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血清前清蛋白、视黄醇结合蛋白、C反应蛋白和白介素-6在腹腔镜与开腹阑尾切除术患者中的临床意义
目的:分析腹腔镜与开腹手术阑尾切除患者血清前清蛋白(PRE)、视黄醇结合蛋白(RbP)、C反应蛋白(CRP)和白介素6(IL-6)的临床意义.方法:收取我院30例阑尾切除患者作为观察组,将其分为腹腔镜纽和开腹手术组,再将15例健康体检者作为对照组,收取时间为2013年4月到2015年6月期间,检测两组患者血清PRE、RbP、CRP和IL-6指标.结果:手术后开腹手术组PRE、RbP低于对照组以及腹腔镜组,而开腹手术组IL-6、CRP高于腹腔镜组(P＜0.05).结论:根据患者体内血清PRE、RbP、CRP和IL-6等炎性介质水平表明,患者对腹腔镜手术的应激反应较轻,在临床治疗过程中应首先采用腹腔镜手术进行治疗.
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温和灸对自然衰老模型大鼠肝组织Rb、P53、Bcl-2、PKC表达的影响
目的 研究温和灸对自然衰老大鼠肝组织Rb、P53、Bcl-2、PKC蛋白及其mRNA表达的影响.方法 24只SD大鼠随机分为正常组、自然衰老组、艾灸组.正常饲养20个月,待其自然进入衰老期以制备自然衰老大鼠模型,温和灸自然衰老大鼠双侧肾俞穴对其进行干预.应用原位杂交、免疫组化方法检测各组大鼠肝组织Rb、P53、Bcl-2、PKC mRNA及其蛋白表达.结果 与正常组比较,自然衰老组大鼠肝组织Rb、P53 mRNA及蛋白表达均显著增强(P<0.01,P<0.05),Bcl-2、PKC mRNA及蛋白表达均显著降低(P<0.01,P<0.05);与自然衰老组大鼠比较,艾灸组大鼠肝组织Rb、P53 mRNA及蛋白表达均显著降低(P<0.01,P<0.05),Bcl-2、PKC mRNA及蛋白表达均显著增强(P<0.01,P<0.05).结论 温和灸肾俞穴能降低自然衰老大鼠肝组织Rb、P53 mRNA及蛋白表达,增强Bcl-2、PKC mRNA及蛋白表达.
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何首乌饮对衰老大鼠睾丸组织细胞Rb/p53信号转导通路的影响
目的 通过检测Rb、p16、p53、p19、p21在衰老大鼠睾丸组织中的表达,探讨何首乌饮抗大鼠睾丸组织衰老的机制. 方法 选用8周龄SD雄性大鼠84只,随机分为正常组、模型组、何首乌饮高、中、低剂量组、何首乌丸剂组、自然恢复组,每组12只,采用D-半乳糖连续腹腔注射建立亚急性衰老大鼠模型.采用免疫组织化学、Western blotting和RT-PCR法检测磷酸化Rb蛋白(pRb)、p16、p53、p19、p21在大鼠睾丸组织的表达差异.结果 模型组大鼠睾丸组织Rb、p53、p16、p19、p21表达明显增加,pRb表达明显减少(P<0.05);何首乌饮、何首乌丸组能显著提高pRb的表达,降低Rb、p53、p16、p19、p21表达(P<0.05),何首乌饮高剂量组调节作用大于其他各组(P<0.05). 结论何首乌饮通过调节睾丸组织Rb/p53信号转导通路相关基因和蛋白表达起到延缓衰老的作用.
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p53/Rb细胞转导通路相关基因和蛋白在衰老大鼠睾丸组织的表达
目的 通过检测p53、Rb、p16、p19、p21在衰老大鼠睾丸组织的表达,探讨p53/Rb细胞转导通路相关基因和蛋白在睾丸组织衰老中的意义. 方法 选用8周龄雄性SD大鼠30只,体重180～220g,随机分为正常对照组和模型组,每组15只.模型组大鼠采用D-半乳糖连续腹腔注射建立亚急性衰老大鼠模型.采用RT-PCR方法 检测p53、Rb基因在大鼠睾丸组织的表达;Western blotting法检测大鼠睾丸磷酸化Rb、p16、p19、p21蛋白的表达.结果 模型组睾丸组织p53、Rb基因表达明显高于正常对照组(P<0.01);模型组睾丸组织与正常组比较:p16、p19、p21蛋白的表达明显升高,而磷酸Rb蛋白表达显著下降(P<0.01). 结论 Rb/p53细胞转导通路相关基因及蛋白在衰老大鼠睾丸组织发生明显改变,Rb/p53细胞转导通路阻滞可能在睾丸组织的衰老过程中起着一定作用.
