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益气活血方对脑缺血大鼠脑组织Glu、GABA及NR1表达的影响
目的 观察益气活血方对急性脑缺血再灌注大鼠缺血脑组织谷氨酸(glutamate,Glu)、γ-氨基丁酸(γ-aminobutyrate acid,GABA)含量及神经受体1(neuroreceptor1,NR1)表达的影响.方法 采用线栓法阻断大鼠左侧大脑中动脉复制局灶性脑缺血再灌注模型.大鼠随机分为假手术组、模型组、益气活血汤组.采用高效液相色谱法和链霉亲合素-生物素酶复合物(streptavidin-biotinidase complex,SABC)染色法,分别检测Glu、GABA含量和NR1表达水平.结果 脑缺血2 h再灌注各时间点与假手术组比较,模型组Glu、GABA含量和NR1表达均显著升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,治疗组脑缺血后6,48,72 h Glu、NR1水平显著降低;72 h GABA含量显著提高(P<0.01).结论 益气活血方可能通过调节兴奋性氨基酸Glu和抑制性氨基酸GABA含量的平衡,及减少NR1表达防止脑缺血再灌注损伤.
关键词： 脑缺血再灌注 益气活血汤 谷氨酸 γ-氨基丁酸 N-甲基-D-天冬氨酸受体 -
儿童抗 N-甲基-D-天冬氨酸受体脑炎10例分析
目的：分析儿童抗 N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDAR）脑炎临床、头颅 MRI 和脑电图（EEG）特点。方法收集10例符合抗 NMDAR 脑炎的患儿临床、头 MRI 和 EEG 资料并进行分析。结果10例抗NMDAR 脑炎患儿中，女7例，男3例，发病年龄1岁1个月至14岁，平均年龄6岁11个月，10例患儿均未伴肿瘤性疾病，伴有癫痫发作者9例，精神行为异常者10例，意识障碍者4例，不自主运动者8例，自主神经功能障碍者5例，睡眠障碍者10例；头颅 MRI 正常者7例，异常者3例，其中为2例为额、颞区异常信号，1例为脑萎缩，与病情不平行；10例患儿 EEG 均异常，多为局灶性或弥漫性慢波活动，5例伴有额、颞区尖慢波，左侧异常高于右侧，与病情相符合。结论抗 NMDAR 脑炎可发生于儿童，女童多于男童，少见合并肿瘤，临床表现主要为精神行为异常、癫痫、不自主运动、意识障碍、睡眠障碍；脑电图监测对于病情及预后判断比头颅 MRI更有意义。
关键词： N-甲基-D-天冬氨酸受体 脑炎 -
氯胺酮对乳鼠海马CA3区神经元凋亡及NMDAR-2B表达的影响
目的 探讨氯胺酮对新生大鼠海马CA3区海马神经元凋亡及N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR) -2B表达的影响.方法 将12只新生7d的SD大鼠随机分为对照组和氯胺酮组,每组6只.氯胺酮组腹腔注射氯胺酮20 mg/kg,间隔90 min再次注射,共计5次；对照组于相应时间点腹腔注射等体积的生理盐水.24h后灌注固定,断头取脑；TUNNEL法检测海马神经元凋亡情况；免疫组化法检测海马神经元CA3区NMDAR-2B表达.结果 氯胺酮组凋亡细胞密度和NMDAR-2B表达均明显高于对照组(P均＜0.05).结论 氯胺酮可引起新生大鼠海马神经元凋亡增加,其机制可能与NMDA受体表达上调有关.
