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自发性糖尿病小鼠肾小球细胞Nampt和骨形态发生蛋白7的表达及烟酰胺单核苷酸在高糖条件下对大鼠肾小球系膜HBZY-1细胞纤维化的影响
目的 探讨糖尿病肾小球细胞烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)与骨形态发生蛋白7(BMP7)表达的关系及烟酰胺单核苷酸(NMN)缓解糖尿病肾小球细胞炎症纤维化的作用机制.方法 ①动物实验:C57/BL6自发性糖尿病小鼠和C57/BL6野生型小鼠,均采取普通饲料喂养,当自发性糖尿病小鼠血糖＞(34.2±1.9)mmol·L-1并出现明显肾组织损伤时,取肾组织进行病理切片,免疫共聚焦法检测肾小球细胞Nampt、核转录因子κB p65(NF-κB p65)、沉默调节蛋白1(SlRT1)和BMP7的表达.②细胞实验:葡萄糖200 mmol·L-1培养大鼠肾小球系膜HBZY-1细胞,在不同时间(24,48和72 h)以及不同浓度NMN(50,100和200μmol·L-1)处理24 h时后,免疫印迹法检测Nampt和BMP7的表达;葡萄糖200 mmol·L-1处理HBZY-1细胞96 h,免疫荧光法检测NF-κB p65和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;应用NMN 100 μmol·L-1和Nampt特异抑制剂FK866 10μmol·L-1作用HBZY-1细胞24 h后,免疫印迹法检测HBZY-1细胞Nampt,BMP7和NF-κB p65表达.结果 ①动物实验:自发性糖尿病小鼠肾小球明显萎缩,肾小球细胞Nampt和NF-κB p65的荧光强度比野生型小鼠明显升高(P＜0.05),而BMP7和SIRT1的荧光强度显著降低(P＜0.01).②细胞实验:Western蛋白印迹检测显示,葡萄糖200 mmol·L-1培养48和72 h,HBZY-1细胞Nampt表达增加(P＜0.01),BMP7表达下降(P＜0.01,P＜0.05).葡萄糖200 mmol·L-1条件下加NMN 50,100和200 μmol·L-1作用24 h,各组BMP7表达均增加(P＜0.01);免疫荧光结果显示,与细胞对照组比较,葡萄糖200 mmol·L-1处理HBZY-1细胞,NF-κB p65和α-SMA的荧光强度升高(P＜0.01);NMN干预后,与葡萄糖200 mmol·L-1处理组比,Nampt和NF-κB p65表达降低(P＜0.01),BMP7表达增加(P＜0.01);加FK866后,Nampt表达降低(P＜0.01),NF-κB p65表达下降,BMP7表达虽然有上升趋势,但其表达增高没有NMN组明显.结论 严重糖尿病状态下,通过抑制内源性Nampt过表达能够上调BMP7,从而缓解肾小球细胞炎症纤维化作用,NMN可能通过干预Nampt影响细胞BMP7表达.
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脑卒中治疗靶点和药物研究
脑卒中作为我国人口第一大致死原因，已成为严重影响国计民生的公共卫生问题，但仅3%~5%患者可接受唯一获准的缺血性脑卒中药物组织型纤溶酶原激活剂治疗，出血性脑卒中更是无药可用。因此，脑卒中药物治疗迫切需要解决。尽管目前已认识到神经保护剂可作为缺血性脑卒中和出血性脑卒中治疗的共性策略，但大量神经保护剂在临床试验中的转化失败，使得脑卒中药物研究成为世界性难题。本文将结合当前脑卒中治疗策略和药物研发现状，阐述靶向兴奋毒性、氧化和硝化应激、炎症反应的脑卒中损伤机制及相应药物的临床试验进展，并从新的视角提出增强机体内在防御机制作为脑卒中治疗的新策略，重点阐述本课题组研究的烟酰胺磷酸核糖转移酶（Nampt）-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸防御系统及其抗脑卒中新靶点Nampt，以及在研新药烟酰胺单核苷酸。希望通过不懈努力，能够破解脑卒中治疗的瓶颈问题，减轻社会和家庭的经济负担和精神压力，造福于人类。
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FK866对脓毒症小鼠肝损伤的保护作用
