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中和试验发现西安地区为肾综合征出血热混合型疫区
目的 调查陕西西安地区汉坦病毒感染现状,分析当地肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)疫源地性质.方法 根据HFRS发病报告数据,分析西安HFRS的发病特点.通过荧光定量RT-PCR方法,检测西安HFRS疫区家鼠和野鼠携带汉坦病毒情况及病毒型别.微量中和试验确定西安本地HFRS病人、HFRS疫苗接种者和隐性感染者血清中的汉坦病毒中和抗体水平并分型,回顾性调查阳性感染者.结果 西安地区HFRS发病每年均有6-7月份的小高峰和10-12月份的大高峰;在当地642只家鼠和1 546只野鼠肺组织中检出汉滩病毒RNA136份;143份人血清中123份检测到汉坦病毒中和抗体,未检测到中和抗体的有20份.中和抗体阳性者中判定为汉滩病毒感染者92人,占74.80％;判定为汉城病毒感染者3人,占2.44％;不能区分病毒感染型别者28人,占22.76％,3例感染汉城病毒者分别为HFRS病人、疫苗接种者和隐性感染者,调查显示3例均为本地感染.结论 实验室和现场调查证实当地存在汉城型病毒本地感染,陕西西安地区是以汉滩病毒型为绝对优势的HFRS混合型疫区.
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对分离自褐家鼠的汉滩型和汉城型病毒的毒力测定
目的 比较分离自褐家鼠的汉滩病毒(HTNV)CGRn5310株和汉城病毒(SEOV)HR54株的毒力差异,探索汉坦病毒(HV)"溢出"到非宿主动物后的毒力变化.方法 选取从贵州省褐家鼠中分离的CGRn5310株HTNV和从河南省褐家鼠分离的HR54株SEOV,用不同稀释度的病毒悬液经脑内接种于昆明乳鼠,观察小鼠发病症状,测定其半数致死量(LD_(50)),并用免疫荧光法检测脑与肺组织内HV特异抗原.结果 接种2株病毒后的小鼠生长缓慢,均出现不同程度的神经症状.CGRn5310株的LD_(50)是10~-6.42,HR54株的LD_(50)是10~-4.51.在死亡小鼠的脑与肺组织中均能检测到HV特异抗原,而对照组脑与肺组织内未检测到病毒抗原.结论 从褐家鼠中分离到的CGRn5310株HTNV的毒力大于从褐家鼠中分离到HR54株SEOV,这可能意味着HV"溢出"到非宿主动物后毒力变化较小.
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肾综合征出血热灭活疫苗大鼠效力试验模型
目前肾综合征出血热灭活疫苗效力试验采用家兔作为免疫动物,对疫苗免疫能产生较好的中和抗体和免疫荧光法(IFA)抗体应答,但购买和饲养家兔成本较高.实验用大鼠为汉坦病毒的敏感动物,我们已经报道汉滩病毒(HTNV)型(Ⅰ型)肾综合征出血热灭活疫苗免疫大鼠,观察表明大鼠对Ⅰ型疫苗的反应性良好,同型中和抗体应答类似于家兔,异型中和抗体和IFA抗体应答较家兔为好.我们继续研究汉城病毒(SEOV)型(Ⅱ型)和双价肾综合征出血热灭活疫苗在大鼠的免疫反应,并观察了疫苗的稳定性.
