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结直肠癌患者与健康受试者外周血CD45RA+/CD45RO+淋巴细胞表型分析
目的 分析结直肠癌患者与健康受试者外周血CD45RA+/CD45RO+系列T淋巴细胞表达的差异.方法 运用流式细胞术(FCM)检测2010年1月至2013年12月解放军总医院收治的109例结直肠癌患者(试验组)与64例健康受试者(对照组)外周血CD45RA+、CD45RO+、CD4+ CD45RA+、CD4+ CD45RO+T淋巴细胞亚群表达情况,统计分析试验组和对照组性别和年龄的分布是否存在差异,然后进一步分析CD45 RA等T淋巴细胞亚群与结直肠癌临床分期的关系.结果Ⅰ+Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期结直肠癌患者外周血CD45 RA+细胞百分率[三者分别为(56.23±7.75)％、(58.86±7.66)％和(59.02±9.71)％]明显高于对照组[(48.94±12.66)％],差异具有统计学意义(F=11.128,P＜0.001);Ⅲ期和Ⅳ期患者的CD45RO+细胞百分率[分别为(47.19±8.30)％和(45.41±10.45)％]则明显低于对照组[(53.43±11.75)％],差异具有统计学意义(F=5.817,P=0.00083);Ⅲ期和Ⅳ期患者CD45RA+/CD45RO+的比值(分别为1.32 ±0.46和1.43±0.63)明显高于对照组(1.00±0.47),差异具有统计学意义(F=6.986,P=0.000185);Ⅰ+Ⅱ期患者CD4+ CD45 RO+细胞百分率[(31.37±6.39)％]明显高于对照组[(27.49±7.19)％],差异具有统计学意义(F=2.368,P=0.009);Ⅳ期患者CD4+ CD45RA+/CD4+ CD45RO+的比值(0.66±0.39)明显高于Ⅰ+Ⅱ期的患者(0.49±0.23),差异具有统计学意义(F=1.812,P=0.029);各组之间CD4+ CD45RA+细胞百分率无明显统计学差异(F=0.637,P=0.592).结论 随着临床分期的增加,结直肠癌患者外周血CD45RA+细胞逐渐增加而CD45RO+细胞逐渐减少,反映出结直肠癌患者随着肿瘤的进展其免疫功能逐渐抑制、逐渐降低的动态过程;CD4+ CD45RA+细胞和CD4+ CD45RO+细胞在反映结直肠癌患者机体免疫功能方面不如CD45RA+细胞和CD45RO+细胞敏感.
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CD45RO N-糖基化位点对galectin-3结合CD45RO突变体转染细胞的影响
目的 构建CD45RO不同N-糖基化位点突变的T细胞株,并检测其与galectin-3的结合情况.方法 采用N→Q定点突变技术分别去除CD45RO的11个N-糖基化位点,制备单个N-糖基化位点缺失的CD45RO,然后将其导入慢病毒表达载体pWPXL中,11个携带单个N-糖基化位点缺失的CD45RO重组慢病毒质粒与慢病毒包装质粒psPAX2和MD2.G共转染293T细胞,将包装重组慢病毒感染CD45-的J45.01细胞,流式分选后获得11株分别表达CD45RO单个N-糖基化位点缺失的J45.01 T细胞株.通过RT-PCR和流式细胞术分别从RNA水平和蛋白水平验证CD45RO突变体的转录和表达,应用流式细胞术检测CD45RO突变细胞株与galectin-3的结合情况.结果 成功构建了1 1个CD45RO单个N-糖基化位点缺失的T细胞株,各突变细胞株能稳定表达突变基因,经测序再次证实突变位点正确,CD45 RO突变体能稳定表达于细胞表面.galectin-3与N327Q突变细胞的结合明显增强,与N36Q突变细胞和N217Q突变细胞的结合明显减弱.结论 CD45RON-糖基化位点对galectin-3与CD45 RO-J45.01细胞的结合有调节作用.