目的 探讨烟酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)抑制剂FK866对脓毒症小鼠肝损伤的治疗效果及作用机制.方法 按随机数字表法将84只健康雄性C57BL/6J小鼠分为假手术组(Sham组)、盲肠结扎穿孔术致脓毒症肝损伤模型组(CLP组)、溶剂对照组(Vehicle+CLP组)和 FK866干预组(FK866+CLP组),每组21只.FK866+CLP组和Vehicle + CLP组分别于制模前24、12和0.5 h腹腔注射FK866 (10 mg/kg)或等体积二甲基亚砜.每组15只小鼠用于观察术后48 h存活情况;剩余6只小鼠于术后20 h处死取下腔静脉血和肝组织标本用于指标检测.采用比色法测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清NAMPT、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)含量,用实时定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝组织TNF-α、IL-6的 mRNA表达,用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测肝组织NAMPT、胞质核转录因子-κB(NF-κB)抑制因子α(IκBα)和胞核NF-κB的蛋白表达.结果 与Sham组比较,CLP组小鼠48 h存活率显著下降,血清和肝脏NAMPT蛋白水平显著升高,血清ALT、AST、TNF-α、IL-6水平和肝组织TNF-α、IL-6的mRNA表达明显升高,胞质IκBα蛋白表达明显下降,胞核NF-κB蛋白表达明显升高,说明CLP可以诱导NF-κB活化和炎症反应及导致肝损伤.Vehicle+CLP组与CLP组各指标比较差异均无统计学意义.与Vehicle+CLP组比较,FK866+CLP组小鼠48 h存活率显著提高(53.33%比26.67%),血清ALT、AST、TNF-α、IL-6水平和肝组织TNF-α、IL-6 mRNA表达显著降低〔血 ALT(U/L):128.94±32.48 比 237.24±58.61,血 AST(U/L):289.89±68.74 比 468.00±82.17,血 TNF-α (pg/L): 65.17±18.74比127.64±48.18,血IL-6(ng/L):31.78±5.23比60.87±13.12,肝TNF-α mRNA(2-ΔΔCt):8.37±4.17比18.24±6.12,肝IL-6 mRNA(2-ΔΔCt):18.58±7.12比34.24±6.71〕,胞质IκBα蛋白表达明显升高(IκBα/GAPDH :0.23±0.03比0.12±0.04),胞核NF-κB蛋白表达显著下降(NF-κB/Lamin B1 :0.25±0.04比0.42±0.05),差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 NAMPT 抑制剂 FK866可能通过抑制NF-κB活化,减轻炎症反应,进而对脓毒症肝损伤小鼠肝组织起到保护作用.
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Visfatin研究进展
Visfatin是新发现的一种脂肪细胞因子,主要来源于内脏脂肪组织.Visfatin可促进脂肪蓄积,有类胰岛素样作用,并在促进炎性反应因子表达及诱导血管生成方面发挥一定作用.多项研究表明,visfatin在肥胖、糖尿病、代谢综合征等代谢性疾病患者及冠心病等心血管疾病患者体内表达水平均有不同程度增加,同时visfatin与多囊卵巢综合征、非酒精性脂肪肝等疾病密切相关.目前研究显示visfatin是细胞内烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)的细胞外形式,其复杂作用机制或许能完全用Nampt的作用来解释,这为肥胖、糖尿病、心血管疾病等提供了新的治疗方向.
关键词： Visfatin 前B细胞克隆增强因子 烟酰胺磷酸核糖转移酶 肥胖 糖尿病 -
烟酰胺磷酸核糖转移酶与妇产科疾病
烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)是一种结构高度保守的细胞因子,在初克隆后近十年中Nampt并未引起关注.自2005年后,越来越多的研究发现,Nampt具有很多功能,其不仅是一种能模拟胰岛素作用的肽类激素,还是一种具有多种生物效应的脂肪因子.Nampt还具有酶的活性,参与细胞多种功能的调控,并与人类多种疾病和病理状态的发生有密切的关系,因而引起高度关注.就Nampt的特点及其与妇产科疾病的关系综述.
