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宫腔镜检查术在反复胚胎种植失败患者中的应用价值
目的：探讨反复种植失败（ RIF）的患者再次胚胎移植前行宫腔镜的临床意义及宫腔镜术后再次胚胎移植的佳时机。方法回顾分析反复种植失败的病例281例患者的临床资料，根据是否在再次移植前接受宫腔镜（ HSC）检查分为A，B两组，A组为观察组，再次移植前接受宫腔镜检查，共计210例；B组为对照组，再次移植前，未接受宫腔镜检查，共计71例。宫腔镜手术中对宫腔异常者予以处理，对于无异常者轻柔搔刮内膜。术后再次行IVF－ET，分析两组再次移植的临床妊娠率，并探讨宫腔镜术后再次移植的佳时机。结果 A组再次移植的临床妊娠率为27．1％（57／210），B组再次移植的临床妊娠率11．3％（8／71），A组与B组间的临床妊娠率差异有统计学意义（χ2＝7．52，P＜0．01）；宫腔镜术后再次移植的妊娠患者中有94．7％于术后6个月内妊娠。结论反复种植失败患者在再次移植前行宫腔镜检查有助于提高临床妊娠率，建议再次移植在宫腔镜手术后6个月内进行。
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宫颈妊娠18例临床护理体会
宫颈妊娠(cerrical pregnancy)是指胚胎植入宫颈管内的宫颈黏膜,即孕囊在子宫颈内(组织学内口以下的宫颈内膜)着床和发育[1].宫颈妊娠是一种罕见的异位妊娠,占异位妊娠的0.15%～2.00%.宫颈妊娠早期在临床上无特异性表现,发病前不易诊断,常误诊.流产术时发生大出血处理不当或抢救不力,可危及患者生命或丧失生育功能[2].我们对18例宫颈妊娠治疗护理进行分析.现报告如下.
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胚胎种植前遗传学诊断的应用
胚胎种植前遗传学诊断(preimplantation genetic diagno-sis,PGD)是辅助生殖技术领域中的新兴技术,用于对着床前胚胎进行基因诊断.主要是指对体外受精(in vitro fertiliza-tion,IVF)的胚胎,待其发育到4～8细胞期,显微操作下行卵裂球细胞活检[1,2],取出一个细胞,或者直接取受精前后的极体[3],对它们行聚合酶链反应(polymerase chain reac-tion,PCR)或荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)等基因分析,进行快速遗传学诊断,选择无遗传学疾患的胚胎植入宫腔,从而获得正常胎儿的诊断方法.这样就可以把疾病控制在胚胎发育的早阶段,避免了妊娠建立后再做产前诊断时孕妇可能面临人工流产所带来的生理和心理的痛苦,这无疑是遗传病基因诊断领域中的又一次变革,可以说PGD技术代表了当今生殖医学临床尖端水平.
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宫颈妊娠介入治疗9例观察与护理
宫颈妊娠指胚胎植入宫颈管内的宫颈黏膜,即孕囊在子宫颈内(组织学内口以下的宫颈内膜)着床和发育[1].宫颈妊娠是一种罕见的异位妊娠,占异位妊娠总数的0.15%～2.0%,患病率为1 : 18 000[2].常见的临床表现是无痛性阴道大出血,甚至发生出血性休克和DIC等,抢救不及时可危及生命.我院自2004年4月采用子宫动脉栓塞介入治疗宫颈妊娠9例,取得较好的效果,现将护理体会报告如下.
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胚胎早期形态学参数与胚胎植入关系分析
目的 探讨各胚胎形态学参数在评估胚胎质量中的作用.方法 回顾性分析植入胚胎形态学参数与未植入胚胎之间的差别和两组各参数评级构成比.结果 卵裂球数、碎片的量和各参数评级构成比,2组比较有显著性差异(P＜0.01).结论 形态学评分系统对预测胚胎植入潜能有较好的作用.
关键词： 体外受精/卵胞浆内单精子显微注射 形态学参数 胚胎植入 -
噪音及其强度对小鼠胚胎发育的影响
目的 主要研究噪音所致各种胚胎发育异常,为临床上预防噪音所致的胎儿发育异常提供动物实验依据:方法取怀孕小鼠,于孕2天至孕6天进行噪音刺激,孕8天解剖取子宫观察胚胎着床数;另取怀孕小鼠,于孕6天至孕10天进行噪音刺激,孕16天解剖取子宫观察胎鼠发育情况.结果 噪音对胚胎植入无明显影响;对胎鼠发育有明显影响,引起胎鼠身长及体重减少,即发育迟缓,且死胎率非常高.结论 高强度噪音对胚胎发育有很大影响.
