首页 > 文献资料
-
Müller细胞反应性胶质化在急性高眼压致大鼠视网膜损伤中作用
目的 观察Müller细胞反应性胶质化在急性高眼压(AOH)大鼠视网膜中变化及其抑制对视网膜损伤的影响.方法 建立大鼠AOH青光眼模型,分为正常对照(Ctrl)、AOH和AOH+玻璃体内注射胶质毒素α-氨基己二酸(AAA)后再灌注1、3和5d组,以及单纯AAA和AOH+ PBS对照组.TUNEL染色检测细胞凋亡,GFAP免疫荧光染色反应Müller细胞反应性胶质化程度,Thy-1染色标记视网膜神经节细胞(RGCs).结果 AOH可致大鼠视网膜内丛状层和内核层明显变薄、神经节细胞层内细胞排列紊乱和数量减少,并诱发Müller细胞反应性胶质化(GFAP表达增加).同时,AAA抑制Müller细胞反应性胶质化可明显缓解AOH所致RGCs丢失和凋亡发生.结论 Müller细胞反应性胶质化参与AOH所致视网膜损伤,抑制其反应性胶质化可能是改善高眼压性青光眼视网膜病变的一种有效治疗方法.
-
水通道蛋白-4表达变化与急性高眼压视网膜损伤的相关性研究
目的 观察不同高眼压作用下,水通道蛋白-4(AQP4)及其mRNA在大鼠视网膜内的表达变化.以探讨AQP4与眼压异常性疾病的关系.方法 采用前房加压灌注法.分别制作75cm、125cm和150cm水柱不同压力急性高眼压大鼠模型;通过HE和尼氏染色了解视网膜病理改变和神经节细胞数目变化;应用免疫组织化学、免疫荧光双标、原位杂交以及RT-PCR等技术检测不同高眼压作用下,AQP4及其mRNA在视网膜内的表达变化.结果 与对照组相比,各实验组大鼠视网膜晕不同程度水肿样改变,其内层厚度增加,神经节细胞数目明显减少;AQP4及其mRNA在视网膜内的表达明显增强,其表达上调水平与眼压升高程度呈正相关,并与视网膜内层厚度增加以及节细胞数目减少相关(P<0.01).结论 急性高眼压作用下,大鼠视网膜内AQP4及其mRNA的表达明显增强,呈压力依赖性,其异常高表达可能与急性高眼压的病理损伤过程以及眼内水、电解质代谢失衡有关.
-
斑马鱼视网膜再生研究进展
哺乳动物视网膜损伤后仅有非常有限的自我修复能力.与哺乳动物不同,硬骨鱼类如斑马鱼的视网膜则具有旺盛的再生能力.斑马鱼视网膜损伤后,能够再生其丢失的所有类型的神经元和胶质细胞,并恢复大部分视力.研究表明,斑马鱼视网膜再生的细胞来源是Müller细胞.近年来,关于斑马鱼视网膜Müller细胞去分化及其增殖的分子机制和信号通路的研究取得了许多新的进展.我们就斑马鱼视网膜再生的研究历史、损伤模型和再生细胞来源以及调控的分子机制等做一综述.
-
糖尿病大鼠视网膜Müller细胞的超微结构变化
目的 研究糖尿病大鼠视网膜Müller细胞超微结构变化特点及其在糖尿病视网膜病变的作用.方法 应用透射电镜技术系统观察糖尿病大鼠4w、8w、12w和24w视网膜病理改变,特别是视网膜Müller细胞形态变化特点.结果 视网膜Müller细胞从4w开始出现少量线粒体肿胀,嵴溶解,并随糖尿病的病程逐渐加重,线粒体肿胀、嵴断裂、空泡状明显.各时段均未发现典型的毛细血管闭锁、管腔狭窄等改变,血管内皮细胞、周细胞基本正常.结论 糖尿病视网膜Müller细胞的超微结构改变要早于视网膜血管内皮细胞及周细胞超微结构的改变,在神经节细胞层及神经纤维层改变明显,并随糖尿病时间的延长Müller细胞形态结构改变更加明显.
