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中性粒细胞碱性磷酸酶在呼吸系统疾病中的应用价值
目的:探讨中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)在呼吸科疾病中的应用价值.方法:对呼吸科收治的369例病人按照发病原因及疾病进程分组,分别检测其NAP水平,然后与对照组NAP进行统计学对比.结果:细菌感染、化疗(使用CSF)后、手术后患者NAP明显升高；病毒感染、终末期患者NAP明显降低；良性肿瘤NAP水平无明显改变.结论:NAP活性检查对于呼吸疾病的诊断、鉴别诊断和临床治疗效果监测有着重要意义.
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细菌感染多种检查方法的对比研究
目的:比较和评价细菌感染时WBC计数、hs - CRP、ESR及NAP积分四项检查方法的临床诊断意义.方法:对临床已确诊的178例细菌感染患者进行WBC计数、hs - CRP、ESR及NAP积分测定,通过统计学方法进行比较.结果:四种检查项目均有不同程度异常.结论:WBC计数相对较廉价、快速,hs - CRP 及ESR快捷、方便但特异性较差,NAP积分具有较高的特异性,但步骤繁琐,检查时间长.
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血涂片与骨髓涂片碱性磷酸酶染色积分比较
目的 中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色常规使用血片或骨髓片.比较血片与骨髓片NAP积分差异,以指导实践.方法 42例患者.取其血片及骨髓片各1张,同时进行NAP染色.结果 血片NAP积分均数59.38稍高于骨髓片NAP积分均数49.19;两者阳性率呈正相关(rs=0.8091,P＜0.01);两者积分呈正相关(rs=0.7977,P＜0.01).结论 血片及骨髓片可相互代替或同时进行NAP染色.
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"知信行"方法的文献学研究
目的 通过文献计量学方法回顾研究"知信行(知识、态度、行为)"方法在国内的应用.方法 基于CNKI(中国知网)学术文献总库,设定关键词,采取题目、关键词结合的方式进行文献检索,并对命中文献通过重点阅读去伪除重,再依据文献的主题进行属性分析.结果 ①自20世纪90年代中期开始,与"知信行"相关的文献数量逐渐上升,2000年以来增长速度显著.②收集的2千余篇有效文献,在学科分布上显著集中于卫生、健康领域,应用方法的主题涉及疾控、营养、预防、控烟、性行为、避孕优生、药物滥用等诸多方面.③并非全部研究均完成了"知信行"方法的全部三个环节,同时,绝大多数文献并未提及所采用的特异性干预手段及其介入后所致目标人群在调查前后"知信行"改变的情况.④进行"知信行"理论探讨的文献相对较少.⑤文献采用的"知信行"中文术语以及英文缩略语缺乏统一标准.结论 ①"知信行"方法已得到我国多学科领域的认可与引进,但其在内涵与名称的规范化及其在具体运用中的方法学等还有待进一步提高.②"知信行"方法与中医学健康监测管理工作具有较好的契合性,值得借鉴应用.
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骨髓细胞学联合WBC、 NAP在全血细胞减少性疾病诊断中的意义
目的 骨髓细胞学联合WBC、NAP在全血细胞减少性疾病诊断中的作用和意义.方法 选取2015年1月至2017年6月本院收治的80例全血细胞减少症患者,分为非造血系统疾病组(n=40)和造血系统疾病组(n=40),给予全部患者行骨髓细胞形态学和外周血常规的检查,同时选取40例健康体检者行外周血常规的检查.结果 与对照组相比,非造血系统疾病组和造血系统疾病组患者血小板(PLT)、红细胞(RBC)、白细胞(WBC)和血红蛋白(Hb)水平明显下降,差异具有统计学意义(P＜0.05).与非造血系统疾病组相比,造血系统疾病组患者血小板(PLT)、红细胞(RBC)、白细胞(WBC)和血红蛋白(Hb)水平明显下降,差异具有统计学意义(P＜0.05).与对照组相比,非造血系统疾病组脾功能亢进患者和骨髓增生异常综合征患者NAP积分明显降低,多发性骨髓瘤NAP积分明显升高;造血系统疾病组再生障碍性贫血患者和急性白血病患者NAP积分明显升高,巨幼红细胞性贫血患者NAP积分明显降低,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 骨髓细胞学联合外周血常规WBC、NAP检查可作为临床诊断全血细胞减少性疾病的重要指标,具有较高的临床应用价值,值得推广应用.
