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植入前小鼠胚胎活检的实验研究
目的以小鼠胚胎进行植入前胚胎活检的研究.方法通过输卵管冲洗,获得4~8细胞期胚胎,用"一"字机械法和化学法分别对4、8细胞的胚胎进行活检后继续培养,比较其囊胚形成及孵出情况.结果"一"字机械法胚胎活检后胚胎的囊胚形成率(4细胞期78.8%,n=66;8细胞99.0%,n=100)、囊胚孵出率(4细胞期84.6%,n=52;8细胞期94.9%,n=99);化学法胚胎活检后胚胎的囊胚形成率(4细胞期74.1%,n=58;8细胞期92.9%,n=127)、囊胚孵出率(4细胞期88.4%,n=43;8细胞期95.8%,n=118).两法均与未活检对照组比较无显著性差异(P>0.05),且两者的囊胚形成率、囊胚孵出率均无显著性差异(P>0.05).Logistic回归分析表明,细胞数越多越有利于胚胎进一步发育;而是否活检与活检方法对胚胎发育潜能无显著影响.结论用"一"字机械法在小鼠胚胎4或8细胞期进行单个卵裂球活检,不影响胚胎的发育,是一种较好的胚胎活检方法.
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下腔静脉滤器植入术后继发下腔静脉与下肢深静脉血栓2例报告
病例1,男,39岁.入院前2周突发头晕、胸闷、气短,超声和核素显像检查均提示右小腿深静脉血栓形成,肺灌注/通气显像检查示双肺多发肺栓塞(累及10个肺段),经溶栓治疗后,1个月后再次行肺灌注/通气显像检查示双肺血流灌注明显改善.为防止再次发生肺栓塞,于3周后行下腔静脉滤器植入术,手术过程中造影证实下腔静脉及右髂总、髂外静脉通畅,于第2腰椎水平撑开滤器.此患者下腔静脉滤器植入前后D-二聚体数值未见明显进行性升高,血小板记数在正常范围内.
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植入前遗传学诊断的方法及应用
植入前遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis,PGD)是指对体外受精胚胎的遗传物质进行分析,诊断胚胎是否有某些遗传异常,确定该胚胎是否适合移植,选择不致造成遗传学疾患的胚胎植入宫腔,从而获得正常胎儿的诊断方法.PGD的步骤包括激素诱导超促排卵,获得卵母细胞,用常规体外受精(in vitro fertilization,IVF)或卵母细胞单精子显微注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)受精,体外培养至6~8个细胞期或囊胚期,在此期间通过显微操作对胚胎或卵母细胞进行活检,取得单个或多个细胞进行遗传学检测,再将2~3个经分析正常的胚胎移植入子宫腔内.PGD是一种更早期的产前诊断方法,避免了选择性流产和多次流产可能造成的危害以及伦理道德观念的冲突.
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动态优化AV/VV间期心脏再同步化治疗慢性心力衰竭的疗效观察
目的:观察动态优化AV/VV间期心脏再同步化治疗(cardiac resynchronization therapy CRT)慢性心力衰竭的中远期疗效。
方法:19例心衰晚期患者接受CRT治疗,分别于植入前、植入术后1周、3、6、12个月在心脏彩超指导下优化房室间期(AV)/室室间期(VV)治疗,同时观察心腔结构、二尖瓣返流、主动脉射血速度时间积分、心电图、脑钠肽(BNP)检查等,评价其血流动力学改变。 -
具有休息频率功能的起搏器对房性心律失常近期影响研究
目的:探讨具有休息频率功能的起搏器对房性心律失常近期影响,评估其临床疗效和安全性。
方法:选择植入Identity Adx DDD 5286型双腔起搏器病态窦房结综合症的患者39例。起搏器植入后不打开休息频率,保持起搏器出厂设置;术后3个月随访时程控为在DDD模式下打开休息频率,共随访6个月。比较起搏器植入前后及打开心房滞后模式后心房起搏百分比,DCG房性心律失常发生情况。 -
慢性心力衰竭患者心脏再同步治疗的疗效评价
目的观察双心室起搏在心力衰竭治疗时改善心功能和逆转左心室重塑的作用.方法4例慢性心力衰竭患者植入双心室起搏器,心功能NYHA分级Ⅲ~Ⅳ级,射血分数<40%,伴QRs>140ms.在起搏器植入前、双心室起搏治疗3~12个月后进行一系列评价.