-
糖尿病视网膜Muller细胞的研究进展
Muller细胞是脊椎动物视网膜内主要的神经胶质细胞.它贯穿整个视网膜,与视网膜神经细胞及视网膜血管发生多种功能的交互作用.糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)的发病机制至今尚未明,近年来的临床和基础研究发现DR患者和动物模型中Muller细胞超微结构和生理功能发生了变化,这种变化早于视网膜血管损伤.本文就近几年有关糖尿病视网膜Muller细胞形态结构及生理变化的研究进展作一综述.
-
缺氧对视网膜Müller细胞水通道蛋白4表达的影响
目的 观察体外培养兔视网膜Müller细胞在缺氧条件下水通道蛋白4(AQP4)表达的变化.方法 本实验以体外培养的兔视网膜Müller细胞为研究对象,选定不同缺氧时间体外培养Müller,并采用AO/EB染色检测Müller细胞的凋亡情况,根据细胞凋亡情况选定适缺氧时间进行检测,利用免疫细胞化学染色、流式细胞术及RT-PCR的方法 对实验组细胞AQP4的表达进行定性及定量测定.结果 Müller细胞缺氧24 h为缺氧大耐受时间.缺氧组Müller细胞AQP4表达明显低于正常对照组;流式细胞仪检测中波峰位置明显提前,AQP4表达减少;RT-PCR半定量分析显示:AQP4 mRNA的表达比对照组明显降低(P<0.01).结论 缺氧使体外培养兔视网膜Müller细胞AQP4表达下调,缺氧可能影响细胞代谢变化,引起K+外流.
-
促红细胞生成素对大鼠视网膜 Müller细胞低氧损伤的保护作用
目的：探讨促红细胞生成素对大鼠视网膜Müller细胞低氧损伤的保护作用。方法传代培养大鼠视网膜Müller细胞，分为N组（正常对照）、C50、C100、C150、C200、C300组（氯化钴浓度50，100，150，200，300μmol/L），MTT检测不同浓度氯化钴对Müller细胞活力的影响，确定制作低氧损伤的氯化钴浓度。然后再分组为N组（正常对照），C组（200μmol/L氯化钴），E1C组（1×104 IU/L rhEPO＋200μmol/L氯化钴），E2C组（2×104 IU/L rhEPO＋200μmol/L氯化钴），E4C组（4×104 IU/LrhEPO＋200μmol/L氯化钴），MTT比色法比较五组视网膜Müller细胞活力的改变。Western blot检测各组细胞谷氨酰胺合成酶蛋白表达的情况。结果氯化钴浓度低于200μmol/L时，细胞活力不受氯化钴浓度的影响。从200μmol/L开始，细胞活力随氯化钴浓度增高而下降。E1C、E2C、E4C组细胞活力均高于C组，E4C组高于E2C组和E1C组，C组低于N组。Western blot检测谷氨酰胺合成酶表达结果显示，C组低于N组，EPO干预各组蛋白表达均高于C组，并随EPO浓度增高表达增高，但均低于N组。结论 EPO对视网膜Müller细胞低氧损伤有保护作用。
-
高糖高胰岛素对兔视网膜Müller细胞血管内皮生长因子表达的影响
目的利用体外培养的兔视网膜Müller细胞,观察其在高糖、高胰岛素条件下血管内皮生长因子(VEGF)表达的变化. 方法采用免疫细胞化学法、原位杂交法和酶联免疫吸附法(ELISA)进行定性定量测定高糖、高胰岛素条件下体外培养的Müller细胞VEGF的表达. 结果高糖、高胰岛素能刺激Müller细胞VEGF的表达,并且是通过转录水平调节的,高糖对Müller细胞分泌的VEGF的调节呈时间和剂量依赖性. 结论高糖和高胰岛素都可以通过刺激Müller细胞编码VEGF基因转录,增强VEGF蛋白表达,而在糖尿病视网膜病变(DR)的新生血管形成中发挥重要作用.
