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鸡血藤黄酮类有效部位对人肺腺癌A549细胞氧化应激的影响
目的:探讨鸡血藤黄酮类有效部位( SSCE)对人肺腺癌A549细胞的杀伤活性与氧化应激反应的相关性.方法:实验分为SSCE高、中、低剂量组和正常对照组,各组分别加入不同浓度的SSCE(正常组用培养基代替)作用人肺腺癌A549细胞24 h后,采用脂质过氧化物(MDA)、谷胱甘肽(GSH)试剂盒检测A549细胞MDA,GSH的含量；以2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)为荧光探针,用荧光酶标法和共聚焦荧光显微镜法检测活性氧(ROS)；选择加入SSCE高浓度组同时加入抗氧化剂维生素C(Vit C),维生素E( Vit E),谷胱甘肽过氧化物酶(GPx),过氧化氢酶(CAT)作用细胞24 h后,采用CCK-8法检测A549细胞增殖情况及荧光酶标仪法检测ROS.结果:加入SSCE后,SSCE各组细胞MDA均含量上升(P＜0.01)、高浓度组GSH含量下降(P＜0.01)；高、中浓度组细胞ROS含量上升(P＜0.01)；共聚焦显示SSCE各组均有绿色荧光,其中高、中浓度组荧光较强；加入抗氧化剂后,各组细胞抑制率均降低(P＜0.05),ROS含量均下降(P＜0.01).结论:SSCE可以改变A549细胞MDA,GSH,ROS水平,其抗肿瘤作用可能是通过诱导肿瘤细胞氧化应激反应而实现的.
关键词： 鸡血藤黄酮类有效部位 活性氧 氧化应激 A549细胞 -
白术精油含药血清对人肺癌A549细胞株的抑瘤作用及机制研究
目的:探讨白术精油对人肺癌A549细胞的抑瘤作用及作用机制.方法:白术精油乳剂灌胃SD大鼠,10日后采集含药血清体外培养A549细胞,噻唑蓝法(MTT)测其细胞生长抑制率,流式细胞术(FCM)检测白术精油含药血清对A549细胞细胞周期的影响,酶联免疫法(ELISA)检测白术精油含药血清对A549细胞半胱天冬蛋白酶3(caspase-3)蛋白表达的影响.结果:白术精油中剂量组(150 μL·kg-1)15％含药血清、高剂量组(300 μL·kg-1)15％含药血清能够显著抑制A549细胞增殖,使A549细胞周期停滞在G0/G1期,并能显著增加A549细胞caspase-3的蛋白含量.结论:白术精油具有抑制A549细胞增殖的作用,其抑瘤机制可能是控制A549细胞周期停滞在G0/G1期、促进细胞内caspase-3的蛋白表达促进细胞凋亡,从而抑制A549细胞增殖.
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补肾疏肝方对人肺癌A549细胞及其相关干性因子的影响
目的:探讨补肾疏肝方对人肺癌A549细胞及其相关干性因子的影响.方法:SD雄性大鼠随机分为6组,每组10只,分别为补肾疏肝方低、高剂量组(15,30 g·kg-1),顺铂组(8 g·kg-1),低剂量联合顺铂组(联合低剂量组),高剂量联合顺铂组(联合高剂量组),正常组,顺铂组ip给予相应药物,补肾疏肝方ig给予相应药物,正常组给予等体积的生理盐水,制备大鼠含药血清;分别配制10％含补肾疏肝方低、高剂量、顺铂、低剂量联合顺铂、高剂量联合顺铂,分别与肺癌A549细胞共同培养,CCK8法检测补肾疏肝方含药血清对A549增殖的影响;流式细胞术检测含药血清对A549细胞周期的影响;Annexin V/PI双染流式细胞术观察含药血清对A549细胞凋亡的影响;荧光定量PCR检测含药血清对相关mRNA表达的影响;流式细胞术检测含药血清对CD133蛋白表达的影响.结果:补肾疏肝方以时间、剂量依赖方式抑制A549细胞增殖,与顺铂联合有协同增效作用,24,48,72 h高剂量联合顺铂组的抑制率分别为45.39％,54.76％及59.94％;与正常组比较,补肾疏肝方、联合、顺铂含药血清可促进A549细胞凋亡,随着浓度增加,G2/M期细胞的百分比明显增加,明显下调CD133,SOX-2,OCT4 mRNA的表达,明显降低CD133蛋白表达量,均具有明显统计学差异(P ＜0.05,P＜0.01).结论:补肾疏肝方可抑制A549细胞增殖,促进细胞凋亡,与顺铂联合可下调CD133,SOX-2,OCT-4等干性因子的表达.
