首页 > 文献资料
-
两种消毒方式对壳聚糖水凝胶温敏性能及模型蛋白体外缓释性能的影响
目的：探索两种消毒方式对壳聚糖水凝胶温敏性能及缓释性能的影响，为壳聚糖水凝胶临床应用前消毒方式的选择提供依据。方法在制备壳聚糖温敏水凝胶前，采用两种方式进行消毒处理。（1）传统组：高压蒸汽消毒壳聚糖－醋酸溶液；（2）改良组：高压蒸汽消毒壳聚糖粉末。检测两组凝胶的成胶时间、旋转粘度；扫描电镜观察表面及截面形貌；傅立叶红外光谱检测特征性吸收峰；采用牛血清白蛋白（BSA）作为模型蛋白，观测体外缓释性能；SDS-PAGE检测缓释后的蛋白完整性。结果采用两独立样本的t检验进行统计。结果37℃时，传统组成胶时间明显长于改良组（t＝61.677，P＝0.000）；改良组的旋转粘度在37℃时达15000 mPa.s，传统组37℃时粘度为1560 mPa.s，40℃时上升至11500 mPa.s；两组凝胶表面致密完整，截面均呈三维立体网状多孔结构，传统组孔隙大于改良组；两实验组与未消毒壳聚糖的吸收光谱基本一致；两组均有良好的缓释性能，改良组缓释性能更佳（t＝61.415，P＝0.000），且释放出的模型蛋白分子结构完整。结论采用改良消毒方式的壳聚糖水凝胶成胶时间更短，温敏性能更佳，缓释性能良好，且与传统组一样能保持缓释蛋白结构完整性。
-
磁性温敏水凝胶的制备及其在交变磁场中的热效应研究
目的 制备磁性温敏水凝胶并考察其在体外交变磁场中的升温情况以及影响因素.方法 以混旋丙交酯、乙交酯和聚乙二醇1500为原料采用开环聚合法合成聚丙交酯-乙交酯-聚乙二醇-聚丙交酯-乙交酯(PLGA-PEG-PLGA)共聚物,加入不同剂量的磁流体配制成不同浓度的磁性温敏水凝胶,设定不同交变磁场电流,分别观察磁流体浓度和交变磁场电流对体系升温的影响.结果 所制备的聚丙交酯-乙交酯-聚乙二醇-聚丙交酯-乙交酯共聚物具有良好的温度敏感性,加入磁流体后仍可保持其原有的温敏性:磁流体5、10、20 min的温升与磁流体的浓度呈直线正相关关系(r=0.998 5、0.989 3和0.971 1,n=3),与磁场电流呈直线正相关关系(r=0.994 8、r=0.997 7和0.999 4,n=4).结论 磁性温敏水凝胶具有良好的温度敏感性,并且在体外交变磁场中能够很好的升温并达到水凝胶相变温度使其发生相变.并可通过改变磁流体的浓度和交变磁场电流来实现对体系温度的控制.
-
载高乌甲素可注射壳聚糖/β-甘油磷酸钠温敏水凝胶的制备与性能研究
目的 制备载高乌甲素(LA)的壳聚糖/β-甘油磷酸钠(CS/β-GP)温敏水凝胶,并研究其凝胶形成的相转变机制和体外释药性能.方法 以生物可降解壳聚糖为载体,以β-甘油磷酸钠为促凝剂制备载高乌甲素可注射壳聚糖/β-甘油磷酸钠温敏水凝胶,采用动态透析法考察其体外释药性能,运用流变学方法研究凝胶形成的相转变机制.结果 优化的制备载高乌甲素可注射壳聚糖/β-甘油磷酸钠温敏水凝胶的工艺条件为:β-甘油磷酸钠质量浓度560 mg·mL-1、壳聚糖质量浓度22 mg·mL-1、酸溶剂为0.1 mol·L-1冰乙酸、壳聚糖/β-甘油磷酸钠体积比8.75∶1.25,在37℃下其凝胶化时间为338 s.壳聚糖/β-甘油磷酸钠水凝胶对高乌甲素具有缓释作用,其释药行为符合Higuchi模型和Korsmeyer-Peppas模型,为溶散释放.流变学研究表明,壳聚糖/β-甘油磷酸钠温敏水凝胶属于触变体系,具有类似非牛顿流体的剪切变稀的性质,表现出一种“类固体”的凝胶行为.结论 成功制备了具有较好弹性及强度的载高乌甲素可注射壳聚糖/β-甘油磷酸钠温敏水凝胶,且其体外释药具有明显的缓释特征.
