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乙肝扶正片的质量标准研究
目的:建立乙肝扶正片的质量标准.方法:采用TLC法对乙肝扶正片中何首乌、虎杖、麻黄药材进行定性鉴别,采用HPLC法对丹参主要成分进行定量分析.结果:在薄层色谱中可检出何首乌、虎杖、麻黄等药味的相应斑点,丹参酮IIA 在20～100 μg/mL浓度范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.999 98);平均加样回收率为98.90%,RSD为1.00%(n=5).丹酚酸B在30～150μg/mL浓度范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.999 87),平均加样回收率为98.94%,RSD为0.904%(n=5).结论:所建标准可用于乙肝扶正片的质量控制.
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高血压病血瘀证患者血清对血管内皮细胞分泌vWF、TM、EPCR的影响及丹参酮ⅡA的干预作用
目的:探讨高血压病血瘀证患者血清对血管内皮细胞分泌vWF、TM、EPCR的影响及丹参酮IIA的干预作用.方法:将培养的人脐静脉内皮细胞株CRL-1730按照不同的作用血清,分为血瘀组、非血瘀组、健康组及对照组,作用时间为24 h;药物的作用分组分为血瘀组及丹参酮IIA40、20、10、5 μg/mL组,药物组为血瘀证患者血清和药物同时加入细胞内培养,作用时间为24 h,采用ELISA法测定细胞培养上清液的vWF、TM、EPCR.结果:血瘀组、非血瘀组、健康组分泌的vWF、TM、EPCR与对照组比较,分泌量较大;血瘀组、非血瘀组分泌的vWF、TM、EPCR与健康组比较,分泌量较大,其中,血瘀组与健康组比较,差异显著(P＜0.05或P＜0.01);丹参酮IIA的某些浓度可以减少血瘀组细胞分泌的vWF、TM、EPCR,其分泌量与血瘀组比较,差异显著(P＜0.05或P＜0.01).结论:高血压病血瘀证患者血清可以促进CRL-1730分泌vWF、TM、EPCR,丹参酮IIA的某些浓度可以减少血瘀证患者血清作用后细胞分泌的vWF、TM、EPCR.
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丹参酮IIA对33例脑梗死患者血清同型半胱氨酸的影响及疗效
目的：探讨血清同型半胱氨酸（homocysteine, HCY）与脑梗死的关系，观察丹参酮IIA对HCY的影响。方法：将66例经CT或MRI证实为脑梗死的患者随机分为叶酸、维生素B12组或丹参酮IIA组，治疗2周内观察HCY水平变化，另用33例健康者作为对照组。结果：脑梗死患者的HCY水平高于健康对照组，两组比较差异有显著性（P<0.05），无论是脑梗死组还是健康对照组HCY水平与叶酸、维生素B12均呈负相关性；叶酸、维生素B12及丹参酮IIA治疗后受试者HCY水平均下降，统计学比较差异有显著性（P<0.05）。结论：脑梗死与血清HCY水平有一定关系，丹参酮IIA可降低血清HCY水平，有利于脑梗死患者康复。
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丹参酮ⅡA抑制乳腺癌转移相关基因GEP100表达的实验研究
目的:考察丹参酮ⅡA 对乳腺癌细胞转移相关基因GEP100 的影响.方法:利用RT-PCR 检测经不同浓度的丹参酮ⅡA 处理72h 后人乳腺癌细胞(MDA-MB-231)GEP100 的表达丰度.结果:一定浓度的丹参酮ⅡA 能够影响GEP100 的表达,浓度达到1.0μg/mL 时丹参酮ⅡA 可使该基因的表达显著下调.结论:丹参酮可能具有一定的抑制肿瘤转移的活性.
