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地西他滨单药或联合以阿糖胞苷为基础的低剂量化疗方案治疗老年急性髓系白血病的临床分析
目的:观察地西他滨(DAC)单药或联合以阿糖胞苷为基础的低剂量化疗方案治疗老年急性髓系白血病(AML)患者的疗效和不良反应.方法:回顾性分析2009年9月至2012年3月我科收治的8例初治老年(年龄＞70岁)AML患者的临床特征,包括年龄、性别、外周血及骨髓特点等.应用低剂量DAC±以阿糖胞苷为基础的低剂量化疗方案化疗(DAC20mg/m2 ·d1-5±以阿糖胞苷20 mg/d d3-9为基础的化疗方案),观察治疗效果及不良反应.结果:8例患者,男3例,女5例,年龄71-84岁,初治时白细胞中位数31.2(1.38-179)×109/L,骨髓原始细胞百分比中位数42.7(23-94)％.接受了DAC±以阿糖胞苷为基础的低剂量化疗方案化疗的中位疗程数为2.5(1-20)个.完全缓解2例,部分缓解2例,总缓解率为50％ (4/8),中位OS为9.5(2-36)个月,3例患者的总生存时间达到或超过了1年,8周内死亡1例.主要的严重不良反应是骨髓抑制(Ⅲ-Ⅳ度87.5％)和肺部感染(50％).结论:低剂量DAC±以阿糖胞苷为基础的低剂量化疗方案治疗老年(年龄＞70岁)AML,明显提高了有效率,延长了患者生存期,患者耐受性良好,疗效满意.
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全反式维甲酸联合地西他滨对U937细胞系和初发老年AML患者的作用及机制研究
目的:分析全反式维甲酸(ATRA)联合地西他滨(DAC)对p16INK4a(p16)和维甲酸受体β(RARβ)的DNA甲基化以及基因表达的影响,探讨2药联合对U937细胞和老年初发急性骨髓系白血病(AML)患者的抗肿瘤作用及其机制.方法:采用实时荧光定量PCR和Western blot方法检测p16和RARβ的表达,通过甲基化特异性PCR分析p16和RARβ启动子的甲基化水平,应用WST-1法和流式细胞术分别检测ATRA联合DAC对U937细胞的增殖作用及其对分化、凋亡和细胞周期的影响.结果:ATRA联合DAC可以诱导DNA去甲基化,增强p16和RARβ的基因表达;2药联合导致U937细胞的生长抑制和分化、凋亡和周期阻滞;此外,对于不能耐受标准化疗的老年AML患者,ATRA联合DAC联合方案在发挥抗肿瘤活性的同时,伴随着p16和RARβ表达水平的上调,以及骨髓原始细胞的减少,且患者显示良好的耐受性.结论:ATRA联合DAC方案,作为诱导分化和去甲基化的联合治疗策略,具有抗AML作用潜能,有助于优化老年AML治疗策略和改善临床预后.
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地西他滨联合IAG方案治疗老年MDS转化为急性髓系白血病患者的疗效观察
目的:观察地西他滨联合IAG方案治疗老年骨髓增生异常综合征(MDS)转化为急性髓系白血病患者的疗效和安全性.方法:2例老年MDS转化为急性髓系白血病患者应用地西他滨+IAG方案(地西他滨25 mg/d,1/d,静脉滴注,d1-5;去甲氧柔红霉素10 mg/d,1/d,静脉滴注,d6;阿糖胞苷10 mg/m2,1/12 h,皮下注射,d6-19;G-CSF 300 μg,1/d,皮下注射,d6-19).观察患者的疗效和不良反应.结果:1例使用2个疗程,另1例使用1个疗程,2例获完全缓解;化疗的不良反应主要表现为骨髓抑制和粒细胞缺乏所致的感染,未见肝肾毒性反应及其他严重的胃肠等非造血系统不良反应.结论:地西他滨联合IAG方案治疗老年骨髓增生异常综合征转化为急性髓系白血病的患者,其效果良好.