-
智能水凝胶在药物控释系统中的应用
目的综述了智能水凝胶在药物控释系统中的应用.方法根据近期国内外文献报道介绍智能水凝胶在药物控释系统中的新研究进展,重点阐述了温敏、pH敏感水凝胶作为释药载体的潜力和在胰岛素自调式释药系统中的应用.结果与结论智能水凝胶设计药物控释系统具有其广阔的应用前景.
-
人牙周膜细胞复合壳聚糖-胶原温敏水凝胶异种移植构建可注射骨组织的研究
目的 观察人牙周膜细胞复合壳聚糖-胶原温敏水凝胶异种移植小鼠皮下的组织再生,评价其作为可注射骨组织的可行性.方法 将壳聚糖、胶原、β-磷酸甘油钠按比例混合构建温敏性水凝胶.通过活/死细胞染色法检测人牙周膜细胞(perio-dontal ligament cells,PDLCs)在壳聚糖-胶原水凝胶三维培养中的存活.PDLCs成骨预诱导后复合水凝胶注入小鼠背部皮下,6周后取出植入物,通过HE、Masson染色法观察组织的再生以及胶原纤维的形成.结果 壳聚糖-胶原水凝胶可支持PDLCs的三维培养,体内实验表明无刺激性.复合细胞后的凝胶支架在动物皮下可形成血管化包块,结缔组织和胶原纤维形成明显高于无细胞的对照组.结论 壳聚糖-胶原温敏水凝胶是一种理想的可注射支架,复合PDLCs有望构建可注射骨组织,修复骨缺损.
-
骨髓间充质干细胞复合温敏水凝胶支架的制备
背景：壳聚糖及其衍生物制备的支架对细胞迁移和神经轴突再生有重要作用。壳聚糖及其衍生物的组织相容性好，易使干细胞在其表面附着生长，在神经组织工程具有较为广阔的应用前景。
目的：制备适宜骨髓间充质干细胞生长的壳聚糖/壳聚糖季铵盐/甘油磷酸钠温敏性水凝胶细胞支架，观察骨髓间充质干细胞在细胞支架中的生长情况。
方法：将壳聚糖进行季铵盐化改性处理，通过傅里叶变换红外光谱分析谱检测确定其生成。实验以壳聚糖与壳聚糖季铵盐配比为8∶1成功制备出较为稳定的壳聚糖/壳聚糖季铵盐/甘油磷酸钠温敏性温敏水凝胶细胞支架，观察成胶情况，并进行生物安全性检测。
结果与结论：实验在傅里叶变换红外光图谱上发现了季铵基基团的特征峰。细胞毒性实验显示，水凝胶浸提液干预的大鼠骨髓间充质干细胞无毒性。急性全身毒性实验显示，浸提液对大鼠体质量增加无明显影响，支架生物安全性较好。扫描电镜观察显示，骨髓间充质干细胞在细胞支架中能正常的生长和增殖。结果证实，实验成功制备了壳聚糖/壳聚糖季铵盐/甘油磷酸钠温敏性水凝胶细胞支架，适合骨髓间充质干细胞生长和增殖。 -
脂肪间充质干细胞条件培养基制备温敏凝胶外用治疗皮肤烫伤