-
小鼠视网膜Müller细胞在深层血管发育中的作用
目的:研究小鼠视网膜Müller细胞在深层血管发育中的作用.方法:实验用P0至P21的C57BL/6J小鼠,在视网膜切片上进行GS及GFAP免疫组织化学染色,研究Müller细胞的发育;在视网膜铺片进行ADP酶染色及GS与CD31免疫荧光双标激光共聚焦显微镜观察,研究视网膜血管发育及与M üller细胞的关系.选取P7小鼠建立高氧诱导的视网膜病变模型(OIR),分别在P9、P12、P14、P17、P21取眼球,在眼球切片上进行GFAP免疫组织化学染色;在视网膜铺片上进行ADP酶染色.在P14、P17、P21取OIR模型小鼠的视网膜,用Western-blot方法研究VEGF的表达变化.体外培养Müller细胞,用Western-blot方法研究低氧条件下VEGF的表达变化.结果:Müller细胞在P0时少量发育,P6～P8分化达到高峰,P10分化近晚期.视网膜血管生后发育,P8开始向深层出芽发育,P21基本成熟.在P8及P12视网膜,众多Müller细胞胞体紧紧包绕深层血管.OIR小鼠视网膜从P14开始出现新生血管,在P17～P21达到高峰;在P14～P21其VEGF表达呈上升趋势;Müller细胞从P14起内侧突起开始表达GFAP,到P21已遍布细胞全层.体外培养的Müller细胞在低氧情况下VEGF表达增加.结论:Müller细胞通过分泌VEGF促进视网膜深层血管的发育并对深层血管起到重要的结构支持作用.
-
胰岛素对视网膜Müller细胞生长活力的影响
目的:研究不同浓度胰岛素对视网膜Müller细胞生长活力的影响,探讨Müller细胞在视网膜神经损伤中的作用.方法:取兔视网膜Müller细胞进行培养及鉴定.取第3代细胞.应用MTT测定方法,测定1U/ml、4U/ml、8U/ml、12U/ml胰岛素分别在6小时、12小时、24小时对视网膜Müller细胞增殖的影响.结果:在胰岛素作用6h、12h时,均为4U/ml浓度组MTT值高,与对照组的差异显著(F值5.60、7.31,均P<0.001).结论:不同浓度胰岛素在一定浓度范围、一定作用时间内,对视网膜Müller细胞的生长有显著的促进作用.
-
Müller细胞干细胞特性的研究进展
视网膜退行性病变缺少有效的防治方法.研究显示,Müller细胞可表达视网膜神经元细胞标记物如钙视网膜蛋白、视黄醛结合蛋白等.人Müller细胞不但可表达神经干细胞相关转录因子如SOX2、PAX6、CHX10、NOTCH1,还表达视网膜神经元标记物如双极细胞标记物蛋白激酶C,光感受器神经元标记物(盘膜边缘蛋白),神经节细胞标记物HuD与Brn3,大部分神经元标记物神经丝蛋白、βⅢ微管蛋白,神经节细胞、无长突细胞和水平细胞阳性标记物(钙视网膜蛋白).因此表明,视网膜Müller细胞可分化成不同视网膜神经元细胞,具有干细胞特性,利用Müller细胞进行细胞移植可能是治疗视网膜退行性病变具有潜力的新策略.
-
糖尿病对视网膜Müller细胞功能的影响
视网膜Müller细胞在结构上与视网膜神经元、血管关系密切,其主要功能是调节细胞外间质中的离子浓度、参与谷氨酸代谢、调节视网膜内酸碱平衡、支持视网膜内各种细胞代谢等.在糖尿病视网膜病变中,视网膜Müller细胞功能的损害可引起K+离子通道功能的损害,影响视网膜的血管功能;谷氨酸载体活性的损害和谷氨酰胺合成酶的功能降低,可影响神经元细胞的活性和功能;改变GFAP和occludin的表达与分布,使血-视网膜屏障受到损害;向成纤维细胞转化产生收缩力,参与增生性糖尿病视网膜病变的发生与发展;碳酸酐酶功能受到影响,引起视网膜内酸碱平衡失调.
-
糖尿病视网膜Müller细胞GLAST功能变化的研究进展
糖尿病引起的视网膜神经功能异常可能先于血管损伤,引起这一改变的主要原因是视网膜细胞外谷氨酸的大量蓄积,持久激活谷氨酸受体以及损伤视网膜神经元.细胞外谷氨酸的蓄积可能与视网膜Müller细胞L-谷氨酸/L-天冬氨酸转运体(GLAST)功能下降有关,致使细胞外的谷氨酸不能及时转运到Müller细胞内.本文就Müller细胞GLAST的作用机制及在糖尿病状态下功能的变化进行综述.
