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新疆鼠尾草总酚酸的体外抗氧化活性
目的:研究新疆鼠尾草总酚酸提取物和纯化物的体外抗氧化活性.方法:以40％乙醇提取和大孔吸附树脂纯化分别制备得到新疆鼠尾草总酚酸的提取物和纯化物,以维生素C(VC)为对照,通过体外化学模拟方法测定新疆鼠尾草总酚酸提取物和纯化物的还原能力、对·DPPH自由基、羟基自由基(·OH)和超氧自由基(Oi·)的清除能力,研究新疆鼠尾草总酚酸的抗氧化活性.结果:新疆鼠尾草总酚酸提取物和纯化物清除·DPPH自由基的作用50％清除浓度(IC50,分别为0.029,0.039g·L-1)弱于VC(IC500.018 g·L-1);对羟基自由基(·OH)的清除作用(IC50分别为0.212,0.165 g·L-1)强于VC(IC500.356 g·L-1);对超氧自由基(O2·)的清除能力(IC50分别为3.735,1.913 g·L-1)弱于VC(IC500.390 g·L-1),其纯化物还具有一定的还原能力.结论:新疆鼠尾草总酚酸具有较强的抗氧化作用.
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新疆鼠尾草不同部位不同极性提取物抗氧化活性
目的:研究新疆鼠尾草地上部分和根部不同极性提取物体外抗氧化活性.方法:新疆鼠尾草地上部分和根部药材的95％乙醇提取物依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取得相应的提取物和水层部分,将各提取物分别配制成适当浓度的溶液,以Vc为阳性对照,采用1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)自由基法、超氧阴离子自由基(O2-)法和铁离子还原法分别测定各提取物的自由基清除能力和铁离子还原能力.结果:新疆鼠尾草地上部分和根部不同极性提取物清除自由基的能力均强于阳性对照Vc,地上部分乙醇层清除自由基的能力(DPPH·法IC500.039 g·L-1,O2-法IC500.130 g·L-1)强于根部乙醇层(DPPH·法IC50 0.160 g·L-1,O2-法IC500.160 g·L-1).对铁离子还原能力的强弱顺序为根部不同极性提取物＞Vc＞地上部分不同极性提取物.结论:新疆鼠尾草地上部分和根部不同极性提取物均具有较强抗氧化作用,地上部分可替代根部使用,为合理开发新疆鼠尾草资源提供科学依据.
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新疆鼠尾草的质量标准
目的:制定新疆鼠尾草药材质量标准,为新疆鼠尾草的开发利用提供技术支持.方法:采集10批新疆鼠尾草药材,对这些样品的性状、检查、鉴别、指标成分含量进行了研究;以迷迭香酸为对照品,采用薄层色谱(TLC)法进行定性鉴别;采用高效液相法(HPLC)测定迷迭香酸的含量.结果:对新疆鼠尾草药材的性状、显微特征进行了描述;根据10批不同产地新疆鼠尾草的测定结果确定:新疆鼠尾草水分不得超过10％,总灰分不得超过14％,酸不溶性灰分不得超过7％,浸出物以热浸法测定,65％乙醇热浸法浸出物暂定不低于13％,水热浸法浸出物的含量不得低于15％.TLC斑点清晰,分离度好;迷迭香酸的进样量在1.001 ～6.006μg(r =0.999 8)与峰面积积分值呈良好线性关系,平均回收率为100.54％,RSD l.9％,迷迭香酸含量不得少于2.0％.结论:新建标准可用于新疆鼠尾草药材的质量控制.
