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矿化液对人脂肪基质细胞(hADSCs)成骨分化的影响
目的:比较人脂肪基质细胞(human adipose-derived mesenehymal stem cells,hADSCs)在矿化条件与非矿化条件下分别培养,评价矿化液对其增殖和分化的影响.方法:酶消法原代培养人脂肪基质细胞,再以含地塞米松、β-甘油磷酸钠和维生素C的矿化液进行诱导,MTT检测矿化液对细胞增殖的影响,细胞培养上清液检测碱性磷酸酶(ALP)活性及骨钙素(OCN)含量.结果:矿化液抑制细胞的增殖,提高人脂肪基质细胞ALP活性和骨钙素的含量.结论:人脂肪基质细胞在矿化条件下可以表现出成骨细胞特性.
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矿化液对釉质表层下脱矿的再矿化实验研究
目的评价矿化液对釉质表层下脱矿的再矿化效果.方法通过人工龋方法获得不同程度的釉质表层下脱矿病损.然后每天用矿化液处理釉质脱矿病损l小时,共60天.应用显微X线仪检测釉质脱矿病损区域矿物质含量变化.结果对于轻度的釉质脱矿病损(24小时人工龋),应用矿化液后获得良好的再矿化效果.表现在病损矿物质丧失量降低和病损深度变浅,低矿物质含量升高和表层厚度的增加.对于程度较重的釉质脱矿病损(48小时人工龋),应用矿化液后也出现了再矿化现象.表现在矿物质丧失量的减少和低矿物质含量的升高,但病损体部深度没有明显改变.结论正畸治疗中应用矿化液也许是一种良好的治疗措施.
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牙周膜干细胞向成骨细胞方向分化实验
目的:探讨人牙周膜干细胞(Periodontal ligament stem cell,PDLSCs)向成骨细胞定向分化潜能,从细胞、分子和基因水平分析矿化诱导过程中细胞形态、功能变化.方法:将免疫磁珠分离的人PDLSCs矿化诱导,通过倒置显微镜观察诱导细胞形态变化,ELISA法检测诱导细胞碱性磷酸酶活性(ALPase)、RT-PCR、Western blot及免疫化学染色分析其成骨相关基因、蛋白表达变化,茜素红染色法检测其矿化结节形成情况来诱导细胞做对照.结果:矿化诱导14d,细胞形态呈成骨样短突起、多角形改变,诱导7d、14d ALPase活性显著增强.21d,诱导细胞高丰度表达骨桥素(OPN)、骨钙素(OCN)、牙骨质附着蛋白(CAP)及Ⅰ型胶原(COL Ⅰ)mRNA,而对照组只有COL Ⅰ mRNA弱表达.同时,Western blot及免疫化学染色均显示诱导细胞分泌骨涎蛋白(BSP).21d,仅诱导组形成大量矿化结节.结论:人PDLSCs在矿化液诱导下可向成骨细胞分化,具有成骨细胞的形态、表型和功能特点,有望成为牙周及种植体周围骨缺损修复再生的理想的种子细胞.
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矿化液促进犬牙周膜细胞异位成骨实验
目的: 探讨矿化液对犬牙周膜细胞(PDLCs)体外诱导分化、体内成骨作用的影响.方法: 酶消化法原代培养成年犬前磨牙PDLCs并鉴定.再以含地塞米松、β-甘油磷酸钠和抗坏血酸的矿化液连续诱导PDLCs,观察细胞形态变化,检测骨涎蛋白(BSP)表达碱性磷酸酶(ALP)活性.将诱导14d的细胞接种于钠米羟基磷灰石-胶原-聚乳酸复合支架(nHAC/PLA)上,体外培养5d后植入犬自体皮下,8W取材HE、三色法染色评价骨形成情况.以未诱导细胞为对照.结果:PDLCs波形丝蛋白(VIM)表达阳性,角蛋白(CK)阴性.矿化诱导后强阳性表达BSP,ALP活性也显著升高,提示细胞向成骨样细胞分化.体内移植8 W,组织学见对照组主要形成纤维样组织而诱导组形成大量骨样组织.结论: 矿化液具有促进PDLCs体外向成骨细胞分化和体内成骨作用.
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根尖乳头干细胞在含KH2PO4矿化诱导液中的增殖变化
目的 探讨根尖乳头干细胞在含/ 不含KH2PO4 矿化诱导液中的增殖变化.方法 从未发育完全的根尖孔分离乳头组织,消化提纯出根尖乳头干细胞,分别用含/ 不含KH2PO4 矿化诱导液处理,对照组为DMEM 培养液;通过流式细胞术检测细胞周期,分析对根尖乳头干细胞的增殖变化.结果 在含KH2PO4 矿化诱导液组根尖乳头干细胞的增殖指数高,与其他两组相比有统计学差异(P <0.05).结论 含KH2PO4 矿化诱导液能促进根尖乳头干细胞的增殖能力.
