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人牙周膜细胞在左旋聚乳酸/羟基磷灰石生物材料上的生长观察
目的 观察电纺左旋聚乳酸,羟基磷灰石(PLLA/HA)生物材料(简称生物材料)的生物相容性,并以人牙周膜细胞作为种子细胞与生物材料复合培养,探索该生物材料用于人牙周组织再生的可能性.方法 用电纺法制备PLLA/HA纤维生物材料;组织块法分离培养人牙周膜细胞,并用免疫组织化学方法鉴定;MTT法评价生物材料的生物相容性;将人牙周膜细胞与生物材料复合培养,用扫描电镜进行观察;将转染人腺病毒介导的绿色荧光蛋白的人牙周膜细胞与生物材料复合培养,用激光扫描共焦显微镜观察.结果 成功分离了人牙周膜细胞.波形蛋白染色阳性确定该细胞来源于中胚层;MTT法检测人牙周膜细胞在生物材料上的增殖状况与正常培养基本一致;扫描电镜下可见细胞在生物材料上生长旺盛、充分伸展;激光扫描共焦显微镜下可见人牙周膜细胞沿生物材料呈纤丝生长,表现出一定的三维结构.结论 电纺PLLA/HA生物材料具有三维空间网状结构和良好的生物相容性,与人牙周膜细胞复合培养有利于细胞的生长、贴附和增殖,并呈现一定的立体结构,为人牙周组织再生提供了实验依据.
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左旋聚乳酸/卵磷脂共混物膜的血液相容性研究
采用溶液共混法制备可降解左旋聚乳酸(PLLA)和5%～15%卵磷脂(质量百分比例)的共混物膜,通过测定静态水接触角来评价材料的亲水性,采用分光光度计分析不同材料的溶血率,利用扫描电镜观察血小板在共混物膜上的形态和黏附量,以评价共混卵磷脂改性后PLLA的血液相容性.结果表明:随着共混物膜中卵磷脂含量的提高,材料的亲水性能明显增加,PLLA和5%～10%卵磷脂共混物膜上血小板的黏附量和变形程度小且溶血率低,获得良好的血液相容性,其在血管组织工程中的应用值得进一步开发研究.
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可吸收颈椎融合器在山羊颈椎融合动物模型中的应用
目的对聚L-乳酸/羟基磷灰石复合材料(HA/PLLA)颈椎椎间融合器进行山羊颈椎融合试验研究.方法 12只成年雄性山羊,支气管内麻醉,于C3、4椎间隙植入HA/PLLA颈椎椎间融合器,术后3、6、9、12个月进行放射学观察、生物力学评价.结果 12只雄性山羊均存活良好,术后即开始正常行走,未见明显神经系统并发症,体重、饮食均无异常,术后12个月所有山羊均发生了融合(3级),融合率明显高于钛合金颈椎椎间融合器组.结论可吸收颈椎椎间融合器具有并发症少、融合率高、人工可吸收等特点,是今后较理想的颈椎融合材料.
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电纺左旋聚乳酸和左旋聚乳酸羟基磷灰石纳米纤维细胞相容性的比较研究
目的:用MTT法检测电纺左旋聚乳酸和左旋聚乳酸/羟基磷灰石PLLA和PLLA/HA纳米纤维材料,对人牙周膜细胞生长曲线的影响,评价两种材料的细胞相容性.方法:通过电纺技术制备PLLA、PLLA/HA纳米纤维材料,体外分离、培养并鉴定人牙周膜细胞,用MTT法检测人牙周膜细胞在两种材料上的生长曲线,评价两种材料的细胞相容性及其用于口腔组织工程的可能性.结果:成功分离、培养了人牙周膜细胞,通过免疫组织化学染色鉴定细胞来源于中胚层,为牙周膜细胞.电纺法制备的PLLA、PLLA/HA纳米纤维材料具有三维网状空间结构,与人牙周膜细胞共培养,MTT检测结果显示,细胞能够在材料上生长增殖,在第七天时PLLA/HA组细胞增殖好于PLLA组和对照组.结论:电纺PLLA和PLLA/HA纳米纤维材料生物相容性良好,PLLA/HA组较单纯PLLA组能够促进细胞的增殖,有望成为良好的新型口腔组织工程支架材料.
