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STAT3和Ⅰ型干扰素在水痘-带状疱疹病毒复制过程中作用机制的研究
目的:探讨在水痘-带状疱疹病毒(VZV)的复制过程中,信号转导及转录激活因子(STAT)3和Ⅰ型干扰素(IFN)与病毒复制之间的关系.方法:VZV感染人胚肺成纤维细胞(HELF)后,病毒空斑试验检测正常对照组、STAT3过表达组及STAT3敲除组VZV滴度的变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测3组Ⅰ型IFN功能基因(OAS、PKR、IRF3和STAT1)的表达情况.结果:VZV感染HELF后,STAT3表达显著增加.STAT3的过度表达增加了VZV的感染(P＜0.001),同时Ⅰ型IFN反应基因OAS、PKR、IRF3和STAT1表达均衰减(P均=0.000).STAT3敲除组VZV病毒滴度显著降低(P=0.000),而Ⅰ型IFN反应基因OAS、PKR、IRF3和STAT1表达均上调(P均=0.000).结论:①通过在HELF中转染STAT3基因使其过表达,促进了VZV的感染,并显著抑制Ⅰ型IFN对VZV感染的作用.②敲除STAT3基因抑制了VZV感染,而Ⅰ型IFN对VZV感染的反应增强.
关键词： 信号传导及转录激活因子3 Ⅰ型干扰素 水痘-带状疱疹病毒 -
水痘-带状疱疹病毒糖蛋白E原核表达载体的表达及产物纯化
目的:构建水痘-带状疱疹病毒(VZV)糖蛋白E(gE)原核表达系统的纯化方法,并鉴定目的蛋白.方法:将VZV gE基因片段克隆到原核表达载体pGEX-1λT,构建重组原核融合蛋白表达载体pGEX-VZVgE;用IPTG(异丙基-硫代-β-D-半乳糖苷)诱导融合蛋白在大肠杆菌中表达;利用蛋白回收试剂盒对表达产物进行纯化.并用免疫印迹法检测纯化产物的抗原性.结果:经双酶切及测序鉴定所得到的重组质粒即为含有目的片段的重组载体pGEX-VZVgE;在IPTG诱导下pGEX-VZVgE表达分子质量为98 ku的融合蛋白;纯化后的融合蛋白经凝血酶酶切后,得到分子质量约为72 ku的VZV gE,并用免疫印迹证明其具有良好的抗原性.结论:构建的VZV gE重组原核表达载体能表达重组蛋白,并建立了一套纯化VZV gE的方法;从而为VZVgE的应用研究打下基础.
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带状疱疹患者免疫功能测定
为探讨带状疱疹患者的免疫功能状态,笔者检测了52例带状疱疹患者血清和水疱中白介素(IL)-2、可溶性白介素2受体(sIL-2R)、γ-干扰素(IFN-γ)水平和水痘-带状疱疹病毒(VZV)IgG抗体,现将检测结果报告如下.
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重组人α-2b干扰素含片药效学试验
目的观察重组人α-2b干扰素(rhIFN α-2b)含片对体外、体内的抗病毒作用,为临床用药提供药理学依据.方法采用体外和体内抗病毒试验.结果 rhIFN α-2b含片浓度为400～250 000 IU/mL时,对单纯疱疹病毒(HSV-1、HSV-2)和水痘-带状疱疹病毒有明显抑制作用,并在31.2～1 000 IU/mL浓度时,对乙型肝炎病毒也有明显抑制作用.小鼠抗流感病毒试验表明,口含rhIFN α-2b 500～50 000 IU/只,能明显降低动物死亡率,并延长存活时间.结论 rhIFN α-2b含片对体内、体外病毒均有明显的抑制作用.
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国产冻干水痘减毒活疫苗接种副反应观察
目的 科学评价国产冻干水痘减毒活疫苗对适龄儿童接种的安全性.方法 采用统一的问卷,由经过培训的专业人员完成.问卷内容包括接种后30min、4h、24h、48h、72h、6w后副反应情况.结果 共纳入617名观察对象,对接种对象接种后30min、4h、24h、48h、72h、6w 等时间段进行观察,其副反应发生率分别为2.7%、4.7%、4.8%、2.3%和0.3%,6w后无副反应报告.观察对象中共计有29名发生发热反应,总体发热反应发生率为4.7%,发生注射部位红肿反应率为4.7%,观察对象局部硬结发生率为0.8%.结论 该国产冻干水痘减毒活疫苗反应轻微,安全性好,有推广应用价值.
