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贵州省一起钩吻引起的食物中毒调查
目的 查明引起本次食物中毒的原因,有针对性地采取有效措施.方法 对参加聚餐者及事故相关人员以及引起食物中毒的危险因素进行调查,采集可疑中毒物样品进行分析鉴定.结果 饮用过植物泡制药酒的男性11人全部发病,饮酒量为0.1～0.2 kg/人,潜伏期为10 ～ 20 min,饮酒量多者发病更快、病情更重.死亡5例,病死率为45.46％,未饮酒者无人发病.经鉴定,泡制药酒的原料为钩吻.结论 此次为有毒植物钩吻引起的食物中毒事故.
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HPLC法同时测定大血藤中原儿茶酸、红景天苷和绿原酸含量
目的 建立同时测定大血藤中原儿茶酸、红景天苷和绿原酸含量的HPLC法.方法 色谱柱为Waters XSELECT CSH C18(150 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-甲醇-0.2%磷酸水为流动相进行梯度洗脱,体积流量0.8 ml/min,检测波长260 nm,柱温35℃.结果 原儿茶酸、红景天苷和绿原酸分别在0.0020~0.0120、0.0600~0.3602和0.0750~4.5006 mg/ml内呈良好线性关系,平均加样回收率分别为98.01%、98.53%、101.10%,RSD分别为0.07%、0.12%、0.92%.结论 该方法操作简便、准确、重复性好,可为大血藤质量控制提供依据.
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鸡血藤、滇鸡血藤、大血藤等血藤类药材的psbA-trnH条形码分子鉴定
目的:中国药典收载的鸡血藤、大血藤、滇鸡血藤及相关物种均有“血藤”之称,其各自的来源不同,功效主治不同,不能混用.为确保其临床用药的安全、有效,本研究应用DNA条形码序列psbA-trnH对鸡血藤、大血藤、滇鸡血藤及其混伪品进行鉴定研究.方法:通过对样本进行基因组DNA提取,PCR扩增sbA-trnH序列.所得序列经拼接后,用MEGA5.0和DNAMAN进行种内种间序列分析,构建NJ树,对psbA-trnH序列在血藤类药材中的鉴定能力进行评估.结果:鸡血藤、大血藤和滇鸡血藤序列长度和GC含量各不相同,psbA-trnH种内序列相似度高,均高于它们与混伪品间的序列相似性.鸡血藤、大血藤、滇鸡血藤与其他非药典收载的血藤类药材的种间小K2P距离分别为0.137、0.426和0.003,均大于其种内大遗传距离0.014、0.004和0.在NJ树中,鸡血藤、大血藤均单独聚为一支,能明显的与其他混伪品区分开,滇鸡血藤与异形南五味子聚为一支.结论:psbA-trnH序列能准确鉴定鸡血藤、滇鸡血藤、大血藤药材及其混伪品,该条形码分子鉴定方法可作为传统鉴定方法的有效补充.
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大血藤的HPLC指纹图谱
目的:建立大血藤的HPLC指纹图谱方法,为其质量控制提供参考.方法:采用HPLC Ultimate XB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相乙腈-甲醇(1∶1)为A相,0.1％磷酸水为B相,流速0.6 mL·min-1,柱温25℃,梯度洗脱,在280 nm波长下测定大血藤、鸡血藤及五香血藤的指纹图谱,应用系统聚类分析对不同市场购买的大血藤药材进行分类.结果:建立了大血藤药材HPLC指纹图谱的分析方法,标定了22个共有峰,指认了3个峰,分别为红景天苷、原儿茶酸和大黄酸.大血藤、五香血藤和鸡血藤药材的指纹图谱相似度差异明显.11批不同市场购买的大血藤药材分为3类.结论:方法简便、准确、重复性好,可用于大血藤的鉴别研究和质量控制.
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大血藤药材的UPLC指纹图谱分析
目的:研究大血藤药材的UPLC指纹图谱.方法:采用色谱法,Agilent ZORBAX RRHD Eclipse Plus C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8 μm),洗脱系统0.05％乙酸水-甲醇梯度洗脱,检测波长280 nm,流速0.3 mL· min-1,柱温35℃.测定10批大血藤、2批鸡血藤及1批五香血藤的指纹图谱.结果:建立了大血藤药材UPLC指纹图谱分析方法,确立了19个共有峰,指认了4个峰.10批大血藤药材相似度＞0.837,大血藤与混淆品(鸡血藤和五香血藤)的指纹图谱具有明显差异.结论:建立的方法快速、准确、重复性好,为评价和控制大血藤药材的质量提供参考.