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聚乙二醇包裹表阿霉素脂质体的制备及评价
目的：制备聚乙二醇( polyethylene glycol,PEG)包裹表阿霉素脂质体,对其药剂学性质和活性进行评价。方法采用乳化溶剂挥发法制备聚乙二醇包裹表阿霉素的脂质体,用扫描电镜和透射电镜观察其形态,用激光纳米粒度仪测定粒径分布及Zeta电位、并对包封率、稳定性及体外释药特性进行研究,采用MMT法和S180小鼠模型评价体内外抗肿瘤活性。结果聚乙二醇包裹表阿霉素的脂质体的粒径为(231.4±2.0)nm,动电位为(-25.62±0.68)mV,包封率为(53.14±4.85)%,各项稳定性均有明显提高,体外释放缓慢,小鼠剂量可增加到6μmol/kg,给药间隔可延长至72 h,并显示比表阿霉素好的抗肿瘤活性。结论本实验获得了较理想的聚乙二醇包裹表阿霉素脂质体,体外释药符合长效制剂特征,血浆中稳定,具有pH敏感性,可改善表阿霉素用药安全性,延长药物作用时间。
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基于三维打印技术的异烟肼/利福平双载药聚乳酸环形植入剂的制备
目的 探讨基于三维打印技术制备异烟肼/利福平/聚乳酸环形缓释制剂的可行性,并对打印的缓释剂的体外释放性能及生物相容性进行检测.方法 将聚乳酸制成大小为75 ～ 100 μm的粉末,异烟肼和利福平药物分别溶解于有机溶剂中作为三维打印的黏结液,三维打印机通过层层黏结的原理,将聚乳酸逐层黏结成环形植入剂,用动态浸泡的方法研究该植入剂的体外释放特征,通过体外细胞培养实验检测植入剂的细胞相容性.结果 将异烟肼或利福平溶解于黏结液中,以聚乳酸为载药基质能够实现多载药缓释植入剂的三维打印;在电镜下药物成巢状分布于植入剂内.双载药环形植入剂在体外能够持续释放32 d以上,在体外释放32 d测得的异烟肼和利福平的浓度高于药物的低有效抑菌浓度.细胞毒性实验以及体外直接接触实验表明该植入剂无细胞毒性,具有良好的生物相容性.结论 所配制的载药聚乳酸三维打印方法能够实现双载药植入剂的制备,为抗结核药物的局部缓释制剂的制备提供了新方法.
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左旋聚乳酸/明胶复合纳米纤维支架在软骨组织工程中的应用
目的 观察静电纺丝技术制备左旋聚乳酸/明胶(PLLA/Gel)复合纳米纤维支架在软骨组织工程中的应用潜力,为其作为软骨组织工程支架提供实验基础.方法 通过静电纺丝技术制备PLLA/Gel复合纳米纤维支架,将其与软骨细胞共培养,通过倒置荧光显微镜、激光共聚焦显微镜(CLSM)、扫描电镜(SEM)等观察细胞、支架及细胞-支架复合物的形态结构;通过MTT实验、生物化学实验等定量检测软骨细胞在支架上的增殖及分泌细胞外基质(ECM)的能力;通过实时定量PCR检测软骨细胞在支架上表达软一型胶原、二型胶原及十型胶原基因的相对定量.结果 静电纺丝PLLA/Gel复合纳米纤维支架为三维多孔结构,软骨细胞能够在此支架上很好的粘附、增殖并分泌软骨特异性的ECM,且能稳定的表达软骨相关基因.结论 静电纺丝PLLA/Gel复合纳米纤维支架对软骨细胞有着良好的相容性,可以作为支架材料应用于软骨组织工程中.
