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肺纤方对博莱霉素大鼠肺纤维化模型基质金属蛋白酶1、2及组织金属蛋白酶抑制剂1、2的影响
目的:观察肺纤方抗大鼠肺纤维化肺基质重建的作用.方法:气管内注入博莱霉素制造大鼠肺纤维化模型,观察造模后14、28、45d 模型组、假手术组、肺纤方组、泼尼松组血清基质金属蛋白酶 1、2及其抑制物组织金属蛋白酶抑制剂1、2的变化.结果:肺纤方可以显著降低血清基质金属蛋白酶1、2及组织金属蛋白酶抑制剂1、2.结论:肺纤方具有抗大鼠肺纤维化基质重建作用.
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外源性组织金属蛋白酶抑制剂-1对基质金属蛋白酶-9高表达大鼠皮肤成纤维细胞生物学行为的影响
目的 观察外源性组织金属蛋白酶抑制剂-1( TIMP-1)对基质金属蛋白酶-9(MMP-9)高表达大鼠皮肤成纤维细胞生物学行为的影响,为寻找治疗糖尿病足的新方法提供实验依据.方法 应用SD大鼠皮肤成纤维细胞株CRL-1213用高糖(22 mmol/L)+高同型半胱氨酸(100 μmol/L)联合培养建立体外MMP-9高表达皮肤成纤维细胞模型,用外源性TIMP-1(100 μg/L)抑制MMP-9的活性,采用实时PCR法和ELISA法检测MMP-9基因及蛋白表达量,用明胶酶谱法检测MMP-9蛋白活性,采用流式细胞术检测细胞增殖功能、CCK-8检测细胞活力、ELISA法检测细胞胶原(羟脯氨酸)分泌能力、划痕实验评价细胞横向迁移能力、Transwell法评价细胞纵向迁移能力.采用单因素方差分析进行统计学分析.结果 TIMP-1干预组大鼠皮肤成纤维细胞MMP-9 mRNA和蛋白的表达量与MMP-9高表达组比较差异无统计学意义(P＞0.05),但MMP-9蛋白活性受到明显抑制(1.47 ±0.13vs 0.43 ±0.13,t=12.495,P＜0.01).与对照组比较,MMP-9高表达组大鼠皮肤成纤维细胞S期的比例[ (9.31 ±0.24)％ vs(6.54 ±0.29)％]、增殖指数[(13.8±0.5)％vs(11.3±0.6)％]、细胞活力(1.76 ±0.13 vs 1.35 ±0.12)、胶原(羟脯氨酸)分泌量[(1126±63) vs (353 ±61) μg/L]、6h横向迁移率[(38.7±2.6)％vs(21.3±2.1)％]和纵向迁移细胞数(91 ±4 vs 71 ±4)均明显减少(t=16.433、7.328、5.113、19.847、11.529、8.124,均P＜0.05)；TIMP-1干预后,大鼠皮肤成纤维细胞S期的比例[(6.54±0.29)％vs(7.75±0.27)％]、增殖指数[(11.3±0.6)％vs(12.5±0.5)％]、细胞活力(1.35 ±0.12 vs 1.64 ±0.14)、胶原(羟脯氨酸)分泌量[(353 ±61) vs (829 ±59)μg/L]、6h横向迁移率[(21.3±2.1)％vs(31.5±2.7)％]和纵向迁移细胞数(71 ±4 vs 85 ±4)与MMP-9高表达组比较得到明显改善[t =6.881、3.292、3.615、12.590、6.644、6.015,均P＜0.05].结论 MMP-9高表达大鼠皮肤成纤维细胞的生物学行为受到抑制,外源性TIMP-1能够减缓这种抑制作用.