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黄芩苷对人肺腺癌A549细胞的体内外研究
目的:探讨黄芩苷在体外对人肺癌A549细胞增殖、侵袭、迁移、对脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)新生血管形成的影响,在体内对A549细胞裸鼠移植瘤的作用.方法:调整细胞密度为1×104/mL,应用25,50,100,200,400 μmol·L-1黄芩苷作用于A549细胞24,48,72 h,采用MTT法检测黄芩苷对A549细胞的增殖抑制作用；Transwell小室法观察12.5,25,50μmol·L-1黄芩苷对A549细胞侵袭及迁移的影响；小管形成实验观察12.5,25,50μmol·L-1黄芩苷对HUVEC小管形成的影响；将A549细胞移植瘤裸鼠分为黄芩苷高剂量组(100 mg·kg-1)、黄芩苷低剂量组(50 mg·kg-1)、溶剂对照组、顺铂组(1 mg· kg-1),前3组通过ig方式给予,连续21 d；顺铂组ip连用10 d.观察黄芩苷对A549细胞裸鼠移植瘤的作用.结果:①黄芩苷能抑制A549细胞增殖,其增殖抑制率与药物浓度及作用时间呈依赖性,24,48,72 h的IC50分别为100.77,75.02,55.81 μmol·L-1.②25,50μmol·L-1黄芩苷能抑制A549细胞的侵袭及迁移,从而抑制癌细胞转移.③25,50μmol·L-1黄芩苷能抑制HUVEC小管生成,与对照组比较具有统计学意义(P＜0.05).④体内实验表明50 mg·kg-黄芩苷对A549细胞移植瘤具有一定的抑制作用.结论:黄芩苷体外可以抑制A549细胞的增殖、侵袭、迁移,抑制HUVEC小管形成,体内对A549细胞裸鼠移植瘤具有一定的抑制作用.
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金丝桃苷对过氧化氢诱导的A549细胞氧化损伤的保护作用
目的:研究金丝桃苷对过氧化氢(H2O2)诱导的A549细胞氧化损伤的保护作用,并探讨其相关的作用机制.方法:体外培养A549细胞,采用H2O2(400 μmol.L-1)作用24 h,建立A549细胞氧化损伤模型,分为空白组,模型组(400μmol·L-1H2O2),阳性药(100μmol·L-1 N-乙酰半胱氨酸)组和不同浓度金丝桃苷(1,10,100 μmol·L-1)组.采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,通过酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测活性氧(ROS),丙二醛(MDA)含量,乳酸脱氢酶(LDH),过氧化氢酶(CAT),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性.通过罗丹明123染色法检测细胞线粒体膜电位改变.采用蛋白质免疫印迹(Western blot)检测沉默信息调节因子3(Sirt3),异柠檬酸脱氢酶2(IDH2)和锰超氧化物岐化酶(MnSOD)蛋白表达.结果:与模型组比较,金丝桃苷显著提高细胞存活率(P＜0.01),降低LDH的外漏,ROS和MDA含量(P ＜0.05,P＜0.01),明显增加CAT,SOD,GSH-Px活性(P＜0.05,P＜0.01).金丝桃苷能够显著提高线粒体膜电位,上调Sirt3,IDH2和MnSOD蛋白表达(P ＜0.05,P＜0.01).结论:金丝桃苷能够保护H2O2诱导的A549细胞氧化损伤,其作用可能与提高清除ROS能力,调控Sirt3线粒体途径相关.
