E、Th1321、D、L耐药率高,对A、C、V、CTM耐药率相对低.结论脓肿分枝杆菌肺病病程长,症状无特异,耐药率高,抗结核治疗疗效差.
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链霉素耐药结核分枝杆菌临床分离株gidB基因突变研究
目的 探索gidB基因突变在结核分枝杆菌链霉素耐药中的作用.方法 结核分枝杆菌临床分离株中,60株为链霉素耐药,30株敏感.同时进行链霉素MIC测定并采用DNA测序法分析gidB,rpsL和rrs基因突变.结果 20%的耐药株含有gidB单基因突变,80%的耐药株除gidB基因突变以外,还有rpsL或rrs基因突变.敏感株中也有gidB基因突变.gidB突变呈散在分布,未发现突变热点.结论 gidB基因突变在结核分枝杆菌链霉素耐药中的作用尚不能肯定.
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2009-2010年北京市登记复治肺结核患者的耐药状况研究
目的 了解北京地区复治肺结核患者的耐药状况,为结核病防治对策的制定提供依据.方法 收集2009-2010年北京市复治肺结核患者276例,对分离出的同时有一、二线药物敏感度试验结果的结核分枝杆菌菌株195株进行抗结核药品耐药情况检测并进行分析.耐药率之间的差异性比较采用x2检验,显著性水平设定为α=0.05.结果 195株结核分枝杆菌菌株对一线抗结核药品的耐药率为56.4％(110/195),对二线抗结核药品的耐药率为63.6％(124/195),耐多药率28.2％(55/195),广泛耐药率3.1％(6/195);在检测的9种抗结核药品中,耐药率顺位前5位依次为丙硫异烟胺57.9％(113/195)、异烟胼42.6％(83/195)、乙胺丁醇36.4％(71/195)、链霉素34.9％(68/195)和利福平33.8％(66/195);耐药率在性别[男性78.8％(119/151),女性79.5％(35/44)]、年龄分布[“15～岁”82.9％(34/41),“30～岁”83.8％(57/68),“45～岁”79.2％(38/48),“60～岁以上”65.8％(25/38)]、地区[北京市79.2％(103/130)、外地78.5％(51/65)]和登记分类[复发77.7％(122/157),初治失败84.6％(11/13),其他复治84.0％(21/25)]等方面比较,差异均无统计学意义(x2值分别为0.011、5.328、0.015、0.824;P值均＞0.05).结论 北京地区复治肺结核患者耐药状况比较严重,应加强对现有治疗管理方法的研究.
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河南省结核分枝杆菌药物敏感性测试质量控制结果分析
目的 评价河南省Mtb药物敏感性测试的质量,规范并完善河南省结核病实验室药物敏感性室间质量保证体系.方法 河南省6个受评估实验室按照《结核病诊断实验室检测规程》中比例法药敏试验要求对河南省结核病参比实验室下发的一线及二线药敏测试菌株58株进行比例法药敏试验,试验结果均报河南省结核病参比实验室( PRL),由PRL与标准结果比较并进行统计学分析.结果 一线药物INH、RFP、S和EMB的一致性分别为91.0％(151/166)、95.8％ (159/166)、89.2％ (148/166)和77.1％(128/168)；二线药物平均一致性达到了94.9％(683/720).结论 河南省6个评估实验室一线药的INH和RFP及四种二线药物敏感性检测均达到WHO和国家要求,EMB的敏感性检测水平有待进一步提高.
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984株结核分枝杆菌耐药情况分析
目的 了解浙江省当前结核病对一线抗结核药物的耐药水平及耐多药情况,为今后结核病防治工作提供参考依据.方法 采用WHO推荐的药敏比例法对984株临床分离结核分枝杆菌进行药物敏感性试验.结果 总耐药率为30.6%,初始耐药率为26.6%,获得性耐药率为52.3%,耐多药(MDR)率为7.6%.结论 浙江省耐药水平有上升趋势,应引起相关卫生部门的关注.