关键词： 氯胺酮 细胞凋亡 N-甲基-D-天冬氨酸受体 -
艾芬地尔预处理对七氟醚致幼年大鼠学习记忆能力损伤的保护作用及机制
目的：探讨N-甲基-D-天冬氨酸受体亚型（ NR2B受体）拮抗剂艾芬地尔对七氟醚导致的幼年大鼠学习记忆能力损伤的保护作用及机制。方法出生后7 d的雄性SD大鼠随机分为四组：对照组（ Con组）给予腹腔注射双蒸水10 mg／kg后暴露在30％氧气下4 h；艾芬地尔组（Ifen组）给予腹腔注射艾芬地尔（10 mg／kg）后暴露在30％氧气下4 h；七氟醚组（ Sev组）腹腔注射双蒸水后暴露在2％七氟醚4 h；七氟醚＋艾芬地尔组（ Sev＋Ifen组）给予腹腔注射艾芬地尔后暴露在2％七氟醚下4 h。用Western blotting、免疫荧光法检测大鼠海马区NR2B及凋亡相关蛋白半胱氨酸蛋白酶3（Caspase-3）、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）的表达。大鼠于出生后40 d行Morris 水迷宫和避暗实验评估其学习记忆能力。结果与Con组及Sev＋Ifen组比较，Sev、Ifen组NR2B、Caspase-3、PARP、Caspase-3阳性细胞百分比均升高（P＜0．05或＜0．01），Con组及Sev＋Ifen组比较，P均＞0．05。在定位航行实验中，Sev组的潜伏期于第2、3天长于Con组（P均＜0．05）。空间探索实验中，各组目标象限的时间百分比比较差异无统计学意义（P均＞0．05）。避暗实验结果表明，与Con组比较，Ifen、Sev组记忆潜伏期缩短（P均＜0．05），Sev＋Ifen组差异无统计学意义（P＞0．05）。结论预先给予艾芬地尔可减少七氟醚对幼鼠学习记忆能力的损伤，其机制可能与抑制NR2 B表达及其所诱导的细胞凋亡有关。
关键词： 记忆能力损伤 七氟醚 艾芬地尔 N-甲基-D-天冬氨酸受体 幼鼠 -
N-甲基-D-天冬氨酸受体与疼痛
谷氨酸是中枢神经系统中重要的兴奋性神经递质,又称为兴奋性氨基酸(EAA).其主要通过离子型和代谢型细胞膜受体发挥作用.离子型受体是直接的离子通道,分为3个主要类型(分别以其激动剂命名):α-氨基-3-羧基-5-甲基异唑-4-丙酸(AMPA),海人藻酸(KA)和N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA).
关键词： N-甲基-D-天冬氨酸受体 疼痛 -
新生期暴露MK-801对成年雌性大鼠再认记忆和海马兴奋-抑制平衡的影响
目的 探讨新生期亚慢性注射谷氨酸N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体拮抗剂-地卓西平马来酸盐(dizocilpine maleate,MK-801)对成年期雌性大鼠再认记忆以及海马突触水平上兴奋-抑制平衡的影响.方法 (1)新生雌性大鼠随机分为MK-801模型组和对照组,在出生后(postnatal day,PND)第5～14天皮下注射MK-801(0.25 mg/kg,2次/d)或生理盐水.(2)在成年期(PND 73-75)进行线索物体辨别测试.(3)用免疫组织化学染色法检测海马囊泡性谷氨酸转运体1(vesicular glutamate transporter 1,VGLUT1)与囊泡GABA转运体(vesicular GABA transporter,VGAT)的表达水平.结果 (1)MK-801组的大鼠对新物体的偏好指数与对照组相比显著降低(t=-2.762,P=0.012);(2) MK-801组大鼠海马各亚区内VGLUT1表达水平未发生显著改变(P＞0.05),VGAT在CA1区的表达量(39.60± 2.19)与对照组(48.19±2.10)相比显著降低(P＜0.05),CA1区VGLUT1/VGAT的比值(1.16±0.05)、CA3区VGLUT1/VGAT的比值(1.44±0.03)与对照组[CA1区:(0.99±0.05),CA3区:(1.28±0.02)]相比显著升高(均P＜0.05).结论 脑发育关键期阻断NMDA受体,对雌性大鼠的联结再认记忆和海马的兴奋-抑制平衡产生了远期的破坏作用,后者可能是认知功能改变的机制之一.