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南方红豆杉水提物联合紫杉醇对人肺癌A549细胞增殖的抑制作用研究
目的:研究南方红豆杉水提物联合紫杉醇对肺癌A549细胞增殖的抑制作用和机制.方法:将A549细胞分为低浓度紫杉醇联合不同浓度红豆杉组、低浓度紫杉醇组、空白对照组,用CCK-8法检测药物作用48h后对细胞存活率的影响,用Western blot检测细胞内Bcl-2、Bax、Survivin蛋白表达变化.结果:红豆杉可增加紫杉醇对A549细胞的抑制作用,且随着药物浓度的增加,其抑制作用逐步增强;紫杉醇联用红豆杉可通过下调Bcl-2,Survivin,并上调Bax的表达,而促进细胞发生凋亡.结论:红豆杉联合紫杉醇能抑制A549细胞生长,其机制可能与凋亡相关基因Bcl-2,Survivin的降低,促凋亡基因Bax的增高有关.
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肺瘤平膏对共培养条件下A549细胞NF-κB通路mRNA及蛋白表达的影响
目的:观察肺瘤平膏对共培养条件下人肺腺瘤细胞(A549细胞)核因子-κB(NF-κB)通路mRNA及蛋白表达的影响.方法:制备肺瘤平膏含药血清;建立A549细胞与巨噬细胞的共培养体系;通过荧光定量PCR和Western blot观察肺瘤平膏对共培养条件下A549细胞NF-κB通路mRNA及蛋白表达的影响.结果:共培养条件下,A549细胞变成间充质细胞样,部分可被肺瘤平膏所逆转.共培养条件下,A549细胞中CHUK、IKBKB、NFKBIA、RelA mRNA表达量明显升高(P＜0.05);干预后,除NFKBIA外,CHUK、IKBKB、RelA表达量均显著降低(P＜0.05).而A549细胞总蛋白中NF-κB p65、p-IKKα/β、p-IκBα的表达量升高(P＜0.05),IKKβ、IκBα的表达量降低(P＜0.05),IKK α表达量无明显变化;干预后可降低IKKα、p-IKK α/β、p-IκB α的表达量(P＜0.05),升高IκBα的表达量(P＜0.05).胞浆和胞核蛋白中p-NF-κB p65的含量亦明显升高(P＜0.05),干预后可降低此其表达量(P＜0.05),并且降低其胞核胞浆比例.结论:肺瘤平膏可以通过抑制CHUK基因的表达,并且减少IKKα/β的磷酸化,抑制其激活,从而抑制IkBα的磷酸化,避免IκBα的磷酸化带来的NF-κB p65核转位.
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调补肺肾三法对香烟烟雾提取物和脂多糖刺激A549细胞分泌细胞因子的影响
目的:从调补肺肾三法对香烟烟雾提取物(CSE)和脂多糖(LPS)刺激A549分泌细胞因子变化的影响,揭示调补肺肾三法治疗COPD分子机制.方法:CSE和LPS及两者联合(LC)刺激肺泡上皮细胞A549,每种刺激物下分为正常组(20％正常大鼠血清)、刺激物组(20％正常大鼠血清和5％CSE或75pg/mL LPS,或5％CSE和75pg/mLLPS)、补肺益肾组(BYFS)、补肺健脾组(BFJP)和益气滋肾组(YQZS)(20％相应方药大鼠含药血清和5％CSE或75pg/mL LPS,或5％CSE和75pg/mL LPS),ELISA法检测细胞因子,应用网络工具分析细胞因子的转录因子.结果:与正常组比较,CSE、LPS和LC组A549分泌IL-3和TGF-β减少(P＜0.01)；CSE组分泌MMP-9增加,分泌IL-8减少(P＜0.05)；LPS组分泌TIMP-1增加(P＜0.05),LC组分泌TNF-α和MMP-9减少(P＜0.01,P＜0.05).与CSE组比较,BFYS组分泌IL-1β和PPAP2B增加(P＜0.01,P＜0.05)；BFJP组分泌TNF-α减少(P＜0.05),IL-1 β和PPAP2B增加(P＜0.01,P＜0.05)；YQZS组分泌L1 p增加(P＜0.01).