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黄连解毒汤全方和不同极性部位的活性筛选
目的:研究比较黄连解毒汤全方水提液体系、水提液体系经有机溶剂梯度萃取后不同极性部位中指标性成分的变化,通过药效学筛选,探讨黄连解毒汤改善脑缺血、益智作用的有效部位及其化学组成,为该方的精制分离提供实验依据.方法:黄连解毒汤全方经水煎煮得水提液(部位Ⅰ),水提液浓缩后以石油醚、乙酸乙酯和水饱和正丁醇梯度萃取,得到石油醚萃取物(部位Ⅱ)、乙酸乙酯萃取物(部位Ⅲ)、水饱和正丁醇萃取物(部位IV)、残留水层上清液(部位V)、残留水层沉淀(部位VI ),以桅子苷、黄芩苷、巴马汀、小檗碱、黄芩素和汉黄芩素6种成分为对照,应用RP-HPLC确定各萃取物中6种指标性成分的含量;选用鼠源肾上腺髓质嗜铬细胞瘤PC-12细胞活性跟踪筛选,MTT法测定黄连解毒汤及各萃取部位对低糖DMEM和氯化钻诱导的PC-12细胞缺糖缺氧损伤的影响.结果:部位V中各指标性成分含量较高,且6种指标性成分的比例与部位Ⅰ相似;部位Ⅰ,V对PC-12细胞的缺糖缺氧损伤保护作用明显.结论:部位V为黄连解毒汤改善脑缺血、益智作用的有效部位.
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新疆鼠尾草不同部位不同极性提取物抗氧化活性
目的:研究新疆鼠尾草地上部分和根部不同极性提取物体外抗氧化活性.方法:新疆鼠尾草地上部分和根部药材的95％乙醇提取物依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取得相应的提取物和水层部分,将各提取物分别配制成适当浓度的溶液,以Vc为阳性对照,采用1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)自由基法、超氧阴离子自由基(O2-)法和铁离子还原法分别测定各提取物的自由基清除能力和铁离子还原能力.结果:新疆鼠尾草地上部分和根部不同极性提取物清除自由基的能力均强于阳性对照Vc,地上部分乙醇层清除自由基的能力(DPPH·法IC500.039 g·L-1,O2-法IC500.130 g·L-1)强于根部乙醇层(DPPH·法IC50 0.160 g·L-1,O2-法IC500.160 g·L-1).对铁离子还原能力的强弱顺序为根部不同极性提取物＞Vc＞地上部分不同极性提取物.结论:新疆鼠尾草地上部分和根部不同极性提取物均具有较强抗氧化作用,地上部分可替代根部使用,为合理开发新疆鼠尾草资源提供科学依据.
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河南连翘不同极性部位的HPLC指纹图谱
目的:建立河南连翘饮片不同极性部位的HPLC指纹图谱,比较不同提取部位化学成分之间的差异,为全面评价河南连翘饮片的质量提供参考.方法:将河南连翘饮片用75％乙醇制备总提取物后,分别用石油醚、乙酸乙酯、三氯甲烷、正丁醇、水依次萃取,浓缩至浸膏,减压干燥制得粉末样品,建立HPLC指纹图谱,并采用相似度评价系统软件进行数据分析.结果:连翘饮片石油醚部位HPLC指纹图谱确定了18个共有峰,指认了3个指纹峰;三氯甲烷部位HPLC指纹图谱共确定了25个共有峰,指认了4个指纹峰;乙酸乙酯部位HPLC指纹图谱共确定了20个共有峰,指认了3个指纹峰;正丁醇部位HPLC指纹图谱共确定了17个共有峰,指认了3个指纹峰;水部位HPLC指纹图谱共确定了17个共有峰,指认了2个指纹峰.连翘饮片同一极性部位指纹图谱相似度较高,不同极性部位之间化学成分有明显差异.结论:该实验方法准确、可靠、重复性高,所建指纹图谱可以全面反映连翘饮片的化学成分分布,为连翘饮片的整体质量评价提供参考.