背景:有研究显示脂肪干细胞参与烫伤后皮肤组织的修复,但利用脂肪干细胞分泌物制备水凝胶,并治疗皮肤烫伤的研究尚未见报道.目的:分析人脂肪干细胞条件培养基水凝胶外用治疗小鼠皮肤烫伤模型的疗效.方法:采用酶解联合贴壁培养法,从脂肪组织培养获得脂肪干细胞并进行鉴定.取稳定增殖期细胞,收集其条件培养基,加入壳聚糖、甘露醇、β-甘油磷酸钠和透明质酸等制备温敏水凝胶,同时用新鲜脂肪干细胞完全培养基制备水凝胶.24只C57BL/6小鼠背部脱毛后用95℃铝块烫伤10 s快速建立3度皮肤烫伤模型,右侧以脂肪干细胞条件培养基水凝胶每天涂抹2次;左侧使用脂肪干细胞新鲜培养基水凝胶每天涂抹2次,连续涂抹7 d,观察愈合时间与愈合进程,计算愈合率,在烫伤后第4,14,28天取材进行苏木精-伊红染色观察组织病理学变化.结果与结论:①人脂肪间充质干细胞为成纤维状,增殖旺盛,平均倍增时间为55 h,可被诱导分化为成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞,高表达CD29、CD44、CD90和CD105,低表达CD31和CD34,证明其符合间充质干细胞的标准;②用人脂肪间充质干细胞条件培养基制备的温敏水凝胶在4-20℃呈现为清凉透明的黏稠液体,放入37℃15 min变为半固态凝胶;③95℃铝块烫伤小鼠表皮、真皮及皮下脂肪和肌肉组织的正常结构完全破坏,符合严重的3度烫伤标准,伤口面积均大致为3 cm2;④在修复过程中发现,与新鲜培养基水凝胶对照组相比,脂肪干细胞条件培养基水凝胶组创口愈合时间短,伤口整洁,瘢痕增生少,创面组织结构恢复好;⑤脂肪干细胞条件培养基水凝胶组炎症浸润深度、炎症浸润细胞密度、肉芽组织厚度、成纤维细胞密度、新生血管密度和表皮厚度等指标显著好于新鲜培养基水凝胶组,差异有显著性意义(P<0.05);⑥以上结果表明,人脂肪间充质干细胞条件培养基水凝胶可有效促进烫伤皮肤伤口愈合,提高再生皮肤质量.
-
壳聚糖基温敏水凝胶对牙周膜成纤维细胞相容性的影响
目的:体外评价壳聚糖季铵盐/甘油磷酸(CS-HTCC/GP)温敏水凝胶的细胞相容性.方法:体外培养人牙周膜成纤维细胞(HPDLCs),采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定不同浓度的CS-HTCC/GP温敏凝胶浸提液对1、3、5d细胞增殖和碱性磷酸酶(ALP)活性的影响.采用扫描电镜和透射电镜观察对细胞超微结构的影响.采用SSPS13.0软件包对数据进行统计学分析.结果:免疫组化显示,培养的细胞波形丝蛋白染色阳性,角蛋白染色阴性,证明体外原代培养细胞及传代细胞均为中胚层组织来源,且无上皮来源细胞混杂.不同浓度的CS-HTCC/GP温敏水凝胶浸提液均有促进HPDLCs增殖的作用,在第3天和第5天,差异有高度显著性(P＜0.001).各组均可提高ALP活性.第2组和第3组在第5天与第1天ALP表达的提高有高度显著差异(P＜0.001).扫描电镜和透射电镜观察水凝胶浸提液对HPDLCs的超微结构无影响.结论:CS-HTCC/GP温敏水凝胶具有良好的细胞相容性,具有用于牙周局部药物释放系统载体及组织工程支架的潜力.