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中国肾综合征出血热流行现状及免疫策略
肾综合征出血热（ hemorrhage fever with renal syndrome， HFRS）是由汉坦病毒感染引起的一种以发热、出血以及肾功能受损为主要症状的自然疫源性传染病。目前公认引起HFRS的汉坦病毒有汉滩病毒、汉城病毒、普马拉病毒和多不拉伐病毒，有一些学者认为还有其他一些引起HFRS的汉坦病毒，如图拉病毒、萨拉马病毒、阿穆尔病毒等，仍待证实。
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呼和浩特市鼠类携带汉坦病毒的基因分型
目的 对呼和浩特市流行的汉坦病毒进行基因分型,为制定肾综合征出血热防制对策提供科学依据.方法 对经间接免疫荧光试验初筛为阳性的鼠肺标本用汉坦病毒型特异性引物,以巢式逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增部分M和S基因片段上的目的核苷酸序列,纯化回收测序后,将扩增片段的核苷酸序列与已知病毒的核苷酸序列进行比较,以明确汉坦病毒的基因型及基因亚型.结果呼和浩特市33份阳性鼠肺中,其中32份为褐家鼠肺,1份为小家鼠肺,经巢式RT-PCR扩增,用汉城病毒型特异性引物共扩增出部分S、M片段(G1、G2区)69个,经同源性和系统发生分析,褐家鼠和小家鼠所携带汉坦病毒均为汉城型S1亚型.结论 呼和浩特市家鼠中流行的汉坦病毒为汉城型,与流行病学分型一致.
关键词： 汉坦病毒 逆转录-聚合酶链反应 基因分型 汉城病毒 -
长春市鼠类携带汉坦病毒的基因型分析
目的 了解长春市鼠类动物所携带的汉坦病毒基因型别.方法 采集长春市地区鼠肺样品,应用免疫荧光法检测鼠肺中汉坦病毒抗原,提取阳性样本中病毒RNA,利用RT?PCR法扩增S基因片段,并测序,利用DNAman软件和Mega 6.0软件进行序列分析.结果 在长春地区共捕获褐家鼠100只,检测到阳性样本3份,阳性率为3.0%.通过测序获得3株病毒的S基因片段序列,经同源性分析比较发现各序列间核苷酸同源性为100%,与其他汉城病毒(SEOV)核苷酸同源性在95.4%~100%之间,3株病毒全部为SEOV.系统发生树分析表明,3株病毒在同一组内,属于S3亚型.结论 研究表明长春市褐家鼠中携带的汉坦病毒为SEOV型,S3亚型.
关键词： 汉坦病毒 反转录-聚合酶链反应 基因分型 汉城病毒 -
汉坦病毒及其相关疾病研究进展--第四届国际HFRS和汉坦病毒会议资料综述
汉坦病毒归属布尼亚病毒科,是一种有包膜分节段的负链RNA病毒,基因组包括L、M、S 3个片段,分别编码L聚合酶蛋白、G1和G2糖蛋白、核蛋白.汉坦病毒包括引起肾综合征出血热(HFRS)的汉滩病毒(Hantaan virus,HTNV)、汉城病毒(Seoul virus,SEOV)、普马拉病毒(Puumala virus,PUUV)、多不拉伐病毒(Dobrava virus,DOBV),引起汉坦病毒肺综合征(HPS)的无名病毒(Sin Nombre virus,SNV)、纽约病毒(New York virus,NYV)、污黑小河沟病毒(Black Creek Canal virus,BCCNV)、牛轭湖病毒(Bayou virus,BAYV)、安第斯病毒(Andes virus,ANV)以及与人类疾病关系尚不清楚的一组病毒,如希望山病毒(Prospect Hill virus,PHV)、泰国病毒(Thailand virus,THAIV)、图拉病毒(Tula virus,TULV)、索托帕拉雅病毒(Thottapalayam virus,TPMV)、哈巴罗夫斯基病毒(Khabarovsk virus,KBRV)、El Moro Canyon病毒(ELMCV)、Rio Segundo病毒(RIOSV)、岛景病毒(Isla vista virus,ISLAV)、Muleshoe病毒(MULEV)、Bloodland lake病毒(BLLLV)、Rio Mamore病毒(RMV)、Topografov病毒(TOPV)等.近年来随着新技术的应用和新型病毒的发现,汉坦病毒及其相关疾病的研究得以飞速发展.