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γ-干扰素联合微卡免疫治疗结核病小鼠的实验研究
目的 研究γ-干扰素联合微卡对结核分枝杆菌感染小鼠的免疫治疗作用及其免疫学机制.方法 60只BALB/c小鼠用随机数字表法随机分为正常组、模型组、γ-干扰素组、微卡组及联合组,每组12只.除正常组不造模外,其余4组小鼠经尾静脉注射结核分枝杆菌(H37 Rv,106个菌/只).微卡组于攻毒后10d腹腔内注射微卡22.5μg/只.γ-千扰素组攻毒后10天腹腔注射γ-干扰素(1万μg/只,1次/d)5 d,间隔2 d,继续腹腔注射5 d.联合组2者均注射.感染6周后处死30只小鼠(每组6只),称取小鼠体质量和肺脏及脾脏质量.取肺、脾组织进行结核菌培养和菌落计数,观察肺脏病理改变,同时用ELISA法检测血清IFN-γ、IL-4水平和用RT-PCR法测定肺组织IFN-γmRNA、IL-4 mRNA的表达.其余30只小鼠观察60d,计算其存活时间.结果 模型组肺组织病理改变以渗出为主,病变广泛,增生改变不明显;3个用药组病变范围局限,并可见类上皮细胞、纤维母细胞.模型组观察期结束无一小鼠存活;正常组和联合组在观察期内无一死亡,γ-干扰素组和微卡组在观察期内仅有1只小鼠死亡.感染后6周,γ-干扰素组肺脾菌荷量(×106CFU/gˉx±s)(分别为7.12±0.51,6.42±0.48)和微卡组(分别为(6.31±0.47),(6.07±0.39))较模型组(分别为26.18±0.96,18.43±0.85)明显减少(P＜0.05),与γ-干扰素组、微卡组比较,联合组肺脾菌荷量为(分别为2.67±0.36,2.12±0.33)减少更显著(P＜0.05).模型组小鼠血清IFN-γ的表达和肺组织IFN-γmRNA(分别为(162±46)pg/ml,(0.18±0.06))的表达较正常组(分别为(521±198)pg/ml,(0.98±0.13))均显著降低(P＜0.01),模型组小鼠血清IL-4的表达和肺组织IL-4 mRNA(分别为(102±24.8)pg/ml,(1.46±0.25))的表达较正常组(分别为(56.2±14.5)pg/ml,(0.04±0.01))均显著增高(P＜0.01).γ-干扰素组小鼠血清IFN-γ的表达和肺组织IFN-γ mRNA的表达(分别为(402±134)pg/ml,(0.66±0.08))和微卡组(分别为(416±153)pg/ml,(0.68±0.09))均显著高于模型组(P＜0.05);与γ-干扰素组、微卡组比较,联合组(分别为(493±145)pg/ml,(0.81±0.11))增高更显著(P＜0.05).γ-干扰素组小鼠血清IL-4的表达和肺组织IL-4 mRNA的表达(分别为(73.5±15.3)pg/ml,(0.63±0.12))和微卡组(分别为(71.3±14.6)pg/ml,(0.59±0.13))均显著低于模型组(P＜0.05);与γ-干扰素组、微卡组比较,联合组(分别为(60.8±12.7)pg/ml,(0.28±0.03))降低更显著(P＜0.05).结论 γ-干扰素和微卡可减少结核病小鼠肺和脾脏结核菌数量,并增强Th1型免疫反应,抑制Th2型免疫反应,增强小鼠抵抗结核分枝菌感染的能力,且两者联用具有协同作用.