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地西他滨联合自体CIK细胞治疗2例高龄急性髓系白血病的疗效观察
本研究旨在观察低甲基化药物地西他滨联合自体细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)治疗老年急性髓系白血病(AML)的安全性及有效性.本科于2006-2012年收治2例80岁以上老年AML患者(M4型和M6型),均继发于骨髓增生异常综合征.对这2例患者先后采取单用自体CIK细胞输注、地西他滨或(和)自体CIK细胞方案治疗,系统观察了2例CIK治疗前后淋巴细胞亚群、临床相关指标(血液学反应、输血频率、白血病相关基因表达、缓解情况、生活质量)及生存期的变化.结果表明,与单用自体CIK细胞输注和单用地西他滨治疗相比,地西他滨联合自体CIK细胞治疗方案可减轻骨髓抑制程度,降低输血频率及输血量,延长部分缓解持续时间,同时表达的白血病相关基因减少,生存期显著延长,患者生活质量得到明显改善.结论:地西他滨联合自体CIK细胞治疗老年AML患者安全有效.
关键词： 急性髓系白血病 地西他滨 细胞因子诱导的杀伤细胞 老年人 -
地西他滨联合CAG方案治疗AML1-ETO+AML的临床效果
目的:观察AML1-ETO+复发/难治急性髓系白血病患者经地西他滨联合CAG方案治疗的临床治疗效果.方法:收集2015年6月至2016年1月我院收治的8例AML1-ETO+复发/难治急性髓系白血病患者临床资料,分析患者入院一般资料及初诊伴随症状、骨髓特点等,同时分析患者经地西他滨联合CAG方案治疗的临床观察指标及不良反应.结果:8例患者中复发1例,难治合并复发7例,初治时白细胞23.57(7.5-65.29)×109/L、血小板40(19-69)×109/L,血红蛋白107(79-131) g/L、乳酸脱氢酶313.5(124.1-865.9) U/L.8例患者经地西他滨联合CAG方案1个疗程治疗后7例症状完全缓解,1例症状未缓解,总缓解率为87.5％;本方案的不良反应为骨髓抑制,1例症状未缓解患者经FLAG方案治疗后突发心衰死亡.结论:AML1-ETO+复发/难治急性髓系白血病患者经地西他滨联合CAG方案治疗后,各临床观察指标较理想,缓解率较高,并发症较少.
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地西他滨增强allo-NK细胞杀伤白血病干细胞敏感性研究
目的:探讨地西他滨增强allo-NK细胞杀伤白血病干细胞(LSC)的作用及其机制.方法:应用免疫磁珠法从KG1a细胞中分选LSC.从健康供者的外周血分离纯化同种异体反应性自然杀伤(allo-reactive natural killer,allo-NK)细胞;LDH法检测allo-NK细胞对LSC的杀伤作用,流式细胞术检测allo-NK细胞诱导LSC凋亡及LSC表面NKG2D配体MICA/B和ULBP1-3的表达.结果:地西他滨10 μmol/L处理LSC 24 h后,allo-NK细胞对LSC的杀伤率明显增高,在效靶比为5∶1、10∶1、20∶1时分别为(60.52％ ±3.52％ vs 22.08％ ±2.07％、73.93％±2.33％ vs 28.99％ ±3.13％、83.08％±1.32％ vs 36.44％±2.40％),差异有统计学意义(P＜0.05);地西他滨10μmol/L处理LSC 24 h后,在效靶比为10∶1时,allo-NK细胞诱导LSC的凋亡率为7.84％±0.34％,明显高于LSC未处理组(3.33％±0.64％),差异有统计学意义(P＜0.05);地西他滨10 μmol/L处理LSC 24 h后,LSC表面NKG2D配体(MICA/B、ULBP1、ULBP2、ULBP3)的表达上调,高于未处理组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:地西他滨可能通过上调NKG2D配体增强allo-NK细胞对LSC的杀伤作用.
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地西他滨对白血病细胞DKK1基因去甲基化的实验研究
目的:探讨地西他滨对急性髓系白血病细胞株HL-60中DKK1的表达及其下游Wnt信号通路的影响.方法:采用流式细胞术(FCM)和DNA Ladder分析检测不同浓度地西他滨对HL-60细胞凋亡的影响,甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)检测DKK1基因甲基化状态,qRT-PCR方法检测mRNA表达水平,Western-blot方法检测蛋白的表达变化.结果:FCM检测结果表明,不同浓度地西他滨作用于HL-60细胞48 h后,地西他滨组的早期凋亡细胞数明显增多(P ＜0.05);DNA梯度检测结果发现,地西他滨组出现明显的细胞凋亡特异性梯度条带;MS-PCR检测发现,DKK1基因发生去甲基化,RT-PCR和Wertern blot检测显示mRNA表达水平增高,DKK1蛋白表达增加,β-catenin及C-MYC蛋白表达降低.结论:地西他滨可以通过DKK1基因去甲基化及抑制Wnt通路的作用,促进HL-60细胞凋亡.