与LPS组比较,BFYS组分泌IL-1 β、MMP-9(P＜0.01)和PPAP2B增加(P＜0.05),分泌TIMP-1、PPAP2B和TNF-α减少(P＜0.05)；BFJP组分泌TIMP-1和TNF-α减少(P＜0.01),分泌IL-1 β和SOD增加(P＜0.05)；YQZS组分泌TIMP-1和TNF-α减少(P＜0.05,P＜0.01),IL-3、MMP-9和IL-1β分泌增加(P＜0.05).与LC组比较,BFYS组分泌MMP-9、IL-3、SOD、IL-1 β、TNF-α、CD36分泌增加(P＜0.05)；BFJP组分泌MMP9、TGF-β、SOD、IL-1β分泌增加(P＜0.05)；YQZS组分泌MMP-9、IL-3、SOD、TNF-α、TGF-β增加(P＜0.05),3个用药组分泌的TIMP-1皆减少(P＜0.01).结论:CSE和LPS对A549分泌细胞因子影响不同.3个调补肺肾方药对CSE和LPS刺激下分泌细胞因子和转录因子均有一定调控作用,补肺益肾中药在CSE刺激下纠正细胞因子分泌作用较好,益气滋肾中药对LPS与CSE联合状态下调节效果较好.
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补中益气汤含药血清对TGF-β1介导的A549细胞中Vimentin及GST-π蛋白表达的影响
目的:观察补中益气汤含药血清对转化生长因子-β1 (TGFβ1)介导的人肺腺癌A549细胞上皮间质转化过程中波形蛋白(Vimentin)及谷胱甘肽-S-转移酶π(GST-π)表达的影响.方法:制备不同浓度的补中益气汤含药血清作用于TGF-β1诱导的A549细胞,实验分组为空白血清组,空白血清+TGF-β1组以及高、中、低剂量补中益气汤含药血清+TGF-β1组.采用免疫组化、Western blot和Real-time PCR法分别检测Vimentin及GST-π 的蛋白和mRNA变化.结果:高、中、低剂量的补中益气汤含药血清均能使TGF-β l诱导的上皮间质化的A549细胞中Vimentin和GST-π蛋白表达下降,mRNA表达水平降低,其中高、中剂量组与空白血清组比,差异亦有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论:补中益气汤含药血清能抑制TGF-β1介导的A549细胞上皮间质化中Vimentin及GST-π的表达,改善其耐药性.
关键词： 补中益气汤 A549细胞 波形蛋白 谷胱甘肽-S-转移酶π -
补肾疏肝方对肺腺癌A549细胞的抑制及凋亡相关因子研究
目的:研究补肾疏肝方对肺腺癌A549细胞凋亡的影响及其凋亡相关基因的研究.方法:制备补肾疏肝方大鼠含药血清,与肺癌A549细胞共同培养,MTT法检测补肾疏肝方含药血清对A549增殖的影响.流式细胞术检测含药血清,对A549细胞周期的影响,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术观察含药血清对A549细胞凋亡的影响.Western blot检测含药血清对P53、Bcl-2蛋白表达的影响.结果:随着补肾疏肝方药物浓度的增加,处理时间的延长其抑制作用呈明显的时间-剂量效应,与顺铂联合作用效果显著,其24、48、72h联合组的抑制率分别为26.71％、30.86％、41.74％;含药血清可以诱导细胞的凋亡,且随着浓度的增加G2/M期细胞的百分比增加,凋亡率与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);其在诱导细胞凋亡过程中,下调Bcl-2蛋白表达,也使P53蛋白表达量增高.结论:补肾疏肝方对A549细胞的增殖有抑制作用,并呈时间、剂量依赖方式,其作用机制可能是通过抑制Bcl-2蛋白表达,活化P53蛋白表达从而诱导肺癌细胞A549的凋亡而抑制细胞增殖.