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中药何首乌饮抗大鼠卵巢组织衰老的机理
目的 讨何首乌饮抗大鼠卵巢组织衰老的机理.方法 36只SD大鼠随机分为3组:正常组、模型组、预防组.采用D-半乳糖连续腹腔注射法制造雌性大鼠亚急性衰老模型,预防组在造模的同时以中药方剂何首乌饮灌胃.应用逆转录聚合酶连反应(RT-PCR)方法检测各组大鼠卵巢组织p53、p19
、Rb及p16基因的表达,用Western blotting方法检测各组大鼠卵巢组织Rb及p16蛋白的表达情况. 结果何首乌饮明显抑制了衰老大鼠卵巢组织中p53、P19arf、Rb以及p16基因表达的上调趋势(P<0.05),且明显降低了衰老大鼠卵巢组织中Rb及p16蛋白的表达(P<0.05). 结论何首乌饮抑制衰老途径中关键的调节因子p53、P19arf、Rb及p16的表达,从而起到抗大鼠性腺衰老的作用. -
膀胱移行细胞肿瘤组织中p21、Rb及TGF-β1的表达及其意义
膀胱移行细胞肿瘤是泌尿系统常见的肿瘤.本文检测p21、Rb及TGF-β1蛋白在膀胱移行细胞肿瘤组织中的表达,以探讨其在肿瘤发生、发展中的作用及其与肿瘤生物学行为的关系.
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Rb、p16和cyclinD1基因在早期胃癌组织中的表达及临床意义
目的 探讨Rb、p16和cyclinD1基因在胃癌发生中的作用及临床意义.方法 应用免疫组织化学S-P法检测Rb、p16和cyclinD1基因在22例早期胃癌、23例异型增生和15例正常胃黏膜组织中的表达.结果 cyclinD1胃癌早期的过表达率高于正常胃黏膜(P＜0.05);Rb与p16胃癌早期的阳性表达率均低于正常胃黏膜(P＜0.05).结论 Rb、p16和cyclinD1与胃癌的发生、发展相关,他们的变化是胃癌发生中的早期事件,CDK4/cyclinD1/p16/Rb途经在胃癌的早期发生过程中起着非常重要作用.
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雷帕霉素在溃疡性结肠炎患者中应用的临床价值评估
目的:研究雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)通路抑制剂雷帕霉素在溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)中的抗炎及抑制癌变的临床价值评估.方法:我院55例UC患者,35例通过在口服美沙拉嗪的基础上加用雷帕霉素治疗10d后,对照组20例为口服美沙拉嗪的基础上加用安慰剂,观察电子结肠镜下溃疡面在治疗前后愈合比较,并检测治疗前后黏膜核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、环氧化酶2(cyclooxygenase 2,Cox2)表达变化,血清促炎因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factoralpha,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)及抑炎因子IL-10变化,同时检测治疗前后抑癌基因PTEN、PHL PP、Rb的表达变化.结果:实验组有1例患者出现口腔溃疡,2例患者因出现腹痛、排黏液脓血便加重而终止,余32例完成该研究,与对照组治疗比较,其中结肠镜下可见治疗后溃疡面明显减少,局部黏膜愈合较快;黏膜核因子NF-κB(0.116±0.026)、Cox2(0.035±0.12)、促炎因子IL-6(13.25±3.78)表达量明显减低(P＜0.05),抑炎因子IL-10(67.23±5.03)检测量增高(P＜0.01),抑癌基因PTEN(0.212±0.18)、PHLPP(0.312±0.43)、Rb(0.285±0.15)表达水平明显增高(P＜0.01),血清TNF-α(19.24±3.25)无统计学意义.结论:雷帕霉素作为免疫抑制剂联合美沙拉嗪可减轻UC炎症反应;并可通过抑制Akt/mTOR通路预防UC黏膜癌变.