关键词： 基质金属蛋白酶9 组织金属蛋白酶抑制剂1 糖尿病足 大鼠 -
TIMP-1和MMP-9与胆囊癌发生、发展的关系
目的 探讨组织金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)与基质金属蛋白酶9(MMP-9)在胆囊癌及癌前病变组织中的表达,阐明其与胆囊癌发生、发展的关系.方法 应用免疫组化SP法检测TIMP-1和MMP-9在42例胆囊癌、18例胆囊上皮中重度不典型增生、13例胆囊上皮轻度不典型增生及30例慢性胆囊炎组织中的表达.结果 胆囊癌组中MMP-9的阳性表达率(88.10％)较轻度不典型增生组(30.77％)及慢性胆囊炎组(20.00％)高,差异有统计学意义(P ＜0.0083),其表达强度差异亦有统计学意义(P ＜0.0083).胆囊癌组TIMP-1的阳性表达率(90.48％)高于慢性胆囊炎组(43.33％),差异有统计学意义(P ＜0.0083),其表达强度差异亦有统计学意义(P＜ 0.0083).不同胆囊病变组织中MMP-9和TIMP-1的表达呈正相关(r=0.222,P=0.024).慢性胆囊炎,不典型增生和胆囊癌组中的MMP-9/TIMP-l的值存在差异,差异有统计学意义(x2=6.851,P=0.033).结论 MMP-9和TIMP-1的阳性表达率及强度与胆囊癌的发生、发展有关,二者的比值可用来评估胆囊癌的预后.
关键词： 胆囊癌 不典型增生 基质金属蛋白酶9 组织金属蛋白酶抑制剂1 -
TGF-β1对诱导肾间质成纤维细胞活化并表达MMP-9及TIMP-1的影响
目的 研究转化生长因子-β1(transforming growth factor beta-1,TGF-β1)诱导的肾间质成纤维细胞(NRK-49F)发生表型转化时基质金属降解酶MMP-9及其抑制因子TIMP-1表达的变化及对分泌纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的影响.方法 以不同浓度hTGF-β1(0 ng/ml、0.5 ng/ml、1 ng/ml、2 ng/ml、5 ng/ml、10 ng/ml)刺激NRK-49F细胞48 h,分别应用ELISA法检测细胞上清FN的浓度,免疫荧光检测细胞表型标记物α-SMA、Vimentin的表达,Western blot、Northern blotting方法检测MMP-9、TIMP-1的基因及蛋白质表达.结果 0.5～ 10 ng/ml TGF-β1随刺激浓度增高NRK-49F细胞表达α-SMA明显增多、Vimentin明显减少,细胞上清中FN的含量显著增加(P＜0.05或P＜0.01);同时,TGF-β1浓度＞2 ng/ml时显著上调TIMP-1 mRNA及蛋白表达水平(P＜0.05或P＜0.01);以上效应均呈浓度依赖性,但对细胞MMP-9mRNA及蛋白表达无明显影响(P＞0.05).结论 TGF-β1能诱导肾间质成纤维细胞活化,使FN的分泌增多,该作用可能与TGF-β1上调了TIMP-1基因及蛋白质水平,进而减少细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的降解有关.
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基质金属蛋白酶9及组织抑制剂因子1与急性呼吸窘迫综合征
基质金属蛋白酶9是降解细胞外基质的重要蛋白酶之一,组织金属蛋白酶抑制剂1是基质金属蛋白酶9的天然抑制剂.二者的比值决定细胞外基质是否处于平衡状态的重要影响因素,故二者在急性呼吸窘迫综合征的发生、发展过程中起着重要作用,是近年急性呼吸窘迫综合征研究的热点之一.