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矿化液对人牙周膜细胞增殖和功能的影响
目的 比较人牙周膜细胞在矿化条件与非矿化条件下增殖和分化的过程,评价矿化液对其功能的影响.方法 人牙周膜细胞原代培养,鉴定.将增殖稳定的细胞分别在矿化条件和非矿化条件下培养,检测其形态、碱性磷酸酶活性、细胞周期等.结果 人牙周膜细胞增殖基本稳定后矿化组与非矿化组细胞分裂增殖指数相似,但前者碱性磷酸酶活性明显较高且持久,表现出较强的钙化能力.结论 人牙周膜细胞增殖基本稳定后加入矿化液对细胞增殖无影响但可明显促进细胞矿化功能,说明人牙周膜细胞在矿化条件下可以表现其成骨特性.
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矿化液对人牙髓干细胞生物学特性的影响
目的 探讨矿化液对人牙髓干细胞(DPSCs)生长特性的影响.方法 用含一定浓度的β-甘油磷酸钠、抗坏血酸和地塞米松的矿化液诱导人牙髓干细胞,通过倒置相差显微镜、透射电镜、免疫细胞化学染色、von Kossa染色方法,观察和检测矿化液诱导后细胞形态、超微结构、表型和矿化基质分泌的变化,以未诱导组为对照.结果 矿化液连续培养7d,人DPSCs细胞形态明显改变,呈牙本质样极化细胞表现,另一侧为增大的胞体;超微结构显示,诱导后的细胞体积增大,核浆比例下降,胞浆细胞器丰富;诱导前细胞不表达牙本质涎磷蛋白(DSPP)和骨钙素(OC),诱导后均表达;连续培养21d,诱导组细胞形成多个矿化结节.结论 矿化液能诱导人DPSCs向成牙本质细胞样细胞分化并产生矿化基质.本研究从细胞水平上揭示了人DPSCs向成牙本质细胞分化机理,为人DPSCs应用于牙髓损伤的修复再生提供了依据.
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氟微量元素矿化液对葡糖基转移酶及乳酸脱氢酶的影响
目的采用氟与微量元素联合配制成以钙、磷为基础,含有氟和微量元素的矿化液,探讨该矿化液对致龋毒力因子--变形链球菌和远缘链球菌的胞外葡糖基转移酶(GTF)和乳酸脱氢酶(LDH)的影响.方法选用国际标准菌株ATCC S.mutans 25175和S.Sobrinus6715为实验菌侏,采用厌氧菌的连续培养技术培养细菌,用微量酶化学分析方法检测矿化液对GTF和LDH酶活性的影响,用菌液的吸光度(ABS)来描述.结果无氟矿化液对GTF酶活性无明显的抑制作用(P＞0.05),而含氟矿化液和氟微量元素矿化液对GTF酶活性有明显抑制作用(P＜0.01),两两比较,尤以氟微量元素矿化液的作用强;氟微量元素矿化液对LDH酶活性具有明显的抑制作用(P＜0.01),而无氟矿化液和含氟矿化液对其无明显的统计学意义(P＞0.05).结论氟微量元素矿化液比单氟矿化液具有更好的抑制致龋毒力因子GTF和LDH酶活性的作用.提示氟与微量元素的联合应用,是其有效的防龋途径之一,同时在调节菌斑生态平衡中起重要作用.
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氟保护漆、矿化液、低浓度氟化物再矿化作用比较
现代口腔正畸技术为无数错颌畸形患者恢复了口腔功能和颜面美观.但是现代口腔正畸治疗中被广泛应用的固定矫治器对错颌畸形患者牙釉质表面所造成的损伤是有目共睹的.目前为止国内外预防和治疗牙釉质脱矿的主要手段仍然是氟化物的局部应用,但是对于氟化物的浓度、成分、再矿化程度等有了进一步的认识和研究.本研究拟应用三种再矿化材料对表层脱矿的离体牙进行再矿化实验研究,通过再矿化前后的纤维硬度分析,找出一种矿化程度高,浓度低,长时间作用的氟化物制剂,从而为治疗已发生的釉质脱矿提供一种方法.