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HPLC测定大血藤药材中绿原酸的含量
目的:建立大血藤药材中绿原酸的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,Diamonsil ODS-C18色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-4％磷酸水(11∶89),流速1.0 mL· min-1,检测波长327 nm,柱温25℃.结果:绿原酸在0.000 102 ～0.010 2 mg线性关系良好.加样回收率为102.4％,RSD 1.7％ (n =6).结论:采用HPLC测定大血藤药材中绿原酸的含量,样品处理方法便捷,测定方法简单,结果准确可靠,可用于大血藤饮片、大血藤制剂的质量控制.
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多指标综合评价优选大血藤酚酸类化合物的提取工艺
目的:筛选出大血藤酚酸类化学成分的佳提取工艺.方法:首先建立HPLC测定大血藤中没食子酸、原儿茶酸、绿原酸方法,采用正交试验设计,以提取时间、甲醇体积分数、溶媒用量、提取次数为因素考察大血藤回流提取方法,以没食子酸、原儿茶酸、绿原酸为评价指标,确定佳提取条件.结果:优选工艺为用10倍量80%甲醇提取3次,每次30 min.结论:采用多指标综合评价法优化大血藤酚酸类化学成分提取工艺合理、可行.
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鸡血藤与大血藤的区别
鸡血藤和大血藤均为藤茎类中药,在砍断时都有红褐色血液状汁液流出,用药时常有混用现象,但两者实为不同药材.现将这两种药从来源、性状到功能主治作一甄别.
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大血藤对破骨细胞活性及成骨细胞增殖分化作用的研究
该研究采用1α,25-(OH)2VitD3诱导兔骨髓细胞法获得破骨细胞,以形态学观察、HE染色、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色和骨吸收陷窝甲苯胺蓝染色来鉴定破骨细胞,用TRAP+细胞计数、TRAP活力测定和骨吸收陷窝的数量及面积来检测大血藤对破骨细胞分化及骨吸收功能的影响.培养MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14)细胞,用MTT法、碱性磷酸酶活力测定检测大血藤对其增殖和分化的影响.结果表明大血藤醇提物和水煎物低、中、高剂量组(2,20,200 mg·L-1)对破骨细胞分化及骨吸收功能具有抑制作用,并具有剂量依赖性.大血藤醇提物和水煎物低、中剂量组具有促进MC3T3-E1Subclone 14细胞增殖分化的作用,说明大血藤对骨质疏松有一定的防治作用,这种作用可能是通过抑制破骨细胞活性和促进成骨细胞增殖分化来实现的.
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大血藤中1个新的木脂素类化合物
大血藤来源于木通科植物大血藤Sargentodoxa cuneata的干燥藤茎.该研究通过HPD-100大孔树脂、反复硅胶柱色谱、Sephadex LH-20和制备液相等方法,从采自安徽黄山的大血藤藤茎中分离出20个化合物；根据化合物的理化性质和波谱数据,分别鉴定为(7R,8S)-3,3’-5-三甲氧基4,9-二羟基4’,7-环氧-5',8-木脂素-7’,烯-9’-酸4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(1),1-O-香草酸-6-O-香草酰基吡喃葡萄糖苷(2),对羟基苯乙醇-6-O-香豆酰吡喃葡萄糖苷(3),枸橼苦素B(4),桂皮苷(5),(-),异落叶松脂素4’-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(6),(-)-异落叶松脂素4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(7),1-O-香草酸-6-(3”,5”-二甲氧基-没食子酰)-β-D-吡喃葡萄糖苷(8),对羟基苯乙醇-6-O-(E)-咖啡酰吡喃葡萄糖苷(9),(-)-丁香树脂醇4’-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(10),(-)-丁香树脂醇双葡萄糖苷(11),野菰苷(12),木通苯乙醇苷B(13),4,羟基-3-甲氧基苯乙酮-4-O-α-L-鼠李糖,(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(14),4-羟基-3-甲氧基苯乙酮-4-O-β-D-芹糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(15),(-),表儿茶素(16),毛柳苷(17),3,4-二羟基苯乙醇吡喃葡萄糖苷(18),绿原酸(19),原儿茶酸(20),其中化合物1为新化合物,化合物2～7首次从该植物中分离得到.