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丹参酮IIA对成年大鼠睾丸扭转的保护作用和机制研究
目的:观察丹参酮IIA对成年大鼠睾丸扭转复位睾丸损伤的保护作用并初步探讨其机制.方法:对建立左侧睾丸扭转复位动物模型,将36只7周龄健康SD雄性大鼠随机分为3组:假手术组、生理盐水组、丹参酮IIA组,每组12只;分别于术后72小时、4周两批处死大鼠,每批每组6只,取左侧睾丸,行HE染色及组织损伤评分,Tunel染色,以及睾丸组织内Bcl-2蛋白检测(免疫印迹法),检测总活性氧(ROS),超氧化物歧化酶(SOD)、与丙二醛(MDA)含量,并测定大鼠血清睾酮水平.结果:与生理盐水组比较,丹参酮II给药组在术后72小时睾丸组织损伤明显减轻,细胞凋亡减少,Bcl-2表达升高;在术后4周发现给药组SOD、大鼠血清睾酮水平明显上升,而组织内ROS和MDA水平含量下降,差异均具有显著性(P<0.05).结论:单次腹腔内注射丹参酮IIA对成年大鼠单侧睾丸扭转损伤具有保护作用,其机制在早期可能是通过抗凋亡作用,而在远期则可能发挥了抗氧化作用.
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丹参酮IIA对腹膜透析液诱导的大鼠腹膜组织学变化及CTGF表达的影响
目的 了解丹参酮IIA对腹腔注射4.25%腹膜透析液(PDS)大鼠腹膜组织学变化以及结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响.方法 50只SD雄性大鼠随机分为5组:对照组,每日腹腔注射生理盐水20mL;PDS组,每日腹腔注射4.25% PDS 20mL;丹参酮低、中、高浓度组,每日分别腹腔注射含丹参酮IIA浓度为50mg/L、100mg/L、200mg/L的4.25%PDS20mL.于实验第30天,取壁层腹膜行光镜检查,并用免疫组织化学的方法 检测壁层腹膜CTGF的表达情况.结果 HE、Masson染色显示,在PDS干预下,腹膜显著增厚,胶原沉积显著增多(P<0.01).与PDS组比较,丹参酮组腹膜明显变薄,胶原沉积明显减少(P<0.01).在PDS干预下腹膜CTGF表达较对照组显著增加(P<0.01),丹参酮组CTGF表达与PDS组比较有显著下降(P<0.01).结论 丹参酮II A具有抑制葡萄糖PDS导致的实验大鼠腹膜纤维化及CTGF表达增加的作用.
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丹参酮IIA对凝血酶诱导的人脐静脉内皮细胞组织因子表达的影响
目的：分析丹参的主要活性成分丹参酮IIA对凝血酶诱导人脐静脉内皮细胞（HUVECs）组织因子（TF）表达的影响。方法将分离的HUVECs随机等分为空白对照组、凝血酶处理组及不同浓度丹参酮IIA处理组。其中凝血酶处理组加入凝血酶（终浓度5U/ml），不同浓度丹参酮IIA处理组加入凝血酶（终浓度5U/ml）和不同浓度的丹参酮IIA（终浓度分别为0.25μg/ml、0.5μg/ml、0.75μg/ml和1.0μg/ml），空白对照组则加入等量的无血清培养基。各组HUVECs均在37℃培养6h后收集细胞。结果各组HUVECs孵育6h后，凝血酶处理组HUVECs中TF mRNA的转录明显强于空白对照组（P<0.001），不同浓度的丹参酮IIA可不同程度抑制TF mRNA的转录，与凝血酶处理组比较差异均有统计学意义（P<0.001），且呈剂量依赖关系。HUVECs与凝血酶孵育后，所表达的TF促凝活性（TF：C）和抗原含量（TF：Ag）均明显增加，明显高于空白对照组（P<0.001）。不同浓度的丹参酮IIA均可不同程度地抑制凝血酶所诱导的TF：C和TF：Ag表达（P<0.001），且呈剂量依赖关系。结论丹参酮IIA可抑制凝血酶诱导的人脐静脉内皮细胞TF基因的转录和表达，这可能是丹参酮IIA发挥抗血栓形成作用的重要机制。