关键词： 半乳糖凝集素-3 结合 N-糖基化位点 CD45RO Jurkat T细胞 -
CD45RO阳性的B细胞性淋巴瘤
目的研究免疫表型异常淋巴瘤的起源.方法从48例B细胞淋巴瘤中筛选出3例CD45RO、CD20和CD79a(+),CD3(-)的淋巴瘤.采用免疫组化、PCR和基因扫描技术对其免疫表型,免疫球蛋白重链基因重排(IgH)和T细胞受体基因重排(TCR)进行深入研究.结果 3例淋巴瘤均为结外淋巴瘤.1例为滤泡性淋巴瘤,2例为弥漫性大B细胞性淋巴瘤.PCR和基因扫描显示3例均有IgH克隆性扩增;PCR未显示TCR扩增;高敏感性基因扫描显示低峰值TCR克隆性扩增,提示可能为背景T细胞扩增.结论 CD45RO不是T细胞特异性抗原,CD45RO阳性细胞不能完全等同于T细胞,因此,在研究和临床病理诊断中应选用多种抗体配合使用.
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类风湿性关节炎滑膜淋巴细胞CD20、CD45RO的表达及意义
目的 检测类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者滑膜组织中淋巴细胞CD20、CD45RO的表达及分布状况,探讨其在RA发病中的作用.方法 采用免疫组织化学SP法检测65例RA患者和10例骨性关节炎(osteoarthritis,OA)患者滑膜组织淋巴细胞CD20、CD45RO的表达状况.结果 CD20阳性淋巴细胞在RA组(33.7±6.7)中水平显著高于OA组(3.4±1.8),差异具有统计学意义(t=29.736,P＜0.01).CD45RO阳性淋巴细胞在RA组(38.2±11.5)中水平显著高于OA组(9.1±2.7),差异具有统计学意义(t=17.535,P＜0.01).在RA病例中,滑膜下组织中CD20阳性淋巴细胞多灶性聚集,CD45RO阳性细胞灶性或弥漫分布,滑膜下组织CD20阳性淋巴细胞水平低于CD45RO阳性淋巴细胞,差异具有统计学意义(t=-2.732,p＜0.01).CD45RO与CD20表达无相关性(r=0.024,P＞0.05).结论 CD20、CD45RO阳性淋巴细胞在RA滑膜组织中均明显增多,B、T淋巴细胞在RA的发病、发展中起重要作用.
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sCD40L、CD4+CD45RA+T细胞及CD4+CD45RO+T细胞在儿童ITP中的作用
目的 探讨协同刺激分子可溶性CD40配体(sCD40L)及CD4+T辅助细胞CD45RA和CD45RO亚群在儿童特发性血小板减少性紫癜中的变化.方法 用ELISA法检测25例ITP患儿血浆sCD40L水平;用微量全血流式细胞术法检测ITP患儿外周血CD4+T辅助细胞CD45RA和CD45RO的表达率;并对sCD40L与血小板计数进行相关分析.结果 ITP患儿血浆sCD40L浓度明显升高,与对照组比较差异有显著性(P<0.05);CITP组血浆sCD40L浓度升高更为明显,与AITP 组或对照组比较差异均有显著性(P<0.05).ITP患儿CD4+CD45RA+T细胞表达率下降,CD4+CD45RO+T细胞表达率升高,差异均有显著性意义(P<0.05),而AITP和CITP之间差异无显著性(P>0.05).血浆sCD40L与外周血小板计数无相关性(r=-0.047,P>0.05).结论 CD40L高表达导致的CD40L/CD40信号传导通路异常可能参与ITP发病;ITP患儿存在Th细胞亚群偏移,表现为Th1细胞减少,Th2细胞增多.