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Hunt综合征16例误诊分析
Hunt综合征(耳带状疱疹),如特征性皮疹延迟出现易致临床误诊,给早期合理治疗及预后带来一定的影响.我院自1996～2005年收治被误诊为其他疾病的Hunt综合征患者16例.现将诊治体会报道如下.
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更昔洛韦联合匹多莫德治疗水痘患者的疗效分析
目的 了解膜抗原荧光抗体试验法在检测血清水痘-带状疱疹病毒抗体(人抗VZV-IgG)中的作用,观察更昔洛韦联合匹多莫德治疗水痘的临床疗效.方法 127例水痘患者随机分为观察组72例和对照组55例,观察组采用更昔洛韦联合匹多莫德治疗,对照组仅采用更昔洛韦治疗;另随机选取387例健康人群为健康组.采用膜抗原荧光抗体试验法检测人抗VZV-IgG;治疗期间观察两组的退热时间、皮疹干涸时间和皮疹结痂时间,并在治疗1个疗程之后评价疗效.结果 观察组和对照组人抗VZV-IgG测定结果均为阳性.健康组中不同年龄人群的人抗VZV-IgG阳性率差异有统计学意义(χ2=104.815,P<0.05);而不同年龄人群的阳性率性别差异无统计学意义(P>0.05).观察组退热时间、皮疹干涸时间和皮疹结痂时间均低于对照组(t=3.122、3.387、7.892,P<0.05).观察组显效率55.56％,总有效率95.83％,总有效率与对照组比较差异有统计学意义(χ2=4.246,P<0.05).观察组药物不良反应发生率5.56％,对照组药物不良反应发生率7.27％,两组比较差异无统计学意义(χ2=0.156,P>0.05).结论 在水痘临床治疗中,更昔洛韦联合匹多莫德具有更好的疗效,药物不良反应发生率较低,具有良好的临床应用价值.
关键词： 水痘 水痘-带状疱疹病毒 膜抗原荧光抗体试验法 更昔洛韦 匹多莫德 -
贯叶连翘提取物和盐酸赖氨酸抗疱疹病毒复方筛选
目的:评价贯叶连翘提取物和盐酸赖氨酸复方抗疱疹病毒活性,有效复方在整体动物的安全性.方法:(1)采用细胞病变效应法(CPE),测定贯叶连翘提取物与盐酸赖氨酸3种复方(分别以质量比1：1、1：2和2：1配比)对Vero细胞和2BS细胞的细胞毒性,以及对单纯疱疹病毒I型(HSV-1)和水痘-带状疱疹病毒(VZV)的抗病毒活性.(2)一次灌胃(ig)给予小鼠复方(2：1),观察 14 d,测定LD50.结果:贯叶连翘提取物和盐酸赖氨酸3种复方体外对HSV-1和VZV表现不同程度的抗病毒活性,小有效浓度(MIC)和半数有效浓度(IC50)范围分别为 9.7～19.5 mg·L-1和 6.8～9.7 mg·L-1,测得复方(2：1)单次小鼠ig的LD50为 11.7 g·kg-1,95%置信区间为 6.5～17.2 g·kg-1.结论:贯叶连翘提取物和盐酸赖氨酸复方体外具有较好抗HSV-I和VZV作用,2：1复方属于无毒药物范围.
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干扰素α-2b治疗小儿水痘的临床疗效观察
目的:探讨干扰素α-2b治疗小儿水痘的临床疗效及安全性.方法:将78例水痘患儿随机分为使用干扰素α-2b的治疗组和使用阿昔洛韦的对照组,临床观察两组的止痒时间、退热时间和水疱结痂时间以及临床症状的改善情况,进行疗效比较.结果:使用干扰素α-2b治疗组在临床症状的改善和治疗有效率均优于阿昔洛韦组,两组比较差异有显著性(P＜0.05).结论:干扰素α-2b治疗小儿水痘疗效显著,能抑制水痘病毒的复制、缩短病程、改善临床症状及预防并发症,是一种安全、有效的治疗方法.
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VZV和钩端感染者谷丙转氨酶的检测
目的:探讨水痘-带状疱疹病毒(varicella zoster virus,VZV)和钩端螺旋体感染者血清转氨酶水平及其意义.方法:应用速率法检测VZV和钩端螺旋体感染者血清转氨酶水平.结果:40例VZV感染者中有23例血清谷丙转氨酶值升高,32例钩端螺旋体感染者中有21例GPT值升高,GPT异常率分别达57.5%和65.63%.结论:GPT值在VZV和钩端螺旋体感染者中异常率较高,在此类疾病中具有诊断和判断病情的意义.