关键词： 烟酰胺磷酸核糖转移酶 肽类激素 脂肪因子 酶 -
苯肾上腺素对131碘致大鼠腮腺早期放射内损伤的作用及NAMPT表达的影响
目的 研究苯肾上腺素(phenylephrine,PE)对131碘(131I)致大鼠腮腺早期放射内损伤的作用及烟酰胺磷酸核糖转移酶(nicotinamide phosphoribosyltransferase,NAMPT)表达的影响.方法 Wistar大鼠随机分四组:空白对照组、单纯苯肾上腺素组(腹腔注射苯肾上腺素5 mg/kg)、单纯131I组(腹腔注射131I 0.5mCi/100g)和苯肾上腺素预处理组(给予131I前半小时腹腔注射苯肾上腺素),分别于给予131I后1、7和14天取腮腺,显微镜下观察各组腮腺组织的形态学变化;免疫组织化学法检测NAMPT在腮腺的分布及表达.结果 131I导致腮腺腺泡发生空泡样变性、萎缩及核固缩,而苯肾上腺素预处理组上述细胞变性现象明显减轻.空白对照组NAMPT主要表达于浆液性腺泡细胞及导管细胞的胞浆和细胞核,单纯131I组NAMPT的表达较空白对照组显著减少,而PE顸处理组NAMPT的表达较单纯131I组明显增加;单纯PE组NAMPT的表达较空白对照组无明显差异.结论 苯肾上腺素可以减轻131I所致的腮腺早期放射内损伤,其机制可能与苯肾上腺素诱导NAMPT表达上调有关.本研究将为探讨涎腺放射内损伤的分子新机制及防治放射性涎腺损伤提供新思路.
关键词： 131碘 腮腺 苯肾上腺素 烟酰胺磷酸核糖转移酶 -
PKCε-Nampt通路调控线粒体自噬防治脑缺血损伤的研究进展
分析近5年来的蛋白激酶Cε(PKCε)-烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)通路调控线粒体自噬防治脑缺血损伤的理论和实验研究,总结PKC￡-Nampt通路调控线粒体自噬防治脑缺血损伤的作用机制,根据目前分子生物学的发展和新技术的应用,提出PKCε-Nampt通路调控线粒体自噬防治脑缺血损伤的研究重点和方法,为脑缺血的线粒体靶向治疗提供新思路.
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烟酰胺磷酸核糖转移酶在大鼠涎腺的表达及定位
[目的]研究烟酰胺磷酸核糖转移酶(nicotinamide phosphoribosyl transferase,Nampt)在大鼠涎腺的表达和分布.[方法]应用半定量逆转录聚合酶链法(RT-PCR)和免疫印迹法检测大鼠正常腮腺、颌下腺和大舌下腺组织Nampt mRNA及蛋白质的表达.采用免疫组织化学法检测大鼠腮腺、颌下腺和大舌下腺组织Nampt的分布.[结果]大鼠腮腺、颌下腺和大舌下腺组织均有Nampt的mRNA及蛋白质表达,RT-PCR结果显示其表达相对光密度值分别为:腮腺82.04%,颌下腺50.89%,大舌下腺30.53%(与aetin比较,P<0.05);Western Blot结果显示其表达相对光密度值分别为:腮腺77.34%,颌下腺47.61%,大舌下腺31.78%(与actin比较,P<0.05).Nampt均主要分布于浆液性腺泡细胞的胞浆和胞核,以及闰管和纹状管的胞核中.[结论]大鼠腮腺、颌下腺和大舌下腺均存在Nampt的mRNA和蛋白质表达,为深入研究Nampt在涎腺生理及病理状态下的功能意义提供初步实验依据.