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姜黄煎剂对银屑病皮损中CD45RO、VEGF和iNOS表达的影响
目的研究姜黄煎剂对寻常性银屑病的治疗效果,并探讨其可能的治疗机制.方法记录姜黄煎剂治疗前后皮损PASI评分,用免疫组化方法检测治疗前后皮损中CD45RO、VEGF和iNOS的表达.结果①姜黄煎剂治疗2月后PASI积分的下降有显著统计学意义(P＜0.01).②治疗后CD45RO阳性T细胞减少(P＜0.05),CD45RO+T细胞数目与PASI积分正相关(r=0.899,P＜0.05).③治疗后VEGF和iNOS阳性表达较治疗前明显下降(分别为P＜0.01,P＜0.05).二者染色评分与PASI无相关性(P＞0.05).结论姜黄对寻常性银屑病有较好的治疗效果,其治疗作用可能和皮损中CD45RO+记忆性T细胞减少有关.
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SOM与腺样体中CD45Ro、CD20、PCNA、BCL-2的关系
儿童分泌性中耳炎(SOM)与腺样体有关,腺样体肥大在儿童是常见病,腺样体是咽淋巴内环的组成部分,参与中央、外周淋巴器官的免疫调节性能[1],近年来的研究表明,腺样体免疫活性物对分泌性中耳炎的发病有重要意义[2].本研究通过对腺样体中CD45Ro、CD20、PCNA、BCL-2的测定,探讨它们对分泌性中耳炎发生、发展的作用,指导临床治疗.
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CD45RA和CD45RO在寻常型银屑病皮损中的表达的研究
目的:观察寻常型银屑病患者皮损中CD45RA和CD45RO的表达情况,探讨寻常型银屑病的发病机制.方法:免疫组化检测30例寻常型银屑病患者皮损中CD45RA和CD45RO的表达,取10例正常人的躯干皮肤做正常对照.结果:寻常型银屑病患者皮损中CIM5RO的表达明显高于对照组(P<0.01),CD45RA的表达和对照组比较无统计学意义(P>0.05).结论:寻常型银屑病患者皮损真皮中浸润的淋巴细胞以记忆性T淋巴细胞为主,推测细胞免疫在寻常型银屑病的发病中起重要作用.
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寻常型银屑病皮损CD45RA、CD45RO及CD43分子表达
目的：探讨寻常型银屑病皮损CD45RA、CD45RO及CD43分子的表达及其意义。方法：应用免疫组化技术对26例进行期寻常型银屑病皮损CD45RA、CD45RO及CD43分子表达进行研究。结果：26例患者皮损真皮内均见到CD45RA、CD45RO及CD43阳性浸润细胞，阳性率分别为（5.8±1.8）%、（86.6±12.5）%及(93.4±14.5)%。22/26的患者角质形成细胞表达CD43（+～）。结论：进行期寻常型银屑病患者皮损真皮内浸润细胞以记忆T细胞亚群为主，角质形成细胞和真皮浸润细胞可通过表达CD43分子，分别与真皮内炎性细胞和表皮角质形成细胞上的ICAM-1结合，从而促进炎性细胞向表皮内浸润。
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癌组织中CD45RO表达水平与肺腺癌患者临床病理特征及生存率的关联分析
目的 评估肿瘤组织CD45RO表达水平与肺腺癌手术患者的临床病理参数及预后的相关性.方法 选取121例进行手术的肺腺癌患者,采集肿瘤组织和癌旁组织样本.采用anti-CD45RO抗体进行免疫组织化学染色检测CD45RO表达水平,计算染色强度分数和染色面积分数的乘积得到总表达评分,并分为高、中和低表达.结果 相对于癌旁组织,CD45RO在肺腺癌组织中高表达;肿瘤组织CD45RO表达水平与肿瘤大小、淋巴结转移呈负相关;Kaplan-Meier (K-M)曲线显示,肺腺癌组织中的CD45RO表达水平越高,无病生存期(DFS)和总体生存期(OS)越长;多因素COX回归发现,肺腺癌组织CD45RO表达量能独立预测良好的DFS,然而,低分化和淋巴结转移均能独立预测不良的DFS;肺腺癌组织CD45RO表达量是较长OS的独立预测因素,而低分化、淋巴转移及远端转移均是OS的独立危险因素.结论 肿瘤组织中CD45RO的表达水平可作为新的、可靠的生物标记物,用于评估肺腺癌手术患者的临床病理特征和预后情况.