关键词： 基质金属蛋白酶9 组织金属蛋白酶抑制剂1 急性呼吸窘迫综合征 -
紫草素对胶原诱导关节炎MMP-1和TIMP-1表达影响的研究
目的:研究紫草素对Ⅱ型胶原诱导的关节炎(CIA) MMP-1、TIMP-1表达的影响.方法:紫草素及对照药物口服给药CIA小鼠,连用30天,用酶联免疫吸附测定试剂盒测定CIA小鼠血清中的MMP-1、TIMP-1;用逆转录聚合酶链反应测定CIA小鼠髌骨及邻近滑膜组织的MMP-1、TIMP-1表达水平.结果:与模型组(775.9102.12)相比,紫草素组(255.9103.7)降低了CIA小鼠血清中MMP-1水平(P ＜0.001),紫草素组(135.39.1)与模型组(106.3 7.07)相比,升高了TIMP-1水平(P＜0.05),髌骨及邻近滑膜组织的MMP-1mRNA水平与对照组相比显著被抑制(P＜0.05);TIMP-1 mRNA水平与对照组相比明显升高(P＜0.05).结论:紫草素可能通过抑制MMP-1,提高TIMP-1发挥对CIA小鼠的治疗作用.
关键词： 紫草素 胶原诱导关节炎 金属蛋白酶1 组织金属蛋白酶抑制剂1 -
慢性阻塞性肺疾病模型大鼠肺组织基质金属蛋白酶9及组织金属蛋白酶抑制剂1与固本颗粒胶囊
背景:中医药防治慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)的有效性和安全性已初步得到临床认证.目的:观察COPD模型大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9及其特异性抑制物组织金属蛋白酶抑制剂1表达与固本颗粒胶囊干预的影响.方法:将50只Wistar大鼠随机等分为5组,除正常组外,其余大鼠均以烟熏及气管内滴注脂多糖的方式建立COPD模型.造模 29 d,泼尼松组、固本颗粒胶囊低、高剂量组分别灌胃给予醋酸泼尼松 1.04 mg/(kg?d),固本颗粒胶囊0.47,0.94 g/(kg?d),1次/d,观察记录大鼠的一般状况.免疫组织化学方法检测大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9及组织金属蛋白酶抑制剂1的表达.结果与结论:COPD大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9及组织金属蛋白酶抑制剂1的表达显著增强(P < 0.05).药物干预后,COPD大鼠的一般状况明显改善,肺组织中基质金属蛋白酶9及组织金属蛋白酶抑制剂1的表达有所降低;其中,醋酸泼尼松的作用为显著,固本颗粒高剂量次之,低剂量弱.说明固本颗粒胶囊能以剂量依赖的方式缓解COPD大鼠的临床表现,改善气道重塑,纠正COPD大鼠体内蛋白酶和抗蛋白酶失衡.
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红花多糖对荷瘤小鼠肿瘤组织基质金属蛋白酶-9、组织金属蛋白酶抑制剂-1mRNA表达影响的研究
目的 探讨红花多糖(safflower polysaccharide,SPS)对荷瘤小鼠肿瘤组织中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP)-9、组织金属蛋白酶抑制剂1(tissue inhibitors of metalloproteinase,TIMP-1)mRNA表达的影响.方法 BABL/c小鼠腋下接种S180肉瘤,腹腔注射SPS连续10 d,给药结束24 h后取肿瘤组织Real time-PCR法测MMP-9、TIMP-1 mRNA表达水平.结果 SPS低剂量组、中剂量组和高剂量组肿瘤组织中MMP-9的表达量分别是模型对照组的0.452、0.204、0.026倍,TIMP-1的表达量分别是模型对照组的3.4、5.2、10.0倍.结论 SPS能够抑制肿瘤组织中MMP-9基因的表达,促进TIMP-1基因的表达,具有抑制肿瘤及其转移的作用.
