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Wnt-3a信号途径对毛乳头细胞聚集性生长作用的初步研究
目的 探讨Wnt-3a信号途径对体外培养的毛乳头细胞聚集性生长特性的影响.方法 构建重组腺病毒pAdEasy-1/Wnt-3a,并以该重组腺病毒感染体外培养的毛乳头细胞,观察细胞生长特性的改变;应用激光共聚焦技术和Western印迹检测β-连环素及相关蛋白多功能蛋白聚糖的表达情况.结果 Wnt-3a的过表达可以有效诱导毛乳头细胞聚集性生长.激光共聚焦显微镜检查提示,Wnt-3a过表达的毛乳头细胞β-连环素和多功能蛋白聚糖的荧光强度分别由34.16±9.62和18.81±9.59升高至87.35±17.28和92.18±18.39(t值分别为11.98,17.88,P值均＜0.01);Western印迹也提示,Wnt-3a过表达的毛乳头细胞β-连环素和多功能蛋白聚糖的表达强度南15.27±2.17和19.32±2.46升高至60.09±7.24和58.46±2.78(t值分别为10.10,20.63,P值均＜0.01).结论 Wnt-3a是调节毛乳头细胞聚集性生长的重要分子,主要通过以β-连环素为核心蛋白的经典途径发挥调节作用,多功能蛋白聚糖作为Wnt信号途径的重要相关基因,是该调节的重要环节.
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β-catenin、c-myc在大肠癌中的表达及其意义
目的探讨大肠癌中β-catenin蛋白与癌基因蛋白c-myc的相互关系及其意义.方法应用免疫组化EnVision法检测10例正常大肠黏膜、15例大肠腺瘤、43例大肠癌组织中β-catenin、c-myc蛋白的表达情况.结果β-catenin在正常大肠黏膜为胞膜表达,大肠腺瘤和大肠癌组织中β-catenin呈胞质/核异位表达,c-myc为胞核阳性;β-catenin和c-myc在大肠癌中阳性率均显著高于腺瘤(P＜0.05);大肠癌中c-myc的表达与β-catenin正相关.结论β-catenin从胞膜转移到胞质/核可能是大肠癌发生过程中的关键步骤.大肠癌中c-myc的表达依赖于β-catenin的异位表达,β-catenin在大肠癌的发生过程中起重要作用.
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肝癌组织中β-连环素和上皮性钙黏附蛋白的表达及其意义
目的 探讨肝癌组织中β-连环素(β-catenin)和上皮性钙黏附蛋白(E-cad)的表达及其与临床病理特征的关系.方法 用免疫组化技术检测49例原发性肝癌(HCC,A组)、7例肝硬化(B组)和5例正常肝组织(C组)β-连环素和E-cad的表达,并结合HCC的临床病理学特征进行分析.结果 C组无β-连环素和E-cad的异常表达；B组有1例出现异常表达；A组的β-连环素和E-cad异常表达率分别为67.35％(33/49)和59.18％(29/49).中低分化癌组织中β-连环素和E-cad的异常表达分别高于高分化癌( P＜0.01)；HCC组织中β-连环素和E-cad的异常表达呈正相关(P＜0.01).结论 在HCC组织中,β-连环素和E-cad的异常表达促进了肿瘤的浸润和发展；联合检测β-连环素和E-cad的表达在预测HCC转移潜能、评价预后、指导临床处理等方面可能具有重要意义.
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上皮性钙黏附素、β-连环素与HER2/neu蛋白在卵巢上皮性肿瘤表达及意义
[目的]探讨上皮性钙黏附素(E-cadherin)、β-连环素(β-catenin)、HER2/neu蛋白与上皮性卵巢癌临床病理指标的关系及其相关性.[方法]采用免疫组织化学法检测正常卵巢、良性、交界性卵巢上皮性肿瘤、上皮性卵巢癌组织中三者的表达.[结果]E-cadherin在正常卵巢组织表达缺失,在上皮性卵巢癌的表达降低,并随组织学分级的升高、临床分期的增加而减少,在术后残留癌>2cm中的表达降低.β-catenin在上皮性卵巢癌组织中的表达升高明显,在卵巢浆液性腺癌的表达高于卵巢黏液性腺癌与卵巢内膜样癌,并随着组织学分级的升高而增多.HER2/neu蛋白在上皮性卵巢癌中的表达升高,在晚期上皮性卵巢癌、术后残留癌>2cm中亦增加.E-cadherin在上皮性卵巢癌中与β-catenin、HER2/nell蛋白均呈负相关,而β-catenin与HER2/neu蛋白呈正相关.[结论]E-cadherin、β-catenin和HER2/neu蛋白在上皮性卵巢癌的发生、发展中起重要作用.并有相互协同作用.联合检测三者可更好地评价上皮性卵巢癌的预后.