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cGVHD患者外周血中CD45 RA＋和CD45 RO＋T淋巴细胞亚群的特点及其临床意义
目的：探讨同种异基因造血干细胞移植（ allo-HSCT ）后发生慢性移植物抗宿主病（ cGVHD ）患者外周血中CD45 RA＋和CD45 RO＋T淋巴细胞亚群特点及其与cGVHD发生之间的关系。方法：回顾性研究广东省人民医院2001年3月～2009年9月64例造血干细胞移植植入成功的患者，其中无cGVHD发生21例，轻度cGVHD 15例，中度cGVHD 18例，重度cGVHD 10例，应用流式细胞术，对其外周血中CD4＋CD45RA＋、CD4＋CD45RO＋、CD8＋CD45RA＋和CD8＋CD45RO＋T淋巴细胞亚群进行检测。结果：与无cGVHD患者相比，cGVHD患者CD4＋CD45RA＋T细胞百分比均明显降低（P＜0.05），CD4＋CD45RO＋T细胞百分比均明显增高（ P＜0.05），而CD8＋CD45 RA＋、CD8＋CD45 RO＋T细胞百分比均无明显改变。轻、中、重度的cGVHD患者之间比较，CD4＋CD45RA＋、CD4＋CD45RO＋、CD8＋CD45RA＋和CD8＋CD45RO＋T细胞百分比均无明显改变。结论：CD4＋CD45RA＋和CD4＋CD45 RO＋T细胞可能对cGVHD的发生有重要意义。
关键词： CD45RA CD45RO 慢性移植物抗宿主病 流式细胞术 异基因造血干细胞移植 -
慢性乙型肝炎患者外周血CD45RA+、CD45RO+T淋巴细胞亚群的特点及临床意义
目的:探讨慢性乙型肝炎患者外周血CD4+ CD45RA+、CD4+ CD45RO+、CD8+ CD45RA+和CD8+ CD45RO+T淋巴细胞亚群的特点及其与肝病病情的关系.方法:采集46例轻中度慢性乙型肝炎患者、58例重度慢性乙型肝炎患者和30例健康人的外周抗凝血,应用流式细胞技术三色荧光分析法对其外周血中CD4+ CD45RA+、CD4+ CD45RO+、CD8+ CD45RA+和CD8+ CD45RO+ T淋巴细胞亚群进行检测.结果:轻中、重度慢性乙型肝炎患者与正常人相比,其外周血中CD4+、CD8+ T细胞均无明显改变;CD8+ CD45RA+ T细胞均明显降低,CD8+ CD45RO+ T细胞均明显增高,而CD4+ CD45RA+、CD4+ CD45RO+ T细胞均无明显改变;重度慢性乙型肝炎患者与轻中度慢性乙型肝炎患者相比,CD8+ CD45RA+ T细胞明显降低(P＜0.05),CD8+ CD45RO+ T细胞明显升高(P＜0.05).结论:乙型肝炎慢性化过程中,CD8+ CD45RO+ T细胞起重要作用且与慢性乙型肝炎患者病情的进展呈正相关;检测CD4+ CD45RA+、CD4+CD45RO+、CD8+ CD45RA+和CD8+ CD45RO+ T淋巴细胞亚群比检测CD4+和CD8+ T细胞亚群更能正确、充分、全面地了解慢性乙型肝炎的发病机制和预后,从而有效地指导临床治疗.