关键词： MK-801 N-甲基-D-天冬氨酸受体 再认记忆 兴奋-抑制平衡 大鼠 -
Neto1-siRNA干预对疼痛模型大鼠条件回避行为和前扣带回NMDA受体亚基的影响
目的 探讨Neto1-siRNA干预对神经病理性疼痛(neuropathic pain,NP)模型大鼠痛相关负性情绪和前扣带回(anterior cingulate cortex,ACC)的Neto1(Neuropilin and tolloid-like1)以及N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体亚基NR2A和NR2B表达的影响.方法 健康雄性Wistar大鼠40只,随机分为假手术组(sham operated group,SO组)、坐骨神经慢性压迫疼痛模型组(chronic constriction injury of the sciatic nerve,CCI组).术后第24天,SO组和CCI组大鼠ACC部位经脑立体定位注射LV-Net0 1-RNAi(30160-1),制备成siRNA SO组和siRNA CCI组.每组10只大鼠.采用坐骨神经慢性压迫损伤制备大鼠CCI模型.各组大鼠分别于第7天、14天、21天和28天测量机械缩足阈(mechanical withdrawal threshold,MWT)和热缩足潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL).RT-PCR和Western Blotting方法检测ACC部位的Net01、NR2A和NR2B的mRNA和蛋白表达水平.结果 CCI组的TWL和MWT比SO组均降低,差异有统计学意义(P＜ 0.05).CCI组回避分数[(410.54±44.79)s]比SO组[(240.23±27.02)s]升高,差异有统计学意义(P＜0.05),但与siRNA CCI组[(395.16±36.25)s]比较,差异无统计学意义(P＞0.05).RT-PCR结果显示,CCI组Neto1、NR2A和NR2B表达水平比SO组均升高(P＜ 0.05),经Neto1-siRNA干预后,Neto1和NR2A表达水平降低(P＜0.05),但NR2B无显著变化.Western Blotting结果显示,CCI组Neto1、NR2A和NR2B表达水平比SO组均升高(P＜0.05),经Neto1-siRNA干预后,Neto1和NR2A表达水平降低(P＜0.05),但NR2B无显著变化.结论 ACC部位的Neto1表达降低可以下调NMDA受体亚基NR2A的表达,但不影响NP所诱导的痛相关负性情绪.
关键词： 疼痛 前扣带回 条件性回避行为 Neto1蛋白 N-甲基-D-天冬氨酸受体 -
脊髓水平NMDAR-ERK5信号通路在吗啡依赖大鼠戒断行为中的作用
目的 探讨脊髓水平N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartic acid receptor,NMDAR)-细胞外信号调节蛋白激酶5(extracellular signal-regulated kinase 5,ERK5)信号通路在吗啡依赖大鼠戒断行为中的作用.方法 成年雄性SD大鼠96只,体质量200～ 250 g,采用随机数字法,将实验动物随机分为四组(n=24):对照组(A组)、戒断组(B组)、二甲基亚砜(DMSO)组(C组)、MK801组(D组).采用剂量递增法皮下注射吗啡以建立大鼠吗啡依赖模型,第6天上午经腹腔注射纳洛酮,催促戒断症状出现,即建立吗啡戒断模型.采用行为药理学方法结合western blot技术,鞘内注射NMDAR抑制剂MK801,观察其对吗啡依赖大鼠戒断行为、戒断所致痛觉过敏及脊髓p-ERK5表达的影响.结果 A组大鼠腹腔注射纳洛酮后并未出现戒断症状及痛觉过敏.与A组相比,B组大鼠戒断症状评分[(45.2±7.3)分]、痛觉过敏评分[(14.4±3.7)分],C组大鼠戒断症状评分[(44.7±6.2)分]、痛觉过敏评分[(13.2±2.7)分],D组大鼠戒断症状评分[(28.3±1.6)分]、痛觉过敏评分[(5.9±11)分]明显增加(P＜0.05);与C组相比,D组大鼠鞘内注射MK801后戒断症状评分[(28.3±1.6)分]、痛觉过敏评分[(5.9±1.1)分]明显降低(P＜0.05).与A组相比,B组大鼠脊髓水平p-ERK5(12 848±621)、C组大鼠脊髓水平p-ERK5(12 579±396)表达显著上调(P＜0.05);与C组大鼠脊髓水平p-ERK5(12 579±396)相比,D组大鼠鞘内注射MK801后脊髓水平p-ERK5(5123±546)表达显著下调(P＜0.05).结论 脊髓水平NMDAR-ERK5信号通路参与吗啡依赖大鼠戒断症状的表达.
