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  • 幽门弹簧插入配合高盐热糊灌胃复制大鼠慢性萎缩性胃炎癌前病变模型形态学观察及早期细胞凋亡分析

    作者:张玉禄;李军祥;鲁香凤;戴欣;朱陵群;尹军祥;孙海芸

    目的:研究幽门弹簧插入配合高盐热糊灌胃法复制慢性萎缩性胃炎(CAG)癌前病变大鼠模型形态学及早期细胞凋亡特征.方法:采用幽门弹簧捕入配合高盐热糊灌胃法复制CAG癌前病变模型,用双标记流式细胞术分析CAG癌前病变大鼠细胞凋亡的特征.结果:光镜观察表明CAG癌前病变模型复制成功,CAG癌前病变模型组大鼠早期凋亡率明显高于正常组(P<0.01).结论:幽门弹簧插入配合高盐热糊灌胃法成功复制CAG癌前病变大鼠模型,细胞凋亡增强可能是CAG癌前病变的发病机制之一.

  • Annexin V在低氧滋养细胞中的表达下调

    作者:辛虹;郑丽丽;王惠兰

    目的 探讨膜联蛋白V( Annexin V)在体内低氧滋养细胞中的表达及其意义.方法 采用免疫组化、流式细胞术等实验技术测定低氧滋养细胞内膜联蛋白V的表达.结果 1)体内低氧状态下滋养细胞Annexin V的表达显著低于正常滋养细胞.2)体外实验显示随着Annexin V浓度的增加,其抗凝功能呈梯度性变化.结论 低氧滋养细胞中Annexin V表达呈明显下调,可能影响胎盘滋养细胞的生理功能,导致多种不良妊娠结局.

  • 钙滴定法测定~(99m)Tc定点标记膜联蛋白V的亲和力

    作者:蔡炯;李方;牛娜;王世真

    目的 测定一种新型~(99m)Tc定点标记膜联蛋白V与磷脂酰丝氨酸(PS)外翻红细胞的结合亲和力.方法 通过毕赤酵母的培养和甲醇诱导表达获得带有金属螯合位点的膜联蛋白V;用超滤的方法纯化膜联蛋白V;用葡庚糖酸钠和氯化亚锡还原将~(99m)Tc定点标记于膜联蛋白V氨基末端.采用不同浓度钙离子滴定放射性膜联蛋白V结合磷脂酰丝氨酸外翻红细胞的亲和力.结果 在不同的蛋门质分子/细胞比值下测定出的半数标记蛋白结合细胞的钙离子浓度是不同的,在低蛋白质分子/细胞比值下测定~(99m) Tc-膜联蛋白V对细胞的亲和力pK=33.4.结论 毕赤酵母系统重组表达的膜联蛋白V具有较高的结合外露PS红细胞的能力.

  • MRI观察超顺磁性纳米颗粒标记的Annexin V体外检测细胞凋亡

    作者:李宗芳;刘流;田伟;滕皋军;张宇;葛玉卿;王福科

    目的 利用MRI观察超顺磁性纳米颗粒(SPIO)标记的膜联蛋白 V(Annexin V)体外检测凋亡细胞的能力.方法 对5管不同的细胞进行MRI和普鲁士蓝染色,分别为:A管:未经H2O2诱导凋亡处理的细胞与SPIO孵育;B管:经H2O2诱导凋亡处理的细胞与SPIO孵育;C管:经H2O2诱导凋亡处理的细胞的空白管;D管:经H2O2诱导凋亡处理的细胞与Annexin V-SPIO孵育;E管:未经H2O2诱导凋亡处理的细胞与Annexin V-SPIO孵育.结果 5管间总体比较MR信号值差异有统计学意义(F=569.38,P<0.01),其中A、B、C三管的MR信号值差异无统计学意义,D和B管、E和A管、D和E管的MR信号值比较差异均有统计学意义.普鲁士蓝染色显示Annexin V-SPIO可与凋亡细胞膜特异性结合.结论 Annexin V-SPIO可与体外凋亡细胞特异性结合,并引起磁共振信号改变.