-
丛生蛋白(Clusterin)与眼病的关系
丛生蛋白(clusterin)作为一种多功能分泌糖蛋白,存在于人体的不同组织中,有多种生理功能.Clusterin在眼组织及细胞中的重要作用,表现在可保护视网膜血管内皮细胞和视网膜色素上皮细胞,减少细胞凋亡,而且能增加闭锁小带合成,促进角膜上皮细胞增生和诱导星形胶质细胞、神经元细胞分化,因此一定浓度的clusterin是维持视网膜及角结膜上皮细胞稳定所需要的.鉴于clus-terin在维持血-视网膜屏障和眼表组织结构稳定中的作用,clusterin被认为是糖尿病视网膜病变、年龄相关性黄斑变性等眼底疾病的潜在药物治疗靶点,同时也为治疗假性剥脱性青光眼、Stevens综合征等多种眼前节疾病提供了新思路和新方法.
-
视网膜Müller细胞的研究现状
Müiler细胞是脊椎动物视网膜重要的胶质细胞,了解其在健康视网膜的生理及功能和在病变视网膜的病理变化,可更好地理解在病变视网膜Müller细胞的胶质反应,探索有效的治疗措施.成年哺乳动物视网膜Müller细胞具有神经干细胞特性,在特定的条件下可能被激活,井受:Notch等一些信号通路的调控.视网膜Müller细胞在维持视网膜正常结构和功能中起重要作用,在病变视网膜中Müller细胞主要表现胶质增多反应,对神经元的功能既有保护又有损害,而Müller细胞的干细胞特性为视网膜神经元再生和对视网膜病变的治疗引出了新方向.
-
Müller细胞在增生性视网膜病变中的作用
视网膜Müler细胞是脊椎动物视网膜主要的神经胶质细胞,参与维持视网膜细胞外环境的稳态.Müller细胞通过增生、迁移、收缩以及显型改变来应答视网膜内环境的改变或视网膜损伤,是参与增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)和增生性糖尿病视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy,PDR)的主要细胞之一.本文就Müller细胞的生理功能以及在PVR和PDR发生发展中的作用作一综述.
-
Müller细胞在糖尿病视网膜病变发病机制中的作用
视网膜Müller细胞作为人类视网膜中重要的神经胶质细胞,具有营养、保护神经元,调节视网膜钾离子、钙离子和水分子的内稳态,参与构成血视网膜屏障等重要生理作用,并且与多种视网膜疾病关系紧密,尤其在糖尿病视网膜病变的发生发展中发挥重要作用.在血管病变发生之前,Müller细胞即可通过分泌多种细胞因子、参与内质网应激、氧化应激反应等,对视网膜神经细胞产生保护及毒性两种作用,并参与视网膜血管渗漏的形成等.
