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人脐带间充质干细胞向胰岛样分泌细胞的诱导分化及胰岛样分泌细胞治疗效果评价

朱旅云;赵芳;郝永蕾;李晓玲;孙蕾蕾

摘要: 目的:对人脐带间充质干细胞( mesenchymal stem cells, MSCs)在体外诱导分化为胰岛样分泌细胞进行观察,并对获得的胰岛样分泌细胞治疗效果进行评价。方法选择雄性SD大鼠32只,随机分为正常对照组(8只)、糖尿病对照组(12只)和糖尿病实验组(12只)。糖尿病对照组和糖尿病实验组给予链脲佐菌素腹腔注射进行糖尿病大鼠造模,正常对照组予0.9%氯化钠注射液腹腔注射。分离、培养脐带Wharton's Jelly(WJ)中的MSCs,将培养至第3代MSCs与雄性SD大鼠胰岛细胞共同培养14 d,培养出的干细胞移植至糖尿病实验组肾包膜下,观察56 d结束实验。通过HE染色和免疫组织化学染色观察实验结束后3组肾脏形态和细胞变化,并比较基线时与实验结束后3组血糖和体重变化。结果实验结束后正常对照组和糖尿病对照组肾脏HE染色示肾被膜边缘完整,形态清楚;免疫组织化学染色示肾被膜下无胰岛素及外源性抗原溴脱氧尿嘧啶核苷( Brdu)染色阳性的细胞。实验结束后糖尿病实验组肾脏HE染色示移植细胞部位肾被膜和肾皮质之间有大量的细胞,部分肾被膜出现断裂现象;免疫组织化学染色示肾被膜和肾皮质之间有胰岛素和Brdu阳性的细胞。基线时糖尿病实验组和糖尿病对照组血糖明显高于正常对照组,体重低于正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。实验结束后糖尿病实验组血糖较基线时下降,体重较基线时有所增加,差异有统计学意义(P<0.05);3组血糖、体重比较差异均有统计学意义(P<0.05);糖尿病实验组血糖明显低于糖尿病对照组,差异有统计学意义(P<0.05);糖尿病实验组、糖尿病对照组体重均低于正常对照组,糖尿病实验组体重高于糖尿病对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论脐带MSCs在胰岛细胞微环境下可诱导分化为胰岛样分泌细胞,对糖尿病鼠具有降糖和恢复体重的作用。

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