  • 膜联蛋白V与碘化丙啶用于细胞周期特异性凋亡的检测

    作者:陶德定;冷彦;覃吉超;周晖;申漫里;余源;龚建平

    目的建立一种新的细胞周期特异性凋亡检测方法.方法将急性早幼粒细胞白血病细胞株(HL-60)分别经喜树碱(CAM)、紫外线诱导,及喜树碱和N-甲苯磺酰基-L-苯基丙氨酸氯甲基酮(TPCK)共同诱导后,用异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V(Annexin V)进行标记,进行标记,经1%不含甲醇的甲醛溶液冰浴固定,再用含洋地黄皂苷的碘化丙啶染色液染色后,流式细胞术分析凋亡细胞的周期特异性和细胞凋亡率,并与DNA链缺口标记法(TdT)和常规Annexin V法检测结果进行比较.结果细胞凋亡的周期特异性分析:膜联蛋白V/碘化丙啶法(PA法)和TdT法结果一致,CAM和紫外线诱导的细胞凋亡分别发生在S期和G1期;CAM 和TPCK共同诱导试验显示,PA法对早期凋亡具有较高的检测灵敏度,TdT法则不能有效检测;而常规Annexin V法无法进行凋亡细胞的周期特异性分析.细胞凋亡率的检测:HL-60经CAM、紫外线、CAM与TPCK 三种方法诱导后,PA法检测凋亡率的结果(17.3%、34.7%、35.9%)与常规Annexin V法的检测结果(18.1%、35.6%、37.0%)一致(P>0.05),而TdT法(10.7%、19.5%、-)则明显偏低(P<0.01).结论 PA法可以用于凋亡细胞周期特异性检测,其稳定、可靠、灵敏度高.

  • 瘢痕疙瘩与正常皮肤的蛋白质组学研究

    作者:唐冰;胡志成;朱斌;陈斌;张凯;胡坤华;黎明涛;朱家源

    目的 通过比较瘢痕疙瘩与正常皮肤组织的蛋白质组表达差异,筛选出与瘢痕疙瘩产生相关的蛋白质.方法 2010年1月至6月运用蛋白质组学技术,对8例瘢痕疙瘩组织和3例正常皮肤组织进行差异双向凝胶电泳(2D-DIGE),选择差异蛋白质斑点,进行基质辅助激光解离飞行时间(MALDI-TOF/TOF)质谱分析和生物学信息分析.结果 成功建立瘢痕疙瘩和正常皮肤组织的双向凝胶电泳图谱,瘢痕疙瘩和正常皮肤组织凝胶电泳图谱中平均蛋白质斑点数分别为2978和3053,其中表达差异超过4倍的斑点共有40个,质谱分析和数据库检索共鉴定出32种蛋白质,包括上调蛋白有20种,下调蛋白有12种.从功能上可分为载体蛋白(3种)、信号转导蛋白(4种)、增殖凋亡相关蛋白(2种)、细胞骨架蛋白(6种)、细胞外基质蛋白(8种)、免疫因子(3种)、肿瘤相关蛋白(2种)和未知功能蛋白(4种).结论 蛋白质组学能较好地显示瘢痕疙瘩与正常皮肤组织间的蛋白质表达差异.对这些差异蛋白质进一步深入研究,将有助于揭示瘢痕疙瘩的发病机制,也为发现新的治疗靶点提供线索和依据.