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观察改良的药物敏感性检测法对检出耐药结核分枝杆菌的影响
目的 利用经改良的低抑菌浓度法(IMIC)检测结核分枝杆菌临床分离株对异烟肼、利福平、乙胺丁醇、链霉素和氧氟沙星的药物敏感性,观察其对耐药结核分枝杆菌检出的影响.方法 利用改良的低抑菌浓度法检测135株临床分离株对INH、RFP、EMB、SM及OFLX的敏感性.结果 在相同的药物浓度中,与接种1×105/ml菌量的试验管相比135株接种1×107/ml活菌数的试管中有68.89%的结果与之相同,有31.1%的结果与之不相同.判断结果由阴性转阳性的标本共有20株,(其中耐RFP的1株、耐INH的3株、耐OFLX的3株、耐EMB的5株以及耐SM的8株)约占135株受试菌株总数的14.8%.结论 利用改良的低抑菌浓度法可发现潜在的耐药结核病患者,提高耐药菌的检出率.
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噬菌体生物扩增法快速测定结核分枝杆菌卷曲霉素耐药性的研究
目的 建立快速测定结核分枝杆菌卷曲霉素耐药性的噬菌体生物扩增法,并探讨其在结核分枝杆菌卷曲霉素耐药性测定中的应用价值.方法 应用噬菌体生物扩增法测定112株结核分枝杆菌卷曲霉素耐药性,并与绝对浓度法结果进行比较,对不符合的菌株采用Bactec MGIT 960测定其低抑菌浓度(MIC).以细菌接种量为10-3mg/ml,药物浓度5μg/ml、37℃作用24 h为药敏试验条件.结果 噬菌体法测定112株结核分枝杆菌临床分离株卷曲霉素敏感91株、耐药21株,绝对浓度法敏感92株、耐药20株;两法测定均为敏感89株、均为耐药18株.在5株噬菌体法与绝对浓度法测定结果不符的菌株中,3株噬菌体法与MIC测定结果相符合.如以绝对浓度法药敏结果为判断标准,则噬菌体法测定卷曲霉素耐药性的敏感性为90%(18/20),特异性为96.7%(89/92),阳性预测值为85.7%(18/21),阴性预测值为97.8%(89/91),准确性为95.5%(107/112).结论 噬菌体生物扩增法测定卷曲霉素耐药性简便快速,只需2 d时间,操作不需特殊仪器设备,具有很高的敏感性和特异性,可作为MTB的卷曲霉素耐药性快速筛选方法,建议临床推广应用.
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1994-2003年广州老城区门诊病人耐药结核病流行状况分析
目的分析广州市老城区10年耐药结核病的流行状况和流行趋势,为今后结核病控制的有效开展提供决策依据.方法回顾性分析结核病肺部肿瘤防治所1994-2003年结核杆菌耐药性测定资料.结果 10年间,9 044株临床分离结核菌株的总耐药率、初始和获得性耐药率分别为23.7%、20.7%和34.6%,总耐药率、初始耐药率呈总体缓慢下降趋势,获得性耐药率反之;2 145株耐药株的耐药顺位为:H(20.3%)、R(10.2%)、S(9.5%)、E(5.0%),其中初始耐药率顺位为:H(17.7%)、R(8.3%)、S(8.1%)、E(4.1%),获得性耐药率顺位为:H(29.8%)、R(16.7%)、S(14.3%)、E(8.3%),耐单药、耐二药、耐多药率分别为:10.8%、3.4%和9.0%,其中其初始耐药率分别为:9.8%、3.0%和7.6%,获得性耐药率分别为:14.4%、4.6%和14.0%,10年间获得性耐H、R、S率及获得性耐多药率呈总体上升趋势,初始耐单药率则呈总体下降趋势.结论耐H和R菌株率和初始耐多药率的居高不下、获得性耐药率与获得性耐多药率的上升趋势、初始耐单药率总体下降趋势表明未来结核分枝杆菌耐药性发生更趋向于耐多种药物,必须采取积极有力的措施,控制耐药结核病尤其是耐多药结核病的流行与蔓延.
