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左心辅助循环对慢性心衰心肌炎症细胞因子及基质胶原代谢的影响
目的 通过建立羊慢性心衰(chronic heart failure, CHF)动物模型以及心衰后应用国产心室辅助装置辅助循环,测定心肌肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),白细胞介素1,6(interleukin-6,1β,IL-6,1β),膜型基质金属蛋白酶1(membrane typel-matrix metalloprotease, MT1-MMP)的变化,探讨心室辅助治疗后心衰心肌功能恢复的有关分子机制.方法 通过快速右心室内膜起搏4～5周建立羊慢性心衰动物模型10只,随机分为对照组和实验组各5只,实验组行左心辅助(1eft ventricular assist devices, LVAD)循环治疗(36±8)h,辅助结束后两组动物开胸取左心室心尖组织液氮速冻后-70℃保存.两组心肌组织行TNF-α和MT1-MMP荧光定量逆转录聚合酶链式反应检测(quantitative reverse transcription-polymerized chain reaction, QRT-PCR),IL-6,IL-1β行半定量逆转录聚合酶链式反应检测(RT-PCR),同时做TNF-α,胶原Ⅰ、Ⅲ免疫组化染色.结果 与对照组比较,心室辅助循环后实验组心肌TNF-α,TI1-MMP mRNA水平明显降低(P＜0.01),IL-6,IL-1βmRNA水平也明显下降(P＜0.05),免疫组化染色显示心肌细胞体积减少,TNF-α,collagenⅠ染色明显降低(P＜0.05).结论 心室辅助循环能减低慢性心衰心肌组织TNF-α、TI1-MMP、IL-6、IL-1βmRNA表达水平以及TNF-α,胶原Ⅰ蛋白合成水平,抑制不利的心肌重塑,改善心肌功能.
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胶质瘤中膜型基质金属蛋白酶1mRNA水平表达
目的 探讨胶质瘤恶性程度和膜型基质金属蛋白酶1(MT1-MMP)mRNA表达水平的关系,为胶质瘤的诊断、治疗及预后等提供参考.方法 分别采用实时荧光定量逆转录PCR法(RT-PCR)和半定量RT-PCR法检测34例胶质瘤和7例正常脑组织中MT1-MMPmRNA的表达水平.结果 实时荧光定量RT-PCR法检测正常脑组织和Ⅱ级(低级别)、Ⅲ级、Ⅳ级、高级别(Ⅲ、Ⅳ级)胶质瘤的△△Ct值分别为0.834±0.517,4.063±2.309,6.376±4.023,7.653±4.196和7.072±4.072.半定量RT-PCR法测定结果显示,正常脑组织和Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级、高级别胶质瘤的相对灰度值分别为0.799±0.156,1.142±0.158,1.538±0.482,1.652±0.376和1.600±0.421.正常脑组织和Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤之间,Ⅱ、Ⅳ级胶质瘤之间,正常脑组织和低、高级别胶质瘤之间,低、高级别胶质瘤之间MT1-MMP基因mRNA表达水平均有显著性差异.结论 胶质瘤中存在MT1-MMP基因mRNA高水平的表达,随着肿瘤恶性程度的增加,MT1-MMP基因mRNA的表达水平增高.
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Cariporide对宫颈癌HeLa细胞体外转移及MT1-MMP表达的影响
目的:通过体外实验研究钠氢交换蛋白1(NHE1)特异性抑制剂Cariporide对人宫颈癌HeLa细胞体外转移能力的影响,并初步探讨其作用机制.方法:用Cariporide处理HeLa细胞,采用细胞-基质粘附实验、细胞划痕实验和Transwell侵袭实验分别检测Cariporide对HeLa细胞的粘附、迁移和侵袭能力的影响;Real-time RT-PCR、Western blot法分别检测Cariporide对HeLa细胞膜型基质金属蛋白酶1(MT1-MMP)mRNA及蛋白表达的影响.结果:细胞-基质粘附实验结果显示,与对照组相比,Cariporide处理过的HeLa细胞体外粘附率降低25%,差异具有统计学意义(P<0.05);细胞划痕实验和Transwell侵袭实验结果显示,Caripo?ride处理后,HeLa细胞损伤愈合的速度和穿过滤膜的细胞数量均明显少于对照组;Real-time RT-PCR及Western blot结果表明Cariporide可显著降低MT1-MMP mRNA和蛋白水平的表达量(P 均<0.05).结论:Cariporide可有效抑制人宫颈癌HeLa细胞的体外转移能力,其作用机制可能与降低MT1-MMP的表达有关.