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螨类传播汉坦病毒的研究进展
肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)在我国多称流行性出血热(epidemic hemorrhagic fever,EHF),是一种疫区分布广、发病率及病死率较高的自然疫源性疾病,其病原属布尼亚病毒科(Bunyaviridae)、汉坦病毒属(Hantavirus,HV).在中国流行的有由黑线姬鼠携带传播的汉滩病毒(Hantaan virus,HTNV)和由褐家鼠携带传播的汉城病毒(Seoul virus,SEOV).HFRS病原体的多型性及传播途径的多样化构成HFRS复杂多变的流行特征.
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我国汉坦病毒疫苗的研究进展
肾综合征出血热(HFRS)是由布尼亚病毒科汉坦病毒属中的病原体引起的一种病情重、病死率高的自然疫源性急性传染病.我国是世界上受肾综合征出血热危害严重的国家,90% 以上的病例在我国.在我国其病死率为 5%～10%,平均病死率为 3.35%[1].目前发现汉坦病毒有二十余种血清/基因型,汉滩病毒(Hantaan virus,HTNV)、汉城病毒(Seoul virus,SEOV)、普马拉病毒(Puumala virus,PUUV)、辛诺柏病毒(SinNombre virus,SVNV)、多不拉-贝尔格莱德病毒(Dobrave virus,DOBV)等,在我国主要流行 HTNV 和 SEOV 两种型别病毒.
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流行性出血热和汉坦病毒肺综合征发病机制研究进展
流行性出血热(EHF)和汉坦病毒肺综合征(HPS)均是由汉坦病毒属病毒(Hantaviruses,HV)引起的急性传染病.EHF的病原体--汉滩病毒(HTNV)、汉城病毒(SEOV)、普马拉病毒(PUUV)和多布拉伐病毒(DOBV)等主要分布于有着几千年文明历史的欧亚大陆,国际上称为旧世界汉坦病毒(Hantavirusin old world);而辛诺柏病毒(SNV)、安弟斯病毒(ANDV)等HPS的病原体主要分布于仅有几百年文明史的南北美洲新大陆,故称为新世界汉坦病毒(Hantavirus in newworld).2类疾病虽然在病原、病变部位、临床表现和诊治方法等方面有所不同,但是其病原体均属于汉坦病毒属,基因组结构和功能大多相同,基本病理改变均为小血管和毛细血管渗漏(capillaryleakage),少数EHF可以表现为呼吸功能衰竭为主,而少数南美国家的HPS病例可伴有明显的肾衰竭.本文就近年EHF和HPS发病机制的研究进展综述如下.
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汉坦病毒与机体干扰素免疫应答
汉坦病毒属(hantavirus,HV)是布尼亚病毒科的单负链RNA病毒,其基因组分为L、M、S 3个片段,分别编码病毒的RNA聚合酶(L)、包膜糖蛋白(Gn和Gc)和核衣壳蛋白(NP),病毒主要分为引起肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)的旧大陆汉坦病毒和引起汉坦病毒心肺综合征( hantavirus cardiopulmonary syndrome,HCPS)的新大陆汉坦病毒.前者主要包括汉坦病毒原型株汉坦病毒( HTNV)、汉城病毒(SEOV)、多布拉伐病毒(DOBV)和普马拉病毒(PUUV)等,后者主要包括辛诺柏病毒( SNV)、纽约病毒(NY-1V)和安第斯山病毒(ANDV)等.除了这些病毒之外,还有被认为是不引起人类明显疾病的图拉病毒(TULV)和希望山病毒(PHV)等.
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汉坦病毒糖蛋白及其在细胞融合中作用的研究进展
汉坦病毒(Hantavirus,HV)属于布尼亚病毒科分节段负链RNA病毒,基因组根据大小将其分为L、M、S.分别编码病毒RNA依赖的RNA多聚酶、两种包膜糖蛋白Gn、Gc和一个非结构蛋白以及病毒的核衣壳蛋白.目前国内外至少有30个血清型/基因型,代表型别有汉滩病毒(Hantann virus,HTNV)、汉城病毒(Seoul virus,SEOV)、辛诺柏病毒(Sin Nombre virus,SNV)、普马拉病毒(Puumala virus,PUUV)、希望山病毒(Prospect Hill virus,PHV)、多布拉伐-贝尔格莱德病毒(Dobrava-Belgrade virus,DOBV)、泰山病毒(Thailand virus,THAIV)等[1,2].