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新疆鼠尾草根中6,7-去氢罗列酮的抗血小板聚集作用考察及其提取工艺优选
目的:评价新疆鼠尾草根中6,7-去氢罗列酮的体外抗血小板聚集作用并优选其提取工艺.方法:应用比浊法测定6,7-去氢罗列酮体外抗血小板聚集作用.在单因素试验基础上,以6,7-去氢罗列酮提取率为指标,通过正交设计法考察提取次数、料液比和提取时间对6,7-去氢罗列酮提取工艺的影响.采用HPLC测定6,7-去氢罗列酮含量,色谱条件为依利特C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-0.02％甲酸(83∶ 17),流速1.=mL· min-,检测波长330 nm,柱温40℃.结果:6,7-去氢罗列酮高、中剂量组抑制凝血酶诱导的血小板聚集作用与生理盐水组比较均具有极显著性差异,高剂量组在15,30,45,60 min内由凝血酶诱导的血小板抑制聚集率分别为90％,75％,66％,64％.佳提取工艺为加10倍量95％于85℃提取3次,每次3h,新疆鼠尾草根中6,7-去氢罗列酮质量分数0.01％.结论:新疆鼠尾草根中6,7-去氢罗列酮表现出较强的抗血小板聚集作用,在此活性基础上优选的提取条件稳定可行.
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新疆鼠尾草二萜醌类成分含量测定及抗血小板聚集作用
目的:研究新疆鼠尾草中荷茗草醌和7-氧-乙酰荷茗草醌抗血小板聚集作用,并建立同时测定其中荷茗草醌,7-氧-乙酰荷茗草醌和6,7-去氢罗列酮3个主要有效成分含量的方法.方法:应用比浊法测定荷茗草醌和7-氧-乙酰荷茗草醌体外抗血小板聚集作用;采用HPLC同时测定荷茗草醌,7-氧-乙酰荷茗草醌和6,7-去氢罗列酮的含量.结果:荷茗草醌和7-氧-乙酰荷茗草醌高、中剂量组抑制凝血酶诱导的血小板聚集作用与生理盐水组比较均有显著性差异,且与质量浓度呈明显的剂量依赖性;荷茗草醌,7-氧-乙酰荷茗草醌和6,7-去氢罗列酮进样量分别在0.31 ～4.56 μg(r =0.999 6),0.01～0.24 μg(r=0.999 4),0.4～6.0μg(r=0.999 5)与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率分别为100.3％(RSD 2.0％),100.6％(RSD 3.1％),102.5(RSD 1.6％).结论:新疆鼠尾草中荷茗草醌和7-氧-乙酰荷茗草醌表现出显著抑制血小板聚集作用;建立的HPLC含量测定方法简便快速,结果准确可靠、重复性好,可用于新疆鼠尾草药材的质量控制与评价.
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新疆鼠尾草地上部分组织学研究
目的:对新疆鼠尾草的茎,叶、性状,显微特征进行了研究,为新疆鼠尾草的鉴定及质量标准的制定提供了依据.为寻找开发新药源及开发新疆的中药资源提供一些理论依据.
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新疆鼠尾草的性状和显微鉴别
目的 对新疆鼠尾草生药学特征进行研究,为进一步研究和利用新疆鼠尾草奠定基础.方法 对新疆鼠尾草原植物进行性状鉴别和显微鉴别.结果 描述、绘制了新疆鼠尾草性状特征和显微特征.结论 通过性状观察和显微研究结果,可为新疆鼠尾草不同部位的生药鉴定提供依据.
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紫外分光光度法测定新疆鼠尾草中6,7-去氢罗列酮的含量
目的:测定新疆鼠尾草中6,7-去氢罗列酮的含量.方法:采用薄层分离紫外分光光度法测定.结果:6,7-去氢罗列酮的含量为0.37%,RSD为2.6%,平均回收率为98.3%.结论:本方法简单,准确可靠.
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新疆鼠尾草抗糖尿病并发症有效部位中丹酚酸K含量的高效液相色谱法测定
目的 建立高效液相色谱法测定新疆鼠尾草抗糖尿病并发症有效部位中丹酚酸K含量的方法.方法 色谱柱为SHIMADZU SHIM-PACK VP-ODS C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为0.2％磷酸-甲醇(65∶35,V/V,调pH值为3.0);流速为0.8 ml· min-1;检测波长为320 nm;柱温为30℃.结果 丹酚酸K与其它组分的分离效果良好,且在0.1～0.35 μg范围内呈良好的线性关系(r≥0.999 9),平均加样回收率为98.11％(RSD=1.87％,n=9).结论 该测定方法简便、准确、可行,为新疆鼠尾草有效部位质量控制和新药开发提供科学依据.
