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百日咳鲍特菌BP283基因的实时荧光定量PCR检测方法的建立

罗炜;王慧;刘利东;任筱兰;赖克方

摘要: 目的 探讨检测百日咳鲍特菌BP283基因片段的有效方法.方法 以百日咳鲍特菌BP283序列为目的基因,设计探针和引物,构建质粒标准品;建立FQ-PCR体系,优化反应条件,并进行方法学评价.结果 成功构建了重组质粒pCR2.1-BP283;建立了检测BP283基因片段的FQ-PCR方法:标准曲线相关系数为0.998,低检测浓度为102 copies/μL,对临床其他常见呼吸道病原体不出现特异性扩增曲线,批内及批间变异系数均<4%.结论 FQ-PCR方法可成功检测百日咳鲍特菌BP283基因,该方法具有敏感性好、特异性高及重复性好等优点.

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