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汉坦病毒病原学研究进展
自1976年李镐汪等从黑线姬鼠肺组织中分离到流行性出血热病原汉滩病毒(Hantaanvirus,HTN)以来,相继发现了引起轻型流行性出血热的病毒,普马拉病毒(PUU)和汉城病毒(SEO).1993年在美国又发现了引起汉坦病毒肺综合征(HPS)的汉坦病毒.近年来,随着分子生物学技术,特别是PCR技术的广泛应用,新发现的汉坦病毒数目急剧增加[1].目前为止,至少有20余种汉坦病毒血清/基因型.
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吉林省汉坦病毒宿主动物携带病毒的遗传进化分析
目的 对吉林省汉坦病毒(Hantavirus,HV)宿主动物携带病毒进行遗传进化分析.方法 采集吉林省不同地区鼠肺样品,应用间接免疫荧光法(indirect immunofluorescence assay,IFA)鉴定出HV感染的阳性样本,利用Trizol试剂提取病毒RNA,RT-PCR法扩增阳性样本中M和S片段基因,并进行测序,应用DNASTAR软件对M和S片段基因的核苷酸同源性进行分析,并与汉城病毒(Seoul virus,SEOV)参考株进行比较;利用MegAligh软件进行蛋白序列中氨基酸差异性分析;利用MEGA 5.0软件进行系统发生分析.结果 共捕获719只啮齿动物,其中褐家鼠(R.norvegicus)555只,黑线姬鼠(A.agrarius)74只,小家鼠(M.musculus)90只,HV抗原阳性率为1.39％(10/719);10份阳性样本中,7份来自褐家鼠,2份来自小家鼠,1份来自黑线姬鼠.用全长S引物扩增得到的10株病毒全长S基因片段,经同源性分析比较发现,各序列间的核苷酸同源性在92.8％～95.1％之间,与其他SEOV核苷酸同源性在90.2％～94.7％之间;用M引物扩增得到的部分基因片段,经同源性分析比较发现,各序列间的核苷酸同源性在96.5％～99.5％之间,而与其他SEOV核苷酸同源性在91.5％ ～ 97.7％之间;10株病毒全部属于SEOV.黑线姬鼠G蛋白365 ～ 769位点间有5个氨基酸差异位点(V494L、C546S、Y626C、M630L和V637I),小家鼠G蛋白365～769位点间主要有5个氨基酸差异位点(C378G/R、F420L、Q436P/R、E535G／A和C589G/W),但同种间在378、436、535和589位点也有差异;黑线姬鼠N蛋白l ～ 430位点间存在P298L变异;小家鼠N蛋白变异位点较多,主要在M24K／N、A37D、I140M、M173K、D192E、L219V、P229A、D237E、H265Y、V284L、T333S、A389G和V425E变异.分离得到的10株病毒根据不同的来源地可分为两个不同的进化分支.结论 研究表明吉林省宿主动物携带的HV仍以SEOV为主,其遗传进化呈现多样性.
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金华市1997～2004年肾综合征出血热疫情分析
肾综合征出血热(HFRS)是一类主要由鼠类携带病毒传播,并有螨类媒介参与的自然疫源性疾病.我国已知有两型:汉坦病毒(HTNV)为姬鼠型HFRS的病原,其主要宿主为黑线姬鼠.汉城病毒(SEOV)为家鼠型HFRS的病原,其主要宿主为褐家鼠[1].为了解金华市HFRS发病特点,现将1997～2004年HFRS疫情监测结果报告如下.