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茜草炭不同极性部位化学成分组成及保护氧化损伤活性比较
采用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤模型,MTT比色法测定细胞活力,评价茜草炭不同极性部位提取物的抗氧化损伤活性,同时采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MS)对各极性部位化学成分进行定性研究.结果显示,乙酸乙酯部位与正丁醇部位均可显著提高细胞活力(P＜0.01),石油醚部位对细胞活力影响不大,水提取部位对损伤的HUVECs有一定的抑制作用.UPLC-Q-TOF-MS分析结果显示,从茜草炭4个极性部位提取物中共鉴定化合物32种,包括31种醌类及其糖苷类和1个烯萜(茜草哌唑嗪C),石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、水提取部位分别鉴定出化合物23,32,26,15种.关联体外细胞实验结果表明,乙酸乙酯部位和正丁醇部位为茜草炭抑制ox-LDL诱导HUVECs损伤的有效部位,为阐明茜草炭的药效物质基础提供科学依据,为茜草炭功效-物质相关性研究奠定基础.
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马齿苋不同极性部位的抗炎活性评价
目的 比较马齿苋不同极性部位(水、乙醇、正丁醇、乙酸乙酯、石油醚)提取物的抗炎活性.方法 马齿苋不同极性部位提取物作用于体外培养的小鼠巨噬细胞RAW264.7,MTT法测定细胞活力,Griess试剂盒测定细胞分泌一氧化氮(N0)的水平.结果 马齿苋水、正丁醇、乙酸乙酯、石油醚提取物均能促进RAW264.7巨噬细胞的增殖;乙醇、正丁醇、乙酸乙酯、石油醚提取物均能抑制LPS诱导的巨噬细胞分泌NO.结论 马齿苋乙醇、正丁醇、乙酸乙酯、石油醚提取物具有潜在的抗炎活性.
关键词： 马齿苋 极性部位 RAW264.7细胞 一氧化氮 抗炎 -
金银花超微粉体不同极性部位的指纹图谱及其与抑菌活性相关性研究
目的 建立金银花超微粉体不同极性部位的指纹图谱,并研究其与抑菌活性的相关性.方法 采用系统溶剂提取法得到6个不同极性部位,分别采用HPLC法进行测定,同时选择体外抑菌药理指标进行活性测定；用多元线性回归分析揭示化学信息与抑菌指标的相关关系,寻找与药理指标密切相关的物质群.结果 确定以醋酸乙酯提取部位的HPLC指纹图谱来制定金银花的抑菌活性指纹图谱.结论 应用该方法建立的金银花粉体的质量标准科学、合理、实用.
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芍药甘草汤不同极性部位对痛经模型大鼠MDA、 SOD、GSH-PX、 ROS、 NO、 PGE2、 PGF2α影响
目的:研究芍药甘草汤不同极性部位对原发性痛经模型大鼠丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、活性氧(ROS)、一氧化氮(NO)、前列腺素B(PGE2)、前列腺素F2α(PGF2α)的影响,确定芍药甘草汤佳极性部位.方法:大鼠腹腔注射己烯雌酚与缩宫素制备原发性痛经模型,观察并记录空白组、模型组、石油醚部位组、乙酸乙酯部位组、乙醇部位组、水部位组大鼠扭体次数和子宫重量;酶联免疫吸附法测定血清中MDA、SOD、GSH-PX、ROS、NO含量;剖取子宫,制备10％匀浆液,测定子宫中PGE2、PGF2α含量.结果:针对大鼠血清中MDA、SOD、GSH-PX、ROS、NO这5项指标,与模型组比较,除石油醚部位组,各实验组差异均有统计学意义;针对大鼠子宫中PGE2、PGF2α这两项指标,与模型组比较,除石油醚部位组,各实验组差异均有统计学意义.结论:芍药甘草汤通过降低痛经模型大鼠MDA、ROS、PGE2、PGF2α含量,提高SOD、GSH-PX、NO含量,治疗大鼠痛经,确定芍药甘草汤佳极性部位是乙醇部位.