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扶正消癌合剂诱导人肺腺癌A549细胞凋亡研究
目的:研究扶正消癌合剂对人肺腺癌A549细胞(以下简称A549细胞)凋亡的影响.方法:制备大鼠含药血清,MTT法检测扶正消癌合剂含药血清对A549细胞增值的影响.Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术观察含药血清对A549细胞凋亡的影响.Western Blot检测含药血清对P53,B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)及Survivin蛋白表达的影响.结果:扶正消癌合剂以时间、剂量依赖方式抑制A549细胞增殖,与DD哈用有协同增效作用,48、72、96h联合组的抑制率分别为28.27％、38.68％、37.98％;其可以诱导细胞的凋亡,且以晚期凋亡为主,凋亡率与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);其在诱导细胞凋亡过程中,下调Bel-2、Survivin蛋白表达,同时活化P53蛋白表达.结论:扶正消癌合剂可能通过抑制Bcl-2、Survivin蛋白表达,同时活化P53蛋白表达诱导A549凋亡.
关键词： 扶正消癌合剂 肺癌 A549细胞 凋亡 P53 B淋巴细胞瘤-2基因 Survivin蛋白 -
中药升陷汤抑制肺癌A549细胞增殖和侵袭转移作用研究
目的:本研究旨在体外筛选出升陷汤抑制人肺癌A549细胞侵袭转移的有效萃取部位,并对其分子机制进行探讨.方法:通过MTT法和形态观察筛选出升陷汤抑制A549细胞增殖的有效萃取部位.Annexin V/PI双染法检测升陷汤正丁醇提取物对A549细胞的凋亡诱导作用.划痕实验和Transwell小室检测生陷汤提取物对A549细胞侵袭、转移的影响；Western blot检测侵袭转移相关信号通路分子表达的变化.结果:20-400μg/mL正丁醇萃取部位作用于A549细胞48、72h后可明显抑制其增长,且与凋亡相关.20-80μg/mL升陷汤作用于A549细胞24h后可明显抑制其侵袭和转移；正丁醇萃取部位可明显降低P-ERK和基质金属蛋白酶MMP2、MMP9的表达(P<0.01).结论:升陷汤正丁醇萃取部位能显著抑制A549细胞的增殖和侵袭转移.
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中药作用人肺癌A549细胞的实验研究进展
中医学在防治肿瘤性疾病方面具有独特的疗效,中药的安全性、有效性、低毒性,使之成为现阶段研究抗肿瘤药物的热点.查阅近年来国内外具有代表性的文献,对中药复方、中药单体作用人肺腺癌A549细胞的实验研究结果进行分析归纳,发现很多中药复方及其中药单体被证实对A549细胞产生一定的影响,如诱导A549细胞凋亡和抑制A549细胞增殖,但具体的作用机制尚需深入研究.
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鸡血藤黄酮类有效部位SSCE对人肺腺癌细胞A549细胞周期调控的分子机制
目的:探讨鸡血藤黄酮类有效部位(SSCE)对人肺癌A549细胞的周期阻滞作用及其分子机制.方法:采用CCK-8法检测SSCE对A549细胞的增殖影响;流式细胞仪检测细胞周期;RT-PCR法检测CDK1、2、4、6 mRNA表达;Western-blot法测定CDK1、2、4、6蛋白表达.结果:SSCE抑制A549细胞的增殖,SSCE引起A549细胞G1/S期和/或G2/M期阻滞.160mg/L SSCE作用A549细胞24h后,CDK1、CDK2、CDK6 mRNA表达较对照组减少(P＜0.05);CDK1、CDK2、CDK6蛋白含量较对照组低(P＜0.05);160mg/L SSCE作用A549细胞48h后,细胞内CDK1 mRNA表达较对照组减少(P＜0.05);细胞内CDK1蛋白含量较对照组低(P＜0.05).结论:SSCE通过下调CDK1mRNA转录水平及蛋白表达量引起A549细胞G2/M期阻滞;通过下调CDK2、6 mRNA转录水平及蛋白表达量引起A549细胞G1期阻滞.