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大孔吸附树脂纯化新疆鼠尾草总酚酸的工艺研究
目的 优选大孔吸附树脂纯化新疆鼠尾草中总酚酸类成分的工艺条件.方法 以鼠尾草洗脱液中总酚酸的含量为考察指标,研究大孔吸附树脂分离纯化的吸附性能和洗脱参数.结果 S-8型大孔吸附树脂对新疆鼠尾草总酚酸的吸附率为76.67％,解吸附率为85.59％,浸膏中总酚酸的含量达56.10％.结论 用S-8型大孔吸附树脂分离纯化新疆鼠尾草中总酚酸的方法可行.
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新疆鼠尾草中酚酸类化学成分的研究
目的 研究新疆鼠尾草的酚酸类化学成分.方法 采用多种柱色谱技术对化合物进行分离纯化,根据理化数据及波谱数据鉴定化合物的结构.结果 从新疆鼠尾草中分离得到7个化合物,分别鉴定为:丹参素(Ⅰ)、丹参素甲酯(Ⅱ)、原儿茶醛(Ⅲ)、原儿茶酸(Ⅳ)、咖啡酸(Ⅴ)、迷迭香酸(Ⅵ)、丹酚酸K(Ⅶ).结论 化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ为首次从新疆鼠尾草中分离得到.
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新疆鼠尾草水溶性有效部位的筛选研究
目的:测定新疆鼠尾草水溶性各部位丹酚酸类的含量,寻找有效部位.方法:采用UV分光光度法,分别对各部位丹酚酸类进行含量测定和方法学研究.结果:新疆鼠尾草地上部分80%甲醇提取物经大孔树脂柱分离的10% EtOH-H2O部分中丹酚酸类的含量为53.144%,为有效部位.结论:UV分光光度法操作简便,结果准确,便于推广,为新疆鼠尾草水溶性有效部位的筛选提供了科学依据.
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HPLC法测定新疆鼠尾草三萜有效部位中熊果酸的含量
目的:建立新疆鼠尾草以三萜为有效部位的熊果酸含量的高效液相色谱检测方法.方法:采用高效液相色谱法(HPLC法)检测浸膏中熊果酸的含量,色谱柱为Waters Symmetry C18柱 (4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为甲醇-水-冰乙酸-三乙胺(85∶15∶0.03∶0.06)∶甲醇=70∶30,流速0.8 ml/min,检测波长210 nm,柱温30℃.结果:HPLC法测得熊果酸的线性范围为Y=447 684X-7 680 (r=0.999 9),平均回收率为98.84%,RSD=1.69% (n=6).结论:HPLC法测定熊果酸含量,操作简便,灵敏度高,重现性好,可为新疆鼠尾草以三萜为有效部位的质量控制提供一定的依据.
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新疆鼠尾草叶化学成分的基础研究
目的:研究新疆鼠尾草叶的化学成分.方法:采用色谱法分离化合物,用波谱和化学方法鉴定结构.结果:从新疆鼠尾草叶中分离得到4种化合物:β-谷甾醇(Ⅰ)、齐墩果酸(Ⅱ)、熊果酸(Ⅲ)、5-羟基-4',6,7-三甲氧基黄酮(Ⅳ).结论:除β-谷甾醇、齐墩果酸、5-羟基-4',6,7-三甲氧基黄酮外,其余均为从新疆鼠尾草的地上部分中首次得到.
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新疆鼠尾草中总酚酸类成分的提取工艺研究
目的确立新疆鼠尾草中总酚酸类成分的佳提取工艺.方法 以总酚酸含量和浸膏得率为指标,采用单因素考察和正交试验相结合的方法确立新疆鼠尾草中总酚酸类成分的佳提取工艺.结果 酚酸类成分的佳提取工艺为:以25倍量的40%乙醇回流提取,3次,每次1 h.在此条件下,新疆鼠尾草中的总酚酸含量为62.81 mg/g.结论 该方法操作简便,稳定性和重现性好,是检测新疆鼠尾草中总酚酸成分的可靠途径.