-
可注射壳聚糖温敏水凝胶对犬骨髓基质细胞生物学行为的影响
目的:探讨可注射壳聚糖(chitosan,CS)基温敏水凝胶对犬骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)生物学活性的影响.方法:利用密度梯度离心法获得犬BMSCs,含10%胎牛血清的L-DMEM培养液进行原代培养并进行初步鉴定.合成壳聚糖温敏水凝胶,光镜下观察BMSCs在凝胶中的存活情况.制备凝胶浸提液,检测其对细胞增殖分化的影响.采用SPSS13.0软件包对实验数据进行单因素方差分析.结果:犬BMSCs可在壳聚糖温敏凝胶中存活.壳聚糖浸提液组对BMSCs的增殖与正常培养液组相比,无显著性差异;但在培养第1、4、7天时,矿化培养液组和矿化浸提液组的细胞增殖率明显低于未矿化的完全培养液组和壳聚糖浸提液组,第10天时,4组间无显著性差异.壳聚糖矿化浸提液组碱性磷酸酶和骨钙素活性明显提高.结论:制备的壳聚糖温敏水凝胶具有良好的生物相容性,可进行水凝胶复合BMSCs的体内外实验研究.
-
壳聚糖基温敏水凝胶对牙周常见致病菌的抑制作用
目的:评价壳聚糖一壳聚糖季铵盐/甘油磷酸(CS-HTCC/GP)温敏水凝胶对3种牙周常见致病菌的体外抑菌活性.方法:采用琼脂扩散法测定CS-HTCC/GP温敏水凝胶对牙龈卟啉单胞菌、中间普氏菌和伴放线放线杆菌的小抑菌浓度(MIC)和抑菌环直径.采用SPSS13.0软件包对数据进行t检验.结果:CS-HTCC/GP温敏水凝胶对牙周常见致病菌-牙龈卟啉单胞菌、中间普氏菌和伴放线放线杆菌均有较强的抑菌活性.与抗菌剂联合后,无论是水凝胶基质还是抗菌剂,抑菌活性均明显增强.结论:CS-HTCC/GP温敏水凝胶不仅作为药物载体参与组成局部药物释放系统,同时作为活性因子参与抑菌过程.
-
温敏水凝胶在智能给药系统中的应用
温敏水凝胶能随环境温度的变化而发生可逆性的体积变化,利用这种性质,将其应用于给药系统可以实现响应环境温度变化的智能化给药.在这种新型的给药系统中,温敏水凝胶可以是骨架材料,也可制成控释膜、微球、胶团等形式.本文介绍温敏水凝胶的性质以及在给药系统中的应用和释药机理.
-
甲氨蝶呤皮下注射用原位凝胶的研制
以壳聚糖-甘油磷酸钠温敏水凝胶为载体,构建甲氨蝶呤皮下注射用原位凝胶.以壳聚糖和甘油磷酸钠的用量为自变量,黏度和胶凝时间为因变量,通过星点设计-效应面法优化处方.结果表明,壳聚糖和甘油磷酸钠的优化用量为1.69％和13.03％.此条件下制得的凝胶黏度为(184.0±12.5) mPa·s,胶凝时间为(6±2) min,pH值为7.01±0.05,并且冻干后能在30d内保持稳定.
-
内镜超声监测5-氟尿嘧啶温敏水凝胶治疗胰腺癌的实验研究
目的 利用内镜超声观察PLGA-PEG-PLGA-5-氟尿嘧啶温敏水凝胶对胰腺癌进行的治疗效果.方法 (1) PLGA-PEG-PLGA-5-氟尿嘧啶温敏水凝胶的体外释放实验:测定不同时间点浸出液药物的浓度,计算释放量；(2)将胰腺癌细胞株SW1990皮下成瘤裸鼠50只随机分为5组,每组10只.A组瘤内注射PLGA-PEG-PLGA-5-氟尿嘧啶温敏水凝胶4 mg/kg;B组瘤内注射PLGA-PEG-PL-GA-5-氟尿嘧啶温敏水凝胶1mg/kg;C组瘤体内注射5-氟尿嘧啶注射液4 mg/kg;D组瘤体内注射瘤体内注射PLGA-PEG-PLGA基质4 mg/kg;E组为空白对照组.于给药前、给药后3、7、10、14 d应用内镜超声观察裸鼠肿瘤结节的生长及声像图,绘制肿瘤生长曲线；14 d时处死动物,称瘤重,计算抑瘤率；行HE染色,观察不同组病理结果.结果 (1)5-氟尿嘧啶温敏水凝胶药物释放率第1天为21.6％,第3天33.8％,第5天为44.3％,第8天为63.6％,第10天为76.3％,第14天为91.8％.(2)内镜超声测量不同时段瘤体大小,A组、B组瘤体与其他组相比明显缩小,差异具有统计学意义(P＜0.05).超声内镜下图像特点与病理结果具相关性.结论 PLGA-PEG-PLGA-5-氟尿嘧啶温敏水凝胶在14 d内能在体外较稳定地持续释放,对人胰腺癌细胞株SW1990有持续抑制作用.该剂瘤内注射可明显抑制胰腺癌瘤裸鼠瘤体的生长,凝胶状制剂较液态制剂在瘤体内固定性好,内镜超声监测下5-氟尿嘧啶温敏水凝胶间质化疗胰腺癌的操作方便、安全；PLGA-PEG-PLGA-5-氟尿嘧啶温敏水凝胶制剂具有一定的潜在临床应用价值.