关键词： 吗啡依赖 戒断症状 脊髓 N-甲基-D-天冬氨酸受体 细胞外信号调节蛋白激酶5 -
老年大鼠空间记忆与海马N-甲基-D天冬氨酸受体2B亚基mRNA的表达
目的 观察老年大鼠在Y迷宫训练建立空间记忆后N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDA)2B亚基mRNA在海马区的表达变化.方法 用Y迷宫对老年(12月龄)大鼠进行短期强化训练,建立空间记忆后,于即刻,3h,6h,12h,24h,3d每组处死8只老年大鼠,取双侧海马,应用RT-PCR方法 检测大鼠海马NM-DA受体2B亚基(NR2B)mRNA的表达变化.结果 训练组动物(包括即刻,3h,6h,12h,24h组)海马NR2B mRNA的表达量[分别为(683.83±78.13),(806.00±81.43),(848.83±80.84),(915.17±84.25),(568.53±77.14)]明显高于对照组和假训练组[(398.17±74.76),(418.33±70.17),P<0.05],且12h时表达多.3d组的表达量(430.33±74.41)与对照组和假训练组相比差异无统计学意义.结论 NR2B可能参与了学习记忆信号的转导过程,且在记忆训练后12h时表达多,3d时恢复到基础水平.
关键词： Y迷宫 空间记忆 N-甲基-D-天冬氨酸受体 海马 基因表达 -
地卓西平对急性吗啡依赖大鼠戒断诱发条件性位置厌恶的影响
目的 谷氨酸NMDA受体拮抗剂地卓西平(MK801)对大鼠急性吗啡依赖戒断性情绪反应的影响.方法 以条件性位置厌恶(CPA)实验建立急性吗啡依赖大鼠戒断性情绪反应模型,观察大鼠训练前后在"纳络酮匹配侧"停留时间的变化.结果 吗啡(5.6mg.kg-1)纳络酮(0.5 mg.kg-1)间隔4h皮下注射,进行2轮纳络酮匹配训练,能建立稳定的急性吗啡依赖戒断诱发的CPA模型;注射纳络酮前30min分别注射生理盐水和不同剂量的MK801(0.05 mg.kg-1;0.1 mg.kg-1),3组大鼠在"纳络酮匹配侧"停留时间训练前、后分别是[(447.25±47.99)s vs(238.00±20.56)s];[(454.63±44.04)s vs(395.38±55.95)s];[(450.38±51.37)s vs(419.63±52.88)s],Post Hoc Tests表明只有空白对照组的训练前后差异显著,而MK801干预的2组训练前后并无显著差异.对急性吗啡依赖和未接触吗啡的大鼠注射MK801,4组大鼠在"处理侧"停留时间训练前后组间和组内均无显著差异,即该剂量的MK801不具有奖赏效应.结论 MK801阻断了CPA的获得可能是直接抑制戒断时厌恶性情绪反应而非其本身具有奖赏效应,提示谷氨酸NMDA受体是介导急性吗啡依赖戒断性情绪反应的部分神经机制.
关键词： 急性吗啡依赖 戒断 条件性位置厌恶 N-甲基-D-天冬氨酸受体 地卓西平 -
细胞内低镁诱发皮质丘脑神经元网络过度兴奋及(癎)样放电的产生
目的 探讨细胞内低镁对皮质丘脑神经元网络兴奋性的影响.方法 通过计算机模型生物学模拟结合大鼠皮质丘脑脑片电生理记录实验,观测细胞内低镁对大电导的钾离子通道(BK通道)、N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDA受体)和皮质丘脑网络放电的影响.结果 1.在BK通道模型上,细胞内低镁并未显著削弱BK通道电流,未引发神经元兴奋性的改变.2.在NMDA受体模型上,细胞内低镁可引发NMDA电流的显著增强,从而导致兴奋性突触后膜电位(EPSPs)的显著增加.3.在大鼠的皮质丘脑脑片上,可以观察到细胞内低镁情况下皮质丘脑神经元网络的兴奋性突触后电位显著增加并产生(癎)样放电,在应用特异性的NMDA受体阻断剂后,兴奋性突触后电位减小,(癎)样放电消失.结论 细胞内镁离子浓度的降低将增强NMDA受体相关电流,从而引发皮质丘脑神经元网络的过度兴奋,终导致(癎)样放电的产生.已证实一种高选择性镁离子转运体相关基因NIPA2与儿童失神癫(癎)密切相关,因此本研究发现的细胞内低镁导致(癎)样放电的机制可能提示儿童失神癫(癎)的发病机制.