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丹参酮IIA对慢性肾功能衰竭大鼠认知障碍的神经保护作用及其机制
目的:研究丹参酮IIA(Tan IIA)对慢性肾功能衰竭(CRF)大鼠认知障碍的神经保护作用及潜在机制.方法:雄性SD大鼠60只,采用随机数字表法分为5组,每组12只,分别为:对照组、模型组、内质网应激(ERS)激动剂衣霉素(TM)组、TM+Tan?IIA组和Tan?IIA组.采用5/6肾切除法模拟CRF模型,造模第4周开始至第12周,TM组和TM+Tan?IIA组腹腔注射TM,剂量为4.5 mg/kg,2次/周;TM+Tan?IIA组和Tan?IIA组腹腔注射Tan?IIA 15 mg/kg,1次/d,对照组注射等量0.9%氯化钠溶液.造模完成后采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,HE染色观察海马神经元形态学,Tunel法检测海马神经元细胞凋亡指数,采用试剂盒检测血清和海马组织中的MDA含量和SOD活力,Western blot检测GRP78、CHOP、Caspase-12蛋白的表达.结果:模型组大鼠在Morris水迷宫中表现出的学习记忆能力较对照组明显下降,使用TM干预后下降更为明显,造模12周以后模型组大鼠GRP78、CHOP、Caspase-12蛋白表达水平和凋亡细胞百分比增加,MDA含量增加,SOD水平降低,神经元细胞结构遭到破坏,使用TM干预后ERS相关凋亡水平、氧化应激水平进一步升高,细胞结构破坏较模型组更明显,而Tan?IIA干预后ERS相关凋亡蛋白GRP78、CHOP、Caspase-12表达显著下降,抗氧化应激能力显著提高,细胞结构得到明显改善,大鼠在Morris水迷宫中的学习记忆能力得到明显改善.结论:过度ERS诱导的凋亡可能参与了CRF大鼠认知障碍,Tan?IIA可能通过抑制ERS相关凋亡、抗氧化应激来发挥神经保护、改善认知作用.
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丹参多种活性成分调节血管新生机制的研究概述
[目的]探讨丹参多种活性成分对血管新生的调节机制，为丹参防治肿瘤、动脉粥样硬化、缺血性心脏病等血管新生异常引起的相关疾病奠定基础。[方法]从血管新生的相关机制出发，查阅近10年国内外文献，分析总结多种丹参活性成分对内皮细胞、离体肿瘤细胞以及体内移植瘤的血管新生的调节机制。[结果]丹参的众多活性成分中，丹参酮IIA、丹酚酸B、隐丹参酮、二氢丹参酮I能促进或抑制血管新生。但调节血管新生的机制研究主要集中在丹参酮IIA、丹酚酸B，表现在调节VEGF、bFGF等促血管新生因子、MMPs、HIF-α、PI3K/AKT/eNOS通路等几方面。并且，丹酚酸B和丹参酮IIA对血管新生的调节具有双向性。[结论]丹参的多种活性成分，可作为一种血管新生调节剂，为防治血管新生异常引起的相关疾病提供新的思路。
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丹参酮IIA与丹酚酸B在丹参药材中的分布研究
目的对丹参酮IIA与丹酚酸B在丹参药材中的分布规律进行研究,为丹参药材的GAP栽培与采收加工提供科学依据.方法在丹参药材的采收季节,分别在不同的主产地采集药材样品,按实验需要分成不同部分,晒干后,以HPLC法测定药材中活性成分丹参酮IIA和丹酚酸B的含量.结果研究表明,丹参酮IIA在皮层含量高,木质部含量甚微,根的下端含量高于上端,须根的含量高;丹酚酸B在皮层的含量高于木质部,根下端含量高于上端,同样以须根的含量高.结论脂溶性的丹参酮IIA与水溶性的丹酚酸B的在丹参根中的分布有一定的规律;这两个成分在丹参根中的横向分布以皮层为高,纵向分布均以根的上端高于下端,须根含量高.