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CD45RA/CD45RO研究进展
目的 CD45RA CD45RO是白细胞共同抗原的两种异型.CD45RA+和CD45RO+T淋巴细胞在表型、功能等各方面均不同,了解其亚群的变化可能有助于了解许多疾病的发病机制、临床状态及预后.
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GD患者外周血CD4+CD28-T细胞亚群的表型特征及临床意义
检测Graves病(GD)患者外周血CD4+ CD28-T细胞水平及其表面CD45RO/CD45RA及ICOS的表达,探讨CD4+ CD28-T细胞亚群在GD免疫致病机制中的作用.采用三色荧光抗体染色及流式细胞术检测了42例初发GD患者和30例健康者外周血中CD4+ CD28-T细胞的百分率及其表面CD45RO/CD45RA和ICOS表达水平,同时检测其甲状腺功能并进行相关性分析.结果GD患者外周血中CD4+ CD28-T细胞百分率明显高于健康对照组,并高表达ICOS分子,与FT3水平显著正相关;与健康对照组相比,GD患者CD4+ CD28- CD45RO+ T细胞百分率也显著增高,而CD4+ CD28- CD45RA+ T细胞呈下降趋势,FT3、FT4水平与CD4+ CD28-T细胞表面CD45RO的表达率呈正相关,而FT3水平与CD45RA表达呈负相关.结论GD患者外周血CD4+ CD28-T细胞异常增高,表面高表达ICOS分子,具有记忆性细胞的表型特征,与甲状腺功能异常有一定的相关性,CD4+ CD28-T细胞可能是参与GD免疫病理反应的自身反应性T细胞.
关键词： Graves病 CD4+CD28-T细胞 CD45RO ICOS -
类风湿性关节炎患者淋巴细胞CD45RO、CD45RA的表达及临床意义
目的 检测类风湿性关节炎(RA)患者CD4+、CD8+细胞表达CD45RO和CD45RA亚群的变化并探讨其临床意义.方法 采用双色流式细胞术(FCM)检测28名正常人外周血、43例RA患者外周血和15例关节液的CD4+、CD8+细胞CD45RO、CD45RA的表达.结果 RA患者关节液CD4+、CD8+细胞表达CD45RO的百分比显著高于RA患者外周血和正常人外周血(P＜0.01);RA患者外周血CD4+、CD8+细胞表达CD45RO的百分比显著高于正常人外周血(P＜0.01).活动期RA患者血液CD4+、CD8+细胞表达CD45RO的百分比显著高于非活动期RA患者(P＜0.05,P＜0.01).结论 CD45RO+淋巴细胞是参与RA病理过程的主要淋巴细胞.
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癌相关CD8+记忆T细胞在过继免疫治疗中的应用
针对癌症患者的过继免疫治疗是临床肿瘤治疗研究中的热点话题.癌症患者体内天然存在着能够对恶性肿瘤细胞进行识别、攻击和杀伤的癌相关CD8+记忆T细胞,它们具有对少量肿瘤细胞产生快速免疫应答和持续长期发挥抗癌作用的优点.癌相关CD8+记忆T细胞主要存在于骨髓中,如将骨髓中的这部分T细胞分离出来,并以特定手段激活并回输体内,将可发挥强大的免疫治疗作用.为了帮助临床癌症治疗研究者们更加清晰地认识癌相关CD8+记忆T细胞的生物学特性、肿瘤杀伤能力和临床治疗效果,并妥善处理实际应用过程中遇到的各种问题,本文对近年有关癌相关CD8+记忆T细胞在肿瘤免疫治疗中应用的研究进展加以介绍.