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广西苦丁茶不同活性部位抑菌活性研究
目的 考察苦丁茶不同极性部位对革兰氏阴性菌、阳性菌的抑制作用,确定苦丁茶抑菌活性的药效部位,为研究苦丁茶抑菌活性成分提供依据.方法 采用系统溶剂提取法得到7个不同极性部位,通过96孔板测定不同极性部位的低抑菌浓度(MIC),牛津杯法测定其抑菌圈直径,并通过HPLC法分别测定其中熊果酸、齐墩果酸、槲皮素、山柰素量,苯酚硫酸法测定多糖量,分析5种物质量与抑菌能力之间的关系.结果 不同极性部位抑菌结果显示石油醚无抑菌活性,三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇提取物抑菌活性中等,乙醇、甲醇抑菌活性强,水提取物的抑菌活性强.结论 槲皮素、熊果酸和多糖类为苦丁茶抑菌活性成分.
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金线莲乙醇提取物及不同极性部分的体外抗氧化活性作用
目的 研究金线莲乙醇提取物及其不同极性部位的体外抗氧化活性作用. 方法 用80％乙醇制备金线莲乙醇总提取物(CE),以石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取CE得到石油醚部位(PEF)、乙酸乙酯部位(EAF)、正丁醇部位(BF)、水部位(AF),用DPPH自由基清除法、ABTS自由基清除法、羟基自由基清除法测定.结果 金线莲乙醇提取物及其不同极性部位对DPPH自由基、ABTS自由基、羟基自由基有不同程度的清除作用,其中乙酸乙酯部位的清除能力强. 结论 金线莲乙醇提取物及其不同极性部位具有一定的抗氧化和清除自由基的作用.
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半枝莲氯仿极性部位逆转人结肠癌HCT-8/5-FU耐药性研究
目的 探讨半枝莲逆转人结肠癌细胞株HCT-8/5-FU耐药性的有效部位. 方法 用5-FU干预HCT-8及HCT-8/5-FU细胞株,检测耐药性;用半枝莲4个极性部位分别干预HCT-8和HCT-8/5-FU细胞株,筛选有效的抑癌部位;并用其联合5-FU干预HCT-8/5FU细胞株,观察该有效部位对其逆转5-FU耐药性的影响. 结果 两株细胞比较,HCT-8/5-FU对5-FU耐药性强,其耐药指数为183.99;半枝莲的氯仿提取物(ECSB)对两株细胞的活力具有显著的抑制作用;ECSB联合5-FU用药显示ECSB可增强HCT-8/5-FU细胞对5-FU的敏感性. 结论 ECSB是逆转人结肠癌5-FU耐药细胞株的有效部位,提示半枝莲逆转人结肠癌细胞的耐药性是其治疗结肠癌的重要机制之一.
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DPPH法测定桑籽不同极性部位抗氧化性
目的 研究桑籽不同极性部位的抗氧化活性.方法 采用不同极性的溶剂提取桑籽,得到不同极性部位的提取物,通过测定对二苯代苦味酰肼基(DPPH)的清除能力,评价桑籽不同极性部位的抗氧化活性.结果 桑籽不同极性部位的抗氧化性不同,乙酸乙酯部位EC50(半数清除率)为0.0540 mg/mL;正丁醇部位EC50为0.1521 mg/mL;石油醚部位EC50为0.3746 mg/mL;水部位EC50为0.2156 mg/mL.结论 桑籽具有较强的抗氧化能力,其中乙酸乙酯部位抗氧化能力强,石油醚部位抗氧化能力弱.
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连翘不同极性部位对酪氨酸酶活性抑制作用研究
目的 研究连翘对酪氨酸酶活性的抑制作用.方法 将连翘用80％的乙醇水溶液回流提取,得到总提取物,再用不同极性的有机溶剂石油醚、二氯甲烷、正丁醇进一步萃取,得到不同极性部位.将总提取物和各部位浸膏溶于不同体积的溶剂,以L-酪氨酸为底物,加入酪氨酸酶,使终浓度为1.0,0.5,0.2,0.1,0.04mg·ml-1,测定药物干预前后反应体系在475 nm波长处吸光度值变化,计算各组分对酪氨酸酶活性的抑制率.结果 在各组分中,连翘的二氯甲烷部位对酪氨酸酶活性的抑制率高,当终浓度为1.0 mg·ml-1时,抑制率为57.3％,抑制率随着浓度的增加而升高,其IC50为0.57mg·ml-1；其他组分也均有不同程度的抑制作用,其中正丁醇部位、水溶部位和总提取物随浓度的增加具有双向调节作用.结论 连翘具有较好的抑制酪氨酸酶活性的作用,可以抑制黑色素的形成.此实验为进一步研究连翘中酪氨酸酶活性抑制成分及其作用机理提供基础.