关键词： 红花多糖 基质金属蛋白酶9 组织金属蛋白酶抑制剂1 -
抗人组织金属蛋白酶抑制剂1的核酶高表达载体的构建及体外活性鉴定
目的:构建特异性切割人组织金属蛋白酶抑制剂1(tissue inhibitor of metalloproteinases1,TIMP-1)的锤头状核酶的真核表达载体并在体外进行活性鉴定,为应用于瘢痕基因治疗奠定基础.方法:设计并合成针对人组织TIMP-1 mRNA的锤头状核酶基因Rz182、Rz358和Rz412及相应的点突变核酶基因,将核酶基因克隆于可在体内高表达核酶的载体pBSKneoU6中,制备嵌合于U6 snRNA分子的核酶基因克隆.逆转录聚合酶链式反应获得全长TIMP-1 mRNA基因片段并克隆至T载体.体外转录法大量制备以α-32P UTP 标记的核酶及靶RNA,进行体外切割实验.结果:核酶基因克隆制备正确,在体外成功转录出嵌合于U6 snRNA的核酶和靶RNA. 37℃的生理温度下,U6Rz182和U6Rz358成功切割了靶RNA,U6Rz182切割效率为49.23%,Km=29.7 nmol/L,Kcat=0.32 min-1.U6Rz358切割效率为55.21%.Km=39.6 nmol/L,Kcat=0.21 min-1.U6Rz412及突变核酶均未显示切割活性.结论:本研究中制备的U6Rz182和U6Rz358有良好的特异催化切割活性,有望在瘢痕成纤维细胞内抑制人TIMP-1的表达,成为新的抗瘢痕核酸药物.
关键词： 组织金属蛋白酶抑制剂1 核酶 载体 活性 -
扎鲁司特对哮喘模型肺组织金属蛋白酶抑制剂1表达的影响
目的观察白三烯受体拮抗剂扎鲁司特对肺组织组织金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)表达水平的影响.方法108只健康雄性豚鼠随机分为3组:哮喘发作组(A组),哮喘发作+扎鲁司特治疗组(B组),生理盐水对照组(C)组,每组36只.每组均分为24 h和1、2、4、8、12周6个小组.免疫组化标记分析肺组织中TIMP-1表达水平.结果C组肺组织中TIMP-1的表达无明显改变.卵蛋白激发后,A组TIMP-1的表达C组稍增高,但各个时期无明显差异.B组随时间的推移,TIMP-1的表达逐渐增加,8周起B组TIMP-1表达较A组、C组明显增多,激发后12周3组之间两两比较有显著性差异(P＜0.05).结论扎鲁司特可以增加哮喘豚鼠肺组织TIMP-1的表达水平,白三烯受体拮抗剂对预防和减轻哮喘气道重塑有积极意义.
关键词： 扎鲁司特 哮喘 组织金属蛋白酶抑制剂1 -
基质金属蛋白酶9/组织金属蛋白酶抑制剂1在鼻致敏豚鼠模型鼻黏膜重塑中的作用
目的 长期慢性炎症导致鼻黏膜重塑特征表现为基膜内胶原沉积.文中探讨与胶原沉积相关的基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-9/组织金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitors of metalloproteinase,TIMP)-1在鼻致敏豚鼠模型鼻黏膜重塑中的作用. 方法 Hartley系豚鼠32只,随机分为4组,即实验2w组、6w组、12w组和对照组.卵清蛋白(ovalbumin,OVA)制备变应性鼻炎动物模型,抗原刺激分别持续2w、6w和12w.鼻黏膜组织切片,采用HE染色,计数鼻黏膜嗜酸性粒细胞数量.免疫组化法检测鼻黏膜I型胶原、MMP-9和TIMP-1含量. 结果 ①实验2w组、实验6w组、实验12w组和对照组下鼻甲嗜酸粒细胞计数分别为:50.75±11.75、56.63±7.46、66.13 ±8.72和8.00±3.91(个/高倍视野),与对照组比较,其他各组差异有统计学意义(P＜0.01).②与对照组比较,实验2w组、6w组、12w组鼻黏膜的I型胶原、MMP-9和TIMP-1的吸光度随抗原刺激时间延长均有升高趋势;实验各组的MMP-9/TIMP-1吸光度比值与对照组比较有下降趋势,尤其在实验12w组,其差别有统计学意义(P＜0.01). 结论 随着抗原刺激延长,鼻黏膜慢性炎症导致与重塑有关的MMP-9和TIMP-1免疫活性增强,MMP-9/TIMP-1的失衡,从而使得细胞外基质(extracellular matrix,ECM)中胶原蛋白沉积.