关键词： 烟酰胺磷酸核糖转移酶 腮腺 颌下腺 大舌下腺 -
Visfatin与甲状腺功能紊乱研究进展
Visfatin(内脂素)是2005年日本学者Fukuhara等[1]从人和大鼠脂肪组织中分离出的一种高表达mRNA,具有模拟胰岛素功能,并与代谢综合征的发生发展密切相关[2].Visfatin与前B细胞克隆增强因子(pre-B cell colony-enhancing factor,PBEF)5'端基因结构一致.PBEF是早期阶段B淋巴细胞的生长因子,主要在骨髓、肝脏、肌肉中表达.Fukuhara等将这种在内脏脂肪组织中高表达的PBEF命名为visfatin.Visfatin广泛存在于从细菌到人类的生物体中,在骨髓基质细胞、活化淋巴细胞、巨噬细胞、脂肪组织、肌肉组织、脑、胸腺、胰腺、肝脏、脾脏、肾脏、子宫、胎膜中均有表达,其合成受到糖皮质激素、TNF、IL-6和生长激素等因素的调节.Visfatin不仅参与糖代谢、脂代谢、炎症反应,还通过自分泌、旁分泌及内分泌途径参与能量调节、免疫调节及内分泌调节.Visfatin/PBEF作为脂肪因子的发现,有利于其代谢与免疫调节作用的深入研究.甲状腺功能紊乱时,常常伴有糖耐量异常、脂代谢紊乱及自身免疫炎症反应状态,而visfatin与甲状腺激素水平正相关.因而,visfatin在甲状腺功能紊乱疾病中所起的作用值得深入研究,而这一方向在国内尚无报道.
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苯丙酸诺龙对胰岛NIT-1细胞Nampt表达和胰岛素分泌的影响
目的：观察雄性激素苯丙酸诺龙（BPN ）干预下胰岛 NIT-1细胞中烟酰胺磷酸核糖转移酶（Nampt）、胰岛素受体底物-2（IRS-2）和胰岛十二指肠同源盒-1（PDX-1）蛋白表达、细胞周期和胰岛素分泌的变化，探讨高浓度葡萄糖氧化应激状态下BPN对NIT-1细胞Nampt表达和胰岛素信号分子的影响。方法：应用4种不同浓度（5.6、11.1、16.7和27.6 mmol·L-1）葡萄糖培养 NIT-1细胞，以10 mg·L-1 BPN干预 NIT-1细胞48 h，以未加 BPN 处理的相应浓度葡萄糖为对照组。应用 Western blotting 法检测各组细胞中 Nampt、IRS-2和 PDX-1蛋白表达水平；流式细胞术检测细胞周期；放射免疫法测定细胞胰岛素分泌水平。结果：与相应浓度葡萄糖对照组比较，各BPN处理组 NIT-1细胞中 Nampt、ISR-2和 PDX-1蛋白表达水平增加（P＜0.05或P＜0.01）；与相应对照组比较，在低糖（5.6 mmol· L-1）时，BPN 能够明显解除细胞 G0/G1期阻滞（P＜0.01），在高糖（27.6 mmol · L-1）时，能够解除细胞的 G2/M 阻滞（P＜0.01）；除正常葡萄糖浓度11.1 mmol· L-1组之外，各处理组细胞的胰岛素分泌水平均明显增加（P＜0.01）。结论：BPN能够增加胰岛NIT-1细胞中 Nampt、ISR-2和 PDX-1蛋白表达水平， NIT-1细胞中 Nampt表达与胰岛素信号传导途径的相关分子间可能存在密切关联，雄性激素在一定条件下能够改善胰岛细胞的胰岛素抵抗状态。
关键词： 苯丙酸诺龙 烟酰胺磷酸核糖转移酶 胰岛十二指肠同源盒-1 细胞周期 胰岛素 -
高浓度葡萄糖条件下肾小球系膜细胞内源性烟酰胺磷酸核糖转移酶对波形蛋白表达的调控作用
目的:探讨高浓度葡萄糖条件下肾小球系膜细胞过度表达的内源性烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)对波形蛋白(Vimentin)表达的调控作用,阐明糖尿病并发肾脏炎症纤维化的形成机制.方法:取患严重自发性糖尿病的C57/BL6小鼠肾脏,以野生型C57/L86小鼠作为对照组,行病理切片和组织荧光染色,应用免疫共聚焦方法检测肾小球系膜细胞中内源性Nampt和Vimentin表达及定位;肾小球膜HBZY-1细胞随机分为4组,即0.56mmol·L-1低浓度葡萄糖(LG)对照组、200 mmol·L-1高浓度葡萄糖(HG)处理组、HG+ FK866组和HG+NMN组;高浓度葡萄糖干预5d后,分别施加FK866(10 μmol·L-1)和NMN(1 mmol·L-1)作用24 h后,通过免疫荧光和免疫印迹法检测细胞内源性Nampt、Vimentin、核因子κB p65 (NF-κBp65)和依赖于烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)的组蛋白去乙酰化酶1 (Sirtl)表达水平;应用RT-PCR和免疫印迹等方法检测细胞Nampt和Vimentin表达水平.结果:与野生型C57/BL6小鼠组比较,严重糖尿病组小鼠肾小球明显萎缩,肾小球细胞内Vimentin表达水平随内源性Nampt表达水平升高而增加(P＜0.01);与0.56 mmol·L-1低浓度葡萄糖对照组比较,高浓度葡萄糖冲击细胞Nampt、NF-κBp65和Vimentin表达水平明显升高(P＜0.01),Sirt1表达水平明显降低(P＜0.01).HG+FK866和HG+NMN组肾小球系膜细胞中Nampt、Vimentin和NF-κBp65表达水平均较对照组明显降低(P＜0.01).结论:高浓度葡萄糖冲击条件下肾小球系膜细胞过度表达的内源性Nampt能够通过NF-κBp65和Sirt1信号通路促进Vimentin表达.