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使用微阵列分析胎儿先天性心脏缺陷的产前基因诊断
本文发表在2011年10月的《Prenatal Diagnosis》杂志上.微阵列技术具有高分辨率、高通量和高准确性等优点,已成为一种重要的工具,用于产前、产后和植入前诊断染色体亚微结构异常.
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单基因疾病的植入前遗传学诊断研究进展
植入前遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis,PGD),作为一种比普通产前诊断更早的方式,在胚胎着床之前即对配子或胚胎进行遗传物质分析,选择没有遗传物质异常的胚胎移植.自1990年诞生了世界第1例经植入前遗传学诊断的健康女婴以来[1],全世界进行了7 000多个PGD周期,已经有超过1000个经PGD诊断的正常孩子出生[2].
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应用多重巢式及荧光聚合酶链反应技术对β地中海贫血进行植入前遗传学诊断
目前,国外对β地中海贫血的植入前遗传学诊断,主要应用巢式PCR结合突变检测技术[1,2].但由于β地中海贫血基因的高度异质性,我国β地中海贫血突变基因类型与国外报道的不同.本研究根据我国常见的β地中海贫血突变基因类型,应用多重巢式PCR及荧光PCR技术,于2003年对4例β地中海贫血患者进行了临床植入前遗传学诊断,获得1例临床妊娠.现将结果报道如下.
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应用Karyomap基因芯片进行单基因疾病的植入前遗传学诊断及筛查二例分析
目前,单基因疾病的植入前遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis, PGD)有多种方式,较多采用植入前单体型分析(preimplantation genetic haplotyping, PGH),即对致病基因位点上下游的遗传学标记进行连锁分析,例如致病位点相关的短串联重复序列(short tandem repeats,STR)或单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点。如果应用STR关联分析,针对每一种单基因疾病必须进行个体化的STR设计,并通过家系验证后才可用于PGD,该过程需要3~4个月并且费用高,而且局限于特定的实验室才能完成。Karyomap基因芯片是针对全基因组的SNP位点设计的芯片,可同时分析近30万个SNP位点,可针对某致病位点进行基因内部或相邻位点的SNP关联分析,不需要个体化STR位点的设计,从而能减少等待时间,加速了实验进程。而且,全基因组SNP分析可进行基因分型,能满足非整倍体筛查的需要。这使得Karyomap基因芯片在PGD方面具有明显优势。如果1对夫妻有遗传性疾病家族史,例如先天性肾上腺皮质增生症(congenital adrenal hyperplasia, CAH)或常染色体显性遗传性多囊肾(autosomal dominant adult polycystic kidney disease,ADPKD),或者其他的可造成严重出生缺陷的单基因遗传病,都可以考虑应用Karyomap基因芯片进行PGD,并且同时进行非整倍体的植入前遗传学筛查(preimplantation genetic screening,PGS)。本研究的目的是探讨应用Karyomap基因芯片进行PGD及PGS的有效性。
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人工耳蜗技术报告(Ⅱ):人工耳蜗团队
1手术医师与听力医师人工耳蜗团队的作用至少应是:确定人工耳蜗的候选者,帮助预期手术的患者在充分了解人工耳蜗手术及装置选件的情况后作出决定,提供必要的医学处置,实施植入手术,植入后设定言语处理程序并予以监测.负有职责的核心人员包括外科医师(耳科医师/耳鼻咽喉科医师)和听力师.植入前关注的焦点在于从医学及听力学角度分析人工耳蜗手术的可行性,处理可能妨碍手术的病症.随着人工耳蜗手术及术后复原,焦点从医学处置转到听力学处理.
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人工耳蜗技术报告(Ⅲ):人工耳蜗植入前的评估和候选
人工耳蜗技术的进步使植入者的术后效果不断提高,人工耳蜗植入的候选者标准也在与时俱进.但归根结底,候选标准总是围绕着三个基本问题:
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人工耳蜗与耳鸣
人工耳蜗( cochlear implant,CI)是一种帮助重度、极重度感音神经性聋患者恢复或获得听力的电子装置.CI能把声音信号变为电信号直接刺激听神经纤维,从而产生听觉[1].在CI用于治疗耳聋的过程中,发现其具有高效抑制和消除耳鸣的作用.到目前为止,以治疗耳鸣为目的的CI植入尚处于探讨阶段,CI对耳鸣的影响也多为回顾性研究,对患者植入前后耳鸣变化的详细对比资料也相对较少.CI能否成为一个治疗耳鸣的有效方法还值得深度研究.