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DNA甲基化对大肠癌相关基因表达的调控意义
目的:探讨大肠癌发生与演进中p16,Rb,cyclin D1甲基化状态与蛋白表达的关系及意义.方法:提取正常黏膜、腺瘤、癌旁组织及癌组织基因组DNA,应用MSP法检测不同病变阶段组织中各基因的甲基化状态,并对其与蛋白表达及临床病理参数的关系进行分析.结果:在大肠癌发生与演进过程中,p16,Rb基因甲基化率呈增高趋势,cyclin D1基因甲基化率呈下降趋势,p16(切缘:r=-0.185,P=0.173;腺瘤:r=-0.381,P=0.013;癌旁:r=-0.419,P=0.001;癌:r=-0.516,P=0.000)、cyclin D1(切缘:r=-0.282,P=0.035;腺瘤:r=-0.329,P=0.033;癌旁:r=-0.298,P=0.026;癌:r=-0.618,P=0.000)基因甲基化程度分别与其蛋白表达呈明显负相关,且在癌组织分化程度(p16:x2=11.232,P=0.002,cyclin D1:x2=9.144,P=0.015)、浸润深度(p16:x2=6.229,P=0.013;cyclin D1:x2=8.023,P=0.006)和淋巴结转移(p16:x2=5.707,P=0.016;cyclinD1:x2=7.794,P=0.005)上有显著性差异.Rb基因的甲基化状态在Rb表达抑制上不起主要作用.结论:大肠癌p16高甲基化和cyclin D1低甲基化可能是p16失活和cyclin D1过表达的主要机制,在大肠癌的发生、发展中发挥重要作用,对于大肠癌的早期诊断、恶性程度及预后判断有重要意义.
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Rb/E2F1调控途径在新疆哈萨克族食管鳞癌发生中的作用
目的:探讨Rb基因与转录因子E2F1在新疆哈萨克族食管鳞癌中的表达及临床意义.方法:应用RT-PCR法对48例新疆哈萨克族食管鳞癌组织及其配对的癌旁正常组织进行Rb和E2F1表达检测,分析Rb/E2F1通路与新疆哈萨克族食管鳞癌发生发展之间的关系.结果:新疆哈萨克族食管鳞癌组织中Rb的阳性表达高于癌旁正常组织(64.6％,43.8％)差异有统计学意义(P＜0.05)；转录因子E2F1的阳性表达率与癌旁正常组织阳性表达率(70.8％,75％)差异无统计学意义(P＞0.05).Rb、E2F1的表达与组织学分级及临床分期无关(P＞0.05).Rb阳性表达强度与E2F1的阳性表达强度之间呈正相关(r=0.867,P＜0.05).结论:Rb的高表达伴随新疆哈萨克族食管鳞癌的发生,E2F1可能作用于食管癌发生的早期阶段,二者在新疆哈萨克族食管鳞癌的发生发展中起拮抗作用.
关键词： 食管鳞癌 Rb E2F1 逆转录聚合酶链式反应 -
RB在细胞周期中的作用及其与大肠癌的关系
视网膜母细胞瘤易感基因RB自发现以来就是细胞周期以及肿瘤研究的重点,而后发现的RB蛋白家族成员(pRB,p107,p103)在细胞周期和肿瘤的发生发展中起着非常重要的作用.pRB在细胞周期中与E2F以及其细胞因子可以相互作用,并调控细胞的生长发育和分化等过程.若pRB与细胞因子的相互作用受到破坏,就可能改变细胞周期进展,甚至导致肿瘤的发生.大肠癌中RB的表达与其他肿瘤相比具有特殊性,此特殊性可能与大肠癌特殊的肿瘤成因或者RB的某些特殊功能有关.
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N端截短的视网膜母细胞瘤基因对人骨肉瘤细胞株SaOS一2生长的影响
目的研究N端截短的视网膜母细胞瘤基因(Rb66)对骨肉瘤细胞Saos-2生长的影响.方法构建携带Rb66cDNA片段的真核细胞表达载体pcDNA3-1-Rb,用脂质体LIPOFECTAMIMETM2000将真核表达载体pcDNA3-1-Rb、空载体对照pcDNA3-1转染至SaOS-2细胞中.RT-PCR及免疫细胞化学检测转染后SaOS-2中Rb66mRNA及蛋白的表达;观察细胞形态的改变;测定细胞倍增时间及生长曲线的改变;流式细胞仪检测对细胞周期的影响.结果成功地将N端截短的Rb66cDNA导入骨肉瘤细胞SaOS-2中,并在mRNA及蛋白水平获得了表达.转染后的SaOS-2细胞胞浆展开,细胞核浆比例变小;Rb66导入后,SaOS-2细胞生长减慢,群体倍增时间延长,细胞周期呈现G1期阻滞.结论Rb66可通过阻止细胞G,→S期进展而抑制骨肉瘤细胞SaOS-2的增殖.