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新疆鼠尾草总酚酸对糖尿病大鼠肾脏蛋白激酶C活性的影响
目的：探讨新疆鼠尾草总酚酸对糖尿病大鼠肾脏蛋白激酶 C（PKC）活性的影响。方法将60只雄性SD大鼠随机分为正常组（A）10只和造模组50只，采用高脂饲料加链脲佐菌素（STZ）腹腔注射建立糖尿病大鼠模型，造模成功后随机分为5组：糖尿病模型组（B）、盐酸二甲双胍组（C）及新疆鼠尾草总酚酸低（D）、中（E）、高（F）剂量组，每组10只。干预8 w，检测大鼠肾脏指数、血糖、肌酐清除率（Ccr）、尿白蛋白排泄率（UAER）、肾脏 PKC活性。结果与正常组比较，模型组大鼠肾脏指数、血糖、Ccr、UAER和肾脏细胞膜 PKC活性均明显升高，差异有统计学意义（P ＜0．05）；与模型组比较，盐酸二甲双胍组和新疆鼠尾草总酚酸高剂量组大鼠肾脏指数、血糖、Ccr、UAER和肾脏细胞PKC活性均明显下降，差异有统计学意义（P ＜0．05）；新疆鼠尾草总酚酸低剂量组大鼠的血糖明显下降，差异有统计学意义（P ＜0．05），其余指标无明显下降，差异无统计学意义；新疆鼠尾草总酚酸中剂量组大鼠的血糖、UAER、肾脏细胞膜PKC明显下降，差异有统计学意义（P ＜0．05），其余指标无明显下降，差异无统计学意义。结论新疆鼠尾草总酚酸能保护糖尿病肾病（DN）大鼠肾脏，其作用机制与抑制其肾脏 PKC的激活有关。
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双波长薄层扫描法测定新疆鼠尾草中6,7-去氢罗列酮的含量
目的:建立新疆鼠尾草中6,7-去氢罗列酮含量测定的一种方法.方法:采用双波长层扫描法,测定波长λs=330 nm,参比波长λR=215nm.结果:6,7-去氢罗列酮测定的线性范围为0.5～4.0μg,平均回收率为102.4%.结论:用双波长薄层扫描法测定方法简单、灵敏.
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新疆鼠尾草抗血栓作用的活性部位的筛选研究
目的：筛选新疆鼠尾草抗血栓作用的活性部位。方法新疆鼠尾草全草分别依次用水、甲醇、氯仿水浴回流提取各3次（3、3、1 h），真空干燥分别得到新疆鼠尾草的水提物（SDS-W）、甲醇提取物（SDS-M）、氯仿提取物（SDS-T）。再分别取适量水提物和甲醇提取物用水溶解，分别依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取、真空干燥得到水提物的乙酸乙酯部位（SDS-WE）、水提物的正丁醇部位（SDS-WN）、水提物的萃取后剩余物（SDS-WR）、甲醇提取物的乙酸乙酯部位（SDS-ME）、甲醇提取物的正丁醇部位（SDS-MN）、甲醇提取物的萃取后剩余物（SDS-MR）。雄性 SD大鼠120只，适应性喂养1 w 后，随机分为假手术组、对照组、阳性对照组、SDS-W 组、SDS-WE 组、SDS-WN 组、SDS-WR 组、SDS-M 组、SDS-ME 组、SDS-MN 组、SDS-MR 组、SDS-T 组。分别用新疆鼠尾草的提取物及萃取物连续灌胃20 d，给药期间自由饮食，于末次给药1 h 后麻醉，用 FeCl3诱导大鼠左侧颈总动脉形成血栓模型，造模完毕后剪取血管称重、HE 染色制石蜡切片光镜观察各组血栓形成变化；从大鼠腹主动脉采血，采用放射免疫法检测血浆中血栓素 B2（TXB2）、6-酮前列腺素1α（6-Keto-PGF1α）、内皮素-1（ET-1）的含量，采用酶联免疫双抗体夹心 ABC-ELISA 法检测 vWF 的含量，并观察其对于血栓形成的影响。