关键词： 细胞内低镁 大电导钾通道 N-甲基-D-天冬氨酸受体 皮质丘脑网络 (癎)样放电 -
加巴喷丁和米诺环素对癫(痫)持续状态大鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸受体表达的影响
目的 研究加巴喷丁(GBP)和米诺环素对戊四氮(PTZ)致癫(痫)持续状态(SE)大鼠海马区N-甲基-D-天冬氨酸受体( NMDAR1)表达的影响.方法 SD大鼠84只随机分为对照组、PTZ致(痫)组(PTZ组)、GBP600mg组(GBP组)、GBP600mg干预组(干预组1)、米诺环素45 mg干预组(干预组2)、米诺环素90 mg干预组(干预组3)、米诺环素180 mg干预组(干预组4),每组12只.采用PTZ溶液60 mg· kg-1·d-1腹腔注射诱发SE大鼠,PTZ注射期间出现RacineⅣ～Ⅴ级的惊厥发作持续30 min,连续3d未死亡者为SE点燃成功.GBP组予GBP灌胃,对照组给予9g.L1盐水灌胃.采用头皮针状电极单极导联法观察大鼠(痫)性放电的脑电图.免疫组织化学染色检测NMDAR1表达.结果 NMDAR1表达在PTZ组显著高于对照组(P＜0.01)；GBP组与对照组比 较差异无统计学意义(P＞0.05)；干预组1表达低于PTZ组(P＜0.05).3个不同剂量的米诺环素组NMDAR1表达与PTZ组比较差异均无统计学意义(Pa＞0.05).结论 PTZ致SE大鼠海马神经元NMDAR1表达增加,GBP能降低PTZ所致的SE大鼠NMDAR1 表达增加,而米诺环素45～180 mg· kg-1不能降低PTZ所致的SE大鼠NMDAR1表达增加.
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抗N-甲基-D-天冬氨酸受体脑炎
N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体是包含谷氨酸和甘氨酸结合位点的离子通道,在中枢神经系统的突触传递和突触可塑性调节中起重要作用.已证实的3种NMDA亚基,在体内有着不同的分布和功能.抗NMDA受体脑炎是近年才被确认的好发于年轻女性的可治疗的疾病,其临床特点为精神病性脑病、癫(癎)样发作以及躯干和面部的异常运动,特别是下颌关节肌张力异常.近年儿童抗NMDA受体脑炎有逐渐增多趋势.因此,增加对典型临床表现的认识,可提高对本病的早期识别并给予适当的治疗.