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左旋聚乳酸颈椎可吸收固定板的力学性能测试
背景:课题组已成功利用左旋聚乳酸的有限固定强度和可吸收的特性制成了新型颈椎可吸收固定板.目的:进行动物体内降解和力学实验,以测定新型可吸收颈椎左旋聚乳酸固定板的生物力学性能.方法:将长30 mm,宽5.5 mm,厚度为2.0 mm的试样经环氧乙烷消毒后,植入至15只兔的背部肌肉内,分别于术后1,3,5,7个月取出,观察材料的降解变化和机械性能的变化.结果与结论:植入1～5个月,外观观察材料植入体内后未发生明显改变.植入1～7个月材料体积和质量均未发生明显改变.植入1个月冲击强度未发生明显变化,植入3个月略有下降,后又逐渐上升,至7个月时达到甚至超过术前水平.植入后随着时间延长左旋聚乳酸板的弯曲强度呈逐渐下降趋势,但7个月内下降幅度并不显著.术后3～7个月扭转强度略有下降,但并不明显.结果表明,左旋聚乳酸的生物力学强度足够维持骨性融合的全过程,用其制成的颈椎前路固定板可以用于颈椎前路手术的植骨融合固定.
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涤纶/左旋聚乳酸静电纺人造小血管的性能
背景 小口径人造血管常用生物材料左旋聚乳酸,在体内的降解速率不能与损伤缺失小血管的组织细胞修复速率相匹配,且绝对力学强度不够高,不能满足病变血管的修复要求.目的 观察不同质量混纺比的涤纶/左旋聚乳酸静电纺人造小血管生物力学性能及生物相容性.方法 将涤纶和左旋聚乳酸在质量配比为10∶0,7∶3,5∶5,3∶7,0∶10 条件下,通过双头静电纺丝制备纳米纤维人造小血管.结果 与结论 涤纶/左旋聚乳酸静电纺混纺结构在纳米级条件下,涤纶与左旋聚乳酸不会发生化学反应,维持各自特性,其力学性能较纯左旋聚乳酸有较大改善,且具备孔隙率高,透水率低的特点,既利于细胞生长,又不会导致液体大量渗透.质量混纺比为5∶5 时制备的涤纶和左旋聚乳酸人造血管各方面性能较优,其生物相容性可通过调节工艺参数细化纤维来改善.
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基于可降解材料构建的腔静脉滤器
背景:永久性腔静脉滤器作为异物长期置于体内可能带来多种并发症,例如滤器移位、腔静脉穿孔、局部血栓形成和腔静脉闭塞等.目的:设计和制作一种可降解的腔静脉滤器.方法:设计了一种带有中心线扩张机构的可降解滤器.采用可降解聚合物左旋聚乳酸制作了带有两侧支和五侧支的可降解滤器模型,用这些滤器模型做力学测试以及体外降解和血栓捕捉实验.结果与结论:实验结果显示中心线不仅能够使滤器扩张,同时也增强了其径向刚度.可降解左旋聚乳酸滤器具有与传统金属滤器相似的力学特性和血栓捕捉能力.可降解滤器存在的主要问题是其在降解过程中会产生碎片.在左旋聚乳酸滤器侧支中复合细线使碎片尺寸减小到约为2 mm.尽管这些小的碎片不至于堵塞肺动脉主干或大的分支,但它们对人体的影响目前还不清楚.因此可降解左旋聚乳酸滤器具有潜在的临床应用价值,值得进一步研究.