  • 99mTc-Annexin V检测早期凋亡多巴胺能神经元的实验研究

    作者:黄金莎;曹卫;孙圣刚;兰晓莉;王涛;张永学

    目的 研究放射性核素标记的膜联蛋白V(Annexin V)与凋亡的多巴胺能神经元的结合特性,探讨使用凋亡显像剂99mTc-Annexin V早期活体显像诊断帕金森病的可行性.方法 采用不同浓度的1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium, MPP+)处理大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)和人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)以诱导其凋亡(PC12 0~200 μm/L, SH-SY5Y 0~500 μm/L),FITC -Annexin V及碘化吡啶(propidiumiodide, PI)双染进行流式细胞仪凋亡检测.以99mTc-Annexin V与凋亡的细胞进行饱和结合实验及细胞摄取实验,研究凋亡细胞与Annexin V的亲和力及其摄取99mTc-Annexin V的动力学.结果 MPP+可诱导PC12细胞及SH-SY5Y细胞发生凋亡,并有明显的量效关系.凋亡细胞可特异性与99mTc-Annexin V结合,亲和力可达(7.16±1.78)nmol/L,每个凋亡的多巴胺能神经元表面的结合位点可达到(179±33)fmol/106cells (PC12)及(220±26)fmol/106cells (SH-SY5Y),且神经元的凋亡水平与其膜结合的99mTc-Annexin V放射性强度有相关性(P<0.001).结论 凋亡的多巴胺能神经元与99mTc-Annexin V有高度亲和力,其所结合的99mTc-Annexin V放射性强度与细胞的凋亡水平相关,99mTc-Annexin V可用于检测多巴胺能神经元的早期凋亡.

  • 人膜联蛋白V二聚体的制备研究

    作者:蔡炯;曾嘉炜;李方;王世真

    目的 制备人膜联蛋白V二聚体,为其药理作用研究创造条件.方法 人膜联蛋白V基因转化毕赤酵母获得的转基因酵母用于本实验.在BMGY培养基中培养转基因酵母,在BMMY培养基中诱导人膜联蛋白V的分泌表达.通过硫酸铵沉淀、分子筛分离、超滤浓缩等纯化步骤序列处理BMMY培养基上清,用SDS-PAGE分析人膜联蛋白V形成二聚体的变化.结果 BMMY培养基诱导转基冈酵母2天后获得人膜联蛋白V,培养基上清经过硫酸铵沉淀、分子筛分离、超滤浓缩等纯化步骤序列处理后制备人膜联蛋白V二聚体.结论 本实验室制备出人膜联蛋白V二聚体,其药理作用有待进一步研究.

  • 针对孕妇外周血与胎盘中膜联蛋白 V的变化与胎儿生长受限的研究

    作者:郭海香;初晓丽;刘艳丽;陈倩;陶春梅

    目的 研究孕妇外周血及胎盘组织中 Annexin V变化与胎儿生长受限的关系.方法 以本院住院分娩的孕妇为研究对象,在随机选取的 125例患者中有 60例出现胎儿生长受限的情况,而剩余65例为正常孕妇,将其分为 FGR组和正常组进行研究,分别采用 ELISA法及免疫组化染色法测量孕妇外周血及胎盘组织中的 Annexin V含量变化.结果 所选研究孕妇基本资料情况的比较差异不具有差异性;而经过两种方法对 Annexin V 进行测定后,FGR组中外周血与胎盘组织中的含量均要低于正常组中的含量,以上数据均在差异比较范围内.结论 Annexin V的变化与胎儿生长受限的存在着一定的相关性,可以以此对胎儿的生长发育情况进行预测,并进行相应的干预.

  • 突变型人膜联蛋白V的重组表达

    作者:蔡炯;李方;张迎强;郑连芳;蒲圻

    目的 将人膜联蛋白V基因突变后转化入毕赤酵母重组表达,从培养液中纯化出具有内在金属螯合位点的活性突变型人膜联蛋白V.方法应用特异引物将天然人膜联蛋白V基因的5'和3'端进行突变改造,将突变型膜联蛋白V基因插入到pPIC9K质粒并进行基因测序鉴定.将正确连接的表达质粒线性化后用电穿孔法转化到毕赤酵母GS115中.通过MD平板筛选转化子、BMGY培养基培养、甲醇诱导表达目的蛋白质.培养物经过离心获取上清液,用SDS-PAGE和银染分析蛋白质的表达情况,通过外露磷脂酰丝氨酸的红细胞和异硫氰酸荧光素标记膜联蛋白V测定上清液中突变型人膜联蛋白V的结合活性.结果 天然人膜联蛋白V基因5'端融合GCAGGCGGCTGCGGCCAT编码序列,3'端946~948位TGT突变为AGC.毕赤酵母转化子分泌产生相对分子质量为36000的蛋白质,其半数抑制浓度为4nmol/L.结论 利用毕赤酵母系统表达出高活性的、具有内在金属螯合位点的突变型人膜联蛋白V.