关键词： N-甲基-D-天冬氨酸受体 亚基 脑炎 儿童 -
银杏叶提取物对红藻氨酸致癫痫大鼠N-甲基-D-天冬氨酸受体及神经肽Y表达的影响
目的 分析银杏叶提取物对红藻氨酸致癫痫大鼠N-甲基-D-天冬氨酸受体(NR2A)及神经肽Y(NPY)表达的影响.方法 将64只实验大鼠随机分为4组,正常大鼠对照组16只,单纯癫痫模型组16只,银杏叶提取物预处理组16只,1,2-丙二醇溶液预处理组16只,后3组实验大鼠予以癫痫大鼠模型制作.造模成功后12h,取各组大鼠脑组织制作标本.采用免疫组化方法检测标本海马组织NR2A及NPY蛋白的表达水平及阳性表达率.结果 单纯癫痫模型组、1,2-丙二醇溶液预处理组NR2A的阳性表达率及表达水平高于正常大鼠对照组(P均＜0.05);银杏叶提取物预处理组NR2A阳性表达率及表达水平均低于单纯癫痫模型组及1,2-丙二醇溶液预处理组(P均＜0.05).单纯癫痫模型组、1,2-丙二醇溶液预处理组NPY阳性表达率及表达水平均高于正常大鼠对照组(P均＜0.05);而银杏叶提取物预处理组NPY阳性表达率及表达水平均高于正常大鼠对照组、单纯癫痫模型组及1,2-丙二醇溶液预处理组.单纯癫痫模型组与1,2-丙二醇溶液预处理组在NR2A及NPY表达比较上,差异均无统计学意义(P均＞0.05).结论 银杏叶提取物预处理给药有一定的抗癫痫作用,其抗癫痫的机制可能与上调NPY及下调NR2A的表达有关.
关键词： 癫痫 银杏叶提取物 N-甲基-D-天冬氨酸受体 神经肽Y -
高功率微波辐射后大鼠海马组织中N-甲基-D-天冬氨酸受体表达的变化及其意义
目的 观察高功率微波(HPM)辐射后大鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体表达的变化及其意义.方法 采用10 mW/cm2和100 mW/cm2 HPM辐射110只Wistar雄性大鼠,于辐射后6 h、1 d、7 d、14 d和28 d活杀取海马组织,采用免疫组化、原位杂交和图像分析等技术分析海马组织中NMDA受体--NR1、NR2A和NR2B的蛋白及mRNA含量的变化.结果 10 mW/cm2及100 mW/cm2 HPM辐射后,可见大鼠海马神经元固缩等病理变化,100 mW/cm2组的病变较10 mW/cm2组严重,且恢复迟.2个辐射组的NR1、NR2A及NR2B的表达均增强;10 mW/cm2组辐射后6 h,NMDA受体表达始见增加,1 d达高峰,28 d基本恢复;100 mW/cm2组照后6 h,NMDA受体表达始见增加,7 d达高峰,28 d基本恢复,且与10 mW/cm2组相比,100 mW/cm2组增高明显,恢复较迟.NR1 mRNA变化规律与其蛋白表达类似.结论 10 mW/cm2及100 mW/cm2 HPM辐射可造成大鼠海马神经元损伤,使NMDA受体表达上调,参与HPM致海马组织损伤的病理生理过程.
关键词： 高功率微波辐射 海马 N-甲基-D-天冬氨酸受体 免疫组化 原位杂交 -
激活γ-氨基丁酸B型受体对糖尿病神经痛大鼠脊髓背角磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白和N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基表达的影响
目的 利用γ-氨基丁酸B型受体(GABAR)受体激动剂(巴氯芬)和拮抗剂(CGP55845),探讨激活GABAB受体对糖尿病神经痛大鼠脊髓背角磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(p-CREB)和N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基(NMDA-2B、NR2B)表达的影响.方法 62只SD雄性大鼠随机分为两组:正常对照组(C组)和糖尿病神经痛模型组(D组),腹腔分别注射生理盐水或链脲佐菌素(STZ,60 mg/kg).50只大鼠腹腔注射STZ,4周后36只大鼠成功制备成糖尿病神经痛(DNP)模型并鞘内置管,根据鞘内给药(共20μ1)随机分为3组(n=12):DNP对照组(D1组):生理盐水10 μl+生理盐水10μ；巴氯芬组(D2组):生理盐水10 μ1+巴氯芬0.5μg;CGP55845+巴氯芬组(D3组):CGP55845 10 μg+巴氯芬0.5 μg；12只同周龄正常大鼠腹腔注射生理盐水并鞘内置管作为C组,鞘内注射生理盐水10μl+生理盐水10μl.4组大鼠两次鞘内注射间隔15 min,连续4d,每天鞘内注射前、后30 min测定大鼠50％机械缩足阈值(PWT),各时点分别为:T1、T2、T3、T4,后1次测完后取大鼠脊髓背角,采用分子生物学方法测定p-CREB、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)和NR2B受体表达变化.结果 与C组比较,D1、D3两组大鼠T1-T4各时点PWT明显降低(P＜0.05),p-CREB和NR2B蛋白表达及NR2B mRNA表达明显增多(P＜0.05)；与D1组比较,D2组大鼠各时点PWT显著升高(P＜0.05)；与D1组p-CREB(0.76 ±0.13)、NR2B(1.28 ±0.14)蛋白表达、NR2B mRNA表达(0.83±0.10)比较,D2组p-CREB (0.45±0.08)和NR2B(0.88 0.13)蛋白表达及NR2B mRNA表达(0.53±0.08)显著降低(P＜0.05).4组间比较,CREB蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 激活GABAB受体可使糖尿病神经痛大鼠脊髓背角p-CREB、NR2B蛋白表达下调,抑制糖尿病神经痛.