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手工MGIT系统在基层结核病实验室中检测分枝杆菌的效果评价
目的 对手工MGIT液体培养系统(manual mycobacteria growth indicator tube system,M-MGIT)检测分枝杆菌的效果进行评价.方法 收集2012年1月至2013年2月北京市朝阳区疾病预防控制中心结核病门诊初诊患者526例,收集首次痰标本526份,分别对同份标本进行罗氏(L(o)wenstein-Jensen,L-J)固体培养、全自动BACTEC MGIT 960系统培养(A-MGIT)和M-MGIT系统培养,统计学分析采用x2检验和t检验,以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 526份标本中,3种分离培养方法共分离出261株分枝杆菌菌株,检出率为49.6％;M MGIT法、AMGIT法和LJ法阳性检出率分别为48.7％(256/526)、49.0％(258/526)和41.3％(217/526).MMGIT和A-MGIT培养法检出率均高于L-J培养法,差异有统计学意义(x2值分别为5.84、6.45,P值均＜0.05),但M-MGIT和A-MGIT培养法检出率差异无统计学意义(x2=0.02,P＞0.05).M-MGIT法、A-MGIT法和L-J法阳性菌株平均报告时间分别为13 d[(13±6)d]、12 d[(12±6)d]和24 d[(24±9)d],M-MGIT和A-MGIT法阳性报告时间明显短于LJ法,差异有统计学意义(t值分别为15.84、18.32,P值均＜0.05),M MGIT和A-MGIT之间的差异无统计学意义(t=1.89,P＞0.05).MMGIT法、A-MGIT法和L-J法污染率分别为4.6％(24/526)、4.9％(26/526)和4.1％(43/1052),差异无统计学意义(x2=0.64,P＞0.05).结论 M-MGIT液体培养系统能快速检测分枝杆菌,检出率高,阳性报告时间短,成本低廉,适合基层结核病实验室应用.
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液基夹层杯技术检测抗酸杆菌应用性研究
目的 评价液基夹层杯技术检测抗酸杆菌的应用价值.方法收集1 190例肺结核可疑症状者的642份晨痰标本和1 140份即时痰标本,每份痰标本均采用液基夹层杯技术、直接涂片查找抗酸杆菌技术和罗氏结核分枝杆菌培养技术进行检测,比较直涂法、液基法与培养法对痰标本的阳性检出率,并在以培养法为金标准的前提下考察液基法、直涂法的灵敏度和特异度,同时评价晨痰和即时痰、1次痰和2次痰对肺结核涂阳病人发现的差异.结果 液基法、直涂法和培养法对642份晨痰标本的阳性检出率分别为23.5%、12.7%和26.6%,对1 140份即时痰的阳性检出率分别为18.1%、9.6%和23.3%.以培养法作为金标准,液基法的灵敏度和特异度分别为68.9%和95.8%,并与直涂法相对应的指标差异有统计学意义(P＜0.05).液基法检测表明:642份晨痰阳性检出率显著高于1 140份即时痰阳性检出率(P＜0.05).结论 液基法能够提高痰标本的灵敏度,特异度较高,操作标准化,且所需设备简单,便于基层开展,是一种可能具有推广价值的检测方法.
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结核分枝杆菌CFP10-ESAT6融合蛋白在大肠杆菌中的高效表达
目的在大肠杆菌中高效融合表达结核分枝杆菌分泌蛋白ESAT-6和CFP-10,获得纯化的重组ESAT6-CFP10(rCFP10-ESAT6)融合蛋白抗原.方法通过聚合酶链反应(polymerase chain reaction ,PCR)扩增CFP10-ESAT6融合基因;以质粒pET-28a为表达载体,构建重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3);以异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达目的蛋白,通过SDS-PAGE电泳和蛋白免疫印迹法 (Western blotting) 鉴定rCFP10-ESAT6在大肠杆菌中的表达,确定rCFP10-ESAT6蛋白抗原在大肠杆菌中的表达形式;采用Chelating Sepharose Fast Flow蛋白纯化试剂纯化重组蛋白.Western blotting及酶联免疫吸附试验(ELISA)分析重组蛋白的免疫原性.结果重组质粒pET28a-CFP10-ESAT6中目的基因测序结果与报道序列相同;在大肠杆菌中以可溶性形式表达;分子量约28kDa,表达量约占菌体总蛋白的46%,纯化后的rCFP10-ESAT6样品经SDS-PAGE和激光密度扫描分析表明其纯度为90%左右,每100 ml培养菌可获得16 mg左右的重组蛋白;Western印迹结果证实重组蛋白与His·tag单克隆抗体及确诊的肺结核病患者血清发生特异免疫反应.ELISA结果分析表明,该重组抗原能区分肺结核患者血清及正常人血清.结论成功地表达和纯化了结核分枝杆菌CFP10-ESAT6融合蛋白,该重组蛋白具有特异的免疫原性.