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丹参酮IIA抗乳腺癌T47 D细胞增殖的GPER途径研究
目的：利用经典雌激素受体( estrogenic receptor,ER)和G蛋白偶联雌激素受体( G protein-coupled estrogen recep-tor, GPER)阳性乳腺癌T47D细胞,探索丹参酮IIA( Tanshi-none IIA)对细胞增殖活性的影响及其GPER介导与调节功能。方法以GPER激动剂G1和GPER拮抗剂G15为工具药干预,并应用 GPER SiRNA 转染构建 GPER 基因沉默的T47D细胞,利用MTT细胞增殖实验观察丹参酮IIA对T47D细胞增殖速率的影响及 GPER 的介导作用。利用 Western blot方法检测丹参酮IIA对T47D细胞GPER表达情况的影响。结果1×10-5 mol · L-1~1×10-7 mol · L-1丹参酮IIA能够明显抑制T47D细胞增殖,且该抑制作用可被G1拮抗,可被G15增强。丹参酮 IIA 作用于 GPER 基因沉默的T47D细胞,该细胞表现出更为明显的生长抑制效应。 West-ern blot测定结果表明,1×10-5 mol · L-1和1×10-6 mol · L-1丹参酮IIA可使 T47D 细胞 GPER 蛋白表达明显降低。结论丹参酮IIA具有抑制乳腺癌T47D细胞增殖的作用,该抑制作用可经GPER途径介导；且丹参酮IIA具有对靶细胞GPER表达的调节功能。
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HPLC法测定丹参舒心胶囊中丹参酮ⅡA的含量
目的 建立丹参舒心胶囊中丹参酮IIA的含量测定方法.方法 采用C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以甲醇-水(77:23)为流动相,检测波长270 nm,柱温30℃,流速1.0 ml·min-1.结果 丹参酮IIA线性回归方程为A＝1.26×105C+2.1×104,r=0.999 7,线性范围4.224~42.24 mg·L-1.平均回收率为98.92%,RSD为1.37%.结论 该方法操作简便,精密度高,重复性好,定量准确,可用于丹参舒心胶囊的质量控制.
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高效液相色谱法测定大鼠血浆中的丹参酮IIA浓度及其药代动力学研究
目的：建立高效液相色谱法测定大鼠血浆中丹参酮IIA含量的方法，并用于药代动力学研究。方法：采用色谱柱为Phenomenex Luna C18色谱柱（150 mm ×4．6 mm，5μm），流动相为1．6‰甲酸：甲醇（80：20 v／v），梯度洗脱，流速为1．0 mL·min－1，紫外检测波长343 nm。大鼠单剂量静注10mg ·kg－1的丹参酮IIA，HPLC－UV法测定丹参酮IIA的血药浓度，并采用DAS 2．0软件计算药代动力学参数。结果：方法学实验结果表明内源性杂质不干扰丹参酮IIA和内标的测定，线性范围0．039～10μg ·mL－1，定量下限为0．039μg·mL－1。方法精密度、准确度、稳定性和回收率均符合生物样品测定的要求，适合大鼠血浆中丹参酮IIA浓度的测定，可以应用该方法进行丹参酮IIA的药代动力学研究。大鼠单剂量静注10 mg·kg－1的丹参酮IIA后的AUC0→t、AUC0→∞、t1／2α分别为134．58±24．69μg·mL· min－1；135．36±24．76μg·mL·min－1；9．93±2．13min。结论：本方法操作简便、灵敏、专属性强，方法学考证符合生物样品测定的要求并成功用于丹参酮IIA在大鼠体内的药代动力学研究。
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HPLC法测定复方丹参片中丹参酮IIA的含量
目的建立调整流动相(甲醇∶水)比例后,HPLC法测定复方丹参片中丹参酮IIA的含量.方法色谱柱:Hypersil ODSC18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:甲醇∶水(85∶15);流速:0.7mL·min-1;检测波长:270nm.结果丹参酮IIA在0.011～0.055μg·mL-1浓度范围之间线性良好,r=0.9998;平均回收率为100.40%,RSD%=2.18%(n=5).结论本法快速、结果准确稳定,主峰与杂质峰分离完全,可作为复方丹参片的质量控制.
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前列地尔联合丹参酮ⅡA治疗肺动脉高压患者的临床效果评价
选取2015年5月~2016年5月我院呼吸内科治疗的66例慢性阻塞性肺疾病引起的肺动脉高压患者.随机分为对照组34例和观察组32例.对照组采用常规治疗的方法,观察组在此基础上采用前列地尔联合丹参酮ⅡA治疗的方法,比较两组患者的治疗效果、肺动脉压及血液流变学变化.观察组治疗有效率为93.75%,显著高于对照组的73.53%,差异有统计学意义(P<0.05);观察组肺动脉收缩压(PASP)、肺动脉平均压(PAMP)、肺动脉舒张压(PADP)均明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组全血粘度、纤维蛋白原、血细胞比容明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).前列地尔联合丹参酮IIA治疗肺动脉高压效果显著,有效控制肺动脉压,降低血压粘度,具有积极的临床意义.