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p53和Rb与甲状腺乳头状癌分化程度关系的研究
目的:通过检测p53和Rb蛋白在不同分化程度甲状腺乳头状癌中的表达,探讨其在不同分化程度甲状腺乳头状癌发生、发展中的意义.方法:采用免疫组化LSAB法,对62例甲状腺乳头状癌术后原发灶标本中p53及Rb蛋白表达情况进行检测,按显微镜下甲状腺乳头状癌细胞的组织学特点,分为Ⅰ型(分化较好型)、Ⅱ型(中间型)、Ⅲ型(分化较差型)三型.结果:1)三型不同分化程度甲状腺乳头状癌中,癌细胞分化程度越好,p53的阳性表达率越低,而Rb的阳性表达率越高,p53阳性表达率差异有统计学意义,P=0.005,Rb阳性表达率差异也有统计学意义,P=0.001.2)在甲状腺乳头状癌中p53和Rb的蛋白表达无相关性,P=1.结论:p53蛋白的高表达与Rb蛋白的低表达在甲状腺乳头状癌向不同分化方向发展方面可能起重要作用,甲状腺乳头状癌细胞分化程度越差,p53的阳性表达率越高,而Rb的阳性表达率越低,但两者并无关联性.
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胶质瘤组织中SV40Tag Rb和IRS-1蛋白的表达及其与胶质瘤发生发展的关系
目的 探讨SV40Tag、Rb和IRS-1在胶质瘤发生发展过程中的关系和作用.方法 构建布有人脑胶质瘤和脑膜瘤临床标本为主体、配有实验性胶质瘤、正常人或鼠脑等相关组织等118个阵列的组织芯片,采用免疫组织化学和免疫荧光共聚焦技术检测SV40Tag、Rb和IRS-1的表达及SV40Tag与Rb、SV40Tag与IRS-1的联合表达.结果 SV40Tag、Rb和IRS-1在胶质瘤和脑膜瘤中均有表达,82例胶质瘤的阳性表达率分别为65.9%、64.6%和48.8%.正常人脑组织仅有Rb和IRS-1表达,而未见SV40Tag表达.SV40Tag和IRS-1的阳性表达率与病理分级呈正相关(P<0.05),Rb蛋白的阳性表达率与病理分级呈负相关(P<0.05).在82例胶质瘤中,SV40Tag与Rb、SV40Tag与IRS-1联合表达阳性率分别为51.2%和40.2%.结论 外源性SV40Tag随SV40病毒侵入机体,与Rb抑癌基因形成复合物使其抑癌功能丧失,同时诱导信号通路中重要成员IRS-1活化,从而促进细胞恶性变化,可能是脑胶质瘤发生发展的重要原因之一.
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Rb、p53基因与PCNA在膀胱癌中异常表达的意义
目的 检测膀胱癌中Rb、p53基因及核细胞增生抗原(PCNA)的表达,探讨其与膀胱癌病理分级、临床分期及预后的关系.方法 采用免疫组织化学方法检测60例老年人膀胱癌组织中Rb基因、突变型p53基因及PCNA的表达.结果 60患者中,p53、PCNA阳性表达者均为24例(40%),Rb异常表达者27例(45.0%);30例(50.0%)膀胱癌患者同时有多个基因的表达异常.多种基因的异常表达与膀胱癌的病理分级、临床分期及复发有密切关系.结论 肿瘤的多基因分析比单基因分析更有价值.Rb基因、p53基因及PCNA异常表达及协同作用可能在膀胱癌的发生、发展中起重要作用.
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Rb对HepG2肝癌细胞系增殖的影响
目的 研究Rb基因及其产物对HepG2肝癌细胞系增殖的影响.方法 转染pRb质粒进入HepG2肝癌细胞系,用MTT法检测转染前后细胞增殖的变化,并将转染pRb质粒的HepG2肝癌细胞接种在裸鼠皮下建立肝癌裸鼠种植瘤模型,观察转染pRb质粒前后裸鼠体内种植瘤生长的变化.结果 转染pRb质粒的HepG2肝癌细胞与未转染pRb质粒者相比细胞增殖受到抑制.成功建立HepG2肝癌细胞裸鼠体内种植瘤模型,转染pRb质粒的HepG2肝癌细胞的裸鼠体内种植瘤生长受抑制.转染组种植瘤体积第4周(429.7±114.987)mm3,第5周(657.90±187.27)mm3,第6周(892.56±258.73)mm3.结论 Rb在体内和体外均能抑制肝癌细胞的增殖.