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DNMT3b基因在骨髓瘤RPMI8226细胞株中的表达及其生物学意义
目的:研究多发性骨髓瘤细胞株RPMI 8226中DNMT3b基因的表达情况并分析其生物学意义.方法:ELISA方法检测RPMI 8226中DNA甲基转移酶的活性;半定量RT-PCR及实时荧光定量PCR方法检测RPMI 8226细胞中DNMT3b基因mRNA的表达;不同浓度地西他滨干预RPMI8226细胞24h后观察细胞增殖及DNMT3b基因mRNA表达水平的变化.结果:RPMI8226细胞中DNMT活性升高,DNMT3b基因mRNA表达水平升高.不同浓度地西他滨干预24 h后RPMI8226细胞增殖抑制,发生凋亡,DNMT3b基因mRNA表达水平降低.结论:骨髓瘤RP-MI8226细胞中DNMT3b基因表达水平升高,地西他滨可能通过抑制DNMT3b表达从而抑制RPMI8226细胞增殖并诱导其凋亡.因此,DNMT3b有望作为骨髓瘤治疗的新靶点.
关键词： 多发性骨髓瘤 RPMI8226细胞株 DNMT3b基因 地西他滨 -
两种化疗方案治疗高龄MDS患者继发AML的临床对比研究
目的:探讨“3+7”与地西他滨+HAG预激方案治疗高龄骨髓异常增生综合征继发AML患者的临床疗效及安全性差异.方法:选取我院2012年3月-2014年5月收治高龄骨髓异常增生综合征继发AML患者50例,随机分为A组(25例)和B组(25例),分别采用“3+7”与地西他滨+HAG预激方案治疗,比较两组患者临床疗效、骨髓抑制时间、毒副作用发生率、生活质量及生存情况.结果:B组患者临床总缓解率显著高于A组患者(P＜0.05);B组患者化疗过程中外周血白细胞减少和粒细胞缺乏的天数及化疗后二者恢复的天数明显缩短(P＜0.05);B组肺感染发生率明显低于A组(P＜0.05),两组患者中其他药物毒副作用发生率比较差异无统计学意义(P＞0.05);B组患者治疗后生活质量明显优于A组患者-(P＜ 0.05);B组患者平均生存时间和中位生存时间显著长于A组患者(P＜0.05).结论:地西他滨+ HAG预激方案较传统“3+7”方案治疗高龄骨髓异常增生综合征继发AML可有效延缓患者病情进展,缩短骨髓抑制时间,降低肺感染发生率,同时延长生存时间.
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地西他滨联合CAG方案与单纯CAG方案治疗中、高危骨髓增生异常综合征的疗效比较
本研究比较小剂量地西他滨联合CAG方案(阿克拉霉素、阿糖胞苷、粒细胞集落刺激因子)与单用CAG方案治疗中高危骨髓增生异常综合征的临床疗效及不良反应,探讨前方案作为中高危骨髓增生异常综合征新的治疗方法的可行性及有效性.2011年起小剂量地西他滨联合CAG治疗中高危骨髓增生异常综合征(MDS-RAEB)12例及2005年起既往单纯CAG方案治疗中高危MDS患者10例(治疗1个疗程后评估,至少使用2个疗程)疗效评估.分析接受两种方案的患者1个疗程的完全缓解率、总有效率、无病生存时间及总的生存时间.结果表明:小剂量地西他滨联合CAG方案治疗中高危MDS的12例患者一疗程后有完全缓解9例,2例部分缓解,1例完全无效,缓解率75.0％,总有效率91.7％,中位无病生存时间9(0-27)个月,中位总生存时间16(3-28)个月.治疗后肺部感染发生4例,予以抗感染治疗后均好转.既往2005年起10例中高危MDS患者予以单纯CAG方案治疗,完全缓解5例,部分缓解伴临床症状改善3例,2例无效,骨髓及血液学均无好转.缓解率50％,总有效率80％,中位无病生存时间6(0-18)个月,中位总生存时间13(3-31)个月.治疗后肺部感染3例,肠道感染1例,大肠杆菌败血症1例,予以积极抗感染治疗后均好转.两组患者治疗过程中未发生严重并发症,患者均能耐受,无治疗相关死亡.经统计分析,小剂量地西他滨联合CAG较单用CAG治疗中高危MDS有较长的无病生存时间(P值为0.013),总体生存时间有延长趋势,但无统计学意义(P值0.087).结论:小剂量地西他滨联合CAG治疗中高危MDS有较高的治疗效果,不增加治疗风险,可在临床推广.