关键词： 卵巢肿瘤 上皮性钙黏附素 β-连环素 HER2/neu蛋白 免疫组织化学 -
E-钙粘素和β-连环素在脑膜瘤中的表达及意义
目的 通过检测人脑膜瘤中E-钙粘素和β-连环素的表达,以进一步了解脑膜瘤的生物学行为.方法 对49例脑膜瘤病理标本采用免疫组化En Vision法.以单克隆抗体直接检测E-钙粘素、β-连环素的表达情况.按染色强度和阳性范围评估免疫组化检测结果,分析粘附分子表达程度与脑膜瘤的WHO分级、瘤周水肿之间的关系.结果 脑膜瘤WHO病理级别为Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级者E-钙粘素表达的阳性率分别为92.69%、33.33%、0(P<0.05),β-连环素表达的阳性率分别为82.93%、33.33%、20.00%(P<0.05).瘤周水肿程度为0级、1级、2级、3级者E-钙粘素表达的阳性率分别为93.75%、85.71%、60.00%、0(P<0.05),β-连环素表达的阳性率分别为87.50%、85.71%、30.00%、0(P<0.01).结论 脑膜瘤中E-钙粘素和β-连环素的表达与其WHO病理分级相关,不典型或恶性脑膜瘤中E-钙粘素和β-连环素呈低表达或缺失;E-钙粘素和β-连环素表达越低,其瘤周水肿越严重.
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上皮间质转化相关标志物在胃癌组织中的表达及其临床意义研究
目的 探讨上皮间质转化相关标志物E-钙黏蛋白(E-cad)、β-连环素(β-cat)、N-钙黏蛋白(N-cad)在胃癌组织中的表达水平及其与患者各项临床和病理特征的关系.方法 应用免疫组化Envision法检测82例胃癌组织中E-cad、β-cat和N-cad的表达情况.结果 胃癌组织中E-cad和β-cat的高表达率为20.7%;异常表达率为79.3%,其中低表达率为34.1%,无表达率为18.3%,异位表达率为9.8%,表达分离率为17.1%;胃癌组织中E-cad和β-cat的异常表达与不同的Borrmann分型、浸润深度、组织学分级和TNM分期的差异均有统计学意义(均P<0.05或0.01),而与患者的年龄、性别、发生部位、肿瘤大小和是否有淋巴结转移、远处转移的差异均无统计学意义(均P>0.05).胃癌组织中N-cad阳性表达率为31.7%,其阳性表达程度与不同Borrmann分型、浸润深度、组织学分级、淋巴结转移和TNM分期的差异均有统计学意义(均尸P<0.05或0.01),而与患者的年龄、性别、发生部位、肿瘤大小和有无远处转移的差异均无统计学意义(均P>0.05).胃癌组织中E-cad和β-cat表达水平与N-cad表达程度的差异均有统计学意义(P<0.05).结论 胃癌组织在演变过程中存在上皮间质转化现象,并参与胃癌侵袭和转移的过程.