  • 放射性核素细胞凋亡显像

    作者:张金山

    放射性核素细胞凋亡显像具有直观、无创伤和实时在体观察细胞凋亡等特点,对于脑、心肌细胞缺血再灌注损伤的观察,器官移植排斥反应的监测,肿瘤放疗和化疗效果的评估等方面的应用前景良好,但仍有许多问题有待于进一步探讨.

  • 凋亡心肌核素显像的研究进展

    作者:段炼;李险峰

    细胞凋亡出现在许多心血管疾病中,如何测量和监测凋亡过程在临床决策中具有十分重要的价值.本文就99Tcm标记的膜联蛋白V(annexin V)心肌凋亡核素显像在心脏移植排斥反应、缺血性心脏病、心力衰竭及评价各种抑制凋亡药物的疗效等方面的研究进展进行了综述.

  • MR细胞凋亡成像研究进展

    作者:张洪春;蔡赛男;谭娜;廖海燕;周炳;王国涛;夏喜斌

    检测细胞凋亡对于早期发现可能病变及评价疾病早期治疗效果具有重要意义.近年出现的许多基于MRI的新型凋亡探针改善了MR成像质量.通过合成针对细胞膜上外翻的磷脂酰丝氨酸和显示半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活性的尺寸更小的探针,提高了探针组织穿透力;为提高探针与靶点结合的特异性,优化了许多原有探针分子结构;基于MR成像新技术,合成了一些新型探针如Caspase-3敏感的纳米聚合性MR探针(C-SNAM),在一定程度上达到了提高信号强度的目的.

  • 99mTc-膜联蛋白V及99mTc-聚合白蛋白静脉血栓显像的对比研究

    作者:吴大勇;张文艳;边艳珠;胡玉敬;魏强

    目的:对99mTc-膜联蛋白V(annexin V)及99mTc-聚合白蛋白(MAA)血栓显像做对比研究.方法:23只下腔静脉血栓模型实验兔分为Annexin V组(10只)与MAA组(13只).建模术后ld两组分别注射99mTc-annexinV与99mTc-MAA,均于术后15、30、45、60、90、120min显像.图像观察到下腔静脉血栓部位呈放射性浓聚为显像阳性,反之为阴性,计算两组各自的阳性率.显像完毕处死动物,留取血栓标本行HE染色.利用SPSS对两组数据行Fisher确切概率法检验.结果:Annexin V组10只实验兔,显像均观察到下腔静脉血栓部位呈放射性浓聚影,阳性率100% (10/10);MAA组13只实验兔,8只显像呈阳性,阳性率61.5% (8/13).两者差异具有统计学意义(P=0.038,小于0.05).病理证实两组所有血栓均为新鲜混合血栓.结论:99mTc-annexin V血栓显像优于99mTc-M AA血栓显像,99mTc-annexin V有望成为一种新的血栓显像剂应用于临床.

  • Calcein-AM和Annexin V在流式细胞术检测早期细胞凋亡的敏感性比较

    作者:王佳;冯永东;陶德定;李小兰;肖薇;刘双又;余从年;龚建平

    目的比较Calcein-AM与Annexin V用于流式细胞术检测活细胞早期凋亡时的敏感性,建立新的检测细胞早期凋亡的方法.方法将人类急性T淋巴细胞白血病细胞株(Molt-4)经喜树碱(CPT)、紫外线(UV)诱导后,分别采用Calcein-AM及异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V(Annexin V)染色,然后用流式细胞仪分析凋亡率,通过比较诱导后不同时间点的凋亡率来分析Calcein-AM和Annexin V对于检测细胞早期凋亡的敏感性.结果在喜树碱诱导模型中,加药后2 h即可用Calcein-AM检测到明显的细胞凋亡,而3 h后才能用Annexin V检测到;在紫外线诱导模型中,照射后1 h即可用Calcein-AM检测到明显的细胞凋亡,而要在2 h后才能用Annexin V检测到.结论Calcein-AM用于检测活细胞早期凋亡比Annexin V更为敏感,是一种稳定、可靠、灵敏度高并且较为经济的检测细胞早期凋亡的活细胞染料.