关键词： 高浓度葡萄糖 烟酰胺磷酸核糖转移酶 核因子κBp65 去乙酰化酶1 波形蛋白 -
2型糖尿病患者血清Nampt与胰岛素抵抗及不同尿白蛋白排泄率的相关性研究
探讨2型糖尿病患者血清烟酰胺磷酸核糖转移酶( Nampt)、白细胞介素-1β( IL-1β)与胰岛素抵抗及不同尿白蛋白排泄率的相关性。选择321例2型糖尿病患者作为实验组进行研究,根据尿白蛋白/肌酐比率( UACR)分为3组：正常白蛋白尿组( UACR<30 mg/g,110例)、微量白蛋白尿组( UACR 30~300 mg/g,106例)、大量白蛋白尿组( UACR>300 mg/g,105例)；采用酶联免疫吸附法检测血清Nampt、IL-1β水平,另设105名为对照组。在上述实验组中筛选出未经胰岛素治疗的糖尿病患者98例,与上述对照组比较,根据空腹血糖及胰岛素水平得出稳态模型评估的胰岛素抵抗指数( HOMA-IR)、定量胰岛素敏感性检测指数( QUICKI)、稳态模型评估的胰岛β细胞功能指数( HOMA-β),比较2组间Nampt、IL-1β、HOMA-IR、QUICKI、HOMA-β等的差异。结果显示大量白蛋白尿组血清Nampt、IL-1β水平明显高于其他3组(均P<0.05)；微量白蛋白尿组血清Nampt明显高于正常白蛋白尿组(P<0.05)；Nampt与HbA1C、空腹血糖、空腹胰岛素、三酰甘油、尿酸、IL-1β呈正相关(均P<0.01),与高密度脂蛋白胆固醇呈负相关(P<0.01)；糖尿病组血清Nampt、IL-1β明显高于对照组(均P<0.05)；Nampt与HOMA-IR呈正相关(P<0.05),与HOMA-β、QUICKI呈负相关(P<0.05)。 Nampt、IL-1β水平与糖尿病肾脏疾病(DKD)的病理进展过程可能存在一定相关性,有可能作为DKD肾损伤的检测指标,两者之间可能存在相互作用,并同时参与DKD的发生、发展。Nampt水平可在一定程度上反映2型糖尿病患者胰岛β细胞功能状态及胰岛素抵抗水平。
关键词： 糖尿病肾脏疾病 胰岛素抵抗 烟酰胺磷酸核糖转移酶 -
烟酰胺磷酸核糖转移酶与炎症、肿瘤的关系
烟酰胺磷酸核糖转移酶（nicotinamide phosphoribosyl transferase，NAMPT）是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide，NAD+）补救合成途径的限速酶，具有类炎症细胞因子作用，在多种炎症刺激时可抑制中性粒细胞凋亡，还参与多种疾病的调控，与肿瘤的发生发展、分期分级及预后密切相关。但NAMPT的类炎症细胞因子作用是否与其调控的NAD+生物合成酶活性有关仍有待研究。本文旨在通过回顾NAMPT的功能、其与炎症、肿瘤的关系的研究进展以及NAMPT的抑制剂APO866/FK866在肿瘤中的应用，为临床防治上述疾病提供新的思路和方法。[临床儿科杂志,2013,31(10)：985-989]
关键词： 前B细胞克隆增强因子 烟酰胺磷酸核糖转移酶 内脏脂肪素 炎症 肿瘤 -
NAMPT及其抑制剂在肿瘤细胞代谢中作用的研究进展