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艾烟可吸入颗粒物对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响
目的：观察艾烟可吸入颗粒物(PM10)对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响,并探讨其诱导凋亡的可能机制。方法采用体外实验方法,以 A549细胞为研究对象,采用 Hoechest33258染色法,荧光显微镜观察艾烟PM10对A549细胞凋亡的影响,检测细胞内Ca2+水平、核因子(NF)-κB p65表达量及细胞内活性氧(ROS)的水平。结果艾烟PM10处理4 h在400μg/mL时出现部分凋亡细胞。艾烟PM10干预A549细胞4 h后,随着浓度增加,细胞内Ca2+水平显著增加(P＜0.01)。与空白对照组比较,艾烟干预4 h,各浓度组A549细胞内NF-κB p65表达量均降低(P＜0.05)；干预20 h,70μg/mL组和280μg/mL组NF-κB p65表达量均降低(P＜0.05),140μg/mL组NF-κB p65含量无明显变化(P＞0.05)。相同浓度下,不同时点艾烟干预各组间比较,NF-κB p65表达量无明显变化(P＞0.05)。与空白对照组比较,艾烟PM10处理各组细胞内ROS水平均显著降低(P＜0.05)。结论艾烟PM10能诱导A549细胞凋亡、提高A549细胞内Ca2+水平。
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槲皮素对甲型H1N1流感病毒诱导的A549细胞凋亡效应酶Caspase-3的影响
目的 观察银杏叶主要活性成分槲皮素对甲型H1N1流感病毒感染的人肺上皮瘤细胞A549凋亡效应酶Caspase-3的影响.方法 采用MTT法测定H1N1毒力、槲皮素细胞毒性作用、槲皮素对H1N1致A549细胞病变的抑制作用.然后用100 TCID50甲型H1N1感染A549 2 h后换用含10 mg/L槲皮素维持液继续培养,于感染后4、12、24、48 h收集细胞,提取细胞总蛋白,采用Western blot方法,应用Image-Pro Plus测定Caspase-3与β-actin灰度值,两者灰度比值为Caspase-3的相对表达量.结果 甲型H1N1 A549的TCID50为10-4.75,槲皮素A549的大无毒浓度为40 mg/L,槲皮素抑制甲型H1N1致A549细胞病变的小有效浓度为10 mg/L.在甲型H1N1感染A549细胞后4～ 48 h内,槲皮素可显著抑制Caspase-3蛋白表达,具有明显的抗凋亡作用.结论 槲皮素可通过抑制Caspase-3含量或活性而发挥抗病毒感染作用.
关键词： 银杏 槲皮素 甲型H1N1流感病毒 A549细胞 Caspase-3 -
藁本内酯抗人肺癌A549细胞增殖作用研究
目的：探讨藁本内酯抗人肺癌A549细胞增殖的作用机制。方法 CCK-8法检测藁本内酯对A549细胞活力的影响,TUNEL法检测细胞凋亡率,Hoechst 33258荧光染色法观察A549细胞的形态变化,ELISA检测血管内皮生长因子(VEGF)含量,Western blot检测核因子-κB(NF-κB)、Bcl-2、Bax及磷酸化JNK蛋白表达。结果15、30、60、120、180μmol/L藁本内酯作用12、24、48 h能抑制A549细胞活力(P＜0.05,P＜0.01, P＜0.001),并呈剂量及时间依赖(P＜0.05,P＜0.01)；30、60、120μmol/L 藁本内酯作用12、24、48 h,细胞凋亡率呈时间和剂量依赖(P＜0.05,P＜0.01)；经藁本内酯处理48 h后,A549细胞核可见明显凋亡形态,包括核皱缩、碎裂、亮蓝色荧光,染色质分割产生凋亡小体；30、60、120μmol/L藁本内酯细胞核内NF-κB蛋白p65亚基表达升高、细胞内JNK蛋白磷酸化水平升高、抑凋亡蛋白Bcl-2表达降低及促凋亡蛋白Bax表达升高(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001)。结论藁本内酯通过抑制VEGF的表达而抑制肿瘤新生血管的形成,通过调控NF-κB蛋白表达及JNK蛋白磷酸化水平,降低Bcl-2/Bax比值,诱导肿瘤细胞凋亡。
