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药物筛选模型和技术及其在中药活性成分研究中的应用
现代生物技术的发展和药物作用靶标的揭示,为中药活性成分的研究提供了新的技术和手段.本文就整体动物模型、受体模型和分子生物色谱、细胞模型和细胞膜色谱、基因芯片技术4种药物筛选模型和技术及其在中药活性成分研究中的应用进行了分析、综述,为推动中药活性成分研究、加速中药现代化步伐提供参考.
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依地福新诱导异源表达人凋亡基因的酿酒酵母细胞的凋亡
酵母作为一种容易进行操作的生物模型,广泛应用于异基因表达和结构与功能的研究中[1].尽管它们可能缺乏某些与高等生物相似的凋亡调节因子的同功异构体,但在某些生理情况下(如突变体、乙酸处理等)或在异源表达哺乳动物促凋亡基因时,可观察到细胞的凋亡.
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3D生物模型制作工具
过去十几年,国内的3D生物模型和动画制作水平与国外相比差距很大.但是近几年,随着电脑技术的飞速发展,人们可以越来越方便地使用各种3D制作软件,用3D软件制作逼真的生物造型和动画.
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2D医学图像处理工具
1引言2D图像处理远较3D生物模型制作工具的品种和规格多,其在医学图像处理方面的应用也更广.2D医学图像处理工具改变图像的能力只受限于人的想象力和使用程序工具的技巧.表1列出了2D图像处理工具的作用.
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装潢居室的空气污染对果蝇寿命的影响
新型建筑装饰材料在给人们带来美观方便的同时,也给生活带来了不利影响[1,2].目前居室环境检测主要是甲醛、苯、甲苯、二甲苯等单一因素指标,而缺乏综合的监测和评估方法.以往实验发现,空气中的有害物质可以明显缩短果蝇寿命[3].为进一步验证实验结果,本研究采用黑腹果蝇的生存实验来检测室内装潢环境对果蝇寿命的影响,以期建立一种综合评价室内空气污染的果蝇生物模型.
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莱菔硫烷激发的细胞自噬潮对离体人晶状体囊上细胞增生的抑制作用
背景 研究已证实莱菔硫烷(SFN)为一种有效的化学预防剂,能调控生物体不同的分子机制以抑制细胞的无序生长.自噬是人体细胞维持自身内环境的生物过程,探讨SFN对晶状体上皮细胞(LECs)生物学行为的影响及其与细胞自噬的关系有助于为后发性白内障(PCO)的预防和靶向治疗提供新的思路.目的 探讨SFN诱导人LECs凋亡的直接作用及其激发细胞自噬潮的作用机制. 方法 将离体24 h内的人供体眼行常规白内障超声乳化手术,取出的完整晶状体囊袋置于含体积分数2％胎牛血清的EMEM中培养,建立PCO囊袋模型.按照分组分别于培养基中添加0(空白对照组)、1、10和100 μmol/L SFN培养30 d,观察各组晶状体囊袋上细胞的生长情况,并采用免疫荧光技术检测细胞中F-actin和Vimentin的表达.用含5％胎牛血清的EMEM培养晶状体上皮细胞系FHL124,将培养的细胞分为空白对照组1、10、30和100 μmol/L SFN处理组,行乳酸脱氢酶(LDH)释放试验以测定各组细胞LDH释放的百分率;采用划痕试验检测各组细胞划痕面积的变化以评估细胞迁移能力;透射电子显微镜下观察各组细胞中自噬囊泡的超微结构及数量;采用Western blot法检测SFN组、SFN+3-MA组和3-MA处理的细胞自噬活动特异蛋白LC3的相对表达. 结果 各不同质量浓度SFN组晶状体囊袋上细胞覆盖率总体比较差异有统计学意义(F=48.57,P＜0.01).10 μmol/L SFN组明显低于空白对照组和1μmol/L SFN组.免疫荧光检测技术表明空白对照组增生细胞中F-actin和Vimentin染色阳性,增生的细胞排列致密,随着SFN质量浓度升高,F-actin和Vimentin阳性细胞密度下降,100 μmol/L SFN组未发现F-actin和Vimentin阳性细胞.空白对照组及1、10、30和100 μmol/L SFN组细胞LDH释放量(A值)分别为0.19±0.03、0.39±0.06、0.56±0.07、0.68 ±0.08和0.89±0.09,其中10、30、100 μmol/L SFN组细胞LDH释放量均明显高于空白对照组,随着SFN质量浓度升高,细胞LDH释放量逐渐增加,均明显高于其相邻的低质量浓度组,差异均有统计学意义(均P＜0.01).随着SFN质量浓度的升高,划痕面积减少率呈下降趋势,10、30、100 μmol/L随着SFN质量浓度升高,划痕面积的减少均明显低于其相邻的低质量浓度组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).空白对照组、SFN组、SFN+3-MA组和3-MA细胞中LC3-Ⅱ蛋白表达的灰度值分别为0.423±0.003、14.543±0.024、0.668±0.024和0.576±0.056,SFN+3-MA和3-MA组LC3-Ⅱ蛋白表达的灰度值均明显低于SFN组,差异均有统计学意义(均P＜0.01).空白对照组及1、10和100 μmol/L SFN组间自噬小体数量分别为4.07 ±0.32、4.13±0.34、9.21 ±0.53和21.02±1.34,其中10和100 μmol/L SFN组细胞中自噬小体数量均明显高于空白对照组及1μmol/L SFN组,差异均有统计学意义(均P＜0.01). 结论 SFN可以激发人LECs自噬潮,从而抑制离体人晶状体囊上LECs的增生,促进LECs的死亡.本研究结果有望成为预防和治疗PCO的新药.