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石韦醇提物抑菌活性的初步研究
目的 研究石韦地上部醇提物的石油醚、醋酸乙酯、正丁醇和水4个极性部位对大肠杆菌、普通变形杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、藤黄八叠球菌、黄曲霉、青霉、黑曲霉等 8种常见菌的抑制作用.方法 采用纸片扩散法进行抑菌试验,观察并测量抑菌环的大小.结果 石韦醇提物的醋酸乙酯、正丁醇和水相萃取物对供试细菌均有不同程度的抑制作用.其中正丁醇相萃取物和水相萃取物的抑菌效果较好.石油醚相萃取物对这8种供试菌均无明显抑菌效果,各相萃取物对黄曲霉、青霉和黑曲霉也没明显抑菌效果.结论 较强极性的提取物对5 种细菌抑菌效果较为突出.
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大叶胡颓子叶止咳作用的研究
目的 探讨大叶胡颓子叶的止咳作用,比较不同极性部位的止咳效果.方法 大叶胡颓子叶经乙醇提取得到粗提物,再用系统试剂萃取分离得到不同极性的部位.采用氨水引咳法分别对粗提物和氯仿部、乙酸乙酯部、正丁醇部、水部4个部位进行止咳试验.结果 大叶胡颓子叶具有显著的止咳作用,粗提物在40 mg/kg的低剂量时就表现出与阳性对照一样的止咳效果.不同部位的止咳效果不同,乙酸乙酯部、水部的止咳作用强,正丁醇部次之,氯仿部的止咳作用较弱.结论 大叶胡颓子叶止咳作用显著,是滨海盐碱地生长的良好中药材.
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利胆排毒口服液不同极性部位体外抗内毒素作用研究
目的：筛选利胆排毒口服液抗内毒素活性部位。方法采用鲎试剂凝集试验法，对利胆排毒口服液不同极性部位抗内毒素作用进行了体外观察。结果各部位均呈现一定的内毒素破坏作用，而水溶性部位在0．01g／mL 仍然对内毒素有破坏作用。结论水溶性部位是抗内毒素主要活性部位，乙酸乙酯和正丁醇部位次之，石油醚部位在处方量浓度下无抗内毒素活性。
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侧柏叶乌发活性部位的实验研究
目的:筛选侧柏叶乌发的活性部位.方法:采用蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法测定侧柏叶不同极性部位及其不同浓度对酪氨酸酶活性的影响,评价侧柏叶不同极性部位及不同浓度的乌发效果.结果:4批侧柏叶中石油醚部位0.5g/ml的剂量有上调蘑菇酪氨酸酶活性的作用.结论:侧柏叶中具有乌发作用的可能是石油醚部位,且与其浓度有关,高浓度有上调蘑菇酪氨酸酶活性的作用.
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广西莪术不同极性部位提取物抗血栓实验研究
目的:研究广西莪术不同极性部位提取物抗血栓作用.方法:采用断尾法测定小鼠出血时间,玻片法测定小鼠凝血时间;胶原蛋白—肾上腺素诱发小鼠体内血栓形成模型;采用肾静脉结扎诱发大鼠体内静脉血栓形成模型,观察广西莪术不同极性部位提取物的抗血栓作用.结果:广西莪术氯仿部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位提取物能明显延长小鼠出血时间和凝血时间;明显抑制胶原蛋白—肾上腺素诱发的小鼠体内血栓形成;明显减轻大鼠体内静脉血栓湿重.结论:广西莪术氯仿部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位提取物具有明显的抗血栓作用.