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左旋聚乳酸羟基磷灰石生物材料与牙周膜细胞的生物相容性
背景：将羟基磷灰石与左旋聚乳酸复合，可以很好地改善羟基磷灰石质地脆、机械性能差等不足。目的：进一步观察左旋聚乳酸羟基磷灰石生物材料与牙周膜细胞的相容性。方法：将细胞浓度为5×109 L-1的第4代人牙周膜细胞与左旋聚乳酸羟基磷灰石生物材料复合培养，设为实验组，设置单纯牙周膜细胞培养作为对照组。培养7 d内检测两组细胞增殖情况；培养24，48，72 h，检测细胞碱性磷酸活性；培养72 h，检测细胞Ⅰ型胶原表达强度。结果与结论：①细胞增殖检测结果：两组培养1-7 d的吸光度值比较差异无显著性意义。②细胞碱性磷酸活性检测结果：两组组内培养48，72 h的碱性磷酸酶活性均高于培养24 h(P<0.05)，但两组间不同时间点碱性磷酸酶活性比较差异均无显著性意义。③细胞Ⅰ型胶原表达检测结果：两组Ⅰ型胶原表达强度比较差异无显著性意义。④结果表明，左旋聚乳酸羟基磷灰石生物材料具有良好的细胞相容性。
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左旋聚乳酸羟基磷灰石材料上人牙周膜细胞的生长
背景：在体外构建组织工程化牙周组织过程中，种子细胞与支架材料的有效结合是提高组织工程化牙周组织质量的关键。其中人牙周膜细胞是常用的种子细胞。
目的：观察左旋聚乳酸羟基磷灰石材料上人牙周膜细胞生长情况。
方法：体外环境下分离与培养人牙周膜细胞，取第3代细胞，分为2组，设为对照组和实验组，分别予以单纯人牙周膜细胞培养与人牙周膜细胞+左旋聚乳酸羟基磷灰石材料复合培养。培养1，2，3 d，检测2组的碱性磷酸酶活性与Ⅲ型胶原表达情况；利用MTT法描绘细胞生长曲线。
结果与结论：①经免疫组化染色，培养所得细胞波形蛋白、碱性磷酸酶染色均呈阳性表达，抗角蛋白染色呈阴性，表明所得细胞为实验所需人牙周膜细胞；②经MTT法检测，不同时间点2组细胞毒性的吸光度(A)值经比较差异均无显著性意义(P>0.05)；2组人牙周膜细胞的生长曲线形态基本一致；③共培养1，2，3 d，2组碱性磷酸酶活性经比较差异均无显著性意义(P>0.05)；④2组Ⅲ型胶原A值经比较差异均无显著性意义(P >0.05)；⑤结果提示，人牙周膜细胞可以在左旋聚乳酸羟基磷灰石材料上正常生长与增殖，未出现细胞毒性等不良反应。 -
双层左旋聚乳酸静电纺织纳米纤维支架与人牙周膜细胞的生物相容性
背景：静电纺织制备的纳米纤维支架形态结构与天然细胞外基质相似，为细胞的生长、增殖提供了良好的微环境，可增强细胞的黏附、迁移、增殖及分化功能。目的：观察双层左旋聚乳酸静电纺织纳米纤维支架与人牙周膜细胞的生物相容性。方法：采用静电纺织技术制备双层左旋聚乳酸静电纺织纳米纤维支架。MTT法评估不同浓度(100%、75%、50%、25%)双层左旋聚乳酸静电纺织纳米纤维支架浸提液对人牙周膜细胞的毒性；将双层左旋聚乳酸静电纺织纳米纤维支架与人牙周膜细胞共培养，以MTT法检测细胞的早期黏附能力，扫描电镜观察细胞在支架上的生长情况。结果与结论：不同浓度双层左旋聚乳酸静电纺织纳米纤维支架浸提液对人牙周膜细胞无毒性。共培养2，6，24 h，人牙周膜细胞在双层左旋聚乳酸静电纺织纳米纤维支架上的黏附能力较差。复合培养7 d，人牙周膜细胞在支架疏松面黏附良好，并保持原有的形态，伸展良好，伸出突起相互连接；在支架致密面呈复层生长，胞体呈梭形、多角形，连接成片。表明双层左旋聚乳酸静电纺织纳米支架与人牙周膜细胞具有良好的生物相容性。