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HOXA-10、 HOXA-11、 Esr2、 Pgr在控制性超排卵小鼠围着床期子宫内膜表达的研究
目的:检测同源框基因HOXA-10、HOXA-11以及雌激素受体Esr2、孕激素受体Pgr在控制性超排卵(COH)小鼠围着床期子宫内膜中的表达,探讨COH对子宫内膜容受性的影响.方法:将30只SPF级雌性昆明小鼠随机分为模型组(GnRH-a+HMG+HCG)和对照组(生理盐水),每组15只,造模成功后,计算子宫脏器指数,光学显微镜观察子宫内膜组织学变化；应用RT-PCR和Real-time PCR方法检测小鼠子宫内膜中HOXA-10、HOXA-11、Esr2、Pgr mRNA的表达.结果:模型组围着床期小鼠子宫脏器指数较对照组显著降低(P＜0.05),子宫内膜发育延迟,子宫内膜成熟度及厚度降低；模型组小鼠HOXA-10、HOXA-11、Pgr mRNA表达较对照组显著下降(P＜0.05),而Esr2 mRNA表达显著升高(P＜0.05).结论:COH引起HOXA-10、HOXA-11、Pgr mRNA表达下降,Esr2 mR-NA表达升高,致使围着床期内膜准备不足,子宫内膜容受性下降.
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胚胎植入前遗传学诊断应用进展
胚胎植入前遗传学诊断(PGD)正高速发展并逐渐应用于临床,这使不孕不育的夫妇不仅能喜得贵子,并且能实现优生优育.与传统的产前诊断相比,其具有非侵入性,更易为舆论、伦理所接受等优点.但同时,也有误诊、污染等不足.目前PGD的分析技术主要有聚合酶链反应和免疫荧光原位杂交等,许多新技术正不断发展.国外PGD正逐渐被应用,并已取得一定成果.国内的PGD技术也在逐步推广,但发展相对缓慢.本文就近年来PGD应用进展做简要综述.
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Indian Hedgehog信号通路在着床过程中的作用
胚胎着床是非常复杂的生理过程,既需要胚胎具有着床能力,又需要子宫处于接受态.在围着床期,Indian Hedgehog(IHH)作为受孕酮调节的靶基因,对胚泡的黏着、植入和子宫内膜蜕膜化具有重要意义.本文就着床过程中起重要作用的Ihh信号通路做一综述.
关键词： 胚胎植入 Hedgehog蛋白质类 印第安刺猬蛋白(Ihh) 蜕膜化 孕酮 综述 -
胚胎培养液中 IG F-Ⅱ与胚胎的关系
目的：比较在不同级别胚胎间人胰岛素样生长因子-Ⅱ（ IGF-Ⅱ）表达的不同，旨在从分子水平完善卵泡和胚胎发育的形态学评分标准，挑选出发育潜力更高的优质胚胎，提高体外受精-胚胎移植（ IVF-ET）的临床妊娠率。方法选取2013年2月～6月期间因单纯性输卵管阻塞行第一周期IVF-ET 患者31例，挑选正常受精的胚胎，收集其第3天移植后的胚胎培养液，ELISA法测其中IGF-Ⅱ的表达水平。结果不同级别胚胎间胚胎培养液中IGF-Ⅱ的分泌浓度：I级＞Ⅱ级＞Ⅲ级，且各组之间比较有统计学意义（P＜0．05），Ⅲ级与Ⅳ级间比较无统计学差异（ P＞0．05）。结论胚胎培养液中IGF-Ⅱ的定量检测有望在临床实践中成为选择胚胎的一个参数，作为辅助形态学评估选择胚胎移植，预测IVF的妊娠率。
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胚胎植入障碍与先兆子痫
先兆子痫是妇产科临床上造成孕产妇和围产儿死亡的主要原因之一,但由于病因学尚未得到阐明,它仍被称为一种"理论性疾病".如何有效地预测、诊断、治疗和预防先兆子痫,一直是全世界生殖医学界倍加关注的问题.越来越多的证据表明胚胎植入障碍与先兆子痫的发生直接相关,因而探讨生理和病理状况下滋养层细胞与母体子宫之间的对话机理可能成为阐明先兆子痫发病机理的重要突破口.