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活血化瘀法对原发性高血压病患者血压变异性的影响
目的:观察改善微循环障碍对高血压病患者血压变异性的影响.方法:将符合纳入标准的高血压病患者52例随机分为治疗组24例和对照组28例,其中治疗组予常规降压药加用丹参酮IIA磺酸钠注射液静脉滴注治疗,对照组予硝本地平等常规西药治疗,疗程均为4周.观察并比较两组治疗前后血压、血压变异性等指标.结果:两组均可降低血压及血压变异性,但治疗组对血压变异性降低更明显,与对照组相比差异有显著性(P＜0.05).结论:西药联合中药活血化瘀法对高血压病血压变异性增高有较好的疗效,其机制可能与微循环障碍改善有关.
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复方丹参片中丹酚酸B和丹参酮ⅡA的含量测定
目的：建立复方丹参片中丹参酮Ⅱ A 及丹酚酸 B 的高效液相色谱测定方法。方法色谱柱为 Venusil XBPC18（L）（4．6mm×250mm，5μm），丹酚酸B的流动相为：乙腈∶甲醇∶甲酸∶水（10∶30∶1∶59），检测波长为286 nm ；丹参酮IIA的流动相为：甲醇∶水（85∶15），检测波长为270 nm。以外标法进行定量计算。结果丹参酮IIA和丹酚酸B分别在00．368～07．36μg和00．6～12．0μg范围内线性良好，平均加样回收率和 RSD分别为984．1％、12．8％（n ＝9）；982．9％、12．1％（n ＝9）。结论该方法简便、准确、灵敏度高，重复性好，无干扰，可用于复方丹参片的质量评价及丹参制剂的质量控制。
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丹参酮IIA对自发性高血压大鼠蛋白激酶C的影响
目的:观察丹参酮IIA对自发性高血压大鼠蛋白激酶C的影响,探讨丹参酮IIA防治高血压心肌肥厚的机制.方法:将18只8周龄的自发性高血压大鼠随机分成三组:一组于8周处死,另两组经腹腔分别注射丹参酮IIA和蒸馏水,共10周.测量大鼠尾动脉收缩压(SBP)及左心室重量指数(LVMI).应用HE染色、免疫组织化学的方法,结合计算机图像分析技术,检测心肌细胞的直径和面积,以及蛋白激酶C(PKC)的表达.结果:与8周龄的自发性高血压大鼠相比,18周龄大鼠的SBP、LVMI、心肌细胞的直径和面积显著增加,PKC表达上调.丹参酮IIA可抑制LVH的发展和心肌组织PKC的表达,但收缩压无明显改变.结论:长期应用丹参酮IIA可预防自发性高血压大鼠左室肥厚的形成,其机制可能与丹参酮IIA能降低心脏蛋白激酶C的表达有关.
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豚鼠体内丹酚酸B和丹参酮IIA浓度的高效液相色谱法同时测定
目的 建立同时测定豚鼠血浆、脑组织、脑脊液和内耳外淋巴液中丹酚酸B和丹参酮IIA的高效液相色谱法.方法采用C18色谱柱,流动相2％冰醋酸水溶液-甲醇,梯度洗脱,流速1ml·min-1,检测波长280 nm.结果 该法能将丹酚酸B和丹参酮IIA有效分离.不同组织中药物在检测范围内线性良好,r均大于0.999,萃取回收率在74.76％～104.27％,方法回收率在93.82％～108.94％,日内和日间精密度RSD小于7.87％.结论 该方法简单、灵敏,可用于豚鼠体内丹酚酸B和丹参酮IIA的测定,为二者体内过程及药动学研究奠定基础.
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丹参酮IIA对压力超负荷性心肌肥厚大鼠血液SOD、NO及Hyp含量的影响
、LVI、Hyp含量明显高于假手术组,而SOD活力、NO含量明显低于假手术组(均P<0.05).与模型组比较,丹参酮2组和纈沙坦组HW/BW、LVI及Hyp含量显著降低,SOD活力、NO含量显著升高;丹参酮1组与模型组各指标间差异无显著性意义.结论:丹参酮IIA对大鼠心肌肥厚有一定的保护作用,其机制可能与增加NO生成、抑制胶原合成、调节心脏局部氧自由基代谢等方面的作用有关,但<5 mg·kg-1的丹参酮IIA对心肌作用不明显.