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白细胞介素-22在大鼠角膜移植术后角膜中的动态表达及其与排斥反应的关系
背景 角膜移植术后的免疫排斥反应仍然是导致角膜移植失败的首要原因,其免疫机制非常复杂.研究证实,辅助性T细胞17(Th17)及其主要效应分子之一白细胞介素-22(IL-22)对心脏、肝脏及骨髓等器官移植方面产生影响,但其在角膜移植排斥反应中的作用尚不确定.目的 探讨IL-22在大鼠角膜移植术后免疫排斥反应中的作用.方法 SPF级雌性SD大鼠24只,SPF级雌性Wistar大鼠76只,体质量180 ～220 g.按照随机数字表法将受体大鼠随机分为自体角膜移植组、同种异体角膜移植组和同种异体角膜移植抗排斥组,另取4只健康Wistar大鼠作为正常对照组.24只SD大鼠作为供体,48只Wistar大鼠作为受体,行同种异体角膜移植术;24只Wistar大鼠行自体角膜移植术.同种异体角膜移植抗排斥组大鼠术后用妥布霉素地塞米松滴眼液点眼2周.术后每日裂隙灯显微镜下观察大鼠角膜植片情况,参照Larkin等的排斥反应评分标准判断角膜植片的存活情况,采用Kaplan-Meier生存分析法比较各组角膜植片的累积生存率.分别于术后第5天、第14天任意取3只大鼠角膜行组织病理学检查,并于相应时间点任意取各组5只大鼠角膜植片行实时荧光定量PCR检测,计算并比较各组大鼠角膜组织中IL-22 mRNA和配体激活转录因子芳香烃受体(AhR) mRNA的相对表达量.结果 同种异体角膜移植组角膜植片的平均存活时间为10 d,同种异体角膜移植抗排斥组为17d,差异有统计学意义(x2=16.442,P=0.000).术后不同时间点正常对照组、自体角膜移植组、同种异体角膜移植组和同种异体角膜移植抗排斥组大鼠角膜中IL-22 mRNA的相对表达量总体比较差异均有统计学意义(术后5 d:F=2.44,P=0.00;术后14 d:F=267.92,P=0.00),其中术后5d和14 d同种异体角膜移植组角膜中IL-22 mRNA的相对表达量均明显高于同种异体角膜移植抗排斥组(术后5 d:9.70±0.35比0.46±0.21;术后14 d:23.12±1.89比3.14±0.94),差异均有统计学意义(均P＜0.05).术后不同时间点4个组大鼠角膜中AhR mRNA的相对表达量明显不同,总体比较差异均有统计学意义(术后5 d:F=395.73,P=0.00;术后14 d:F=942.37,P=0.00),其中术后5d和14 d同种异体角膜移植组角膜中AhRmRNA的相对表达量均明显高于同种异体角膜移植抗排斥组(术后5 d:2.52±0.32比1.89±0.10;术后14 d:7.20±0.25比2.60±0.17),差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 IL-22在发生角膜移植免疫排斥反应的大鼠角膜中呈高表达,妥布霉素地塞米松滴眼液点眼可通过下调IL-22的表达而抑制免疫排斥反应,AhR对IL-22在角膜植片中的表达发挥调控作用.
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基于创新药物研究的心肌缺血/心肌梗死生物模型
目的:为心肌缺血/心肌梗死的创新药物评价提供合理可靠的生物模型.方法:通过查阅2001-2011年中国知网、万方、维普及PubMed、HighWire Press、EBSCO-ASP等数据库的相关文献,对实验动物的选择和方法进行归纳总结.结果:基于创新药物研究的心肌缺血/心肌梗死生物模型主要包括3类,即整体实验动物模型、离体组织器官模型及体外细胞模型;实验方法有适用于急性或者亚急性心肌梗死模型的冠状动脉结扎法、适用于心肌缺血模型的离体心脏法、适用于心肌损伤模型的体外培养心肌细胞法等.结论:在创新药物研究过程中,根据不同阶段的需要选择合适的模型,有利于提高研究效率,降低研究风险.
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瘢痕疙瘩的治疗进展
瘢痕疙瘩虽然历史久远,但在治疗方面仍然是整形外科的难题之一.由于难以控制其复发,到目前为止国内外还没有一种非常满意的治疗方法.瘢痕疙瘩是人类所特有的,加之目前尚不能制作满意的生物模型,使其实验研究工作进展缓慢.就目前所知理论,有效的治疗方法是去除病变,并通过抑制成纤维细胞的增殖及其胶原的合成、分泌或沉积来预防其复发.其治疗方法有手术、药物注射、放射治疗、激光、硅凝胶、加压及冷冻等多种,单一的治疗方法疗效均不理想,目前较统一的主张是多种方法联合应用,进行综合治疗才能取得较好的疗效.现就近年来有关瘢痕疙瘩治疗的研究进展综述如下.
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浅谈三羧酸循环与精气的生化
建立相应的生物模型是中医基础理论研究的重要方法;三羧酸循环从生物化学角度阐释了中医精气生化理论,明确了精与气的物质本质和精气生化过程中熵的变化规律;从而证明了从生命的产生到消亡的整个过程中物质和能量的守恒.
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β射线体外诱导单层贴壁细胞凋亡生物模型的建立与吸收剂量的估算
选用纯β-发射体32P胶体掺入人肺腺癌A549细胞体外培养体系,定时洗去干预因子,动态观察细胞凋亡,建立β射线体外诱导单层贴壁细胞凋亡的生物模型.计算单层细胞厚度,根据β面源吸收剂量估算公式估算生物模型吸收剂量.结果表明,模型稳定、重复性好,为研究核素内照射治疗实体瘤的可能机制提供了符合临床实际情况的体外观察β射线诱导细胞凋亡和吸收剂量估算的方法.