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汉坦病毒核酸疫苗研究进展
汉坦病毒引起的疾病是一种人兽共患性疾病,它在世界上有着广泛的流行区域.目前发现汉坦病毒有二十余种血清/基因型,引起人类肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome, HFRS)主要是汉滩病毒(Hantaan Virus, HTNV)、汉城病毒(Seoul Virus, SEOV)、普马拉病毒(Puumala Virus, PUUV)和Dobrava病毒(DOBV),疫源地在亚洲与欧洲.而引起人类汉坦病毒肺综合征(hantavirus pulmonary syndrom, HPS)除辛诺柏病毒(Sin Nombre Virus, SN)外,还发现有纽约病毒(New York Virus, NYV),长沼病毒(Bayou Virus), 黑渠港病毒(Black Creek Canal Virus, BCCV)等,主要在美洲流行.近年来随着分子生物学技术的发展及对汉坦病毒基因结构的深入研究,其流行病学和致病机制正逐步被阐明,汉坦病毒疫苗的研制也有了显著发展.其中核酸疫苗是近年来发展起来的一项新生物技术,具有广阔的应用前景,本文主要就这方面进行简要综述.
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深圳市福田区1997-2011年流行性出血热流行病学特征分析
目的 对深圳市福田区流行性出血热(epidemic hemorrhagic fever,EHF)发病数据进行流行病学分析,为制订EHF的预防和控制措施提供科学依据.方法 EHF鼠密度调查采用笼日法,带毒率用ELISA法检测鼠血清EHF特异性抗体.结果 福田区在1997-2011年共发现EHF病例69例,呈低度活跃状态,近5年发病有增多趋势,其中男性61例,占88.41％;女性8例,占11.59％.年龄20～49岁居多,占86.96％.职业分布中前三位是工人、商业服务、家政待业;EHF在区内呈现春夏型:鼠媒监测显示褐家鼠是优势鼠种,平均捕获率9.72％,EHF病毒分型主要为汉坦病毒(hantavirus,HV)Ⅱ型即汉城病毒(seoul virus,SEOV).结论 福田区EHF符合家鼠型传播特点,褐家鼠是区内的主要宿主动物和传染源.加强对EHF疾病监测及健康教育,注重环境和食品卫生、加强鼠密度监测的同时灭鼠防鼠,可有效防止疫情传播.
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巴彦淖尔市肾综合征出血热疫情分析
目的 调查1999年后巴彦淖尔市及周围区城流行性出血热疫情呈逐年上升趋势的原因. 方法 对2005年春末在巴彦淖尔市,D河区有HFRS病人的居民区捕获褐家鼠119只、小家鼠21只、获得鼠血条126份、9份病人血清和2份正常人血清样本.以间接免疫荧光和RT-PCR等流行病学检测技术,综合全市人文地理特征分析.结果 恢复期病人及病人密切接触者的IgG均显示对SEO型L99株抗原的反应滴度高于HTN型76-118株,从褐家鼠筛选出9个阳性标本,对其部分S和部分M核苷酸序列进行系统发生分析,均为SEOⅡ亚型. 结论汉城病毒为巴彦淖尔市流行性出血热暴发的主要病原体.褐家鼠为优势鼠种,有很高的感染率和带病毒率,是主要传染源和储存宿主.
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汉城病毒的TaqMan-BHO探针实时荧光定量检测方法的建立
目的：建立一种汉城病毒实时荧光定量 RT-PCR 快速的检测方法。方法用专业软件设计引物和 TaqMan-BHQ探针，以人工合成 L 基因的片段作为模板，进行实时荧光定量 RT-PCR 研究。结果模板的 Ct 值与模板稀释浓度的对数存在良好的线性关系，标准曲线为Y ＝－3.607X ＋41.84，r2＝0.998，PCR 扩增效率为108.1％，其低检出限为53.2 copies／μL。结论应用 TaqMan-BHQ1探针的实时荧光 RT-PCR 检测汉城病毒核酸，具有耗时短、灵敏度高等特点。
关键词： TaqMan-BHQ探针 实时荧光RT-PCR 汉城病毒 定量检测