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地西他滨治疗骨髓增生异常综合征和急性髓系白血病的临床观察
本研究目的是观察地西他滨治疗骨髓增生异常综合征(MDS)和急性髓系白血病(AML)的临床疗效及不良反应.对2009年11月至2011年12月我科收治的应用地西他滨治疗的12例MDS及AML患者进行了回顾性分析.12例中1例MDS-RA,2例MDS-RAEB-Ⅰ,3例MDS-RAEB-Ⅱ,2例AML-M4,2例AML-M5,1例AML-M6,l例AML-M0.8例应用地西他滨化疗5d方案:地西他滨20 mg/(m2.d)×5 d,4周为1个周期；3例用3d方案:地西他滨15 mg/m2,1次/8 h×3d,6周为1个周期；另2例用地西他滨20 mg/m2,隔日1次×5次.应用甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)检测1例应用地西他滨治疗后达到完全缓解(CR)患者治疗前后ID4基因甲基化表达水平,进一步验证地西他滨的去甲基化作用.结果显示,12例患者中CR 2例、部分缓解1例、病情稳定5例、病情进展l例、死亡3例.疾病控制率66.67％ (8/12),有效率25％(3/12).患者的平均生存期为(11.5±2.1)个月、1年总体生存(OS)率为40％、2年OS率为16.7％.MS-PCR检测显示,地西他滨使ID4基因甲基化水平明显降低.结论:地西他滨能够使MDS患者病情稳定,减轻输血依赖,提高生活质量,甚至能够使部分MDS向白血病转化的患者达到完全缓解.地西他滨能够使ID4基因甲基化水平明显降低.其不良反应主要为骨髓抑制和感染,需输血抗感染等支持治疗,部分患者经积极对症支持治疗可以耐受.本研究中的疗效及生存期与国内研究相类似.
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地西他滨联合小剂量IA方案治疗骨髓增生异常综合征伴原始细胞增多的临床观察
目的:观察地西他滨联合小剂量去甲氧柔红霉素、阿糖胞苷(DAC+ IA)方案治疗骨髓增生异常综合征伴原始细胞增多的临床疗效.方法:回顾性分析2015年6月-2017年1月在西安交通大学第一附属医院血液科治疗的37例骨髓增生异常综合征伴原始细胞增多患者,分别采用DAC+ IA方案(19例)和单用DAC(18例)方案治疗,观察其临床疗效和不良反应.结果:1-2疗程后,DAC+ IA组CR+ CRi率为57.9％,总反应率100％,骨髓病理组织幼稚细胞明显减少,外周血中性粒细胞、血红蛋白、血小板水平显著提高,完全缓解中位持续时间7.3月,无进展生存时间为10月,3例患者缓解后停止治疗,3.5月复发.DAC组CR+ CRi率为16.7％,总反应率38.9％,中位无进展生存时间为6月.3例患者达到完全缓解,中位时间4个月均进展为AML.两组患者常见的不良反应为骨髓抑制和感染,其差异无统计学意义.结论:DAC联合小剂量IA方案治疗骨髓增生异常综合征伴原始细胞增多,可延长患者生存期,改善生存质量,近期疗效显著,但远期疗效仍有待于异基因造血干细胞移植进行巩固.