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上皮性钙粘附素、β-连环素在上皮性卵巢癌及其转移灶的表达及意义
目的 研究上皮性钙粘附素、β-连环素在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达情况,探讨其表达与上皮性卵巢癌各项临床病理指标、肿瘤转移的关系.方法 采用免疫组织化学法检测正常卵巢,良性、交界性卵巢上皮性肿瘤.上皮性卵巢癌及其转移灶组织中上皮性钙粘附素、β-连环素的表达.结果 上皮性钙粘附素在正常卵巢组织表达缺失,在上皮性卵巢癌的表达明显低于良性、交界性卵巢上皮性肿瘤(P<0.05).上皮性钙粘附素在上皮性卵巢癌的表达随组织学分化的降低而减少(P<0.05),随临床分期的增加而降低(P<0.05),术后残留癌>2cm则上皮性钙粘附素的表达明显降低(P<0.05).β-连环素在上皮性卵巢癌组织中的表达较正常卵巢及良性、交界性卵巢上皮性肿瘤明显升高(均P<0.05),在交界性卵巢上皮性肿瘤中的表达亦高于正常卵巢组织与卵巢良性上皮性肿瘤(均P<0.05);β-连环素在卵巢浆液性囊腺癌的表达明显高于卵巢黏液性囊腺癌及卵巢内膜样癌(均P>0.05),并随组织学分化的降低而升高(P<0.05).上皮性钙粘附素、β-连环素在上皮性卵巢癌转移灶的表达较原发灶明显增强(均P<0.05).结论 上皮性钙粘附素、β-连环素在上皮性卵巢癌的发生、发展中起重要作用,两者可随肿瘤的转移而发生改变,两者联合检测可更好地评价上皮性卵巢癌的预后,为临床治疗方案提供理论依据.
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EBV-LMP2A和β-catenin蛋白在鼻咽癌中的表达关系及意义
目的 探讨EB病毒编码的潜伏膜蛋白2A(latent membrane protein 2A,LMP2A)和β-连环素(β-catenin)在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)中的表达关系及其临床意义.方法 应用免疫组化SP法检测LMP2A和β-catenin蛋白在32例鼻咽黏膜慢性炎、56例NPC和18例NPC淋巴结转移灶中的表达,采用Westem blot法和免疫荧光细胞化学染色法观察LMP2A和β-catenin蛋白在CNE2-LMP2A细胞及其对照组CNE2-Vector和CNE2细胞中的表达.结果 (1)LMP2A在NPC及其淋巴结转移灶中的阳性率分别为89.3％ (50/56)和77.8％(14/18),均明显高于鼻咽黏膜慢性炎(37.5％,12/32)(P均＜0.01);β-catenin在NPC及其淋巴结转移灶中的异常表达率分别为62.5％ (35/56)和83.3％(15/18),均明显高于鼻咽黏膜慢性炎(3.1％,1/32)(P均＜0.01);LMP2A与β-catenin正常表达呈负相关(rs=-0.391,P ＜0.01);LMP2A和β-catenin蛋白在鼻咽癌T分期、N分期和临床分期组间表达率的差异均有统计学意义(P ＜0.05或P＜0.01).(2)CNE2-LMP2A细胞中β-catenin蛋白表达水平明显高于CNE2-Vector和CNE2细胞;CNE2-LMP2A细胞中β-catenin胞质和胞核的表达水平明显高于CNE2-Vector和CNE2(P均＜0.01).结论 LMP2A高表达和β-catenin异常表达与鼻咽癌临床生物学行为进展密切相关,其机制可能与LMP2A上调β-catenin蛋白水平并促进其核转位有关.
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E-cadherin、β-catenin、CD44v6在乳腺癌中的表达
目的探讨乳腺癌中E-cadherin(E-cad)、β-catenin(β-cat)、CD44v6蛋白表达.方法采用免疫组化S-P法测定48例乳腺癌中E-cad、β-cat、CD44v6蛋白的表达.结果E-cad、β-cat蛋白的表达强度,无淋巴结转移组高于有淋巴结转移组(P＜0.05),与肿瘤的大小、病理分级、组织学分类无关;在乳腺癌中随着E-cad强度的增加,β-cat阳性率亦呈上升趋势(P＜0.05).CD44v6蛋白的表达强度,有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组(P＜0.05),与肿瘤的大小、病理分级、组织学分类无关.结论E-cad、β-cat、CD44v6的表达可作为判断乳腺癌是否转移的可靠指标.
