首页 > 文献资料
-
再生障碍性贫血患者T细胞CD69的表达
CD69又称活化诱导分子(AIM)、早期活化抗原1(EA-1),是淋巴细胞活化早表达的膜表面分子.CD69由两个相同的单体经不同的糖基化后构成,属植物血凝素C超家族Ⅱ型膜贯通型糖蛋白,细胞外区C型凝集素(钙离子依赖性)有一个N结合型糖链附着部位[1].
-
血小板/T细胞活化抗原1
1985年Burns等以活化T细胞为免疫原制备了抗活化T细胞表面抗原的单克隆抗体,并将其中1株单克隆抗体Leo-A1识别的抗原命名为人T细胞系特异性活化抗原1(T lineage-specific activation antigen1, TLiSA1),实验证实TLiSA1参与了CTL细胞的活化与分化[1-3].随后的实验发现TLiSA1也高表达于血小板表面,并与血小板的活化和凝集功能有关,遂将此抗原重新命名为血小板/T细胞活化抗原1(platelet and T cell activation antigen 1, PTA1)[4].1997年我实验室与澳大利亚Newcastle大学癌症研究中心合作成功克隆了人PTA1 cDNA[5].随后,我室又成功克隆了长臂猿和猴PTA1全长cDNA.PTA1基因的克隆为进一步深入探讨PTA1的功能打下了良好的基础.
-
慢性乙型肝炎患者外周血CD14+细胞的功能状态
目的:研究慢性乙型肝炎患者外周血CD14+细胞早期活化抗原分子表达、炎症因子生成和吞噬能力.方法:采用四色荧光分析方法,运用流式细胞术检测正常对照人群(10例)、慢性活动性乙型肝炎患者(11例)外周血单个核细胞(PBMC)CD14+细胞率和CD14抗原量;并行CD14设门,检测CD14+细胞前向角(FSC)、侧向角(SSC)值、细胞早期活化抗原(CD69)的表达率、TNF-α表达率、细胞内TNF-α水平、细胞吞噬率及吞噬力.结果:HB组CD14+细胞SSC值高于对照组(P<0.01);HB组和对照组间外周血CD14+细胞比例、CD14抗原水平无统计学意义差别,抗原水平与CD14+细胞率呈正相关;HB组CD14/CD69双表达细胞明显多于对照组(P<0.01);HB组CD14/TNF-α+(细胞内)双染细胞与对照组间无差别,HB组CD14+细胞TNF-α水平高于正常对照组(P<0.05);对照组TNF-α+细胞率与细胞颗粒度呈正相关,与CD14/69双表达并发生吞噬细胞率一致.HB组CD69/CD14双阳性细胞荧光球吞噬率与对照组无差别(P>0.05);HBV组CD14+细胞荧光球吞噬率显著高于对照组(P<0.01),吞噬力低于对照组(P<0.05),荧光微球吞噬率与CD14抗原表达的量负相关;CD14+细胞SSC,TNF-α+细胞率同CD14抗原表达的量也呈负相关.结论:慢性乙肝患者外周血存在过度活化CD14+单核细胞,细胞吞噬力弱、胞内TNF-α生成增多.
-
晚期恶性肿瘤患者放疗前后淋巴细胞活化抗原表达的变化与临床意义
目的:检测T淋巴细胞活化抗原CD69、CD25在外周血中的表达,分析其与晚期恶性肿瘤病人放疗前后免疫功能的相关性.方法:应用流细胞仪检测29例晚期癌症病人放疗前后T细胞表面抗原标志物CD69、CD25,并与正常人进行对照.结果:癌症患者放疗前CD69、CD25均低于对照组(P<0.05)、放疗后CD69、CD25均升高(P<0.05).结论:以上结果可能与放疗后患者细胞免疫功能恢复,体内活化T细胞明显增多有关,说明放疗有利于晚期恶性肿瘤病人,使肿瘤缩小,免疫力提高,抑制肿瘤的生长.
-
流式细胞术检测恶性肿瘤患者T淋巴细胞活化抗原的临床意义
目的研究恶性肿瘤患者的免疫状态及其治疗前后的变化.方法在荧光单抗直接标记后,用流式细胞术检测52例癌症病人外周血的淋巴细胞标志抗原和T淋巴细胞活化抗原,并对其中15例免疫增强剂治疗前后的抗原表达结果进行比较.结果恶性肿瘤患者的CD3+、CD4+细胞及CD4+/CD8+比值较对照组显著减少(P<0.05或0.01),而CD8+细胞显著增多(P<0.01).15例治疗后CD3+、CD4+细胞及CD4+/CD8+比值均较治疗前明显增加(P<0.05或0.01),且CD3+/HLA-DR+、CD 4+/HLA-DR+、CD8+/HLA-DR+和HLA-DR+细胞也显著增加(均P<0.01).结论恶性肿瘤患者的免疫状态有缺陷,免疫治疗可激活T淋巴细胞而改善免疫功能.流式细胞术检测T淋巴细胞活化抗原可作为恶性肿瘤患者免疫增强疗法的监测手段.
-
抗人血小板/T细胞活化抗原1(PTA1)不同表位单克隆抗体的制备及鉴定
目的 研制一套可识别PTA1分子不同功能性表位的单克隆抗体(mAb). 方法 采用亲和层析法从血小板裂解液中纯化的天然PTA1分子免疫BALB/c 小鼠,以间接ELIS A筛选阳性杂交瘤,并以PTA1 cDNA转染COS7细胞,进行间接免疫荧光染色和流式细胞术鉴定 mAb的特异性. 竞争结合试验确定mAb识别PTA1分子的表位. 纯化的PTA1经SDS-PAGE后,转 移到PVDF膜,确定mAb是否可用于Western blot. 结果 共获得7株可稳定 分泌mAb的杂交瘤 细胞株,分别命名为FMU1,FMU2,FMU3,FMU4,FMU5,FMU6和FMU7. 所有mAb与纯化天然PTA 1和PTA1/Ig融合蛋白均有良好的免疫反应性,均可识别PTA1 cDNA转染的COS7细胞. 流式细 胞仪检测阳性荧光峰型与PTA1阳性对照Leo A1 mAb的荧光峰型相似;7 株mAb识别PTA1分子 的5个不同表位;FMU1,FMU2,FMU4,FMU5,FMU6和FMU7可应用于Western blot. 结 论 成 功地制备7株抗PTA1分子的特异性mAb,这些mAb可分别识别PTA1的5个表位,为PTA1分子结构 与功能的研究提供了新的手段.