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复合左旋聚乳酸胆肠溶解支架的体外实验
背景：目前已研制出复合左旋聚乳酸可降解性胆肠支架。目的：研究复合左旋聚乳酸胆肠溶解支架的溶解性及生物相容性。方法：①溶解性：将复合左旋聚乳酸胆肠溶解支架置于人工胃酸中，12周内检测溶解率；②热源性：将复合左旋聚乳酸胆肠溶解支架浸提液经耳缘静脉注入兔体内，检测体温变化；③溶血性：将复合左旋聚乳酸胆肠溶解支架浸提液、生理盐水及蒸馏水分别加入兔抗凝血中，检测溶血率；④细胞相容性：分别以含体积分数10%胎牛血清的DMEM高汤培养基、橡胶材料浸提液、复合左旋聚乳酸胆肠溶解支架浸提液培养结肠癌Caco-2细胞，12，24，36，48 h后，检测细胞增殖；2 d后，检测细胞乳酸脱氢酶释放量。结果与结论：复合左旋聚乳酸胆肠支架的体内稳定性时间长，在20周左右可以溶解近80%以上；复合左旋聚乳酸胆肠支架不具有热源性及溶血性；复合左旋聚乳酸胆肠支架对Caco-2细胞的增殖及乳酸脱氢酶释放无影响，无明显细胞毒性；结果表明，复合左旋聚乳酸材料具有良好的溶解性及细胞相容性。
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表面改性聚合物左旋聚乳酸-多聚赖氨酸可促进骨髓基质细胞的初始黏附
背景:通过增加表面活性基团对生物支架材料进行表面改性,可提高材料对细胞的亲和力,有效提高材料的细胞相容性.目的:合成表面改性聚合膜左旋聚乳酸-多聚赖氨酸(PLLA-PLL),并观察其对骨髓基质细胞黏附、增殖的影响.方法:通过开环聚合反应合成不同组分高分子聚合膜PLLA139-PLL131,PLLA77-PLL72,PLLA45-PLL246,将人骨髓基质细胞接种至不同组分聚合膜PLLA-PLL表面、左旋聚乳酸及商品化的细胞培养板,寻找佳PLLA-PLL组分.结果与结论:与左旋聚乳酸比较,不同组分PLLA-PLL聚合膜细胞黏附量均升高,以PLLA77-PLL72聚合膜组增高显著(P < 0.05),所以佳组分为PLLA77-PLL72,连续培养结果显示PLLA77-PLL72聚合膜表面骨髓基质细胞骨架蛋白表达丰富,清晰有序,增殖实验也证实了PLLA77-PLL72聚合膜可促进骨髓基质细胞增殖.
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高分子面部填充剂的临床应用进展
经过半个多世纪的研究,人们对面部填充剂的结构、理化性质和生理功能已有了明确的认识.本综述主要介绍不同种类的高分子面部填充剂在面部整形美容领域的应用进展,以期为相关产品的研发提供参考.