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骨桥蛋白影响矿化液诱导牙髓干细胞成骨分化能力的研究
目的 研究骨桥蛋白(osteopontin,OPN)对矿化液诱导牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)成骨分化能力的影响,并优化其诱导条件.方法 矿化液培养DPSCs作为对照组,在矿化液培养基础上添加适宜浓度OPN作为实验组,在倒置相差显微镜下观察诱导后的DPSCs形态变化;应用茜素红染色法检测矿化结节的形成;采用反转录聚合酶链反应(reversetranscription polymerase chain reaction,RT-RCR)分别检测DPSCs骨涎蛋白(BSP)、Runt相关转录因子2(Runx-2)、骨钙蛋白(OCN)、Ⅰ型胶原(Col-1)等骨源性基因表达情况.结果 茜素红染色显示诱导培养28 d后两组均出现矿化结节,且实验组的数量和大小明显高于对照组.培养7d后两组DPSCs骨源性基因表达均成阳性,且实验组中BSP、Runx-2、Col-1及OCN等基因表达水平均明显高于对照组.结论 OPN能增强矿化液诱导DPSCs成骨分化的能力.
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谁在忽悠我们喝瓶装水
某纯净水打出这样的广告语:"27层净化".初次听说27层净化这个词,我们的感觉就是没什么比那瓶水更纯净了.那么,瓶装水真的纯净又健康吗?瓶子不是优质的象征天涯论坛上一个名为《XXX,你的优质水源在哪里?》的帖子曾引爆了整个瓶装水行业的定时炸弹.这个公司也动作迅速地承认自家的"优质水源"就是水龙头里接出的自来水.而上海饮料协会的某负责人更是爆料说,在自来水源中添加矿化液,已是业内人尽皆知的"潜规则".
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人牙周膜细胞在矿化液作用下的增殖、成骨分化与相关基因表达
目的:分离培养人牙周膜细胞(PDLCs),观察矿化液对PDLCs细胞增殖和成骨分化的影响.方法:酶解组织块后获得人PDLCs,矿化液处理后观察对细胞影响.采用MTT法检测对细胞增殖;流式细胞分析细胞周期改变;分别通过碱性磷酸酶(ALP)染色、茜素红染色,RT-PCR观察矿化液诱导成骨分化的效果.结果:矿化液对人PDLCs的增殖无显著影响,高浓度地塞米松(Dex)的矿化液有一定抑制作用.含Dex的矿化液可促进成骨分化,包括ALP活性提高,矿化结节形成,以及成骨基因的表达上调.S100A4和PLAP-1是相对特异的牙周膜标志,也参与矿化液诱导的成骨分化的调控过程.结论:含地塞米松的矿化液可有效促进人PDLCs的成骨分化,对细胞增殖影响较小.PDLCs是一种新型的种子细胞,可应用于骨组织工程.
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矿化液对体外培养的人牙囊细胞碱性磷酸酶活性的影响
目的:探讨矿化液对体外培养的人牙囊细胞中碱性磷酸酶表达的影响.方法:取12～13岁患者因正畸原因拔除的下颌第三磨牙牙囊,原代培养人牙囊细胞,将第5代细胞加入矿化液培养,应用碱性磷酸酶组织化学方法染色、碱性磷酸酶试剂盒检测人牙囊细胞中碱性磷酸酶的活性.结果:培养的牙囊细胞呈长梭形、不规则多角形.免疫细胞化学染色显示抗波形丝蛋白染色阳性.矿化液诱导7 d,碱性磷酸酶染色呈阳性,碱性磷酸酶活性检测第3、5、7 d 明显升高,与对照组均有显著性差异.结论:矿化液能增强体外培养的人牙囊细胞中碱性磷酸酶的表达.
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Balb/c胎鼠下颌突外胚间充质细胞向成骨细胞诱导分化的体外研究
目的:探讨矿化液体外诱导外胚间充质细胞向成骨细胞分化的过程.方法:取妊娠12.5 d胎鼠第三代下颌突外胚间充质细胞,培养于含10 mmol/L β-甘油磷酸钠、100μg/mL维生素C、10 nmol/L地塞米松、150 mL/L胎牛血清的DMEM中.相差显微镜下观察细胞的形态变化,免疫组化鉴定细胞性质,碱性磷酸酶染色及活性检测,矿化结节Von Kossa染色.结果:培养14 d,细胞形态发生明显变化,呈多边形、立方形,抗Ⅰ型胶原染色阳性.碱性磷酸酶活性增高,碱性磷酸酶染色阳性,矿化结节形成.结论:矿化液可诱导外胚间充质细胞向成骨细胞分化.