与正常细胞不同,肿瘤细胞主要依赖糖酵解途径快速获得三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)为自身快速增殖和生存提供能量.因此,肿瘤细胞对于糖酵解途径的重要辅酶烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD)需求量较正常细胞明显提高.研究显示,肿瘤细胞通过主要补救合成途径获得NAD,而烟酰胺磷酸核糖转移酶(nicotinamide phosphoribosyltransferase,NAMPT)是该途径的限速酶.NAMPT可通过控制NAD的合成直接调节的细胞代谢;也可通过影响NAD依赖酶类的活性、上调还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)的水平而间接调控细胞代谢,以提高细胞的生存能力.目前,NAMPT被认为是肿瘤治疗的重要靶点,多项研究证实NAMPT抑制剂有明显的抗肿瘤作用.本文将就肿瘤细胞在代谢方面的改变,NAMPT在肿瘤细胞代谢中起到的重要作用,利用NAMPT抑制剂进行抗肿瘤治疗的可行性及新进展作一综述.
关键词： 肿瘤 烟酰胺磷酸核糖转移酶 抗代谢药 抗肿瘤 -
烟酰胺磷酸核糖转移酶抑制剂在肿瘤治疗方面的研究进展
烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)是生命体内200多种氧化还原反应的辅酶,在很多细胞生理过程中发挥着重要作用.烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)是哺乳动物NAD合成途径的限速酶,调节着细胞内的NAD水平,是生物体内进行各种生命活动和能量代谢的重要蛋白,具有多种生物学活性.在癌症中,肿瘤细胞为了快速增殖,对细胞内NAD水平的依赖比正常细胞更强.研究表明Nampt有促血管生成活性,支持着一些肿瘤细胞的生长,抑制Nampt酶活性可起到很好的抗肿瘤作用.这使得Nampt成为近年来药物研究中一个非常有吸引力的靶标,Nampt抑制剂被用于肿瘤化疗干预研究.目前有研究报道的Nampt抑制剂共4个:FK866、CHS828、CB30865、IS001.本文就近年来Nampt抑制剂在肿瘤治疗方面的研究进展进行综述,以期为Nampt调控剂的开发和应用提供参考.
关键词： 烟酰胺磷酸核糖转移酶 抑制剂 肿瘤 -
visfatin与肥胖及2型糖尿病相关性研究进展
近年来的研究表明,脂肪组织是重要的内分泌器官,能够分泌多种因子如脂联素(adiponectin)、瘦素(leptin)、抵抗素(resistin)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-8(IL-8)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1).这些因子在调节机体糖代谢、脂代谢中发挥重要作用,与肥胖、胰岛素抵抗、2型糖尿病、心血管疾病等密切相关.内脏脂肪组织在诱导糖尿病、肥胖症相关心血管疾病和其他各种代谢症发生发展过程中发挥重要作用[1].
关键词： 烟酰胺磷酸核糖转移酶 肥胖 糖尿病 2型 -
烟酰胺磷酸核糖转移酶及其与肿瘤关系研究进展
烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)是哺乳动物细胞合成烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的限速酶; Nampt也是一种细胞因子,如作为一种新的具有结合并激活胰岛素受体、模拟胰岛素作用的脂肪细胞因子,调控B细胞分化、延缓中性粒细胞凋亡、参与炎症和免疫应答.本文就Nampt的结构、功能及其与肿瘤关系的研究进展作一综述.