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地西他滨联合预激化疗对中老年MDS转化急性髓系白血病的近远期疗效及预后因素分析
目的:探讨国产地西他滨联合预激化疗[粒细胞集落刺激因子(G-CSF)+吡柔比星(THP)+阿糖胞苷(Ara-C)](CTG方案)治疗中老年骨髓增生异常综合征(MDS)转化的急性髓系白血病(AML)的近远期疗效及预后因素.方法:选取2013年6月至2015年6月在东莞市人民医院收治的初诊中老年MDS转化AML患者共76例,依据治疗方法分为CTG治疗和地西他滨联合CTG治疗(联合治疗组)2组,CTG治疗组36例,联合治疗组40例,2组患者均接受4个疗程治疗,随后进行来那度胺维持治疗.比较2组的近远期疗效及不良反应发生率,同时探讨影响联合治疗的不良预后因素.结果:2组患者的年龄、性别、初始血细胞计数、骨髓原始细胞比例、疾病诊断分型、染色体核型及FLT3-ITD基因突变等基础临床特征均无显著性差异,联合治疗组的近期疗效优于CTG治疗组(ORR:72.5％vs50％)(P＜0.05),而骨髓抑制程度、严重感染发生率、胃肠道反应及肝损害方面,2组均无明显差异(P＞0.05).随访2年时间,联合治疗组的中位生存时间优于CTG治疗组(19.9vs11.0个月)(P＜0.05).多因素分析显示:近期疗效不佳(RR=3.926,P=0.015)、FLT3-ITD基因突变(RR=4.347,P=0.004)是影响联合治疗的独立危险因素.结论:国产地西他滨联合预激化疗治疗中老年MDS转化急性髓系白血病的近远期疗效均优于单纯预激化疗,而不良反应并未显著增加,其中近期疗效及FLT3-ITD基因突变是影响患者预后的独立危险因素.
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低剂量地西他滨序贯CAG方案治疗MDS-难治性贫血伴有原始细胞过多的临床疗效
目的:通过回顾性分析探讨低剂量地西他滨序贯CAG方案治疗骨髓增生异常综合征-难治性贫血伴有原始细胞过多(MDS-RAEB)的临床疗效.方法:将我院收治的接受低剂量地西他滨序贯CAG方案治疗的36例MDS-RAEB患者,纳入地西他滨序贯CAG组;同期将单用地西他滨治疗的MDS-RAEB 40例患者作为对照,比较2组患者临床特征、疗效及不良反应等.结果:序贯CAG组总有效率(ORR)[完全缓解(CR)+部分缓解(PR)+血液学改善(HI)]为83.3％ (30/36),明显高于单用地西他滨ORR 62.5％ (25/40)(P=0.043),2组不良反应比较无显著差别.地西他滨序贯CAG组常见的不良反应为3度以上的血细胞减少和感染,在治疗早期(第1-2疗程)比较常见,治疗有效后上述不良反应逐渐减少,其他非血液学不良反应少见.结论:地西他滨序贯CAG方案治疗MDS-RAEB比单用地西他滨疗效更确切,此方案对不适合行造血干细胞移植的患者可能有重要的临床价值.
关键词： 地西他滨 CAG方案 骨髓增生异常综合征 难治性贫血伴有原始细胞过多 -
地西他滨治疗骨髓增生异常综合征的临床观察及预后因素分析
目的:探索地西他滨治疗骨髓增生异常综合征(MDS)的临床疗效及预后预测因素.方法:回顾性分析87例接受地西他滨治疗的MDS患者的临床资料.分别采用Q-PCR及测序检测MDS患者hENT1的mRNA表达及TP53基因的突变情况,分析患者临床特征及分子学指标与地西他滨临床反应的关系.结果:地西他滨中位治疗4(2-17)个疗程,51例(58.6％)治疗有效,其中CR 17例(19.5％),PR 12例;mCR 9例,HI 13例,36例(41.4％)无反应.单因素分析显示,复杂核型、单体核型、7号染色体异常以及1个疗程后Plt数倍增的患者可获得更高的CR率;IPSS相对高危组(中危2+高危)、复杂核型及1个疗程后Plt倍增的患者总体有效率更高.治疗有反应组MDS患者的hENT1 mRNA表达水平明显高于无反应组[1.78±1.45(2-△△Ct)vs 0.96±0.97(2-△△Ct)](P=0.002).在51例有反应组中,CR组的hENT1 mRNA表达水平高于未获得CR者[2.58±1.44(2-△△Ct) vs 1.39±1.3(2-△△Ct)](P=0.005).在52例相对高危组(中危2+高危)中高hENT1 mRNA表达的患者中位OS时间显著长于低hENT1表达的患者(31 vs 12个月)(P ＜0.001).在87例接受地西他滨治疗的患者中,TP53突变者11人(12.6％).TP53突变患者总体反应率高(P=0.04),且更容易获得CR(P ＜0.001).多因素Logistic回归模型显示,复杂核型、1个疗程后Plt数倍增、TP53突变及hENT1 mRNA高表达是预测地西他滨治疗获得CR的独立预后因素.结论:IPSS分期、复杂核型、1个疗程后Plt数倍增及hENT1表达、TP53基因突变可预测地西他滨治疗的疗效.