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玻璃体内人工晶状体取出5例
目的:探讨坠入玻璃体内的人工晶状体取出方法.方法:对5例玻璃体内人工晶状体分别采取直接钩取法和玻璃体切除法取出,然后视情况植入前房或后房型人工晶状体.结果:2例采取玻切法取出,其中1例植入前房型人工晶状体,视力恢复到0.5,1例植入后房型人工晶状体,视力恢复到0.8;3例采取直接钩取法取出,其中1例植入前房型人工晶状体,视力恢复到0.4,另2例植入后房型人工晶状体,视力分别恢复到0.8及1.0.结论:两种手术方法对视力影响不大,植入前房型晶状体视力恢复不如植入后房型晶状体.
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应用种植体支抗的临床要点(二)
在第一部分已讨论了使用支抗种植体的适应证,支抗钉植入前的准备和植入后的检查等问题.在这部分将重点讨论支抗种植体的种类和主要结构;不同植入部位的解剖特点和植入微螺钉种植体的注意事项;临床中根据错(牙合)畸形的类型,如何选择适合的植入部位等问题.一、微螺钉种植体的种类和结构1.根据材质分类(1)钛合金:属于生物惰性材料,可与骨组织形成部分骨整合.是目前临床上常使用的微螺钉类型.由于其机械强度要差于不锈钢材质,为了减少植入和取出时折断的可能性,使用的微螺钉直径应在1.5 mm以上为宜.
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小鼠胚卵石蜡切片及免疫组织化学染色方法
石蜡切片法是科研与教学工作中的一种常用实验技术,在细胞生物学、组织胚胎学及病理学中应用甚广[1].对于一般肉眼可见的较大组织标本来说,此项技术操作简便 ,标本能够长期保存.胚卵标本是研究人与动物胚胎发生发育过程中必须观察的标本,尤其是植入前的早期胚卵,对研究胚体早期发育的影响因素至关重要.本文对原有的胚卵切片技术进行了改进,为进一步研究人与动物的早期胚卵发育及其影响等诸因素提供了新的技术方法.已有研究表明层粘连蛋白(laminin,LN)在胚胎粘附、着床过程中发挥重要作用[2,3].本实验利用植入前各阶段的早期胚卵,以单个胚卵石蜡包埋切片技术为手段 ,通过免疫组化染色研究LN在小鼠早期胚卵中的分布,摸索出一套特异性强的针对单个胚卵进行免疫组化染色的方法,为进一步研究LN在小鼠早期胚卵中的免疫定位及分布奠定了基础.
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植入前遗传病的诊断
植入前遗传学诊断(preimplantation genentic diagnosis,PGD)又称着床前产前诊断.从狭义上讲是指对体外受精(in vitro fertilization)的胚胎在其被移植入子宫之前,利用一些先进的技术对带有的已知致病因素进行筛查,从而将正常胚胎移植入子宫内的一种方法.从广义上讲,还应包括对精子和卵子的选择,将形态和功能正常的配子受精,以利优生优育.近10年来,随着诊断技术的发展和辅助生育技术的进步,PGD不但成为一种可能,而且成为一种必要的检测手段,现将此方面的一些进展,综述如下.
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遗传外重新编程中的DNA甲基化
遗传外重新编程(epigenetic reprogramming)是一个充满生机和活力的课题,它主要涉及基因组DNA的甲基化/去甲基化和核小体核心组蛋白的甲基化和乙酰化,还有相关的基因印记.大量的体外实验表明,遗传外重新编程在哺乳动物的胚胎发育中起关键性的作用,由此推测克隆胚胎的低成功率(大量重组卵卵裂受阻、囊胚形成受阻)的原因可能是遗传外重新编程的不彻底性.就遗传外重新编程中的基因组DNA甲基化/去甲基化过程及遗传外重新编程与克隆的关系作简要的阐明.
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072吸烟对卵母细胞及植入前胚胎透明带厚度的影响
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039 囊胚滋养外胚层细胞活检用于β-地中海贫血的植入前诊断