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结核分枝杆菌glcB基因原核表达质粒的构建、表达和纯化
目的 构建结核分枝杆菌glcB基因原核表达工程株,并进行表达、纯化.方法 用PCR扩增结核分枝杆菌glcB基因,并克隆入pTA2质粒.测序正确后,再亚克隆入pET30a(+)质粒,构建pET30a(+):glcB重组体,转化宿主菌大肠埃希菌BL21(DE3).结果 结核分枝杆菌glcB基因工程株经0.4 mM异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导后,表达出相对分子质量为92 kD重组蛋白.SDS-PAGE分析显示,IPTG诱导4 h重组蛋白的表达量高.表达蛋白以包涵体形式存在于胞质中,表达量占全菌蛋白质的50%.经Ni-NTA柱纯化,获得纯度为90%的重组蛋白.结论 成功地构建了结核分枝杆菌glcB基因工程表达株,并获得GlcB重组蛋白,为研究新型血清学诊断活动性结核病奠定了基础.
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江西省结核分枝杆菌耐二线抗结核药的分子学特征
目的 初步明确江西省耐二线抗结核药相关基因突变的特征,评价等位基因特异性多重PCR(multiplex allele-specific polymerase chain reaction,MAS-PCR)检测二线抗结核药耐药性的可行性.方法 采用DNA测序方法和MAS-PCR技术,对江西省52株耐二线抗结核药的结核分枝杆菌进行耐药相关基因突变位点检测.结果 DNA测序分析:39株耐氧氟沙星(Ofx)菌株中,32株存在gyrA基因错义突变,2株发生gyrB基因错义突变.29株耐卡那霉素(Km)或卷曲霉素(Cm)菌株中,22株为rrs1401位点A→G突变.52株耐二线抗结核药的结核分枝杆菌,40株为北京基因型(76.92％,40/52),其中17株北京基因型菌株发生gyrA-GAC94GGC突变(42.50％,17/40),19株北京基因型菌株发生rrs-A1401G突变(47.50％,19/40).北京基因型与基因突变类型gyrA-GAC94GGC和rrs-A1401G无明显相关性(x2=1.16、1.92,P值均＞0.05).MAS-PCR检测Ofx耐药株的敏感度为61.54％(24/39),检测Km或Cm耐药株的敏感度为79.31％(23/29).结论 gyrA基因94位密码子突变是江西省结核分枝杆菌Ofx耐药的主要机制；rrs-A1401G突变则是Km或Cm耐药的主要原因.MAS-PCR方法对于快速检测二线抗结核药的耐药性有一定的临床应用价值.