  • 用99Tcm-rh-Annexin V检测放疗或化疗后肿瘤细胞凋亡

    作者:张欣;李亚明;张延军;季晓鹏;陶莉;张剑英;赵贞贞;田爱娟;朱毅;杨春;赵明

    目的 验证99Tcm直接法标记的重组人膜联蛋白V(99Tcm-rh-AnnexinV)用于早期评价放化疗后肿瘤组织细胞凋亡状态的可行性.方法 将小鼠肝癌细胞(Hca-F25)接种于实验小鼠右腋下,8 d后当肿瘤生长至直径约1 cm时,将模型鼠分为A(化疗组,13只)、B(放疗组,10只)、C(荷瘤对照组,12只)3组.其中A、C组按注射示踪剂后不同时间(1、4、6 h)各分为3个亚组(A1组3只,A2组4只,A3组6只;C1组3只,C2组4只,C3组5只);A组接受环磷酰胺单次化疗(按体重150 mg/kg,腹腔内注射),C组腹腔内注射同等量生理盐水,20h后A、C组鼠尾静脉注射99Tcm-rh-Annexin V 3.7MBq(0.5μg)/只.B组按不同吸收剂量(2、5、10 Gy)分为3个亚组(B1组4只,B2组3只,B3组3只),放疗后1 h注射与A、C组相同剂量示踪剂,6 h后显像.小鼠模型显像后即刻处死,取组织(肿瘤、血、肌肉)称重后,测量放射性计数,并计算每克组织百分注射剂量率(%ID/g)及肿瘤(T)/肌肉(M)、T/血液(B)放射性比值,应用流式细胞仪检测细胞凋亡百分率.结果 A、B组小鼠肿瘤组织中凋亡细胞百分率[(11.16±3.83)%、(17.40±5.20)%]均明显高于C组[(2.11±1.51)%,F=56.414、94.748,P<0.001];A2、A3及B组肿瘤组织%ID/g均明显高于C2及C3组(F值分别为14.307、7.074、28.672,P均<0.05),且与凋亡细胞百分率呈明显正相关(A2、A3组:r=0.813,P=0.002;B组:r=0.780,P=0.004),而C组肿瘤组织%ID/g与凋亡细胞百分率无相关性(r=-0.238,P=0.229).结论 接受放疗或化疗后,小鼠肝癌组织对99Tcm-rh-AnnexinV的摄取明显增加,且其摄取程度与肿瘤组织内凋亡细胞量呈明显正相关;应用99Tcm-rh-AnnexinV显像可较准确地反映治疗后早期肿瘤组织细胞凋亡的状态.

