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As2O3联合衣霉素体外干预对人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响及作用机制

李丹丹;秦奕男;陈华妹;朱筑霞

摘要: 目的 观察三氧化二砷(As2O3)联合衣霉素(TM)体外干预对三阴性人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响,探讨其作用机制.方法 常规培养MDA-MB-231细胞并随机分为五组.空白对照组不作处理,对照组采用DMEM培养基培养,As2O3组、TM组分别用不同浓度(0.1、0.5、1、10、20、40、60、80 μmol/L)As2O3、(0.1、0.5、1、10、20、40、60、80 μmol/L)TM单独作用24 h,根据MTT法检测细胞增殖抑制率,选择0.5 μmol/L的TM为固定浓度,并联合不同浓度As2O3作用细胞24 h(联合组).用Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率,流式细胞术检测细胞线粒体膜电位,用内质网应激抑制剂4-PBA预处理细胞后用Western blotting技术检测GRP78、Caspase4蛋白表达.结果 As2O3组、TM组、联合组细胞增殖抑制率随As2O3浓度增加而升高;联合组细胞增殖抑制率与其他两组同浓度比较,P均<0.05.联合组细胞凋亡率与As2O3组比较,P<0.05.联合组线粒体膜电位与对照组比较,P<0.05.0.5 μmol/L TM在 4-PBA预处理后GRP78、Caspase4蛋白表达与预处理前比较,P<0.05.1 μmol/L As2O3+0.5 μmol/L TM在4-PBA预处理后GRP78、Caspase4蛋白表达与预处理前比较,P>0.05.结论 As2O3联合TM可协同诱导三阴性人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡,其机制可能为TM将低浓度As2O3的促细胞增殖效应逆转为抑细胞增殖效应.

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