关键词： 变应性鼻炎 细胞外基质 胶原 基质金属蛋白酶9 组织金属蛋白酶抑制剂1 -
荔枝核总黄酮对肝星状细胞增殖的抑制作用及其机制
目的 探讨荔枝核总黄酮(TFL)对肝星状细胞(HSC)-T6增殖的抑制作用及其机制.方法 体外培养HSC-T6并随机分为对照组及TFL低、中、高剂量组,均置于含10% FBS的培养基中培养, TFL低、中、高剂量组均加入TFL,使终浓度分别为 160、320、640 μg/mL.分别于作用24、48、72 h时采用MTT法检测细胞增殖情况(吸光度值).作用72 h时采用RT-PCR法、Western blotting法检测基质金属蛋白酶2(MMP2)、组织金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)mRNA和蛋白表达.结果 除TFL高剂量组作用48、72 h外,各组随着作用时间的延长,HSC-T6吸光度值均明显增加(P均<0.05).作用24 h时,各组HSC-T6吸光度值变化不明显;作用48 h时,TFL低、中、高剂量组HSC-T6吸光度值明显低于对照组,以TFL高剂量组显著(P均<0.05);作用72 h时,各TFL组随着TFL浓度增加HSC-T6吸光度值逐渐降低(P均<0.05).作用72 h时,TFL低、中、高剂量组MMP2、TIMP1 mRNA和蛋白相对表达量均低于对照组,且随着TFL浓度升高相对表达量逐渐降低(P均<0.05).结论 TFL可抑制HSC-T6增殖,具有时间和浓度依赖性;其作用机制可能与下调MMP2及TIMP1表达有关.
关键词： 肝纤维化 荔枝核总黄酮 肝星状细胞 基质金属蛋白酶2 组织金属蛋白酶抑制剂1 -
抗病毒治疗对HBeAg阴性CHB患者TGF-β1、TIMP-1、MMP-1水平的影响
目的 探讨TGF-β1、TIMP-1、MMP-1在HBeAg阴性CHB患者肝纤维化诊断中的作用以及抗乙肝病毒治疗对其影响.方法 以正常体检健康者为对照组,HBeAg阴性CHB分轻度、中度、重度组,依据抗病毒治疗48周后HBV DNA低于检测下限分为治疗有效组和治疗无效组,ELISA法测定各组血清中TGF-β1、TIMP-1、MMP-1含量,免疫组化检测肝组织TIMP-1、MMP-1表达.结果 HBeAg阴性慢性乙型肝炎外周血TGF-β1、TIMP-1水平明显高于正常对照组(P＜0.01),而血清MMP-1则明显低于正常对照组(P＜0.01).随慢性肝炎轻度-重度逐渐发展,血清TGF-β1、TIMP-1的水平逐渐增高,且差异有统计学意义(P＜0.05).TIMP-1蛋白在肝纤维化组织的阳性表达,随肝纤维化程度的加重而增强,呈正相关(rs=0.618,P=0.002)；MMP-1蛋白在肝纤维化组织的阳性表达与肝纤维化程度无相关性(rs=0.077,P=0.732).抗病毒治疗48周后有效组血清TGF-β1、TIMP-1的含量明显下降,MMP-1水平上升(P＜0.01).无效组血清TGF-β1、TIMP-1、MMP-1水平变化不明显(P＞0.05).结论 联合检测TGF-β1、TIMP-1、MMP-1是判断慢性肝病患者有无纤维组织增生敏感而可靠的指标,动态观察上述指标的变化,对临床判断肝纤维化程度和活动度有着重要价值,同时也为临床疗效的判断提供有效的实验依据.