-
PLGA-PEG-PLGA温敏水凝胶的制备及其流变学研究
目的：合成不同的PLGA-PEG-PLGA温敏水凝胶，并研究水凝胶相变温度及流变学与原料比例的关系。方法：以混旋丙交酯(DL-lactide)、乙交酯(Glycolide)和PEG为原料，异辛酸亚锡为催化剂，采用开环聚合法，通过改变投料配比和PEG的分子量，制备PLGA-PEG-PLGA嵌段共聚物。倒转试管法测定共聚物水溶液的相变温度和沉淀温度；同时用Anton Paar MCR301对水凝胶流变学进行研究。结果：原料比例不同，合成的水凝胶流变学参数和相变温度也不同。结论：改变聚乙二醇的分子量和丙交酯与乙交酯的比例来控制合成共聚物的流变学参数以及相变温度，也可以通过改变共聚物的浓度来小范围地调节其流变学参数和相变温度。
关键词： PLGA-PEG-PLGA 温敏水凝胶 相变温度 流变学 -
CS/HACC/GP温敏水凝胶复合MSCs的实验研究
目的 制备壳聚糖(CS)/壳聚糖季铵盐(HACC)/甘油磷酸钠(GP)温敏性水凝胶,检测其成胶时间、超微结构、渗透压、生物安全性等性质,将其和骨髓间充质干细胞(MSCs)复合培养,观察MSCs的生长情况.方法 制备壳聚糖季铵盐,将壳聚糖/壳聚糖季铵盐/甘油磷酸钠按一定配比制备温敏性水凝胶,观察其成胶情况、内部超微结构,测量孔隙率、孔径大小,评估其降解情况,进行生物安全性检测.将MSCs与支架复合培养,倒置显微镜观察凝胶表面细胞生长情况,扫描电镜观察凝胶内部细胞的生长、增殖情况.结果 成功制备HACC,水凝胶37℃时10分钟可成胶,生物安全性好,渗透压为290～310 mmol/kg,水凝胶无细胞毒性,其浸提液对小鼠体重增加无影响.扫描电镜见内部结构多空疏松的三维网状结构,孔径50～100um,孔隙率≥85％,降解时间约12周.MSCs在水凝胶中能正常生长、增殖.结论 本实验证明CS/HACC/GP温敏水凝胶孔隙率、孔径大小合适,无细胞毒性,适合MSCs生长、增殖,具有较大的潜力成为神经组织工程中的细胞支架.