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中性粒细胞碱性磷酸酶、C反应蛋白和血沉对晚期肺癌并发院内感染的诊断价值
为了探讨中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)积分和百分比、C反应蛋白(CRP)、血沉(ESR)对晚期肺癌患者并发院内感染的诊断价值,笔者自2000年1月至2008年12月对我院收治的176例晚期肺癌患者进行了上述指标测定,报道如下:
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CRP和NAP联合检测对妇科炎症的诊断意义
目的:探讨C反应蛋白(CRP)和中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)联合检测对妇科炎症的诊断意义.方法:选择2016年1月-2017年1月本院妇科收治的128例妇科炎症患者作为观察组,以同一时期收治的非炎症患者128例作为对照组,比较两组患者治疗前后血清CRP、NAP及WBC水平变化.结果:观察组患者治疗后1、3、7 d的CRP、NAP及WBC水平均低于治疗前,差异均有统计学意义(P<0.05),对照组治疗前后无显著变化;观察组治疗前及治疗后1、3、7 d的CRP、NAP及WBC水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:CRP联合NAP检测可有效鉴别诊断妇科炎症疾病,具有较高的诊断效能,可以作为筛选和诊断妇科炎症的实验室指标,值得临床推广使用.
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幽门螺杆菌的免疫反应及疫苗研究进展
Hp的自然免疫Hp可激活胃黏膜中多种天然防御体系,如同时激活Toll样受体(TLR)和Nod样受体(NLR),终会导致T辅助(Th)1细胞的强烈反应.Hp的不同菌体成分均能激活免疫细胞,其中Hp-中性粒细胞激活蛋白(NAP)是Hp激活TLR的重要因子.
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分泌表达神经保护短肽重组慢病毒对SK-N-SH细胞的保护作用
目的 构建分泌表达神经保护短肽NAP的重组慢病毒载体,观察重组慢病毒对APPsw转基因人神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH)的保护作用.方法 采用PCR方法克隆融合基因NT4-NAP cDNA;磷酸钙沉淀法包装重组慢病毒Lent/NT4-NAP;平行包装含有报告基因EGFP的报告病毒;SK-N-SH细胞分为正常对照组、单纯APPsw转基因组、空慢病毒载体+APPsw转基因组和NT4-NAP慢病毒+APPsw转基因组,在倒置相差显微镜下观察形态学改变;MTT检测细胞增殖活力;Annexin V/PI法流式细胞术检测各组细胞凋亡和坏死情况.结果 基因测序证明克隆的NT4-NAPcDNA与实验设计完全一致;FACS检测重组病毒滴度为2×106 U/L;单纯APPsw转基因组,大量细胞出现凋亡及坏死(与正常对照组比较P＜0.01);NT4-NAP慢病毒+APPsw转基因组的细胞数量和活力明显较单纯APPsw转基因细胞改善(P＜0.01);FACS检测无论凋亡还是坏死细胞的比率保护组都明显低于加害组(P＜0.01).结论 成功构建了能够分泌表达NAP的重组慢病毒载体;重组病毒能够高效转染人神经母细胞瘤细胞;重组病毒表达的蛋白能对AD细胞模型起到很好的保护作用.
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发热时检测血清PCT与外周血涂片NAP积分的临床价值比较
发热多数是由细菌、病毒感染引起,临床需要早期快速了解是何种性质发热,才能决定冶疗方案及是否应用抗生素.故发现方便快捷、 灵敏度高和特异性好的检验指标是关键.通过本文血清降钙素原(PCT)检测具有方便快捷、灵敏度高和特异性佳等优点,在发热时具有病因诊断鉴别价值及为临床应用抗生素提供理论依据,现将结果报告如下.