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MMP-9、TIMP-1在大鼠视网膜缺血-再灌注损伤中的表达
目的探讨高眼压视网膜缺血-再灌注(retina ischemia-reperfusion,RIR)损伤时大鼠视网膜基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)和组织金属蛋白酶抑制剂1(tissue inhibitor of metalloproteinase 1,TIMP-1)的动态变化及意义.方法利用前房高压灌注法造成大鼠视网膜缺血1 h,再恢复其供血,并于再灌注0 h、3 h、12 h、24 h、48 h和72 h后处死,采用免疫组化SP法和计算机图像分析系统检测视网膜MMP-9和TIMP-1的表达和分布.结果 RIR 0 h视网膜MMP-9表达极弱,MMP-9阳性染色于RIR 3 h出现,12 h迅速增加,24 h达高峰,以后逐渐下降,72 h接近正常.RIR各时段TIMP-1水平无明显改变.结论 MMP-9是参与RIR损伤的重要因素.
关键词： 视网膜 缺血-再灌注损伤 基质金属蛋白酶9 组织金属蛋白酶抑制剂1 -
脂蛋白(a)免疫复合物对U937细胞基质金属蛋白酶1及其抑制物的作用
目的 探讨脂蛋白(a)免疫复合物对U937细胞基质金属蛋白酶1及其抑制物组织金属蛋白酶抑制剂1 mRNA表达的影响.方法 分别采用不同浓度的天然脂蛋白(a)、氧化型脂蛋白(a)及其免疫复合物作用U937细胞,通过半定量RT-PCR分析U937细胞中基质金属蛋白酶1和组织金属蛋白酶抑制剂1基因表达的变化.结果 正常U937细胞低表达基质金属蛋白酶1(0.076±0.012),而高表达组织金属蛋白酶抑制剂1(0.973±0.031).等量的天然脂蛋白(a)、氧化型脂蛋白(a),及其免疫复合物作用后,基质金属蛋白酶1 mRNA表达量分别为0.361±0.016,0.330±0.019,0.106±0.006和0.089±0.008;组织金属蛋白酶抑制剂1表达量分别为0.229±0.017,0.360±0.018,0.157±0.025和0.967±0.031.天然脂蛋白(a)对细胞基质金属蛋白酶1和组织金属蛋白酶抑制剂1 mRNA表达没有影响.氧化型脂蛋白(a)引起基质金属蛋白酶1轻度表达,但显著地下调组织金属蛋白酶抑制剂1的表达;而天然、氧化型脂蛋白(a)免疫复合物均非常显著地增加基质金属蛋白酶1和降低组织金属蛋白酶抑制剂1的mRNA表达 (P<0.001),且较氧化型脂蛋白(a)对基质金属蛋白酶1的作用更为显著(P<0.001),并呈剂量效应关系.结论 脂蛋白(a)免疫复合物增强U937细胞基质金属蛋白酶1 mRNA表达,下调其抑制物组织金属蛋白酶抑制剂1的表达.
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人系膜细胞中组织金属蛋白酶抑制剂1基因的稳定表达
目的建立自体肾系膜细胞作为靶向载体转导外源基因的方法,使组织金属蛋白酶抑制剂1基因在肾系膜细胞稳定表达.方法选择性DMEM培养液培养的肾活检组织系膜细胞,构建重组真核表达载体pcDNA3-TIMP1进行体外转染,G418筛选阳性克隆,RT-PCR确认.结果建立了人肾穿刺组织系膜细胞培养方法,经组织学和免疫组化鉴定系膜细胞,成功构建表达组织金属蛋白酶抑制剂1基因的重组真核表达载体pcDNA3-TIMP1,筛选得到一个稳定表达的阳性克隆.结论肾活检组织系膜细胞培养条件的建立为肾病的基因治疗提供了一种有效载体,稳定表达组织金属蛋白酶抑制剂1基因的肾系膜细胞株为研究TIMPI在肾脏病中的作用提供良好的模型.