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地西他滨治疗后28d的淋巴细胞预测骨髓增生异常综合征患者的治疗反应
目的:探索能够早期预测地西他滨(DAC)在骨髓增生异常综合征(MDS)中治疗反应的临床指标.方法:对55例MDS患者DAC治疗效果进行回顾性分析,根据患者DAC首次治疗后28天的淋巴细胞水平将患者分为高淋巴细胞组(H-Lym≥1.2×109/L)和低淋巴细胞组(L-Lym＜ 1.2×109/L),比较两组的总反应率(ORR)、无进展生存期(PFS)之间的差异.结果:55例患者中,H-Lym组ORR为76.0％,L-Lym组ORR为50.0％,二者之间统计学差异显著(P＜0.05);H-Lym组中血小板≥100×109/L比例非常显著高于L-Lym组(72.0％ vs 20.0％)(P＜0.01).H-Lym组患者的中位PFS时间15.7个月,L-Lym组的中位PFS 8.5个月,二者之间统计学差异显著(P＜0.05),L-Lym组患者疾病进展的风险非常显著高于H-Lym组,为H-Lym组的4.45 (95％ CI:1.58-12.59)(P＜0.01).结论:DAC首次治疗后28 d淋巴细胞≥1.2×109/L的患者具有较高的总反应率和较长的无进展生存期,可作为预测地西他滨治疗反应的早期临床指标.
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地西他滨与传统化疗治疗中、高危骨髓增生异常综合征的临床比较
目的:比较国产地西他滨与传统化疗治疗中、高危骨髓增生异常综合征的临床疗效及相关的不良反应.方法:回顾性分析本院2011年12月到2016年12月的48例初发中、高危MDS患者,其中29例患者应用传统化疗方案,19例患者采用单纯地西他滨[15 mg/(m2·d),ivgtt,d1-5]方案,比较2组治疗方案的临床疗效及相关不良反应.结果:地西他滨方案组2个疗程后总有效率(ORR)为78.9％(15/19例),其中完全缓解(CR)5例,部分缓解(PR)5例,血液学改善(HI)5例;传统化疗组2疗程ORR为65.5％(19/20例),其中CR 6例,PR 5例,HI 8例;2组2个疗程后ORR、缓解率(PR+ CR)差异无统计学意义(x2=0.458,P＞0.05;x2=0.499,P＞0.05);地西他滨方案组4个疗程后ORR 84.2％(16/19例),其中CR 5例,PR 9例,HI 2例,传统化疗组ORR为68.9％ (20/29例),其中CR 6例,PR 5例,HI 9例;2组ORR差异无统计学意义(x2=0.726,P＞0.05),但缓解率差异具有统计学意义(x2 =4.534,P＜0.05).与传统化疗组对比,地西他滨方案组总体生存(OS)及无进展生存(PFS)明显增高,并均具有统计学意义(P =0.034,P=0.003).对于不良反应,地西他滨方案组与传统化疗组之间Ⅲ-Ⅳ级血红蛋白减少发生率为52.6％ vs79.3％(P＞0.05),Ⅲ-Ⅳ级血小板减少发生率为52.6％ vs 86.2％ (P ＞0.05),Ⅲ-Ⅳ级中性粒细胞绝对值减少发生率为84.2％ vs96.6％(P＞0.05),感染发生率为26.3％ vs79.3％(P＜0.05).结论:国产地西他滨治疗中、高危MDS疗效肯定,不良反应小,值得临床推广.