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N-甲基-D-天冬氨酸对正常大鼠空间学习记忆的影响
目的 观察给予正常成年大鼠脑内外源性N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)对其空间学习记忆的影响及海马区NMDA受体活性的改变.方法 选取正常成年雌性Wister大鼠90只,随机分成6组,正常大鼠组(组1)、手术对照组(组2)、空白膜片组(组3)、10-5 mmol/L浓度组(组4)、10-4 mmoL/L浓度组(组5)及10-3 mmol/L浓度组(组6).第1组为正常大鼠,不予以任何处理;第2组大鼠仅行开颅手术;其余4组大鼠开颅手术后分别在大脑皮层表面置人一空白膜片或上述3种浓度的NMDA缓释膜片.手术后3周,利用Morris水迷宫测试评价各组大鼠空间学习记忆能力,并用放射标记受体测定方法测定各组大鼠海马区NMDA受体活性.结果 1～6组大鼠Morris水迷宫测试的潜伏期分别为:(38.3±25.6)、(30.9±21.9)、(28.1±21.1)、(24.4±17.1)、(25.3 ±21.8)、(24.0±15.5)s,各组潜伏期之间差异无统计学意义(P＞0.05).各组大鼠海马区的NMDA受体活性分别为:(45313.57 ± 11851.33、43 793.84±6 835.53、47 962.06±5019.62、42 699.19±5 778.45、45 521.03 ±9 924.43、51 408.68±15 041.08) fmol/(mg·prot).各组间测定结果差异无统计学意义(P＞0.05),但随着所植入的缓释膜的NMDA浓度增加,大鼠海马区NMDA受体活性有增高的趋势.结论 不同浓度缓慢释放NMDA的缓释膜片没能对正常大鼠的空间学习记忆能力产生显著影响.使用的NMDA浓度对正常大鼠相对安全,无明显毒性反应.
关键词： N-甲基-D-天冬氨酸受体 空间学习记忆 突触可塑性 -
幼鼠癫痫模型海马神经元NMDA受体表达与MMP-3表达相关性
目的 探讨幼鼠癫痫模型海马神经元N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)表达与基质金属蛋白酶-3(MMP-3)表达的相关性.方法 将60只2~4周龄SPF级C57/BL6小鼠随机分为正常组、癫痫组、MMP-3抑制剂组、NMDAR抑制剂组,每组15只.采用匹罗卡品建立幼鼠癫痫模型;采用RT-PCR检测海马神经元NMDAR2A、NMDAR2B、MMP-3 mRNA表达;采用尼氏染色观察海马区神经元形态;采用Western blot检测海马区P-糖蛋白(P-gp)、钙调蛋白激酶Ⅱ(CAMKⅡ)蛋白表达.结果 幼鼠癫痫模型海马区NMDAR2A/B、MMP-3 mRNA以及P-gp、CAMKⅡ蛋白较正常组显著增加(P<0.05).注射NMDA受体抑制剂或MMP-3抑制剂可显著降低幼鼠癫痫模型NMDAR2A/B、MMP-3 mRNA及P-gp、CAMKⅡ蛋白表达,且明显改善海马区神经元结构.结论 幼鼠癫痫模型海马神经元MMP-3表达与MNDAR表达可能具有相关性.
