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止消通脉宁干预转化生长因子-β1诱导人肾小管上皮细胞表型转化的研究

杨丽霞;李晓东;程涛;刘铜华;吴丽丽;Margetts Peter Joseph

摘要: 目的 观察止消通脉宁药物血清对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)表型转化的影响,并探讨其机制.方法 将HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基培养并分为空白对照组、TGF-β1诱导组(TGF-β1 10 ng/mL)、空白血清对照组(TGF-β1 10 ng/mL+ 10%空白血清)、干预1组(TGF-β1 10 ng/mL+ 10%低剂量止消通脉宁药物血清)、干预2组(TGF-β1 10 ng/mL+ 10%中剂量止消通脉宁药物血清)、干预3组(TGF-β1 10 ng/mL+ 10%高剂量止消通脉宁药物血清).药物干预24 h后,免疫组化检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达.在24、48、72 h应用酶联免疫吸附法检测细胞培养上清中Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)和纤连蛋白(FN)的含量.结果 正常HK-2细胞表达E-cadherin,不表达α-SMA,经TGF-β1刺激后细胞表型发生转变,E-cadherin的表达明显减弱,α-SMA表达明显增强,且Col Ⅰ、ColⅢ和FN的分泌明显增加,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).止消通脉宁药物血清干预后α-SMA表达明显减弱,E-cadherin表达明显增强;同时抑制了Col Ⅰ、ColⅢ和FN的分泌,与TGF-β1诱导组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 止消通脉宁在一定程度上能够抑制人肾小管上皮细胞表型转化,减少细胞外基质成分的分泌,具有防治肾间质纤维化的作用.

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