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地西他滨对MDS-L细胞增殖的抑制作用及其相关作用机制研究
目的:探讨去甲基化药物地西他滨(Decitabine,DAC)的不同剂量对MDS-RAEB(骨髓增生异常综合征-原始细胞增多型)细胞株MDS-L细胞增殖的抑制作用及其相关作用机制.方法:采用LC-MS/MS生物分析法检测应用DAC 20和15 mg/m2×5d的两组MDS患者血药浓度水平;模拟患者的血药浓度,设计不同剂量的DAC(0.5、0.3、0.2、0.1、0.05、0.025和0.01 μg/ml)作用于MDS-L细胞24、48、72和96 h,用CCK-8法检测细胞的增殖抑制效应;光学显微镜下观察细胞形态学变化;流式细胞术检测细胞周期变化及凋亡情况;PCR检测DAC作用后MDS-L细胞P15的甲基化水平的变化.结果:注射结束即刻,DAC 20 mg/m2 ×5 d组患者血药浓度为174.08±80.15(84.7-311) ng/ml,明显高于15 mg/m2×5d组的89.87±32.94(43.2-165)ng/ml(P =0.014).DAC对MDS-L细胞有明显增殖抑制作用,且呈时间浓度依赖关系(r=0.786),但DAC≥0.1 μg/ml浓度时,各浓度对细胞的抑制作用无明显差异.DAC处理后G1期细胞明显增多,而S期细胞明显减少.与对照组相比,MDS-L细胞经DAC 0.01、0.025、0.05、0.1、0.2 μg/ml作用96 h后,P15INK4B表达均下降,但各浓度之间无显著差异(P＞0.05).结论:低浓度DAC对MDS-L细胞有明显增殖抑制作用,在0.1和0.2μg/ml浓度时,对MDS-L细胞的抑制作用达理想范围.DAC可以将MDS-L细胞阻滞在G1期,阻止G1期细胞向S期细胞转化.
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地西他滨对全反式维甲酸耐药细胞株NB4-R2的增殖抑制及诱导凋亡作用研究
本研究探讨地西他滨(DAC)对全反式维甲酸耐药细胞株NB4 -R2的增殖抑制及诱导凋亡作用.应用细胞增殖及毒性检测法(新型四唑单钠盐法)观察0.01 - 0.5 μmol/L DAC作用于NB4-R2细胞24、48及72 h后的细胞增殖活力变化；PI单染及AnnexinV -FITC/PI双染流式细胞术观察不同浓度DAC(0.05 -5 μmol/L)对NB4-R2处理48 h后的细胞凋亡率；RT-PCR法检测编码P糖蛋白(P-gp)的多药耐药基因1(MDR1)转录水平的变化.结果表明,0.01 -0.5 μmol/L DAC可抑制NB4-R2细胞增殖,并呈现明显的量-效与时-效关系；作用48及72 h后的IC50分别为0.089和0.064 μmol/L;0.05 -5 μmol/L DAC以浓度依赖的方式诱导NB4-R2细胞凋亡,下调MDR1基因表达.结论:低浓度DAC( ＜0.5 μmol/L)对NB4-R2细胞有增殖抑制作用,较高浓度DAC(1、5μmol/L)可以诱导NB4 -R2细胞凋亡,同时使MDR1表达下调.
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地西他滨对多发性骨髓瘤U266细胞株生物学行为的影响
本研究以多发性骨髓瘤U266细胞株为实验对象,探讨地西他滨对其生物学功能的影响,为MM的临床治疗提供新思路及实验依据,也为MM的发病机制提供进一步的佐证.应用MTT实验、平板克隆形成试验、FCM分析细胞周期、transwell迁移及matrigel侵袭试验分别检测地西他滨对U266细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响.结果表明,地西他滨随着浓度增加对U266细胞增殖抑制作用增强,呈剂量和时间依赖性;FCM检测结果表明地西他滨处理后,G0-G1期U266细胞明显增加,S期和G2-M期细胞降低(p<0.05),表明地西他滨可抑制U266细胞DNA合成,将细胞周期阻滞在G0-G1期;低浓度(0.8 mmol/L)地西他滨处理后U266细胞迁移能力及侵袭力明显降低(p<0.05).结论:地西他滨对U266细胞的增殖、迁移、侵袭能力均有抑制作用,本研究为地西他滨应用于MM临床治疗提供了一定的实验依据.