关键词： 肾穿刺组织 系膜细胞 组织金属蛋白酶抑制剂1 -
依贝沙坦对阿霉素肾病大鼠肾小管间质的保护作用
目的探讨依贝沙坦(irbesartan)对阿霉素诱导重复单肾大鼠肾小管及间质的保护作用及其可能的调节机制.方法将诱导的肾病大鼠分为肾病组和依贝沙坦治疗组,并设假手术组为正常对照.检测依贝沙坦治疗4周后,3组大鼠肾功能和组织病理改变,并用免疫组织化学(组化)或原位杂交的方法检测肾小管间质中转化生长因子β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)及组织金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)的表达.结果治疗组大鼠24 h尿蛋白、肾重/体重、肾小球截面积以及病理改变与对照组相比明显减轻,肾小管间质中TGF-β1、MMP-9、TIMP-1表达均有不同程度的减少.结论通过调节细胞外基质降解作用,依贝沙坦能延缓单侧肾切除加重复阿霉素注射诱导的肾病大鼠肾小管间质的病变.
关键词： 阿霉素肾病 间质纤维化 基质金属蛋白酶9 组织金属蛋白酶抑制剂1 依贝沙坦 -
MMP-9与TIMP-1在肾小管上皮细胞转分化中的作用
目的 研究结扎大鼠单侧输尿管(UUO) 制备的实验性肾纤维化模型梗阻肾基质金属蛋白酶9(MMP-9)和组织金属蛋白酶抑制剂1 (TIMP-1)表达的动态变化,探讨MMP-9和TIMP-1在肾小管上皮细胞转分化中的作用.方法 将64只雄性大鼠随机分为假手术组和UUO组(n=32),UUO组结扎单侧输尿管,术后3 d、7 d、14 d、21 d每组各处死8只大鼠,用免疫组化法检测大鼠梗阻肾组 织MMP-9、TIMP-1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SAM)及纤维连接蛋白(FN)的表达.结果 UUO术后3 d,PAS染色见少量肾小管基底膜(TBM)局灶性断裂.术后7 d, TBM断裂程度加重,基底膜断裂的肾小管数增多.术后14 d直至术后21 d,可见部分TBM增厚、扭曲,基底膜断裂程度和基底膜断裂的肾小管数较7 d时略减轻和减少.与假手术组相较,UUO组随着梗阻时间的延长,肾间质中α-SMA、FN 、TIMP-1蛋白表达逐渐增多.UUO组术后3 d可见MMP-9在肾小管间质有强阳性表达,术后7 d达高峰,14～21 d呈下降趋势.α -SMA、MMP-9、TIMP-1主要表达于肾小管上皮和肾间质.MMP-9阳性染色面积与α-SMA 阳性染色面积、TBM的断裂程度、基底膜断裂的肾小管个数均呈正相关(r分别为0.894, 0.85 4,0.821,P均＜0.05).结论 肾小管间质MMP-9和TIMP-1蛋白表达的动态变化影响TBM完整性与ECM堆积.MMP-9与TIMP-1相互拮抗调节肾小管基底膜代谢,参与肾小管上皮细胞转分化,影响肾纤维化进展.
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基质金属蛋白酶9和组织金属蛋白酶抑制剂1在大鼠肾脏机械性损伤后的表达
目的 探讨大鼠肾脏机械性损伤后肾组织基质金属蛋白酶9(MMP-9)和组织金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)的表达及意义.方法 36只Wistax大鼠随机分为对照组和创伤组.采用自由落体生物撞击仪撞击大鼠脊肋角复制创伤动物模型.用组织芯片技术及免疫组织化学方法检测各组大鼠创伤后1、6、12、24和36 h肾组织中MMP-9和TIMP-1蛋白的表达.结果 对照组肾组织中MMP-9蛋白表达微弱,创伤组MMP-9表达在创伤后1 h开始增强.6 h迅速增加并达高峰(P<0.05),以后逐渐下降并接近正常.创伤组各时段TIMP-1蛋白表达与对照组相比,差别无统计学意义(P>0.05).结论 大鼠肾脏机械性损伤后MMP-9是参与肾脏损伤的重要因素之一.
关键词： 肾 创伤 基质金属蛋白酶9 组织金属蛋白酶抑制剂1 组织芯片