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番荔枝内酯对肺腺癌A549细胞周期及凋亡的影响
目的：探讨番荔枝内酯 Bullatacin 诱导肿瘤细胞凋亡的机制。方法采用 MTT 法检测不同浓度(6.25、12.5、25、50、100μg/mL)Bullatacin对A549细胞的抑制增殖作用,依照MTT结果取浓度25μg/mL Bullatacin作用于A549细胞0、12、24、48 h,流式细胞仪分析其对A549细胞增殖周期的影响,观察其对细胞凋亡的干预作用。Western Blot 检测不同实验组 ERK、JNK、p38磷酸化与总蛋白的表达。结果不同浓度Bullatacin作用于A549细胞后,呈明显的剂量依赖性；25μg/mL Bullatacin能将A549细胞周期阻滞在G0/G1期,诱导细胞凋亡；与空白组比较,P-ERK、P-JNK、P-p38的蛋白表达均明显增强。结论 Bullatacin明显抑制A549细胞增殖,并诱导其凋亡,其机理与Bullatacin通过磷酸化各蛋白激酶而激活MAPK通路有关。
关键词： 番荔枝内酯 Bullatacin A549细胞 增殖 凋亡 MAPK信号转导通路 -
金雀异黄素对脂多糖诱导人肺泡上皮细胞A549炎症及凋亡的影响
目的：观察金雀异黄素对脂多糖（LPS）诱导人肺泡上皮细胞A549发生炎症与凋亡的影响，探讨其改善肺损伤的作用机制。方法 CCK-8法检测不同浓度金雀异黄素和/或 LPS 干预细胞12 h 后的活力；RT-PCR检测金雀异黄素对LPS诱导的炎性因子白细胞介素（IL）-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达；TUNEL法检测细胞凋亡；Western blot检测信号通路的变化。结果金雀异黄素（1、5、10μmol/L）对细胞活力无明显影响，LPS（1μg/mL）可显著降低细胞活力，而金雀异黄素与LPS共同干预则细胞活力呈浓度依赖性升高；RT-PCR结果显示，LPS可显著提高炎性因子的基因表达，而金雀异黄素则可呈浓度依赖和时间依赖抑制其表达；TUNEL染色结果显示，金雀异黄素（10μmol/L）与LPS联合干预12 h可显著减少LPS诱导的细胞凋亡；Western blot结果显示，金雀异黄素（10μmol/L）与LPS（1μg/mL）协同刺激A549细胞30 min可显著抑制LPS诱导的IκBα、p65信号通路的磷酸化水平。结论金雀异黄素可抑制LPS诱导的人肺泡上皮细胞发生炎症和凋亡，从而发挥保护作用。
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复方龙芩草微乳提取液有效成分体外抗H1N1流感病毒的药效研究
目的：研究复方龙芩草微乳提取液中有效成分体外抗H1N1流感病毒增殖的作用，观察微乳提取液中有效成分对流感病毒的抑制率。方法用均匀设计法安排实验，MTT法检测药物对H1N1流感病毒致A549细胞病变的抑制效率（ER），以ER为指标，运用Minitab17软件建立数学模型得出各因素之间的回归方程，分析各成分对ER的作用关系并优选出具有佳抗H1N1流感病毒效果的有效成分比例。结果复方成分中，黄芩苷发挥显著的抗病毒作用，甘草苷对细胞病变有一定的抑制作用，5种成分对ER存在协同或制约性的关系。每毫升药液含甘草苷、黄芩苷、亮氨酸、天冬氨酸、谷氨酸分别为13.94μg、49.44μg、0.23 mg、1.25 mg、2.50 mg时ER值佳，经验证ER值为85.34%±4.72%。结论复方龙芩草微乳提取液有效成分的优化组合能较好发挥抗H1N1流感病毒的作用。