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大血藤药材和饮片中酚类和皂苷类成分的含量
建立大血藤药材中总酚、总皂苷和指标成分红景天苷、绿原酸、3,4-二羟基苯乙醇葡萄糖苷的含量测定方法,为2015版《中国药典》大血藤药材和饮片质量标准修订提供参考.以没食子酸为指标,采用分光光度法测定总酚的含量;以特征性成分3-O-[β-D-木糖基-(1-2)-O-β-D-葡萄糖醛酸基]-28-O-[β-D-葡萄糖基]积雪草酸为指标,采用分光光度法测定总皂苷含量;采用高效液相色谱法测定红景天苷、绿原酸、3,4-二羟基苯乙醇葡萄糖苷的含量.总酚在1.01 ～7.04 mg·L-1线性关系良好,平均加样回收率为99.12％;总皂苷在37.7 ～ 201 μg线性关系良好,平均加样回收率为99.11％;红景天苷、绿原酸、3,4-二羟基苯乙醇葡萄糖苷分别在0.025 8～1.55,0.076 2 ～5.44,0.0649 ～ 3.47μg线性关系良好,平均加样回收率分别为105.5％,99.08％,101.6％;大血藤中总酚和总皂苷的质量分数分别为3.04％ ～ 11.9％和0.87％ ～ 3.63％,红景天苷、绿原酸、3,4-二羟基苯乙醇葡萄糖苷的质量分数分别为0.018％ ～0.572％,0.041％ ～ 1.75％,0.035 ～ 1.32％.建立的各指标定量分析方法重复性好,适合用于大血藤药材的质量评价.建议2015年版《中国药典》大血藤药材标准项下增加总酚、红景天苷和绿原酸的含量测定方法,以干燥品计,含总酚以没食子酸(C7H8O6)计不得少于6.8％;含红景天苷(C14H20O7)不得少于0.040％,含绿原酸(C16H18O9)不得少于0.21％.
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大血藤的佳提取工艺研究
目的:建立大血藤的佳提取方法.方法:利用HPLC法,比较超声提取、回流提取、不同溶媒、不同提取时间对绿原酸提取率的影响.结果:50%甲醇,回流提取1.5h为佳条件.结论:该方法稳定、重现性好,可作为大血藤的佳提取工艺.
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痛风停胶囊配合金黄膏外敷治疗痛风35例
痛风是嘌呤代谢障碍、血尿酸增高伴组织损伤的一组疾病.急性发作时以关节急性炎症为主要临床表现,属于中医之"痹病"范畴,辨证多属风湿热痹,白虎桂枝汤为治风湿热痹之主方,我们在此基础上加入苗药青风藤、大血藤、肥猪苗等制成胶囊,运用于痛风急性关节炎期,并配合外敷金黄膏,取得了较好疗效,现总结如下.
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大血藤不同极性部位对H2O2损伤成骨细胞的保护作用研究
目的 考察大血藤不同极性部位的体外抗氧化活性及对过氧化氢诱导成骨细胞氧化损伤的保护作用.方法 以清除1,1二苯基苦基苯肼(DPPH)自由基、Fe3+还原能力(FRAP)和2,2-联氮-双-(3-乙基苯并噻唑啉磺酸-6)二铵盐(ABTS)自由基3种方法为指标,评价大血藤不同极性部位的抗氧化能力.另外,用过氧化氢作用成骨细胞(MC3T3-E1Subclone 14),建立成骨细胞氧化应激模型.通过MTT法测定模型组和药物组的细胞活力并测定超氧化物歧化酶(SOD)、细胞总抗氧化能力(T-AOC)生化指标来判断细胞抗氧化能力.结果 大血藤醇提物的各个极性部位均具有一定的抗氧化作用,其中以乙酸乙酯部位抗氧化能力强(DPPH IC500.059 g/L,FRAP 1.072 mmol/g,ABTS IC500.439 g/L),其他部位抗氧化能力依次为正丁醇部位＞水部位＞石油醚部位.用1 mM/L过氧化氢作用成骨细胞1h可造成氧化应激模型,实验证明,大血藤各极性部位低、中、高剂量组均具有一定预防氧化损伤的作用,其中乙酸乙酯部位保护作用强,并具有一定的剂量依耐性,细胞的存活率由49.36％分别上升至60.67％、64.27％、69.47％;其次分别为正丁醇部位、水部位和石油醚部位,其机理可能是大血藤各极性部位能够剂量依赖性地增强超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等酶的活性.结论 大血藤不同极性部位对氧化应激损伤成骨细胞具有保护作用,其作用可能与抗氧化相关活性成分有关.
