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他莫昔芬对乳腺癌 MCF-7细胞侵袭能力、MMP-9活性和表达的影响及机制

陈妍;王婧;徐旖旎;洪端阳;潘迪;沈祥春

摘要: 目的:观察他莫昔芬(TAM)对乳腺癌MCF-7细胞侵袭能力、基质金属蛋白酶9(MMP-9)活性、MMP-9蛋白表达、MMP-9 mRNA 表达的影响,并探讨抑制 G 蛋白偶联受体30(GPR30)对上述作用的影响。方法取对数生长期乳腺癌 MCF-7细胞,用无血清无酚红高糖 DMEM培养基培养24 h 耗竭内源性雌激素。将 MCF-7细胞接种6孔板,待细胞贴壁后分为对照组、TAM组和 TAM+G15(GPR30选择性抑制剂)组。对照组用无血清无酚红高糖DMEM培养基继续培养24 h。TAM组用含1μmol/L TAM的无血清无酚红高糖 DMEM培养基培养24 h,TAM+G15组先用含1μmol/L 的 G15的无血清无酚红高糖 DMEM培养基培养30 min,然后用含1μmol/L TAM的无血清无酚红高糖 DMEM培养基培养24 h。收集各组细胞,用 Transwell 侵袭实验检测 MCF-7细胞侵袭能力,用明胶酶谱法检测 MCF-7细胞培养液上清 MMP-9活性,用 Western blot 法检测 MCF-7细胞 MMP-9蛋白表达,用实时荧光定量PCR 法检测 MCF-7细胞 MMP-9 mRNA 表达。结果与对照组相比,TAM组 MCF-7细胞侵袭能力升高,MMP-9蛋白和 mRNA 表达增加,培养液上清 MMP-9活性升高(P 均<0.05)。与 TAM组相比,TAM+G15组上述指标均降低(P 均<0.05)。结论TAM可增强乳腺癌 MCF-7细胞的侵袭能力,上调 MMP-9的活性及表达水平。用 GPR30选择性抑制剂 G15抑制 GR30通路可以抑制这一作用。

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