关键词： 钠氢交换蛋白1 膜型基质金属蛋白酶1 粘附 迁移 侵袭 -
非类固醇类抗炎药NS398对肺癌H460细胞RECK及MT1-MMP表达的影响
目的 探讨非类固醇类抗炎药NS398对肺癌H460细胞增殖及其Kazal基序逆向诱导半胱氨酸丰富蛋白(RECK)及膜型基质金属蛋白酶1(MT1-MMP)表达的影响.方法 应用MTT方法检测H460细胞生长的抑制率,用免疫荧光法、Western blot法检测RECK及MT1-MMP蛋白的表达.结果 NS398可抑制H460细胞的增殖,促进RECK蛋白的表达,减少MT1-MMP蛋白的含量,并呈剂量依赖关系.结论 NS398可通过促进肺癌细胞RECK的表达并减少MT1-MMP的含量,进而抑制肺癌H460细胞的生长,这可能是肺癌侵袭转移的一个重要机制.
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膜型基质金属蛋白酶1在胃癌及癌周组织中的表达及临床意义
目的 探讨膜型基质金属蛋白酶1 (MT1-MMP)在胃癌及其周围组织中的表达和临床意义.方法 收集胃癌病例110例,利用免疫组化染色、RT-PCR分析MT1-MMP在手术切除肿瘤组织及瘤旁组织中表达的差异,以及与患者临床特点及预后的关系.结果 110例肿瘤标本根据染色结果评定,高表达组(＞4分)74例,低表达组(≤4分)36例,而瘤旁组织仅有5例呈低表达,其余均未见明显表达.RT-PCR显示Ⅰ、Ⅱ期胃癌与Ⅲ、Ⅳ期胃癌之间表达也具有统计学差异(P＜0.05),不同组织类型的胃癌之间表达无明显差异.患者肿瘤早期转移、2年复发率及生存率与MT1-MMP表达具有一定的相关性.结论 MT1-MMP在胃癌组织中表达明显高于癌旁肿瘤组织,与胃癌的病理类型无关,而与胃癌的分期有关.MT1-MMP高表达的胃癌患者,其预后往往差于低表达患者.MT1-MMP有可能作为胃癌治疗的一个新的靶向基因位点.
关键词： 膜型基质金属蛋白酶1 胃癌 -
H型高血压患者心肌纤维化与血管紧张素Ⅱ、膜型基质金属蛋白酶1水平变化的相关性
目的 探讨H型高血压患者心肌纤维化( MF)与血清血管紧张素( Ang)Ⅱ、膜型基质金属蛋白酶1( MT1-MMP)水平变化的相关性.方法 共纳入研究者187例,根据血压及同型半胱氨酸( Hcy)水平将患者分为H型高血压组72例、高血压对照组55例、正常对照组60例.收集一般临床资料和血生化检查结果,采用磁共振成像技术进行MF检测及图像分析测量T1值;采用酶联免疫法测定血清Hcy,MT1-MMP水平;采用放射免疫法检测血清AngⅡ水平,并且分析比较各组患者的T1值及T1值与血清Hcy、AngⅡ、MT1-MMP水平的相关性.结果 H型高血压组、高血压对照组、正常对照组T1值、血清AngⅡ、MT1-MMP水平比较差异有统计学意义(P<0. 05).直线相关分析T1值与血清Hcy、AngⅡ、MT1-MMP水平均呈负相关(P<0. 05).血清Hcy与AngⅡ、MT1-MMP水平呈正相关( P<0. 05).结论 高血压、Hcy是MF的危险因素.高血压、Hcy可能通过AngⅡ、MT1-MMP诱导H型高血压患者MF的发生.
关键词： 高血压 同型半胱氨酸 心肌纤维化 血管紧张素Ⅱ 膜型基质金属蛋白酶1 -
人MT1-MMP真核表达载体的构建及其在HepG2细胞中的表达及意义
目的:克隆人膜型基质金属蛋白酶1(MT1-MMP)基因,构建真核表达载体,并检测其在人肝癌细胞HepG2中的表达.方法:采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)从人正常肝组织中扩增MT1-MMP全长cDNA,将之与pMD18-T载体连接,测序后将该片段亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1中.将构建好的pcDNA3.1/MT1-MMP真核表达载体经酶切鉴定后,采用脂质体法转染入HepG2细胞,经G418筛选,得到阳性克隆细胞株.应用RT-PCR检测转染前后该细胞株MT1-MMP mRNA表达水平.结果:①RT-PCR获得长度约为704 bp的目的片段,与预期片段相符;②将pcDNA3.1/MT1-MMP真核表达载体经EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切鉴定,得到约5 400 bp和704 bp两个片段,测序结果证实所插入目的片段与GenBank中MT1-MMP cDNA序列匹配;③重组质粒转染株MT1-MMP mRNA表达水平(1.66±0.43)明显高于空质粒组(1.21±0.25)和对照组(1.19±0.18)(P＜0.01).结论:成功构建pcDNA3.1/MT1-MMP真核表达载体,并在人肝癌细胞株HepG2中稳定表达.