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子宫内膜癌中β-连环素表达及与预后的关系
目的探讨β-连环素(β-catenin,β-Cat)在子宫内膜癌中的表达及与预后的关系.方法应用免疫组化S-P法检测20例正常子宫内膜,36例子宫内膜癌标本中β-Cat及靶基因c-myc产物的表达.结果β-Cat、c-myc在子宫内膜癌组中阳性表达率分别为52.8%、47.2%,显著高于正常子宫内膜组(P<0.05);随着组织学分级的增加,β-Cat阳性率显著上升,c-myc表达也平行上升.G1级与G2级间、Ⅰ期与Ⅱ期间差异有显著统计学意义(P<0.05),且两者在子宫内膜癌中表达呈正相关(r=0.499 0,P=0.006);有肌层浸润和淋巴结转移组β-Cat阳性率显著高于无肌层浸润和淋巴结转移组(P<0.01);而c-myc表达与肌层浸润和淋巴结转移无明显相关.结论β-Cat表达与预后呈负相关,是评估预后的有效参数.
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β-连环素与血管内皮生长因子-C在甲状腺乳头状癌中的表达及其相关性
目的：：探讨甲状腺乳头状癌(PTC)组织中β-连环素(β-catenin)与血管内皮生长因子(VEGF)-C的表达相关性及其意义。方法：采用免疫组织化学方法检测70例PTC和40例正常甲状腺组织中β-catenin、VEGF-C的表达。结果：70例PTC组织中β-catenin异位表达率70.00%、VEGF-C阳性率75.71%，而正常甲状腺组织中β-catenin 无异位表达；VEGF-C阳性率为15.00%。 PTC的β-catenin异位表达率和VEGF-C阳性率均显著高于正常甲状腺组织(P<0.01)，并且有淋巴结转移的PTC组织中β-catenin异位表达率和VEGF-C阳性率亦均显著高于无淋巴结转移的PTC组织(P<0.01)。 PTC组织中β-catenin异位表达与VEGF-C表达呈显著正相关关系(P<0.01)。结论：β-catenin和VEGF-C可能在PTC的淋巴管生成过程中起着重要作用。
关键词： 甲状腺肿瘤 β-连环素 血管内皮生长因子-C 淋巴管生成 -
JAB1、β-catenin与大肠癌生物学行为之间的关系
目的：通过检测大肠癌组织及相应癌旁组织中的C-Jun结合蛋白1（c-Jun activation domain binding protein 1，JAB1）和β-连环素（β-catenin）的表达，探讨JAB1和β-catenin在大肠癌组织中的表达与其生物学行为之间的关系。方法（1）应用免疫组化学方法（SP法）检测94例大肠癌及相应癌旁组织中JAB1和β-catenin的表达情况。（2）分析JAB1和β-catenin的表达与大肠癌的发生、发展、分化程度、临床分期及淋巴结转移等之间的关系。结果（1） JAB1在大肠癌组织中的表达率明显高于癌旁组织（χ2＝86．686， P＜0．001），JAB1在低分化型大肠癌中的阳性表达率为94．3％，高于中、高分化型中的79．7％（χ2＝5．634，P＝0．018）；在淋巴结转移阳性的病例中表达率为94．6％，高于淋巴结转移阴性的病例中的73．7％（χ2＝8．344，P＝0．004）；在Dukes 分期C期＋D期中的阳性表达率为93．2％，在A期＋B期中阳性表达率为70．0％，差异具有统计学意义（χ2＝8．124，P＝0．004）；JAB1的表达与患者性别、年龄、肿瘤大小无明显统计学意义（P＞0．05）；（2）在94例大肠癌组织中β-catenin异常表达数为61例（64．9％），癌旁组织异常表达数为26例（27．7％），二者差别有明显统计学意义（χ2＝26．209，P＜0．001），β-catenin在低分化型大肠癌中的异常表达率为91．4％，高于中、高分化型中的72．9％（χ2＝4．686，P＝0．030）；在淋巴结转移阳性的病例中异常表达率为98．2％，高于淋巴结转移阴性的病例的76．3％（ P＝0．001）；在Dukes 分期C期＋D期中的异常表达率为90．9％，在A期＋B期中异常表达率为64．0％，差异具有统计学意义（χ2＝9．454，P＝0．002）。β-catenin的表达与患者性别、年龄、肿瘤大小无明显统计学意义（P＞0．05）。结论（1）JAB1、β-catenin 参与大肠癌的发生及发展；（2） JAB1可能会成为大肠癌新的肿瘤标记物，提高其诊断率。
关键词： C-Jun结合蛋白1 β-连环素 大肠癌 -
表皮生长因子受体及β-连环素在非小细胞肺癌组织中的表达及相关性研究
目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)和β-连环素(β-catenin)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其相关性.方法应用SABC免疫组化技术检测了53例NSCLC中EGFR和β-catenin的表达情况.结果在53例非小细胞肺癌病理组织中,EGFR和β-catenin阳性表达率分别为67.9%(36/53)和54.7%(29/53).在不同临床分期,有无淋巴结转移的NSCLC比较中EGFR表达有显著差异(P<0.05);在不同分化程度、有无淋巴结转移的NSCLC中β-catenin表达有显著差异(P<0.05),EGFR和β-catenin表达呈负相关(γ=-0.8436,P=0.001).结论在NSCLC中,EGFR及β-catenin的表达与淋巴结转移密切相关,两者表达呈负相关,β-catenin低表达提示预后不良.