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兔关节软骨细胞的体外培养及凋亡相关基因在传代细胞中的表达
目的 验证体外Ⅱ型胶原酶消化法培养兔软骨细胞的可行性,探讨凋亡及抗凋亡基因在软骨细胞传代中的变化,寻找关节软骨退变老化研究的适宜靶细胞.方法 在无菌条件下取6周龄新西兰大白兔双侧膝关节软骨,采用Ⅱ型胶原酶消化并机械吹打的方法分离关节软骨细胞并进行原代、传代培养;形态学观察时采用甲苯胺蓝染色法对关节软骨细胞进行鉴定;RT-PCR法检测P0～P4代软骨细胞烟酰胺磷酸核糖转移酶[NAMPT)、信息沉默因子1(Sirt1)、p53、Bax基因的mRNA相对表达量,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各代关节软骨细胞增殖情况.结果 显微镜下观察兔原代软骨细胞大多呈透亮椭圆形、短梭形、多角形特征,72h全部贴壁生长.甲苯胺蓝染色显示培养的软骨细胞细胞质染成浅蓝色,细胞核染成深蓝色;前3代软骨细胞表型稳定,增殖力良好;连续培养至P4代后,绝大部分细胞变为长梭形和不规则形状.随着软骨细胞的传代,NAMPT的表达量逐渐下调.与P0代软骨细胞相比,Sirt1的表达量在P1代细胞中明显上调,在P2代细胞急剧下降至P0代以下,在P3～P4代细胞中Sirt1的表达量逐渐下调.凋亡基因p53和Bax的表达量随着软骨细胞的传代而上调.前3代软骨细胞增殖差异无统计学意义(均P＞0.05);在培养到第4～7天时,P1～P3代与P4代软骨细胞增殖差异有统计学意义(P＜0.05).结论 采用体外Ⅱ型胶原酶消化法培养兔关节软骨细胞是切实可行的.随着软骨细胞的传代,抗凋亡基因NAMPT、Sirt1的表达逐渐下调,凋亡基因p53、Bax的表达逐渐上调.P1～P3代关节软骨细胞作为研究关节软骨凋亡的细胞体系是合适的.
关键词： 软骨细胞 体外培养 烟酰胺磷酸核糖转移酶 信息沉默因子1 传代 -
Nampt/Visfatin/PBEF研究进展
尼克酰胺磷酸核糖转移酶(nicotinamide phosphoribosyltransferase,Nampt)是生物合成NAD的关键限速酶,又被称为前B细胞克隆增强因子(pre-B cell colony enhancing factor,PBEF)和内脏脂肪素(visfatin).近研究发现,Nampt/Visfatin/PBEF在NAD生物合成、代谢、炎症反应和细胞增殖、分化、凋亡等诸多领域发挥作用,可能影响2型糖尿病、急性肺损伤、恶性肿瘤等疾病发生、发展和预后.本文主要对Nampt/Visfatin/PBEF的生理功能及临床意义进行综述.
关键词： 烟酰胺磷酸核糖转移酶 前B细胞克隆增强因子 内脏脂肪素 -
Nampt在结直肠组织的表达及其临床意义
目的 观察烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)在结直肠癌(CRC)组织以及癌旁组织的表达,探讨Nampt表达与临床病理参数的相关性,并评价其与CRC患者预后的相关性.方法 检索Oncomine数据库探讨Nampt mRNA在CRC组织与癌旁组织的表达特点.利用免疫组织化学法检测93例CRC患者癌组织及其相应的癌旁组织Nampt蛋白的表达,并结合其临床病理资料分析其临床意义.结果 Nampt信使核糖核酸(mRNA)和蛋白在CRC组织的表达水平显著高于相应的癌旁组织(P=0.000).Nampt蛋白的高表达与较高级别的N分期(x2=3.908,P=0.048)、M分期(x2=5.316,P=0.021)和TNM分期(x2=11.930,P=0.001)明显相关.生存分析表明Nampt蛋白高表达的CRC患者总体生存期(OS)显著低于低表达的患者(26.02个月比45.37个月,P=0.017),而Nampt蛋白的表达与无病生存期(DFS)无明显相关(13.72个月比14.29个月,P=0.564).Cox回归分析表明Nampt蛋白高表达是CRC患者预后不良的独立危险因素[P=0.045,风险比(HR)=1.963,95％可信区间(CI):1.080 ～3.652)].结论 Nampt在CRC组织的表达水平高于相应的癌旁组织,Nampt蛋白的高表达与肿瘤分期相关,CRC患者Nampt高表达可能预示着预后差.
关键词： 烟酰胺磷酸核糖转移酶 结直肠癌 免疫组织化学 预后
