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银屑病患者骨髓CD34+细胞Notch受体的表达
Notch信号传导通路广泛参与了包括造血干细胞在内的诸多干细胞的发育分化过程,对干细胞状态的维持和终末分化的方向等起着决定性的作用.在造血细胞的发育过程中,Notch受体1和2不同程度地表达以及被不同的配体活化决定了造血十细胞向淋巴细胞系或髓细胞系分化.为进一步研究Notch信号通路是否参与了银屑病的发病过程,本研究采用半定量RT-PCR法检测了24例寻常型银屑病患者和18例正常对照骨髓CD34+细胞两种Notch受体mBNA的表达情况.
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自噬与肝癌
自噬,又称细胞自我消化,是细胞为了自身的发展、分化、生存,维持稳态的一种生理过程.自噬可以清除细胞内长期存活的蛋白和损伤的细胞器,并使降解产物重新被细胞利用[1,2].新研究显示,自噬的调节异常是人类恶性肿瘤病理过程中的一个新特征.现就自噬在肝癌中的作用综述如下.一、白噬的分子机制细胞内蛋白质及高级结构(如细胞器)的周转能力对于细胞内环境的稳定非常重要.例如,炎症、发育和增殖信号均与蛋白质的降解相关,可以通过快速开关信号转导通路来改变细胞状态.这种快速改变主要受蛋白酶体系统的交互调节[3,4].长寿命的蛋白质和细胞器需要周期性的降解,因其累积可以引起细胞功能丧失或者对细胞产生毒性作用(氧化改变).巨自噬(后称为自噬)是一种进化上非常保守的可调节的代谢过程,能够降解这些结构并利用这些生物组件到能量代谢和其他生物合成反应中[5,6],是真核细胞降解长寿蛋白和细胞器的主要代谢机制[1].
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骨关节炎患者骨髓间充质干细胞功能状态与病情进展的相关性
背景：研究表明骨髓间充质干细胞功能状态的改变是骨关节炎的病因之一。
目的：探讨骨关节炎患者骨髓间充质干细胞功能状态与病情进展的相关性。
方法：收集45例患者的临床资料，其中15例为关节镜下进行膝关节交叉韧带重建患者(对照组)，15例为轻度骨关节炎患者(轻度骨关节炎组)，15例为重度骨关节炎患者(重度骨关节炎组)。体外培养获得3组患者骨髓间充质干细胞，观察其形态变化，检测其增殖能力及软骨向诱导分化能力。
结果与结论：原代骨髓间充质干细胞经24 h培养后呈整齐排列状，且为长梭形，3组骨髓间充质干细胞形态基本一致，不存在显著差异。骨髓间充质干细胞成软骨诱导14 d后行甲苯胺蓝染色鉴定，爬片可见甲苯胺蓝异染颗粒，3组成软骨诱导分化能力无明显差异。CCK-8法检测各组患者骨髓间充质干细胞的增殖能力，其中以对照组增殖能力强，重度骨关节炎组增殖能力弱，结果表明骨关节炎患者骨髓间充质干细胞功能状态与病情进展之间存在一定的相关性。 -
肿瘤细胞状态对检测壁虎活性单体IC50的影响
目的 采用四氮唑盐MTT法研究肿瘤细胞状态对检测壁虎活性单体BH1258209半数抑制浓度IC50的影响.方法 取处于对数生长期的人肝癌HepG2细胞接种于96孔板,细胞贴壁后,分别加入含10%胎牛血清及无胎牛血清的RPMI-1640培养液配制的不同浓度的BH1258209,培养48h,72h后呈色、比色,检测肿瘤细胞生长抑制率,计算IC50.结果 含10%胎牛血清培养液配制的BH1258209(A组)作用的肿瘤细胞处于倍增状态,能使细胞变小、变圆、胞浆浓缩,且抑瘤率较高,HepG2的IC50为0.33g/L.无胎牛血清培养液配制的BH1258209(B组)作用的肿瘤细胞处于非倍增状态,细胞形态亦发生改变,但不如A组明显,其抑瘤率较低,HepG2的IC50为1.38g/L.结论 BH1258209作用于倍增状态的肿瘤细胞的IC50明显低于非倍增状态的IC50,且随着BH1258209浓度的增加,肿瘤细胞的抑制作用更明显.
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pMaxGFP 导入人肝癌 HepG2细胞中磷酸钙转染法的应用条件优选
目的：优选出pMaxGFP导入人肝癌HepG2细胞中磷酸钙转染法的应用条件。方法取对数生长期的人肝癌HepG2细胞，采用磷酸钙转染法将pMaxGFP导入HepG2细胞，转染前1 h换不同血清浓度的新鲜培养液培养HepG2细胞，血清浓度分别为无血清、1％、2％、5％、10％、15％。转染48 h后以倒置荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达，评估转染效率，同时以原位台盼蓝染色检测转染后的细胞存活率，优选出适血清浓度。在适血清浓度条件下，磷酸钙转染法将pMaxGFP转染贴壁状态和悬浮状态的HepG2细胞，共分为A、B、C、D、E 5组，分别代表转染贴壁状态、悬浮状态3×104细胞/孔、4×104细胞/孔、5×104细胞/孔、6×104细胞/孔。转染48 h后在荧光倒置显微镜下观察绿色荧光蛋白表达，评估转染效率，同时以原位台盼蓝染色检测转染后的细胞存活率，优选出适的细胞状态和细胞密度。结果48h后，无血清组HepG2细胞大量死亡，而其他组有较少部分细胞死亡。1％、2％、5％、10％、15％血清浓度的转染效率分别为30．92％±1．29％、30．10％±1．05％、21．27％±0．63％、19．10％±0．51％、10．44％±1．42％，血清浓度为1％、2％时的转染效率明显高于其他血清浓度，P＜0．05；1％、2％、5％、10％、15％血清浓度的细胞存活率分别为76．01％±0．94％、89．68％±0．68％、92．38％±1．02％、93．36％±1．35％、93．49％±0．91％，血清浓度为2％时的细胞存活率明显高于1％血清浓度。在转染培养基血清浓度为2％条件下， A、B、C、D、E组转染效率分别为30．74％±0．50％、6．38％±0．28％、31．41％±0．42％、30．94％±0．47％、1．41％±0．27％， A、C、D组转染效率明显高于B、E组，P﹤0．05；A、B、C、D、E组细胞存活率分别为91．76％±0．99％、88．40％±1．29％、88．38％±1．08％、87．48％±0．78％、64．45％±0．55％，A、B、C、D组细胞存活率明显高于E组。结论优选出pMaxGFP导入人肝癌HepG2细胞中的磷酸钙转染法应用条件为转染培养基中血清浓度2％、悬浮状态下细胞密度为4×104细胞/孔或5×104细胞/孔。
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反复下呼吸道感染患儿细胞免疫及NK细胞状态的临床研究
反复下呼吸道感染是儿科常见的一种临床现象,病因复杂.我们用流氏细胞仪对反复下呼吸道感染患儿细胞免疫及NK细胞功能进行测定,现将结果报告如下.