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β-catenin和Ki-67在人宫颈癌组织中的表达及其意义
目的 探讨β-catenin 和Ki-67在宫颈癌发生、发展、转移中的作用及其相互关系.方法 采用免疫组织化学染色的方法,检测了55例宫颈癌、12例宫颈上皮内瘤变(CIN)、11例正常组织中β-catenin 和Ki-67的表达水平.结果 β-catenin在正常宫颈、CIN、宫颈癌组织中的异常表达率分别为18.3%、50.0%、80.0%(P均＜0.05);β-catenin 异常表达与宫颈癌的病理分级、临床分期、淋巴结转移有关.Ki-67在宫颈癌组织、正常宫颈组织、CIN中的阳性表达率分别为74.5%,0,41.6%(P均＜0.05);Ki-67的阳性表达与宫颈癌的临床分期、淋巴结转移有关.结论 联合检测β-catenin 和Ki-67,有助于判断宫颈癌分期及预后,作为临床治疗的参考指标.
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β-catenin的表达与胃癌临床病理特征的关系
目的 探讨胃癌组织中β-catenin的表达与胃癌临床病理特征的关系.方法 应用EnVision法检测60例早期胃癌、60例进展期胃癌组织中β-catenin表达情况,并比较β-catenin在不同临床病理特征的胃癌组织中的表达差异.结果 早期胃癌组织中β-catenin阳性表达率为63.3%,不同组织学类型(肠型和弥漫型)、不同分化程度(高、中、低)、有无淋巴结转移的早期胃癌,其组织中β-catenin阳性表达率相互比较,均存在显著性差异(P＜0.05),但与浸润深度无显著性相关(P＞0.05).进展期胃癌组织中β-catenin的阳性表达率为55.0%,不同分化程度及有无淋巴结转移的进展期胃癌,其组织中β-catenin的阳性表达率相互比较存在非常显著性差异(P＜0.01),但与组织学类型、腹膜转移及远处转移无显著性相关(P＞0.05).结论 β-catenin表达减低与胃癌的发生、发展有关.
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β-连环素与肿瘤的关系研究
β-连环素初是作为细胞粘附复合体的胞内成分被发现的.近年来有研究发现,它是Wnt信号通路的关键调控分子,具有细胞粘附和信号传导的双重作用.在Wnt信号通路异常激活导致的多种肿瘤中,β-连环素发挥着重要作用,它与肿瘤的发生、转移密切相关.