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中国区县级结核病防治机构结核分枝杆菌涂片和培养结果多中心比对分析研究
目的 分析我国区县级结核病防治机构(简称“结防机构”)就诊患者痰涂片和培养结果之间的关系.方法 选取全国耐药性基线调查期间通过分层整群抽样方法随机抽取的18个区县级结防机构,自2007年4-12月连续纳人的1230例初治和复治涂阳患者痰标本,共计3550份,采取“三涂两培”的方法(即3份痰标本均为阳性,选取阳性级别高的2份痰标本进行培养；3份痰标本2份阳性,选取2份阳性痰标本进行培养；3份痰标本1份阳性,选取阳性标本和1份质量好的阴性标本进行培养),完成涂片和培养试验,计算患者即时痰、夜间痰和晨痰不同痰标本的涂片阳性率和培养阳性率,分析涂片和培养结果的相关关系.结果 结核病患者即时痰、夜间痰和晨痰涂片阳性率分别为78.8％(917/1164)、87.0％(1070/1230)和90.0％(1040/1156),即时痰、夜间痰和晨痰培养阳性率分别为96.9％(504/520)、97.1％(881/907)和97.8％(709/725),对2147份痰标本涂片结果阳性级别和培养结果阳性级别进行趋势x2检验,发现两者存在一定的线性趋势相关关系(x2=206.2,P＜0.01).结论 涂片结果在一定程度上可为培养结果提供依据,涂片阳性级别越高,培养阳性级别也越高.
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1819株非结核分枝杆菌行药物敏感性试验的结果分析
目的 对广州市1819株非结核分枝杆菌临床分离株行药物敏感度试验的结果进行回顾性分析,为临床第一线治疗非结核分枝杆菌病提供可靠的科学依据.方法 按照中国防痨协会制定的《结核病诊断实验室检验规程》,对2009-2011年来自广州市胸科医院门诊就诊和住院患者以及少部分院外单位在实验室中从痰液、支气管冲洗液、胸腹腔积液、尿液以及咽拭子等样品培养出的14 095株分枝杆菌进行菌型鉴定,对确认为NTM的实验菌株3264株,选择没有混合感染的株种1819株采用临床上常用的一、二线药物(包括INH RFP、S、EMB、Am、Clr、Lfx、Mfx、环丙沙星(CIP)、力克菲蒺、Rfb、Pto和Cm共计13种药物)进行敏感度试验.结果 非结核分枝杆菌对INH和力克菲蒺耐药率达96.15％(1749/1819)和95.41％(1248/1308);其他依次为S 76.25％(1387/1819)、Pto 73.94％ (817/1105)、Lfx 72.94％(954/1308)、RFP 72.51％ (1319/1819)、EMB 70.42％(1281/1819)、Mfx65.29％(854/1308)、CIP 60.13％(543/903)、Rfb 56.87％(236/415)和Cm50.50％(102/202);而Clr和Am对非结核分枝杆菌的敏感率为88.17％(1163/1319)和67.73％(892/1317).结论 非结核分枝杆菌对一线抗结核药物具有高度的原始耐受性,而大环内酯类的Clr和氨基糖甙类的Am则对非结核分枝杆菌有较强的抑菌效能,因而对实验室中分离出的非结核分枝杆菌有必要进行药物敏感度试验.
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痰与支气管肺泡灌洗液结核分枝杆菌FQ-PCR检测对涂阴肺结核诊断价值的比较
目的 探讨呼吸道痰标本和支气管肺泡灌洗液(BALF) Mtb-DNA检测对涂阴肺结核的诊断价值.方法 选择福州肺科医院2009年7月至2009年12月胸部影像学疑为肺结核但至少3份痰涂片镜检Mtb阴性,或胸部影像学无法排除肺结核需进一步检查的患者共51例,所有入选患者初诊根据临床症状、体征、胸部影像学结果分为疑似结核组(24例)和待排结核组(27例).均行抗结核抗体、红细胞沉降率检测及PPD试验,应用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)定性及定量检测两组患者痰和BALF中的Mtb-DNA.结果 疑似结核组和待排结核组各有22例和2例确诊肺结核,确诊的24例中痰FQ-PCR敏感度为45.8％(11/24),特异度为96.3％(26/27),Youden指数42.1％；BALF FQ-PCR的敏感度为75.0％(18/24),特异度96.3％(26/27),Youden指数71.3％.结论 FQ-PCR检测BALF Mtb较痰更为敏感,对影像学疑诊但痰涂片阴性的结核患者有很高的实用价值,尤其适用于无痰的患者.