关键词： 膜型基质金属蛋白酶1 基因转染 真核表达 -
基质金属蛋白酶在涎腺良、恶性多形性腺瘤中的表达
目的:检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)、膜型基质金属蛋白酶1(MT1-MMP)、基质金属蛋白酶组织抑制剂2(TIMP-2)及细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN),在人正常涎腺组织和涎腺良、恶性多形性腺瘤中的表达,探讨其表达的生物学意义.方法:通过免疫组织化学技术SP法检测人66例正常涎腺组织、45例涎腺多形性腺瘤及42例涎腺恶性多形性腺瘤中,MMP-2、MT1-MMP、TIMP-2及EMMPRIN的表达,采用χ2检验比较3种组织中MMP-2、MT1-MMP、TIMP-2及EMMPRIN表达的差异.结果:MMP-2在人正常涎腺组织,涎腺良、恶性多形性腺瘤中的阳性表达率分别为9.09%、46.67%、85.71%;MT1-MMP在以上3种组织中的阳性表达率分别9.09%、53.33%、78.57%;TIMP-2在以上3种组织中的阳性表达率分别为10.61%、44.44%、59.52%;EMMPRIN在以上3种组织中的阳性表达率分别为13.64%、48.89%、83.33%.MMP-2、MT1-MMP、TIMP-2及EMMPRIN在涎腺多形性腺瘤中的表达显著高于人正常涎腺组织,且MMP-2、MT1-MMP及EMMPRIN在涎腺良、恶性多形性腺瘤中表达的差异有统计学意义.结论:在涎腺多形性腺瘤中,MT1-MMP、TIMP-2及EMMPRIN的表达与MMP-2的活化有关,且MMP-2、MT1-MMP、TIMP-2及EMMPRIN有可能作为判断多形性腺瘤侵袭性的有效指标.
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CD44干扰对人宫颈癌HeLa细胞体外转移的影响及其作用机制
目的 研究CD44表达降低对人宫颈癌HeLa细胞体外转移能力的影响及其作用机制.方法 用特异性shRNA对.HeLa细胞内的CD44进行干扰,采用细胞划痕试验和Transwell侵袭试验分别检测HeLa细胞的迁移和侵袭能力,Real-time RT-PCR、Western blot法分别检测HeLa细胞膜型基质金属蛋白酶1(MT1-MMP)mRNA及蛋白的表达.结果 HeLa细胞内CD44表达降低后,HeLa细胞损伤愈合速度降低,细胞穿过滤膜的数量减少,MT1-MMPmRNA和蛋白表达量降低(P均＜0.05).结论 CD44表达降低可有效抑制HeLa细胞的体外转移能力,其作用机制可能与降低MT1-MMP表达有关.
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应力对成骨样细胞MG63中膜型基质金属蛋白酶1表达的影响
目的:研究压应力对成骨样细胞MG63中膜型基质金属蛋白酶1(Membrane type-1 matrix metalloproteinase,MT1-MMP)表达的影响.方法:应用四点弯曲力学加载仪对成骨样细胞MG63施加不同时间及不同力值的压应力,运用Western Blot及Reverse Transcription PCR(RT-PCR)检测MT1-MMP蛋白及mRNA表达的变化.结果:当应变值为2000 μst rain时,力学刺激对成骨样细胞MG63中MT1-MMP表达作用强.应变值恒定(2000μst rain)时力学刺激呈时间依赖性的上调MT1-MMP的表达.结论:不同时间、不同力值的压应力可以影响成骨样细胞MG63中MT1-MMP的表达,进而影响骨改建.
关键词： MG63 压应力 膜型基质金属蛋白酶1 -
膜型基质金属蛋白酶1及其诱导因子在结直肠癌中表达与预后的相关性
目的 探讨基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)及膜型基质金属蛋白酶1(MT1-MMP)在结直肠癌组织中的表达与肿瘤的侵袭、转移及预后的关系.方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测48例结直肠癌组织及其癌旁正常组织中EMMPRIN及MT1-MMP mRNA的表达,并用免疫组化SABC法检测上述组织中EMMPRIN及MT1-MMP蛋白的表达.结果 48例肿瘤组织中35例(72.9%)有EMMPRIN mRNA的表达,30例(62.5%)有MT1-MMP mRNA的表达.免疫组化染色分别有31例(64.6%)EMMPRIN和25例(52.1%)MT1-MMP呈阳性反应,但在癌旁正常组织中均未检测到EMMPRIN和MT1-MMP mRNA及蛋白的表达.EMMPRIN与MT1-MMP mRNA的相对表达强度与患者年龄、性别、肿瘤大小、浸润深度以及肿瘤类型和分化程度无关(均P＞0.05),但与Duke's分期、区域淋巴结转移和远处转移情况呈显著相关(均P＜0.01),且EMMPRIN和MT1-MMP的mRNA表达呈显著正相关(r=0.728,P＜0.01).EMMPRIN mRNA阳性表达的患者平均生存期为(37.8±14.6)月,阴性患者为(54.7±11.3)月,5年生存率前者为41.2%,显著低于阴性患者的70.4%(P＜0.01),EMMPRIN和MT1-MMP mRNA的阳性表达同患者的总生存率显著相关(P＜0.01,P＜0.05).结论 MT1-MMP及其诱导因子EMMPRIN与结直肠癌的侵袭与转移密切相关,有可能作为判断结直肠癌侵袭性的有效指标,高表达EMMPRIN和MT1-MMP可能预示着结直肠癌患者不良的预后.