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E-钙粘附素/β-连环素复合体对孕鼠神经干细胞迁移和归巢的影响
[目的]干细胞的微环境是影响干细跑行为的关键因素之一,微环境中的粘附分子E-钙粘附素是其重要组成部分,在微环境中扮演重要角色,它功能的发挥离不开β-连环素,常作为一种复合体研究他们的功能.本课题采用实时定量PCR技术测量神经干细胞在原代和传代4～6代后E-钙粘附素和β-连环素的表达量是否有所变化,同时在蛋白表达水平借助流式细胞技术测量β-连环素相应的表达变化,进而判断这两种粘附分子在神经干细胞的传代过程中有何影响,为神经干细胞的迁移、植入的研究打下基础.[方法]孕鼠神经干细胞若干,为了说明前后实验细胞均为神经干细胞,本实验在取得细胞之时,立刻取少量神经干细胞行特异性Nestin染色,证明其并未分化.取一部分进行实时定量PCR检测E-钙粘附素和β-连环素的含量,毕竟这是在RNA水平借助实时定量PCR来测量的,为了佐证本结论,在蛋白水平借助流式细胞计数测量β-连环素的含量变化,β-连环素是一种胞浆蛋白,在细胞核内也有少量的表达,且核内核外保持一种动态的平衡,β-连环素处于E-钙粘附素/β-连环素复合体的核心部位,它表达的变化也间接体现了E-钙粘附素/β-连环素复合体的变化.剩余的继续培养,保持传代不分化,传代4～6代,即2周左右,再一次重复前面的操作,统计前后的结果有无差别.[结果]原代及传代培养形成的克隆球进行神经干细胞特异性抗体巢蛋白(Nestin)免疫荧光染色时发绿色荧光,呈阳性反应.应用实时定量PCR技术发现神经干细胞传4～6代后,E-钙粘附素和β-连环素的含量明显增多,且差别具有统计学意义(P＜0.05);相应的流式细胞技术测量β-cat的含量变化,发现β-连环素的含量也明显增多,且差别同样具有统计学意义(P＜0.01).[结论]试验中神经干细胞在传代的过程中,不论是在RNA层面还是在蛋白层面,粘附分子的表达均有提高,作者认为E-钙粘附素/β-连环素复合体的含量变化对神经干细跑传代中保持神经干细胞的稳定性起着一定作用,为进一步研究神经干细胞粘附分子对神经干细胞的迁移、增殖、分化、归巢和成熟的研究以及后续的临床应用提供了实验数据.
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E-钙粘素和β-连环素在妊娠滋养细胞疾病中的表达与意义
目的:探讨E-钙粘素和β-连环素表达与妊娠滋养细胞疾病(GTD)恶性转化的相关性.方法:应用逆转录聚合酶链反应技术检测12例正常早孕绒毛和35例妊娠滋养细胞疾病组织中E-钙粘素mRNA和β-连环素mRNA的表达.结果:E-钙粘素和β-连环素mRNA在正常早孕绒毛与葡萄胎组织的表达差异无显著性(P＞0.05);而在正常早孕绒毛、葡萄胎组织的表达量明显高于侵蚀性葡萄胎、绒癌组织(P＜0.05);在侵蚀性葡萄胎组织的表达高于绒癌组织(P＜0.05).结论:E-钙粘素和β-连环素的表达下调与妊娠滋养细胞疾病的恶性转化有关,对预测妊娠滋养细胞疾病的恶变以及评价预后有一定的参考价值.
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β-连环素与皮肤恶性黑素瘤关系的研究
目的:检测不同生长阶段皮肤恶黑中的β-连环素的表达,以探讨它们之间的关系及其临床病理意义.方法:用免疫组化SP法检测65例皮肤黑素瘤中β-连环素的表达水平.结果:β-连环素在皮肤恶黑的初始阶段、侵袭阶段、侵袭转移阶段、有淋巴结转移阶段、无淋巴结转移阶段阳性表达率分别为93.3%、65.4%、37.5%、35.7%和77.3%.结论:β-连环素阳性表达与皮肤恶黑的侵袭与转移程度呈负相关,与患者的年龄、性别、肿瘤发生的部位无关,β-连环素对判断皮肤恶黑的预后有重要意义.
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E-钙黏素和β-连环素在食管癌组织的表达及与临床病理因素的关系
目的 探讨E-钙黏素和β-连环素表达与食管癌患者的临床病理关系.方法 对58例食管癌患者术后标本和20例正常食管组织应用PV-6000法检测E-钙黏素和β-连环素的表达.结果 E-钙黏素阳性表达率与食管癌患者癌细胞浸润深度、临床分期显著相关(P<0.01),与癌细胞分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05);β-连环素阳性表达率与食管癌患者癌细胞分化程度、临床分期显著相关(P<0.01),与癌细胞浸润深度、淋巴结转移有关(P<0.05).结论 E-钙黏素及β-连环素与食管癌的浸润和转移相关.