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丝素蛋白／左旋聚乳酸复合组织工程纳米材料的生物相容性及安全性评价
目的：研究新型组织工程纳米材料丝素蛋白／左旋聚乳酸（SF／PLLA）无纺网的生物相容性和安全性，探讨其作为生物植入材料的可行性。方法：采用静电纺丝方法制备 SF／PLLA复合组织工程纳米材料，制备浸提液，并以生理盐水作为对照，注射入小鼠体内，观察2周内小鼠的一般情况和不良反应；将材料植入小鼠背部，以3-0缝线作为对照，于术后1、2、3和4周分别取材， HE染色并拍照，比较实验组与对照组周围组织的炎症反应情况；培养兔膝关节软骨细胞，传代后接种至材料表面，在体外继续培养，倒置光学显微镜观察细胞的黏附和生长情况。将关节软骨细胞分为阴性对照组（空白培养液）、实验组（含材料的培养液）和阳性对照组（含苯酚培养液），不同组材料浸提液与细胞共培养24和48 h，MTT法检测材料对软骨细胞增殖的影响。结果：注射浸提液后小鼠的全身状况与注射生理盐水后无差别；材料植入小鼠背部后，开始有少量成纤维细胞长入材料中，伴随出现少量的淋巴细胞及异物巨细胞，随后成纤维细胞数量增加，淋巴细胞及异物巨细胞无明显增多，材料慢慢降解，直至第4周时材料出现明显的降解；材料周围组织炎症反应，第2周时严重，然后逐渐减轻，其周围组织炎症反应与缝线周围组织一致或略轻；将细胞接种于支架上24 h 后有细胞贴附于材料纤维上，48 h后贴附于纤维上的细胞数量增多。MTT法检测，实验组24和48 h细胞毒性均为Ⅰ级。除阳性对照组外，其他各组随着培养时间的延长，吸光度（A）值均增加；同一时间点，实验组与阴性对照组 A值比较差异无统计学意义（P＞0.05），与阳性对照组比较 A值明显升高（P＜0.01）。结论：SF／PLLA无纺网支架材料属于安全植入性材料，具有良好的生物相容性。
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生物可降解聚乳酸血管支架有限元分析
生物可降解血管支架作为第三代支架成为了近研究的热点.该文利用有限元数值模拟的方法,对三种相同结构不同规格的支架,采用von Mises屈服准则和Goodman准则,对其压握、扩张以及疲劳安全性进行分析.结果表明,大规格支架在压握、扩张和疲劳过程中均出现大的应力,此规格危险,同时也为支架的疲劳试验选择极限规格样品提供理论依据.
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生物可降解消化道内支架的研究进展
生物可降解支架作为一种临时性支架,避免了金属或塑料支架的近期及长期的不良反应.它已经在良性食管狭窄及胆管狭窄中进行临床应用,取得鼓舞人心的效果.它克服了永久性支架的再狭窄、难取出、易穿孔及出血等缺点,也为一些临床棘手的青少年及儿童良性消化道病变的治疗,提供治疗的新方法,具有广阔的应用前景.目前生物可降解支架的技术已经通过大量的动物实验及初步的临床应用,但其材料的选择、支架的设计及降解时间的调节等都需要通过未来更多的临床应用来评估.
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BMSCs联合3D打印PLLA支架促进兔颅骨PDO的研究
目的：探讨骨髓间充质干细胞（Bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs）促进骨膜牵张成骨（Periosteal distraction osteogenesis，PDO）的可行性。方法全骨髓贴壁培养法获取新西兰白兔BMSCs，体外扩增培养并进行成骨、成脂、成软骨诱导分化。用3D打印（Three-dimensional printing，3D printing）的左旋聚乳酸（Poly l-lactic acid，PLLA）支架牵张兔颅骨骨膜，在牵张期结束时，实验组于骨膜与颅骨间隙内注射兔BMSCs，对照组则注射等量生理盐水（Normal saline，NS）。分别在固定期后的4周和8周，对兔颅骨的牵张部位进行取材，行Micro-CT扫描和组织学染色，评价新骨形成情况。结果全骨髓培养法获取的兔BMSCs具有多向分化能力。 Micro-CT显示实验组和对照组的牵张区域在4周和8周均有新骨生成，实验组在两个时间点的新生骨量（Bone volume，BV）、骨量/组织量（Bone volume/Tissue volume， BV/TV）、骨密度（Bone mineral density，BMD）、骨小梁数量（Trabecular number，Tb.N）和厚度（Trabecular thickness，Tb.Th）均明显高于对照组，骨小梁间隔（Trabecular separation，Tb.Sp）小于对照组。 HE染色显示，实验组与对照组均有新骨生成，实验组新生骨小梁增厚增多，比对照组成熟，且与颅骨皮质的界线不明显。结论在兔颅骨PDO区域内注射自体BMSCs可以补充成骨细胞的不足，有利于骨膜牵张成骨。