  • 99 Tcm-HYNIC-Annexin V荷瘤小鼠肿瘤细胞凋亡显像研究

    作者:刘萌;王荣福;张春丽;郭凤琴;俞建华;赵光宇;陈大明;祁本忠

    目的研究99Tcm-联肼尼克酰胺-膜联蛋白V(HYNIC-Annexin V)的制备及其在荷瘤小鼠体内生物分布特性和活体显像.方法用双功能螯合剂法,以99Tcm标记Annexin V,经高效液相色谱仪分离纯化并检测产物的标记率、放化纯及稳定性.建立荷S180肉瘤小鼠模型,于20~25g/只昆明种小白鼠右前腋皮下接种S180肉瘤细胞1周.荷瘤小鼠在环磷酰胺腹膜内化疗72h后,尾静脉注射7.4 MBq(200μl)99Tcm-HYNIC-Annexin V,分别于5、30min和1、3、6 h进行显像和体内生物分布测定.实验结果应用SPSS 12.0统计软件进行分析.结果 99Tcm-HYNIC-Annexin V的标记率达95%,放化纯为99%.荷瘤小鼠注射99Tcm-HYNIC-Annexin V后6 h显像,可见肿瘤组织放射性浓聚明显异常.体内生物分布实验示,注射显像剂后6 h肿瘤组织的放射性摄取高[每克组织百分注射剂量率(%ID/g)为1.59±0.44],与其他时相比较,差异有显著性(P<0.05).99Tcm-HYNIC-Annexin V主要浓聚于肾、肺和肝,经肾脏排泄;其在血液中清除速度快,注射后30 min,血液放射性摄取[(1.59±0.50)%ID/g]较注射后5 min时[(8.85±2.65)%ID/g]减少80%(P<0.05).注射显像剂后6 h,肿瘤/肌肉放射性摄取比值(3.73±1.42)高于肿瘤/血液(2.80±0.54).结论 99Tcm-HYNIC-Annexin V活体细胞凋亡显像可应用于荷瘤小鼠模型,其临床应用有待进一步研究.

  • 99Tcm-Annexin V显像联合MR-DWI检测125I内照射后肺腺癌裸鼠移植瘤的细胞凋亡

    作者:张金山;罗良平;史长征;李园;安薇

    目的 探讨99Tcm-膜联蛋白V(Annexin V)显像联合磁共振弥散加权成像(MR-DWI)非创伤性活体检测125I粒子植入内照射致肺腺癌裸鼠移植瘤细胞凋亡的可行性.方法 将25只A549肺腺癌细胞皮下种植的BALB/c-nu裸鼠模型按随机数字表法分为实验组(n=13)和对照组(n=12).实验组进行125I粒子[表观活度为(24.8±6.3)MBq/粒]植入,对照组进行无活度的“冷粒子”植入,7~10d后进行99Tcm-Annexin V细胞凋亡显像,并同期行MR-DWI,然后处死裸鼠,取瘤体标本进行原位末端标记法(TUNEL)荧光免疫细胞凋亡检测及Survivin免疫组织化学检测.采用两独立样本t检验、x2检验和Pearson相关分析进行数据分析.结果 (1)实验组99Tcm-Annexin V细胞凋亡显像阳性率为69.2%(9/13),大于对照组的8.3%(1/12,x2=12.73,P<0.01);(2)实验组瘤体99Tcm-Annexin V摄取比值、表观弥散系数(ADC)和细胞凋亡指数(AI)分别为2.91±0.85、(2.03±0.44)×10-3 mm2/s和(49±18)%,对照组相应指标分别为1.26±0.37,(1.29±0.21)×10-3 mm2/s和(11±4)%,实验组较对照组高(t=5.930、5.452和7.606,均P<0.05),而对照组的Survivin阳性表达率高于实验组[(46±13)%和(15±7)%,t=5.158,P<0.05];(3)ADC、AI和瘤体摄取比值间两两相关(r分别为0.756、0.788和0.754,均P<0.05),Survivin表达与AI呈负相关(r=-0.772,P<0.05).结论 Survivin表达下调致细胞凋亡可能是125I内照射治疗A549肺腺癌裸鼠移植瘤的机制之一;99Tcm-Annexin V显像联合MR-DWI能有效地对移植瘤细胞凋亡情况进行非创伤性活体检测,有利于125I粒子内照射治疗早期疗效的判断.