-
糖尿病大鼠视网膜神经细胞损伤机制的研究
目的 观察糖尿病大鼠视网膜Müller细胞谷氨酸转运体(GLAST)、谷氨酰胺合成酶(GS)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的变化、视网膜神经细胞凋亡的检测以及神经营养因子NT-3的表达,探讨糖尿病(DM)对视网膜神经细胞损伤的机制.设计 实验研究.研究对象Sprague-Dawley(SD)大鼠82只.方法 大鼠随机分为正常对照组12只,糖尿病模型组70只.链脲佐菌素诱导实验性DM大鼠模型.RT-PCR法检测视网膜GFAP mRNA表达水平；TUNEL法检测视网膜神经节细胞(RGC)及内核层细胞的凋亡并计数凋亡细胞数量；免疫组织化学技术LSAB法检测GFAP、GLAST、GS、NT-3在视网膜的表达,观察DM大鼠视网膜RGC及内核层细胞功能的改变,用图像分析仪测量免疫组化的显色强度.主要指标 GFAP、GLAST、GS和NT-3的表达量,视网膜内核层和RGC细胞凋亡数.结果(1)与正常组(1.00±0.02)相比,模型组GFAP阳性表达量(5.22±1.34)明显增加(P=0.000),GLAST、GS、NT-3阳性表达明显降低.(2)大鼠视网膜凋亡阳性细胞仅见于RGC层和内核层,模型组视网膜内核层细胞及RGC凋亡数量(36.00±6.02,11.48±2.08)比正常组(16.33±2.34,5.34±0.52)显著增加(P均=0.000).(3)DM大鼠视网膜GFAP mRNA表达(7.00±0.37)比正常组(0.29±0.08)明显增加(P=0.000).(4)GFAP阳性表达与内核层细胞及RGC凋亡数呈正相关(r=0.88、0.85,P=0.021、0.028)；GLAST阳性表达与内核层细胞及RGC凋亡数呈负相关(r=-0.91、-0.89,P=0.014、0.020),GS阳性表达与内核层细胞及RGC凋亡数呈负相关(r=-0.93、-0.90,P=0.007、0.009)；NT-3阳性表达与内核层细胞及RGC凋亡数呈负相关(r=-0.74、-0.71,P=0.036、0.041).结论 糖尿病大鼠视网膜神经细胞凋亡增加与Müller细胞的过度反应性增生及神经营养因子的缺失有关,高浓度谷氨酸的兴奋性毒性作用以及神经营养因子NT-3的缺失是其视网膜神经细胞损伤的重要机制.(眼科,2011,20:372-377)
-
喷他佐辛对高糖环境下体外培养视网膜Müller细胞的保护作用
目的 探索喷他佐辛对高糖环境下体外培养大鼠视网膜Müller细胞的保护作用及其作用机制.设计 实验研究.研究对象 体外培养的SD大鼠视网膜Müller细胞.方法 体外培养的SD大鼠视网膜Müller细胞分三组:正常对照组(葡萄糖5mmol/L),高糖组(葡萄糖30 mmol/L),高糖+喷他佐辛组(葡萄糖30 mmol/L+喷他佐辛3 umol/L),分别在培养6、12、24、72小时以MTT法检测细胞活性;RT-PCR法检测Müller细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和转录激活因子4(activating transcription factor 4,ATF4)mRNA的表达;蛋白印迹法检测VEGF和ATF4蛋白的表达.主要指标 细胞活性,VEGF和ATF4 mRNA和蛋白的表达.结果 高糖作用72小时,高糖组与对照组相比细胞活性下降(23.3±0.1)％(P＜0.05),喷他佐辛处理后可抑制由于高糖作用造成的Müller细胞活性降低,且与对照组无统计学差异.与对照组相比,高糖组VEGF、ATF4mRNA和蛋白表达量均显著增加(P＜0.05),喷他佐辛处理后可降低VEGF、ATF4mRNA和蛋白的表达与对照组无显著性差异(P＞0.05).结论 喷他佐辛可提高高糖作用下体外培养视网膜Müller细胞的活性,减少高糖作用下视网膜Müller细胞VEGF、ATF4 mRNA和蛋白的表达,具有神经保护作用.
-
胶质纤维酸性蛋白在视神经横断后大鼠视网膜神经胶质细胞中的表达
目的 探讨胶质纤维酸性蛋白(GFAP)在视神经横断后大鼠视网膜神经胶质细胞中的表达情况及可能的意义.方法 制作大鼠视神绛横断模型,分别于术后1、3、7d取材,制作视网膜矢状位冰冻切片,用谷氨酰胺合成酶(GS)标记视网膜Müller细胞,行GS/GFAP免疫荧光双标.提取视网膜总RNA行GFAP Real-Time PCR半定量分析.结果 正常大鼠视网膜中GFAP阳性染色仅位于视网膜内层的星形胶质细胞上.术后1d,在Müller细胞上出现GFAP的诱导表达,术后3d,GFAP在Müller细胞上的表达进一步增强.术后1周,GFAP在Müller细胞上的表达保持在较高水平,Real-Time PCR半定量分析与以上结果吻合.结论 视神经横断后GFAP在Müller细胞上的诱导表达是Müller细胞对视网膜损伤产生的一种胶质化反应,GFAP的表达量与病程进展相一致.GFAP在Müller细胞上的诱导表达尤其在足板处的强烈表达可能对视网膜神经节细胞具有保护作用.