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VZV糖蛋白E基因胞外域的原核表达及其兔抗血清的制备
目的 采用原核表达系统表达水痘-带状疱疹病毒(VZV)糖蛋白E(gE)基因的胞外域,将纯化后的目的蛋白免疫新西兰家兔,制备该蛋白特异性抗血清.方法 构建原核表达质粒gE-pET-32a(+),测序后将其转化至E.coliBL21,以异丙基硫代β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导,获得VZVgE融合蛋白.采用SDS-PAGE电泳、Western blot法鉴定其特异性,利用Ni2+-NTA柱对gE蛋白进行纯化,复性后免疫新西兰家兔,获得兔抗VZV gE血清;采用间接免疫荧光、Western blot法和ELISA法检测该血清的特异性和效价.结果 成功诱导表达出VZV gE融合蛋白,SDS-PAGE鉴定提示其主要为包涵体表达,浓度约为3.01mg/ml.蛋白经Ni2+-NTA柱纯化后,纯度约为90％.Western blot法显示,经变性、复性后的该融合蛋白有良好的免疫反应性.用该蛋白免疫新西兰家兔后获得兔抗VZV gE血清.ELISA分析显示,该兔抗血清的效价为1∶6400.结论 成功构建了高效表达VZV gE蛋白的原核表达系统,获得较高纯度的gE蛋白,可以作为VZV亚单位疫苗的候选抗原,制备了特异性及效价均较高的兔抗VZV gE多克隆抗体,为VZV感染的临床诊断及治疗提供了重要的实验工具.
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水痘-带状疱疹病毒糖蛋白E胞外域基因的真核细胞稳定表达及其免疫反应性的初步研究
目的：真核细胞稳定表达水痘-带状疱疹病毒( VZV)糖蛋白E( gE)的胞外域基因,应用gE抗原建立VZV感染的血清学试验来评价VZV疫苗的免疫效果。方法构建含有VZV gE胞外域基因的真核表达质粒pCDNA3．1-gE,测序后脂质体转染 COS-7细胞,经 G418筛选出稳定表达VZV gE的细胞株。采用RT-PCR法检测VZV gE的mRNA, Western blot和间接免疫荧光法检测gE的免疫反应性,表达产物经Ni2+-NTA柱纯化后包被ELISA板,对127份0~10岁正常儿童血清中VZV-IgG抗体水平进行检测。结果成功筛选出能够稳定表达VZV gE胞外域基因的COS-7细胞株,RT-PCR检测到gE的mRNA,经Western blot和间接免疫荧光鉴定,gE具有明显的免疫反应性,COS-7细胞株和其培养上清液中均有gE融合蛋白,表达量约为0．632 mg/ml,纯度约为90%。 ELISA实验检测了127份0~10岁儿童血清中VZV-IgG抗体,总阳性率为81．89%,特异度和灵敏度分别为93．75%和88．24%。结论本实验获得稳定高效表达VZV gE胞外域基因的COS-7细胞株,建立的ELISA 血清学检测方法有助于 VZV感染的流行病学研究和对易感人群VZV感染的诊断和预防。
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抗水痘-带状疱疹病毒药物的研究进展
水痘-带状疱疹病毒(Varicella-Zoster Virus,VZV)是一种α疱疹病毒.VZV的初次感染会引发水痘,之后潜伏于神经节中.VZV的再激活会导致带状疱疹和其他多种神经性疾病.目前阿昔洛韦是首选的抗水痘-带状疱疹病毒药物,近年来其它一些处于研究中的抗水痘-带状疱疹病毒药物都表现出较好的抗病毒活性.