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中药大血藤的酚性化合物
目的对中药大血藤干燥藤茎的化学成分进行研究.方法采用现代色谱技术分离化合物,运用现代波谱技术(IR,MS,1H NMR,13C NMR,2DNMR)对所得化合物的结构进行鉴定.结果从大血藤的藤茎中分得10个酚类化合物,分别鉴定为1-O-(香草酸)-6-(3",5"-二-O-甲基-没食子酰基)-β-D-葡糖苷(Ⅰ)、(-)-表儿茶素(Ⅱ)、阿魏酸-对羟基苯乙醇酯(Ⅲ)、3-O-咖啡酰奎宁酸(Ⅳ)、3-O-咖啡酰奎宁酸甲酯(Ⅴ)、罗布麻宁(Ⅵ)、香草酸(ⅦH)、原儿茶酸(Ⅷ)、3,4-二羟基-苯乙醇(Ⅸ)、4-羟基-苯乙醇(Ⅹ).结论化合物Ⅰ为新化合物,化合物Ⅲ～Ⅵ和HⅧ～Ⅹ为首次从该植物中分得.
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大血藤叶片提取物抑菌活性与次生代谢产物含量的通径分析
目的比较5个不同产地大血藤叶片提取物对5种细菌的抑菌活性,通过对抑菌活性和次生代谢产物含量进行通径分析,以确定进一步开发研究的目标化合物.方法采用纸片琼脂扩散法测定抑菌圈大小,利用分光光度法对次生代谢产物含量进行测定,采用逐步回归和通径分析的方法确定目标化合物.结果大血藤叶片提取物的抑菌活性高于其他器官.不同产地大血藤叶片提取物对5种细菌的抑菌活性与浓度之间存在明显的剂量-效应关系,即随着浓度的升高,抑菌效果明显增高.当药液为每1 mL含1 g生药,大血藤叶片提取物对5种细菌的抑菌效果为枯草芽孢杆菌＞金黄色葡萄球菌＞大肠杆菌＞苏云金芽孢杆菌＞铜绿假单胞菌.不同产地大血藤叶片的抑菌活性与次生代谢产物含量差异均较大,抑菌活性与次生代谢产物含量之间的通径分析显示,影响大血藤叶片提取物抑菌活性的主要次生代谢产物为黄酮类化合物和生物碱.聚类分析显示高抑菌活性的大血藤的适生区域为大雷山和百山祖.结论大血藤叶片具有抑菌活性,相关的次生代谢产物可能为黄酮类化合物和生物碱.
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复方清肝胶囊薄层色谱鉴别方法研究
目的 制定复方清肝胶囊的质量控制方法.方法 采用TLC法对处方中的栀子、羚羊角、大血藤进行鉴别.结果各品种的薄层色谱特征明显,专属性强.结论 该方法可以准确地进行定性鉴别,能有效的控制该制剂的质量.
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反相高效液相色谱法测定大血藤中大黄素的含量
目的建立反相高效液相色谱法测定大血藤中大黄素含量的方法.方法选用DiamonsilTMC18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:甲醇-0.1 %磷酸水溶液(80:20);检测波长:254 nm;流速:1.00 mL/min;柱温:35 ℃.结果大黄素进样量在0.0416～0.2080 μg范围内线性关系良好,r=0.9997,平均加样回收率为101.4 %,10批大血藤饮片中大黄素的含量范围为6.72～13.71 μg/g.结论该方法操作简便,快速,准确,重现性好.
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大血藤与易混药物的饮片鉴别与临床辨用
大血藤、昆明鸡血藤、鸡血藤三者均有大血藤之称,药效均有活血化瘀通络之功.三种药物名称易混,但三种药物的来源、形状特征、药物性味功效、临床应用各有特点,本文对三种药物的来源、形状特征、药物性味功效、临床应用分述如下,以便临床区分使用,保证临床用药的有效性和安全性.1.药材基源1.1大血藤:出自《简易草药》.本品来源于木通科植物大血藤Sargentodoxa cuneata (Oliv.) Rehd.et Wils.的干燥藤茎.异名:红藤.
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大血藤的化学成分研究(Ⅱ)
目的 研究大血藤Sargentodoxa cuneata的化学成分.方法 应用多种色谱技术对大血藤进行分离纯化,并通过NMR等波谱方法鉴定化合物的结构.结果 从大血藤乙醇提取物的正丁醇和醋酸乙酯部位分离得到13个化合物,分别鉴定为毛柳苷(1),(-)-表儿茶素(2)、3,4-二羟基苯乙醇(3)、原儿茶酸(4)、N-(对羟基苯乙基)阿魏酸酰胺(5)、3,4-二羟基苯乙醇葡萄糖苷(6)、野菰苷(7)、4-羟苯基-乙基-6-O-(E)-咖啡酰基-β-D-葡萄糖苷(8),绿原酸乙酯(9)、lyoniresin-4'-yl-β-glucopyranoside(10)、2-(3',4'-二羟苯基)-1,3-胡椒环-5-醛(11)、丁香酸葡萄糖苷(12)、8,8'-bis-(dihydroeoniferyl)-diferuloylate(13).结论 化合物7～13均为首次从该植物中分离得到.