结果与对照组比较，SDS-W 组、SDS-MR 组大鼠血栓重量降低，差异有统计学意义（P ＜0．01）；SDS-WE 组、SDS-MN 组大鼠血栓重量降低，差异有统计学意义（P＜0．05）；SDS-WN 组、SDS-T 组血栓重量增加，差异有统计学意义（P ＜0．01）；SDS-W 组、SDS-MR 组 TXB2水平降低，6-keto-PGF1α水平升高，TXB2／6-keto-PGF1α比值降低，差异有统计学意义（P ＜0．01）；SDS-WE 组、SDS-WN组、SDS-WR 组、SDS-M 组、SDS-ME 组、SDS-MN 组、SDS-T 组血浆中 TXB2水平降低，同时6-keto-PGF1α水平升高，TXB2／6-keto-PGF1α比值降低，差异有统计学意义（P ＜0．05）；SDS-W 组、SDS-MR 组大鼠血浆中 ET-1水平降低，差异有统计学意义（P ＜0．01）；SDS-WE 组、SDS-WN 组、SDS-WR 组、SDS-M 组、SDS-ME 组、SDS-MN 组、SDS-T 组血浆中 ET-1水平降低，差异有统计学意义（P ＜0．05）；SDS-W 组、SDS-MR 组血浆 vWF 的浓度降低，差异有统计学意义（P ＜0．01）；而 SDS-WE 组、SDS-WN 组、SDS-WR 组、SDS-M 组、SDS-ME 组，SDS-MN 组、SDS-T组血浆中 vWF 的浓度升高，差异有统计学意义（P ＜0．01）。结论新疆鼠尾草提取物 SDS-W 和 SDS-MR 部位具有抗血栓作用。
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HPLC法测定新疆鼠尾草各部位6，7-去氢罗列酮的含量
目的：了解二萜类有效成分中6，7-去氢罗列酮在新疆鼠尾草各部位的含量。方法：采用HPLC测定6，7-去氢罗列酮在新疆鼠尾草各部位的含量。结果：确定了6，7-去氢罗列酮在新疆鼠尾草各部位的含量。结论：首次利用HPLC法明确了6，7-去氢罗列酮在新疆鼠尾草各部位的含量分布情况。测定平均回收率99.8％，RSD=0.92％。
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HPLC法同时测定新疆鼠尾草中5个酚酸类成分的含量
目的:建立HPLC同时测定新疆鼠尾草中原儿荼醛、丹参素钠、原儿茶酸、咖啡酸、迷迭香酸的含量.方法:采用Phenomennex Luna C18(250 mm×4.6 mm,5μμm)色谱柱,以甲醇(A)-0.5％甲酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0～10 min,20％A→30％A;10～20 min,30％A→35％A;20～30 min,35％A→36％A;30～35 min,36％A→47％A),流速1 mL·min-1,检测波长为285 nm,柱温40℃,进样量20μL.结果:新疆鼠尾草5个成分在各自的线性范围内(原儿茶醛0.080 96～4.048 0μg·mL-1,丹参素钠0.8032～40.16μg·mL-1,原儿茶酸0.1728～8.640μg·mL-1,咖啡酸0.1664～8.320μg·mL-1,迷迭香酸0.800 8～40.40μg·mL-1)均呈良好的线性关系(r=0.9998),平均加样回收率、精密度、重现性和稳定性均符合有关规定.10批样品中5种酚酸类成分的含量分别为原儿茶醛0.024～0.140 mg·g-1,丹参素钠0.676～1.940 mg·g-1,原儿茶酸0.017～0.276 mg·g-1,咖啡酸0.032～0.264 mg·g-1,迷迭香酸0.199～6.319 mg·g-1.结论:该方法经方法学验证,可用于新疆鼠尾草药材的质量评价.