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2017年江西省部分地区健康人群血清水痘-带状疱疹病毒lgG抗体水平调查
目的 了解江西省健康人群中水痘-带状疱疹病毒抗体的水平,评估接种疫苗的佳对象.方法 根据2017年传染病报告信息管理系统的水痘-带状疱疹病例监测资料进行分析;选区江西省3个设区市的6个县(市)随机采集1816例健康人群血清标本,使用酶联免疫吸附法进行水痘-带状疱疹病毒IgG抗体检测.结果 ⑴2017年江西省共报告水痘-带状疱疹病例19749例,平均发病率为43.01/10万,其中赣州市发病率高,全省11个设区市的100个县区均有病例报告;每月均有水痘-带状疱疹病例的报告,有5~7月及11~12月两个流行高峰.各年龄组人群均有发病,以15岁以下的学生及儿童发病多,尤其是5~15岁的学龄儿童;⑵1816例健康人群血清标本共检出水痘-带状疱疹抗体阳性1149例,阳性率为63.27%,抗体水平中位数为357.03mIU/ml;不同县市的水痘-带状疱疹抗体IgG抗体阳性率及抗体水平值差异无统计学意义(P＞0. 05);男性和女性的抗体IgG抗体阳性率及抗体水平值差异均具有统计学意义(P＜0.01);不同年龄组的抗体IgG抗体阳性率及抗体水平值差异均具有统计学意义(P＜0.01);不同年龄组的抗体阳性率及抗体水平随年龄而增长,1岁以下年龄组抗体阳性率和抗体水平中位数均为低.结论 儿童是水痘发病的主要人群,当前推荐的出生后12~15月龄进行第一次水痘-带状疱疹疫苗接种,并在4~6岁进行第二次疫苗接种的策略可以有效减少水痘病例的发生.
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成人水痘13例临床分析
我院1997年10月～1999年10月收治13例成人水痘,现分析报告如下.
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2012-2013年青岛市水痘流行病学特征分析
目的 分析2012-2013年青岛市水痘流行病学特征,为制定预防控制策略提供依据.方法 对2012-2013年青岛市水痘病例进行描述性流行病学分析.结果 2012-2013年青岛市累计报告水痘病例5 610例,年均发病率为36.53/10万.发病高峰为4-6月和11月-次年1月;发病率居前3位的依次是四方区、市北区、李沧区,不同县(市)区年均发病率差异有统计学意义(x2=8 174.52,P＜0.05);男性发病率高于女性,差异有统计学意义(x2=54.05,P＜0.05);病例集中在20岁以下人群,其中5～9岁为发病高峰年龄,职业以学生居多.结论 水痘是一种多见于儿童的传染性极强的传染病,应做好疫情监测和预警,对适龄儿童开展水痘疫苗的查漏补种工作,逐步提高疫苗接种率,为降低发病率提供有力保障.
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2011～2016年靖江市水痘流行病学特征及趋势分析
目的 分析靖江市水痘流行病学特征、发病趋势,探讨防控措施.方法 通过《中国疾病预防控制信息系统》收集、分析靖江市2011～2016年不同人群特征的水痘分布情况,以及高发季节、高发地区,统计每年水痘疫苗使用量率,分析其与水痘发病率可能存在的关联.结果 靖江市2011～2016年报告水痘1 184例,平均年发病率28.88/10万,靖城街道办为高发乡镇.高发年龄段主要集中在5～14岁,各年龄段发病率差异有统计学意义(P＜0.01),幼托儿童发病率高(228.69/10万),其次为学生和散居儿童,男女水痘发病率差异无统计学意义(P＞0.05).全年均有发病,冬春季为高发季节.2013年水痘疫苗使用率高(625.88/10万),2016年低(40.20/10万);2016年水痘发病率高(62.86/10万),2011年低(4.72/10万);水痘疫苗使用率与发病率之间呈显著负相关关系(r=-0.53).结论 靖江市2011～2016年水痘发病率呈逐年上升趋势,而水痘疫苗接种情况与水痘发病率呈显著负相关.
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水痘-带状疱疹病毒研究进展
水痘-带状疱疹病毒( VZV)可引起水痘及带状疱疹，幼年及老年较常见，目前对其分子机制、免疫机制以及疫苗研发的研究居多。本文针对近年来VZV致病情况、免疫机制及疫苗的相关研究作一综述。
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带状疱疹的研究治疗进展
带状疱疹是由水痘-带状疱疹病毒引起的急性感染性疱疹,皮疹一般有单侧性和按神经节段分布的特点,由有集簇性的疱疹组成,并伴神经痛.本文从发病机制、病理诊断、治疗措施3方面整理归纳国内外相关临床报道文献,为临床治疗提供依据.
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水痘-带状疱疹病毒致肾损伤病例临床特点分析
带状疱疹是成人常见的急性感染性皮肤病,多表现为集簇性疱疹伴有较为严重的疼痛,其好发部位依次为肋间神经、颈神经、三叉神经和腰骶神经,也可发生于眼部及耳部.近年来发现水痘-带状疱疹病毒感染除引起皮肤疱疹外常同时导致急性肾损伤,本研究对261例带状疱疹病毒感染患者进行观察,并对其所致肾损伤的临床特点做出分析,以供临床医师参考.