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中性粒细胞碱性磷酸酶检测在血液病诊断中的应用
为研究中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)活性对各血液病的诊断、鉴别诊断及疗效观察中的价值,本研究对219例血液系统疾病患者NAP活性检测结果,进行对比分析,以探讨其在血液系统疾病诊断和鉴别诊断中的应用意义.
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两种成熟中性粒细胞碱性磷酸酶染色积分比较
目的 比较中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色后,中性分叶核粒细胞及中性杆状核粒细胞NAP阳性率及积分的差异.方法 各种疾病患者36例.取每例患者骨髓片1张,进行NAP染色.中性分叶核粒细胞及中性杆状核粒细胞分别计数NAP阳性率及积分.结果 中性分叶核粒细胞NAP阳性率、积分均数分别为(69.92±20.92)%、116.11±67.49;中性杆状核粒细胞NAP阳性率、积分均数分别为(35.83±23.70)%、54.36±50.29;两种细胞NAP阳性率呈正相关(r＝0.671 0);两种细胞NAP积分呈正相关(rs＝0.767 7).结论 中性分叶核粒细胞NAP阳性率、积分约为中性杆状核粒细胞的2倍,并呈明显正相关.某些疾病引起中性粒细胞核左移或骨髓两种细胞比例改变,可能会伴随NAP积分改变.这对研究疾病NAP积分改变机制具有重要意义.
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幽门螺杆菌napA基因的克隆及生物信息学分析
[目的]获取幽门螺杆菌NCTC 11639中性粒细胞激活蛋白基因(napA),预测其编码蛋白作为幽门螺杆菌疫苗候选抗原的可行性,为Hp疫苗研制奠定基础.[方法]提取幽门螺杆菌标准株NCTC 11639的基因组DNA,参照GeneBank中幽门螺杆菌标准株22695的序列设计引物PCR扩增napA基因,克隆入pMD18-T载体中,对重组质粒测序后进行生物信息学分析.[结果]克隆的napA基因全长为435 bp,在GenBank上登录(No.DQ341279),与GenBank公布的其它Hp菌株的核酸同源性为94%～98%,与国际测序模式株Hp26695、HpJ99同源性达97%.[结论]成功扩增Hp标准株NCTC 11639 napA基因,通过同源性检索分析表明Hp与人及其它哺乳动物的基因组DNA同源序列低,在不同Hp菌株中高度保守,符合疫苗候选抗原的基本特征;抗原表位预测显示有4条高抗原性肽段,其中118-140肽段抗原指数强,可能存在良好的抗原表位,结合Hp-NAP二级结构、亲水性分析认为Hp-NAP是很有前景的幽门螺杆菌疫苗候选抗原.
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神经短肽NAP对体外培养的兔视网膜神经细胞的作用
目的 以感染神经营养因子4-神经保护短肽融合基因(NT4-NAP)的兔虹膜色素上皮细胞(IPECs)为替代分泌细胞,探讨NAP对兔视网膜神经上皮细胞生长的作用.方法 分别培养兔IPECs和视网膜神经上皮细胞;构建NT4-NAP融合基因,同时构建重组腺相关病毒载体rAAV-GFP和rAAV-NAP(含融合基因NT4-NAP),采用斑点杂交法测定病毒滴度.rAAV-GFP感染体外培养的兔IPECs,以荧光表达检测病毒的感染情况.rAAV-NAP感染兔IPECs 3d后收集含NAP蛋白的上清液,将其加入兔视网膜神经上皮细胞的培养基中,观察细胞的生长状况,同时以未加上清液的兔视网膜神经上皮细胞为对照.结果 经斑点杂交证实rAAV-GFP滴度为2.25×1011 cfu/mL,rAAV-NAP滴度为2.25×1010 cfu/mL.感染rAAV-GFP的兔IPECs表达出明显的绿色荧光.在加入含有NAP蛋白上清液的培养基中,兔视网膜神经上皮细胞生长良好,存活细胞数目多,细胞突起粗而长,培养14d时其突起长度[(14.6±1.1) μm]与对照组[(3.1±0.6) μm]相比差异有统计学意义(P＜0.05).结论 神经短肽NAP对体外培养的兔视网膜神经上皮细胞有促进生长的作用.