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类风湿性关节炎患者IL-17和淋巴细胞CD45RO表达的临床意义
目的:检测类风湿性关节炎(RA)患者血中白细胞介素(IL-17)和CD4+、CD8+T细胞表达CD45RO抗原的水平,探讨其在RA发病过程中的作用.方法:采用ELISA和双色流式细胞技术分析92例RA患者血中IL-17水平和CD4+、CD8+T细胞表达CD45RO抗原阳性率.结果:IL-17在RA患者血清中出现明显的升高(P<0.05),血浆中CD4+CD45RO+、CD8+CD45RO+T淋巴细胞阳性率也均明显高于对照组(P<0.01).结论:CD45RO+T细胞参与了 RA发病,这些细胞在 RA炎症部位大量聚集,促使IL-17的大量分泌,导致疾病的发生.
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多发性肌炎和皮肌炎外周血CD45RA+及CD45RO+细胞亚群的变化
目的: 研究多发性肌炎(PM)和皮肌炎(DM)外周血单一核细胞(PBMCs)中CD45RA+、CD45RO+细胞亚群的变化.方法: 应用双色荧光标记抗体、流式细胞仪对PM和DM外周血CD45RA+、CD45RO+细胞亚群进行了检测.结果: (1)PM和DM的PBMCs中CD45RA+细胞显著低于对照组,CD45RO+细胞和CD45RO+/RA+比值均显著高于对照组,PM的CD45RA+细胞显著低于DM(均P＜0.05).(2)在PM的CD4+亚群中,CD45RA+细胞显著低于对照组和DM,CD45RO+细胞和CD45RO+/RA+比值显著高于对照组(均P＜0.05).(3)在DM的CD4+亚群中,CD45RA+细胞与对照组比较无显著性差异(P＞0.05),CD45RO+细胞和CD45RO+/RA+比值显著高于对照组(均P＜0.05).(4)在CD8+亚群中,PM和DM的CD45RA+、CD45RO+细胞与对照组比较,均无显著性差异(均P＞0.05),但CD45RO+/RA+比值均显著高于对照组(均P＜0.05).结论: 在PM和DM自身免疫发病过程中PBMCs和CD4+、CD8+亚群中的CD45RO+、CD45RA+细胞可能起重要作用,PM和DM在免疫学方面存在一定的异质性.
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CD53和胸腺细胞亚群与重症肌无力胸腺异常关系的研究
目的:比较重症肌无力患者胸腺与正常胸腺中CD53与胸腺细胞亚群的差异,探讨重症肌无力患者胸腺异常增生的机制.方法:采用流式细胞术分析重症肌无力患者胸腺与正常胸腺(对照组)中胸腺细胞CD4、CD8、CD45RA、CD45RO的表达,采用实时荧光定量PCR技术检测重症肌无力患者和对照组胸腺组织CD53 mRNA的表达水平.结果:重症肌无力患者胸腺双阳性细胞(CD4+CD8+)、单阳性细胞(CD4+CD8-和CD4-CD8+)均高于对照组差异有统计学意义(P<0.01).CD45RA分子表达明显低于对照组(P<0.01),CD45RO分子表达明显高于对照组(P<0.01).荧光定量PCR发现CD53 mRNA的相对表达量在重症肌无力患者胸腺组织中为(4.45±0.5),对照组为(5.58±3.140),与对照组相比较,重症肌无力患者胸腺组织中CD53mRNA的表达上调2.66倍.结论:CD53与重症肌无力患者胸腺细胞亚群异常分布有关,可能与重症肌无力胸腺异常及其发病机制有关.
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玫瑰糠疹患者皮损中CD45RA与CD45RO的表达
目的:观察玫瑰糠疹患者皮损中CD45RA与CD45RO的表达情况,探讨玫瑰糠疹的发病机制.方法:免疫组化SP法检测30例玫瑰糠疹患者皮损中CD45RA与CD45RO的表达,取10例正常人躯干部皮肤作对照.结果:玫瑰糠疹患者皮损中CD45RO的表达明显高于正常对照组(P＜0.01),CD45RA的表达和正常对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:玫瑰糠疹患者皮损真皮中浸润的淋巴细胞以记忆性T淋巴细胞为主,推测细胞免疫在玫瑰糠疹的发病中起主要作用.