-
盐酸布替萘芬阴道用温敏水凝胶的制备及体外释放度的考察
目的:制备盐酸布替萘芬阴道用温敏水凝胶并考察其体外释放度.方法:以泊洛沙姆为基质,筛选佳处方以达到合适胶凝温度,并利用高效液相色谱法(HPLC)建立含量测定方法考察体外释放度.结果:结果显示以1％盐酸布替萘芬、0.1％山梨酸钾、2％甘油、5％聚山梨酯80、12％泊洛沙姆407及5％泊洛沙姆188为配方制备的温敏水凝胶在35℃时产生胶凝,体外释放度考察结果显示8h可释放超过90％的药物.结论:本研究制备的盐酸布替萘芬阴道用温敏水凝胶具有很好的温度敏感性及黏附性,具有缓释特性且给药方便,是一种值得开发的药物制剂.
-
牙周膜细胞与壳聚糖温敏水凝胶生物相容性评价
目的:评价壳聚糖温敏水凝胶与牙周膜细胞的生物相容性.方法:将牙周膜细胞接种于壳聚糖温敏水凝胶中固化后进行三维培养.通过MTT法、细胞周期分析,活/死细胞染色法检测牙周膜细胞与壳聚糖温敏水凝胶的生物相容性.结果:壳聚糖溶液加入β-磷酸甘油钠后具有温敏特性,在生理温度下固化形成凝胶.壳聚糖水凝胶提取液对细胞增殖没有影响,并可提高细胞S期的比例.牙周膜细胞在壳聚糖水凝胶中三维培养环境下大部分可存活.结论:壳聚糖温敏水凝胶具有良好的生物相容性,有望应用于牙周组织工程.
-
甲氨蝶呤给药系统的研究进展
目的：为甲氨蝶呤（MTX）给药系统的研发及临床应用提供参考。方法：以“甲氨蝶呤”“微球”“温敏水凝胶”“缓释制剂”“长效制剂”“给药系统”“Methotrexate”“Microspheres”“Temperature-sensitive hydrogel”“Sustained-release preparations”“Long-act-ing formulations”“Drug delivery systems”为关键词，组合检索2004年1月－2015年11月在PubMed、中国知网、万方等数据库中关于MTX给药系统的研究文献，对MTX近年来各类新型给药系统的特点进行综述和分析。结果：共检索到相关文献106篇，其中有效文献26篇。用于MTX关节腔缓释系统的给药系统主要有缓释微球和温敏性水凝胶等；用于肿瘤治疗的MTX给药系统有脂质体、纳米粒、微球及复合温敏凝胶体系；目前较新的MTX给药系统以及以无机材料为载体制备的有MTX柔性纳米脂质体、MTX/蒙脱土纳米插层化合物、MTX硫酸钙人工骨缓释剂。结论：采用新型载体和制剂技术制备的MTX给药系统，既可以控制药物释放，降低其口服产生的胃肠道、消化道及肝肾毒性等强烈的全身副作用，又可起到所需的靶向作用，具有良好的应用前景。
-
温敏水凝胶Dex-PCL-HEMA/PNIPAAm的生物学性能
目的:对温度敏感水凝胶葡聚糖接枝聚己内酯-甲基丙烯酸羟乙酯共聚N-异丙基丙烯酰胺(Dex-PCL-HEMA/PNIPAAm)合成及体外降解进行研究,了解水凝胶的体外生物学性能.方法:利用自由基聚合法合成Dex-PCL-HEMA/PNIPAAm,并对其作LCST的测定、内部形貌观察、体外降解、体外控制释放胎牛血清蛋白(BSA).结果:水凝胶的较低临界溶解温度(LCST)为33.2～34.2℃;内部形貌观察到水凝胶的孔径随着Dex-PCL-HEMA的含量的增大而缩小;体外酶降解显示DN水凝胶在前3天降解比较快,在第4～16天间,DN1、DN2、DN3、DN4四种水凝胶的降解率依次增大,16天后基本上不再降解;DN Dex-PCL-HEMA/PNIPAAm凝胶体外释放BSA曲线显示前5小时内释放快,此后逐渐减慢.结论:Dex-PCL-HEMA/PNIPAAm水凝胶保持了其良好的温度敏感性,体外实验显示生物相容性良好,因此可以作为动物实验的材料.
关键词： 温敏水凝胶 聚N-异丙基丙烯酰胺 较低临界溶解温度