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幽门螺杆菌napA基因的克隆、表达及免疫反应性分析
目的:构建高效表达幽门螺杆菌(Hp)中性粒细胞激活蛋白(NAP)的原核表达系统,为Hp候选疫苗研制打下基础.方法:从Hp标准株NCTC11639 染色体DNA中扩增napA基因片段,T-A克隆后测序,与GenBank公布的其他Hp菌株的napA基因序列进行比较.目的基因片段酶切后,与表达载体连接,转化至宿主菌,构建napA基因原核表达系统pGEX-4T-1-napA-E.coli Top10.优化诱导表达条件,采用SDS-PAGE鉴定表达产物,GST亲和层析纯化收集重组NAP蛋白,Western blot法鉴定重组NAP的免疫性;采用ELASA法检测胃癌患者Hp阳性血清中抗NAP抗体效价,通过间接ELASA法从29株小鼠抗Hp全菌单克隆抗体(mAb)中筛选抗Hp-NAP mAb.结果:所克隆的napA基因全长为435 bp,在GenBank上登录(No.DQ341279),与GenBank公布的其他Hp菌株的核苷酸同源性为94%～98%,与国际测序模式株Hp26695、HpJ99同源性达97%,表达的NAP融合蛋白的相对分子质量(Mr)为44 000,1 mmol/L浓度IPTG诱导4 h表达产物量较高,表达产物可被Hp感染患者的血清及兔抗Hp全菌抗体特异性结合,胃癌患者血清中抗NAP抗体效价高于正常人群血清,29株小鼠抗Hp全菌mAb中有3株mAb能与NAP发生强免疫反应.结论:成功构建napA基因高效可溶性原核表达系统,重组NAP具有良好的免疫反应性,NAP在胃癌患者血清中高表达可能与胃癌的发病有关,NAP 是具有良好前景的抗原.
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神经短肽NAP在缺氧环境中对体外小鼠Müller细胞的保护作用
目的:观察神经短肽NAP对小鼠Mtiller细胞在缺氧环境中的保护作用.方法:用重组腺相关病毒作为载体,将含NT4-NAP融合基因的rAAV-NAP和含报告基因的rAAV-GFP对体外培养的小鼠Müller细胞进行感染,用MTT法和流式细胞仪检测感染细胞和未感染细胞在缺氧24h时的增殖活性和凋亡率.结果:感染rAAV-GFP的小鼠Müller细胞表达出明显的绿色荧光,缺氧24h时,感染rAAV-NAP的细胞与未感染细胞相比,增殖活性高(A=0.109,P<0.05).两组细胞凋亡率分别为8.13%和18.72%,感染有NAP细胞的凋亡率显著低于正常细胞(P<0.05).结论:神经短肽NAP可以减轻缺氧对Müller的损害.
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WBC、DC、NAP、骨髓细胞学联合检测在儿童发热中的应用
目的:探讨WBC、DC、NAP和骨髓细胞学联合检测在儿童发热中的应用.方法:对50例发热患儿WBC、DC、NAP和骨髓细胞学资料进行综合分析.结果:患儿WBC计数升高38例,正常6例,减低6例;DC表现为正常6例,异常44例;NAP的阳性率、积分均增高36例,正常或减低14例;骨髓细胞学表现为异常47例;大致正常3例.结论:WBC、DC、NAP和骨髓细胞学联合检测对儿童发热诊断具有重要应用价值.