关键词： 膜型基质金属蛋白酶1 基质金属蛋白酶诱导因子 结直肠肿瘤 预后 -
金属蛋白酶及其抑制剂在大鼠正常及纤维化肝脏中的表达
目的:了解膜型基质金属蛋白酶1(MT1-MMP)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP1)在大鼠正常及纤维化肝脏中的表达.方法:用60%CCl4加5%乙醇制作大鼠肝纤维化模型,利用原位杂交及免疫组化的方法检测MT1-MMP, MMP2,TIMP1的表达并与正常对照组比较.结果:在纤维化肝脏中,MT1-MMP, MMP2,TIMP1主要表达在成纤维细胞、肌成纤维细胞中,以纤维间隔及汇管区明显,血管内皮细胞有低水平表达.而正常组中仅有内皮细胞有低表达,明显弱于肝纤维化组.结论:在肝纤维化中,成纤维细胞及肌成纤维细胞是MT1-MMP、 MMP2、TIMP1表达的主要细胞.
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广西壮族男性膜型基质金属蛋白酶1基因多态性与骨质疏松症的相关性
目的 探索膜型基质金属蛋白酶1(membrane-type l matrix metalloproteinase,MTl-MMP,MMP14)基因的多态性与广西百色地区壮族男性骨质疏松症的相关性.方法 用超声骨密度仪测量百色地区301名壮族男性左跟骨超声振幅衰减(broadband ultrasonic attenuation,BUA),并根据中国人骨质疏松症建议诊断标准分为正常对照、骨量减少以及骨质疏松组.应用Multiplex SNaPshot SNP分型技术确定MMP14基因5个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点(rs1003349、rs3751488、rs2269213、rs2236303和rs743257)的基因型.结果 全部位点的多态性分布均符合Hardy-Weinberg平衡(P＞0.05).多元线性逐步回归分析提示,上述多态性与BUA变异无相关性(P＞0.05).rs2236303位点CC基因型(vs.TT,OR=10.604,95％CI:1.899～59.228,P=0.007)、CT基因型(vs.TT,OR=5.602,95％CI:1.351～23.24,P=0.018)以及rs1003349的GT基因型(vs.GG,OR=4.884,95 ％CI;1.087～21.949,P=0.039)在骨质疏松组的频率显著偏高.连锁不平衡分析显示,rs1003349和rs2236303位点存在一般连锁(D′=0.839,r2 =0.458,P＜0.01),两个位点的单倍型G-T在骨量正常组与骨质疏松组中的频率差异有统计学意义(P＜0.05),单倍型为G-T的个体发生骨质疏松症的风险显著高于G-C或T-C的个体(P＜0.05).结论 MMP14基因的rs1003349和rs2236303多态性位点可能与广西壮族男性骨质疏松症的易感性相关,rs1003349和rs2236303位点的单倍型G-C和T-C可能增加骨质疏松症的发病风险.
关键词： 膜型基质金属蛋白酶1 单核苷酸多态性 骨密度 骨质疏松症 壮族 -
雌激素对去卵巢大鼠牙槽骨组织结构和MT1-MMP表达的影响
目的:研究雌激素对去卵巢大鼠牙槽骨组织结构、MT1-MMP表达的影响.方法:对大鼠牙槽骨组织石蜡切片进行HE染色和MT1-MMP免疫组化染色,观察不同时期的正常大鼠、去卵巢大鼠和去卵巢后补充雌激素大鼠的牙槽骨组织结构情况和牙槽骨中MT1-MMP的表达及其分布特征.结果:雌激素缺乏会导致大鼠牙槽骨的骨代谢失衡,牙槽嵴与固有牙槽骨吸收、破坏;成骨细胞和骨细胞MT1-MMP表达降低,而破骨细胞MT1-MMP表达升高.结论:雌激素缺乏引起牙槽骨吸收,MT1-MMP表达水平和分布部位变化可能对其有调节作用.
关键词： 雌激素 骨质疏松 牙周炎 膜型基质金属蛋白酶1