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Survivin在小鼠胚胎植入过程中的动态变化
目的:检测Survivin在围植入期小鼠子宫内膜组织中的表达,探讨其在胚胎植入过程中的作用.方法:选择成年雌性昆明小白鼠42只,阴道脱落细胞涂片法确定动情周期.将处于动情周期的雌鼠与性成熟雄鼠合笼后次晨检查阴道分泌物涂片,有精子者记为妊娠0d.采用免疫组织化学和RT-PCR法分别检测妊娠0,3.5,4.5,5.5,6.5,7.5及9d各组子宫内膜组织中Survivin蛋白及mRNA水平的变化.结果:①Survivin蛋白在妊娠0d小鼠子宫内膜组织中表达较低,其阳性产物光密度(OD)值为0.058 1.之后逐渐增高,至妊娠5.5d达峰值为0.140 7.之后逐渐下降,至妊娠9d降至0.074.统计学检验结果提示:Survivin蛋白在胚胎植入期(4.5d,5.5d,6.5d)表达较高,其OD值与胚胎植入前期(0d,3.5 d)及胚胎植入后期(7.5d,9 d)的差异均有显著性(P＜0.05).②Survivin mRNA的表达在妊娠0d小鼠子宫内膜组织中较低,其与内参相比的相对表达量为0.330 4.之后逐渐增高,至妊娠6.5d达峰值为1.310 7.之后逐渐下降,至妊娠9d降至0.598.统计学检验结果提示:Survivin mRNA在胚胎植入期表达较高,其OD值与胚胎植入前期及胚胎植入后期的差异均有显著性(P＜0.05).③Survivin 蛋白及mRNA在胚胎植入后期小鼠子宫内膜组织中的表达略高于胚胎植入前期,但差异无显著性(P＞0.05).结论:Survivin在胚胎植入前期和后期均低表达,植入期高表达.这种变化提示Survivin是影响胚胎植入的重要因素之一.
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sHLA-G检测在胚胎植前筛选的临床应用价值研究
目的 探讨胚胎植前筛选以提高胚胎移植成功率.方法 单胚培养体外受精胚胎,ELISA方法检测移植成功组与失败组胚胎培养上清液sHLA-G水平,并比较培养上清中sHLA-G与胚胎HLA-G mRNA表达的相关性.结果 胚胎移植成功组sHLA-G水平显著高于未成功受孕组;sHLA-G＞10 ng/ml移植组受孕成功率60.9%,sHLA-G＜5 ng/ml成功率11.5%.结论 sHLA-G是植前筛选良好指标,能提高胚胎移植成功率.
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PCR定量分析胚胎植入前后子宫内膜基质细胞中IL-15基因表达的变化
目的 进一步确证胚胎植入过程中,在绒毛膜滋养细胞作用前后,IL-15基因在子宫内膜基质细胞中的表达的变化.方法 建立早期妊娠期绒毛膜滋养细胞与子宫内膜基质细胞的共培养模式,24 h后分离这两种细胞,获得IL-15基因,运用PCR技术扩增后电泳凝胶经激光扫描显影和数字分析,定量地体现子宫内膜基质细胞在胚胎种植前后IL-15基因表达的差别,并进行统计学分析.结果 绒毛膜滋养细胞作用前后,IL-15在子宫内膜基质细胞中的PCR显影差异有统计学意义(P＜0.05).结论 胚胎种植期,在绒毛膜滋养细胞的作用下,子宫内膜基质细胞中IL-15的基因表达显著增强,为研究不孕等生殖疾病发生机制提供依据.
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1例胚胎移植后发生尿潴留的护理体会
1978年第一例试管婴儿Louise Brown诞生至今,体外受精与胚胎移植(俗称试管婴儿)技术已比较成熟地为不孕患者解决了生育问题.目前,国际上试管婴儿的成功率约为30%～40%,为了进一步提高试管婴儿的成功率,我们不断摸索和总结经验,2003年开始我们应用在膀胱充盈、B超引导下进行胚胎移植共1 131例,其中验血HCG阳性502例,血HCG阴性629例,成功率约44.4%.在膀胱充盈、B超引导下进行胚胎移植可以更清晰地看清胚胎移植(简称ET)管沿着宫颈管进入子宫腔的全过程,而且当ET管进入子宫腔时,我们可以顺利地将胚胎植入子宫内膜.