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p27、cyclin E、Rb蛋白在胃癌中的表达及临床意义
目的:探讨p27、cyclin E和Rb蛋白在胃癌中的表达及其与胃癌病理参数之间的关系.方法:用免疫组化技术(SP法)对10例非瘤病变患者的正常胃黏膜和40例胃癌和癌旁黏膜标本进行染色,分析p27、cyclin E和Rb蛋白表达及其与预后的关系.结果:p27、cyclin E和Rb蛋白在正常胃黏膜与瘤旁黏膜表达差异无统计学意义;p27在胃癌中表达降低,cyclin E蛋白在胃癌中表达增高,呈过度表达,Rb组间差异无统计学意义.p27、cyclin E和Rb蛋白表达与组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移、预后等胃癌病理参数之间具有相关性.结论:p27、cyclin E和Rb蛋白异常表达与胃癌的发生、发展有关,并可能作为胃癌预后的指标.
关键词： p27 Rb 细胞周期蛋白类/代谢 胃肿瘤 预后 -
肺癌mdig基因对组蛋白H3及H4部分位点赖氨酸残基甲基化状态的作用
目的 研究肺癌mdig基因对组蛋白H3及H4部分位点赖氨酸残基甲基化状态的作用,为肺癌的诊断和治疗建立基础.方法 随机选择2010年12月～2015年12月我院收治的肺癌患者200例(病例阶段为T1～T4期)作为本次研究的对象,对患者癌组织和癌旁组织中UTX与Rb的mRNA和蛋白质含量进行检测,同时检测肺癌及癌旁组织中H3K27me3和Rb蛋白含量以及UTX去甲基化酶活性,以确定UTX表达及功能异常在肺癌发生、发展和预后中的作用.结果 肺癌患者不同病理期的癌组织和癌旁组织中UTX与Rb的mRNA和蛋白质含量不同,肺癌患者肺癌组织及癌旁组织中H3K27me3和Rb蛋白含量以及UTX去甲基化酶活性差异有统计学意义(P＜0.05),对肺癌mdig基因肺癌细胞中的H3K27me3含量进行检验,沉默mdig肺癌细胞、过表达mdig肺癌细胞中H3K27me3含量无明显变化(P＞0.05).结论 组蛋白去甲基化酶、UTX、Rb,在肺癌组织的发生和发展中发挥着重要的作用,其可以抑制肿瘤细胞的发展,控制癌细胞的扩散,加强对组蛋白H3及H4部分位点赖氨酸残基甲基化状态的检测和研究,对肺癌的治疗和诊断有重要的意义.
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骨肉瘤中抑癌基因PTEN、Rb、p53蛋白的表达及相关性研究
目的检测抑癌基因PTEN、Rb、p53蛋白在骨肉瘤中的表达并探讨其相关性.方法采用免疫组化SP法检测人骨肉瘤组织中PTEN、Rb、p53蛋白的表达情况.结果 60例骨肉瘤组织中,PTEN的失表达率为21.7%(13/60),在血管扩张型及复发型骨肉瘤中,PTEN失表达有增高趋势.Rb的失表达率为60%(36/60).p53阳性率为23.3%(14/60).PTEN与Rb、p53之间比较,P>0.05,缺乏相关性.结论 PTEN的失表达可能为骨肉瘤细胞生长活跃和复发的机制之一.PTEN与Rb、p53之间可能通过不同的途径参与骨肉瘤细胞生长的调控.
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蕏苓多糖抗小鼠HepA机制研究
目的研究蕏苓多糖抗小鼠HepA瘤细胞的可能机制.方法采用免疫组化方法研究蕏苓多糖对小鼠HepA瘤细胞P16、Rb基因及TNF-α表达影响.结果蕏苓多糖作用后,小鼠HepA瘤细胞P16基因表达蛋白(P16蛋白)表达显著增强(P＜0.01);小鼠HepA瘤细胞Rb基因表达蛋白(P105-Rb蛋白)表达增强(P＜0.05),小鼠HepA瘤细胞TNF-α表达显著增强(P＜0.01).结论蕏苓多糖对小鼠HepA瘤细胞P16、Rb基因及TNF-α表达有激活作用.对抑癌基因P16、Rb基因及TNF-α表达的激活可能是蕏苓多糖抗肿瘤的普遍机制之一.