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白花蛇舌草不同极性部位抗血管生成及抗氧化活性研究
目的:研究白花蛇舌草不同极性部位的体外抗血管生成和抗氧化活性,以期为白花蛇舌草深入研究与开发提供理论依据.方法:使用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇对95％乙醇提取物水溶液依次萃取,得到4种不同极性部位.人脐静脉内皮细胞(HUVEC)管腔形成实验初步观察各极性部位抗血管生成活性;以总还原力、DPPH.和.OH清除率为评价指标,考察各萃取物抗氧化能力.结果:石油醚、乙酸乙酯萃取物对HUVEC管腔形成有较好抑制作用;乙酸乙酯部位总还原力高于其他部位;DPPH·清除率顺序为:乙酸乙酯＞正丁醇＞石油醚＞水部位,其IC50分别为0.110 mg/mL、0.122 mg/mL、0.473 mg/mL和0.754 mg/mL,·OH清除率顺序为:石油醚＞正丁醇＞乙酸乙酯＞水部位,其中石油醚部位清除·OH线性关系较好,线性方程为y=38.565x-40.991,IC50值为2.374 mg/mL.不同极性部位对HUVEC管腔形成的抑制和抗氧化活性呈浓度依赖关系,DPPH·清除率呈时间依赖关系.结论:白花蛇舌草不同极性部位具有一定抗氧化活性,同时能抑制HUVEC管腔形成.
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甘遂炮制前后各部位刺激性和泻下作用研究
目的 比较生甘遂和醋甘遂各极性部位的刺激性和泻下作用.方法 以家兔皮肤刺激和眼刺激的评分标准为依据,观察各受试物组的刺激性.以黑色炭末为指示剂,以正常小鼠首次排黑便时间和数量为指标,观察各受试物组的泻下作用.结果 与对照组相比,生品乙酸乙酯部位和二萜部位具有明显刺激性,醋制后刺激性显著下降,生品石油醚部位有轻度刺激,醋制后稍有下降,正丁醇部位刺激性不明显.甘遂各部位组均能缩短小鼠第一次排黑便时间,使排黑便粒数增加.其中生品石油醚和二萜部位,与对照组相比具有极显著性差异(P<0.01),生品乙酸乙酯部位与对照组相比具有显著性差异(P<0.05),醋制后各组作用皆有所降低.结论 甘遂的刺激性成分主要集中在乙酸乙酯和二萜部位,泻下成分主要集中在石油醚和二萜部位,炮制后作用均显著下降.
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西南齿唇兰提取物及其各极性部分的体外抗氧化活性筛选
目的 研究西南齿唇兰总浸膏及其不同极性部位的体外抗氧化活性.方法 使用95％乙醇多次提取西南齿唇兰,减压浓缩后得到总浸膏,分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、水进行萃取,得到不同极性部位浸膏.采用DPPH法、ABTS法、羟自由基清除法及其FRAP法以抗坏血酸(VC)和2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)作为阳性药,分别对一系列浓度的不同极性部位及其总浸膏的抗氧化活性进行考察.结果 DPPH自由基清除模型中,抗氧化活性强弱顺序为乙酸乙酯部位＞氯仿部位＞正丁醇部位＞总浸膏＞水部位＞石油醚部位.ABTS自由基清除模型中,西南齿唇兰不同极性部位的抗氧化强弱顺序为乙酸乙酯部位＞氯仿部位＞正丁醇部位＞总浸膏＞水部位＞石油醚部位.在羟自由基清除模型中,抗氧化活性强弱顺序为石油醚部位＞乙酸乙酯部位＞总浸膏＞氯仿部位＞正丁醇部位＞水部位.在考察样品的Fe3+还原成Fe2+能力实验中,西南齿唇兰不同极性部位的还原能力强弱顺序为乙酸乙酯部位＞正丁醇部位＞氯仿部位＞水部位＞总浸膏＞石油醚部位.结论 综合DPPH法、ABTS法、羟自由基清除法及其FRAP法考察结果,各个极性部位中抗氧化能力为突出的是乙酸乙酯部位,乙酸乙酯部位可作为西南齿唇兰抗氧化活性研究的主要极性部位进行深入研究并进一步分离其中的抗氧化活性成分.本文为进一步深入开展研究西南齿唇兰关于氧化应激损伤性疾病的防治药物筛选提供了参考.