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胚胎植入与肿瘤侵袭转移的相似性
随着生物信息学、人类基因组计划、功能基因组学及免疫学等多学科的飞跃进展,人类对生命科学的探索已达到分子甚至量子水平,但对胚胎植入及肿瘤侵袭转移等基本生命现象本质机制的认识仍然茫然无知.70%的侵袭性肿瘤患者在确诊时已有微转移或可见转移灶,术后40%-60%的病人发生复发与转移,80%-90%的肿瘤患者死于侵袭转移及相关并发症[1-3].同样近30年来体外受精-胚泡移植的成功率一直徘徊在20%-40%.为什么?也许人类还缺乏一个整体的思维来探究复杂的生命现象.自1829年Lobstein等提出肿瘤胚胎性起源概念以来,胚胎植入与肿瘤侵袭转移生物学行为的相似性研究日益受到重视."假恶性"的囊胚滋养层细胞及恶性肿瘤细胞在细胞增殖分化、侵袭信号转导通路、血管侵蚀和新生血管形成、免疫逃逸及细胞凋亡等诸多方面具有惊人的相似性[4].两者的交叉性研究不仅对各自学科发展有推动作用,更重要的意义在于对揭示生命的起源、肿瘤与胚胎细胞发育生物学及胚胎植入和肿瘤侵袭转移等复杂生命现象的内在机制可能找到突破口.
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植入前遗传学诊断
植入前遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis, PGD)是产前诊断的早期形式.植入前遗传学诊断在20世纪80年代末期开始应用于遗传性疾病的携带者,以避免有遗传性疾病的患儿出生.1990年Handyside等[1]报道了世界第1例植入前性别诊断婴儿的出生.至1997年为止,全世界已有超过 1 200 个治疗周期和160个经PGD出生的正常婴儿[2].相比于产前诊断,PGD在胚胎植入子宫前即已知道胚胎是否有遗传性问题并选择无遗传性问题的胚胎进行移植,因此PGD可以避免选择性流产和多次流产对妇女身心的伤害.PGD涉及体外受精、胚胎移植、遗传学、胚胎活检和单细胞诊断等多个领域.以下将首先介绍可进行PGD的遗传性疾病,然后逐步介绍胚胎活检和单细胞诊断技术及PGD在本中心的临床应用.
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子宫内膜蠕动波研究进展
胚胎成功植入与子宫内膜容受性密切相关。评估子宫内膜容受性的金标准是子宫内膜活检，其是一项侵入性操作，对子宫内膜有一定损伤性，故未广泛应用于临床。在正常月经周期中，子宫内膜可随卵巢内固醇激素变化而呈周期性波状运动，这种波状运动与精子运输、经血排出、胚胎植入及维持妊娠有关，可作为评估子宫内膜容受性的一项新指标［1］。现将子宫内膜蠕动波相关研究进展总结如下，以便更好指导临床工作及提高辅助生殖技术临床妊娠率。
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TGF-β与妊娠期高血压疾病
妊娠的顺利进行有赖于母体内环境的稳定,特别是胎盘局部的正常免疫调节.转化生长因子β(TGF-β)作为一种重要的Th2类细胞因子,参与Th1/Th2在妊娠期的生理性改变,如促进胚胎植入、维持母胎耐受.但在体内调节紊乱时,异常表达的TGF-β可能通过抑制滋养细胞的侵入致使螺旋动脉重铸障碍,从而参与发生妊娠期高血压疾病.近的研究还发现,TGF-β在肾脏局部的作用可能与妊娠期高血压疾病的蛋白尿产生有一定联系.
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辅助生殖技术中的伦理问题
1978年7月25日,世界上第一例试管婴儿Louise Brown在英国诞生.它标志着辅助生殖技术在临床应用的成功.我国于1989年诞生了第一例试管婴儿.近年这一领域更获得了飞跃的发展.但随着辅助生殖技术的不断发展、新技术的不断诞生,她对社会的影响也是始料未及的.曾有报道,母亲替女儿怀孕,即将女儿的胚胎植入自己的子宫,妊娠并生下了孩子.那么,她是孩子的母亲呢,还是孩子的"外祖母"?许许多多的新技术令社会的道德观念和医学、伦理学和法学都面临着巨大的挑战,激烈的辩论有可能孕育着深刻的变化.