  • 99Tcm-TP5-3 microSPECT/CT探测乳腺癌化疗后细胞凋亡的实验研究

    作者:罗瑞;王峰;侯彦杰;付彤;华子春;张建平;章英剑

    目的 合成新型凋亡显像剂99Tcm-半胱氨酸-膜联蛋白V(TP5-3),研究其在小鼠体内生物分布和药代动力学特点,探讨99Tcm-TP5-3 microSPECT/CT检测乳腺癌单次化疗后肿瘤早期细胞凋亡的可行性.方法 以直接还原法对TP5-3进行99Tcm标记,HPLC检测产物的标记率;进行正常小鼠体内99Tcm-TP5-3的生物分布及药代动力学研究.建立荷MDA-MB-231人乳腺癌裸鼠模型,取10只分为2组,化疗组单次腹腔内注射紫杉醇(每只40 mg/kg),对照组注射等体积生理盐水,48 h后由尾静脉注射37 MBq 99Tcm-TP5-3,进行microSPECT/CT图像采集,显像后立即处死、取材,比较2组肿瘤的放射性摄取(%ID/g)、T/NT(NT取肌肉);采用流式细胞术和病理学检测肿瘤凋亡细胞.采用单因素方差分析、两样本t检验和直线相关分析数据.结果 99Tcm-TP5-3标记率>95%,室温放置4h放化纯仍保持在(96.0±1.5)%,稳定性好.正常小鼠注射显像剂后30 min肾脏放射性摄取高[(8.48±1.07) %ID/g],其他脏器分布较少;血液清除快,注射后4h血液放射性摄取[(2.07±0.35) %ID/g]较注射后5 min[(13.74±4.21) %ID/g]减少了85%(F=11.310,P<0.05);显像剂主要浓聚于肾、肝和胃,经肾脏排泄.化疗后99Tcm-TP5-3 microSPECT/CT显像示化疗组T/NT为4.21±0.06,对照组T/NT仅1.57±0.67(f=12.820,P<0.05);化疗后生物分布实验示,化疗组肿瘤放射性摄取明显高于对照组,分别为(4.82±0.54) %ID/g和(1.44±0.38) %ID/g(t=0.679,P<0.05).肿瘤放射性摄取与流式细胞仪测定的凋亡细胞百分比呈正相关(r=0.985,P<0.05).HE染色示化疗后肿瘤组织有大量凋亡细胞,而对照组仅有少量.结论 99Tcm-TP5-3标记方法简单,生物分布理想,具备优良的药代动力学特性;99Tcm-TP5-3 microSPECT/CT可用于早期检测荷乳腺癌裸鼠模型化疗后的肿瘤细胞凋亡水平.

  • 99Tcm-HYNIC-Annexin V动脉粥样硬化显像的实验研究

    作者:黄代娟;兰晓莉;张永学;张国鹏;常伟;张斌青

    目的 探讨99Tcm-联肼尼克酰胺(HYNIC)-膜联蛋白V(Annexin V)显像检测兔动脉粥样硬化(AS)病变的价值.方法 5只雄性日本大耳白兔通过免疫损伤血管和12周高脂饮食制备成AS模型(实验组),自兔耳缘静脉按体质量注射99Tcm-HYNIC-Annexin V 37 MBq/kg,分别行活体和离体血管的99Tcm-HYNIC-Annexin V显像.5只未经特殊处理的同种白兔行活体显像作为对照.对实验组兔的主动脉分段后,测定各片段质量和放射性计数,并进行病理学和免疫组织化学检查.采用SPSS 13.0软件对数据进行统计学处理.结果 显像剂注射后2h,实验组兔主动脉可见放射性摄取达峰值,而对照组未见明显的放射性摄取,前者靶/非靶(T/NT)比值(2.70±0.26)明显高于后者(1.30±0.13,t=1.99,P<0.05).实验组兔的主动脉血管斑块片段放射性摄取(每克组织百分注射剂量率,%ID/g)为(0.075±0.016)%ID/g,明显高于非斑块血管片段[(0.035±0.013)%ID/g,前者是后者的(4.55±0.99)倍,t=4.77,P<0.001];两者的凋亡细胞指数(AI)分别为(40.53±14.94)%和(11.90±7.09)%,差异具有统计学意义(t=2.54,P<0.01).所有血管片段的放射性摄取(%ID/g值)与AI呈正相关(r=0.98,P<0.001).结论 99Tcm-HYNIC-Annexin V可以无创性地检测AS斑块的凋亡.

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