关键词： 癫痫模型 幼鼠 N-甲基-D-天冬氨酸受体 基质金属蛋白酶-3 基因表达 -
视神经脊髓炎合并抗N-甲基-D-天冬氨酸受体脑炎1例
目的 探讨视神经脊髓炎合并抗N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体脑炎的临床特征.方法 报道本院收治的1例视神经脊髓炎合并抗N-甲基-D-天冬氨酸受体脑炎的临床特点及诊治经过,并结合文献分析该病的特征.结果 患者为21岁女性,表现为腹泻后急性起病的下肢麻木无力、昏睡、视物模糊;MRI示双侧基底节、海马、桥臂、齿状回、延髓背侧多发异常信号,同时伴有颈髓多发条片状长T2异常信号.脑脊液NMDA受体抗体阳性,血清和脑脊液水通道蛋白4(AQP4)抗体阳性,合并心动过缓并发症,筛查未发现肿瘤;经激素冲击、丙种球蛋白及免疫抑制剂治疗后症状逐渐好转至痊愈.结论 视神经脊髓炎合并抗N-甲基-D-天冬氨酸受体脑炎可以在感染后起病,症状和影像学主要表现为两种疾病的叠加,可出现心动过缓并发症,早期积极行免疫治疗效果较好.
关键词： 自身免疫性脑炎 N-甲基-D-天冬氨酸受体 水通道蛋白4 视神经脊髓炎 心动过缓 -
水杨酸钠通过DA受体影响耳蜗螺旋神经节神经元NMDA受体与GABAa受体亚单位的表达
目的:观察水杨酸钠(SS)对大鼠耳蜗螺旋神经节神经元(SGN)的多巴胺受体(DR)亚型表达的影响,以及观察SS作用下,DR对SGN的N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体和γ-氨基丁酸(GABA)a受体亚单位的影响,探讨SS介导的受体之间的相互作用.方法:应用免疫荧光技术,检测新生SD大鼠SGN中DR两家族DR1、DR2的表达;应用RT-PCR技术,检测SS处理后的SGN中DR1和DR2亚型的mRNA变化,观察在激活和抑制DR活动时SS对SGN的NMDA受体亚单位NR1、GABAa受体亚单位GABRα2的mRNA表达的影响.结果:免疫荧光显示:在SGN的胞体与突起均有DR1、DR2的免疫荧光显示.RT-PCR结果显示:①SGN有DR亚型(DRd1～DRd5)、GABRα2、NR1的表达;②5 mmol/L SS作用SGN 30 min后,除DRd3外,其余DR亚型及GABRα2、NR1的mRNA表达量均明显升高,其中DRd1表达增加34.64％(t=-5.123,P=0.007);DRd2表达增加34.60％(t=-5.206,P=0.006);DRd4表达增加20.87％(t=-3.337,P=0.029);DRd5表达增加26.42％(t=-6.054,P=0.004);GABRα2表达增加30.41％ (t=-2.839,P=0.047);NR1表达增加39.22％(t=-6.243,P=0.003);③SS分别与多巴胺(100 μmol/L)、DR1激动剂(SKF38393,20 μmol/L)、DR2激动剂(Quinpirole,20 μ.mol/L)分别作用SGN 30 min后,GABRα2、NR1的mRNA表达量均明显升高,其中,GABRα2表达分别增加21.78％、27.45％、33.02％、33.42％ (F=12.399,P=0.001),NR1表达分别增加28.70％、26.82％、29.03％、35.05％(F=50.395,P=0.000);④SS+ DR1拮抗剂(SCH23390,20 μmol/L)、SS+ DR2拮抗剂(Eticlopride,20 μmol/L)分别作用SGN 30 min后,与单独SS作用相比,GABRα2的mRNA表达分别减少29.56％、37.10％(F=22.101,P=0.000),NR1的mRNA表达分别减少37.62％、32.83％(F=72.933,P=0.000).结论:SS可诱导SGN的大部分DR亚型的mRNA表达明显升高;SS可能通过DR影响SGN上GABAaR、NMDAR的mRNA表达.
