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鱿鱼皮胶原蛋白多肽对B16黑素瘤细胞黑素合成的影响
目的 研究不同分子量鱿鱼皮胶原蛋白多肽SP1(Mr＞10 000u)、SP2(6 000u＜Mr＜10 000u)、SP3(2 000u＜Mr＜6 000u)对小鼠B16黑素瘤细胞黑素含量、酪氨酸酶活性及酪氨酸酶基因表达的影响.方法 采用MTT法测定细胞增殖活性,NaOH裂解法测定黑素含量,多巴氧化法测定酪氨酸酶活性,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定酪氨酸酶mRNA表达.结果 不同分子量鱿鱼皮胶原蛋白多肽均能明显降低B16黑素瘤细胞黑素含量(P＜0.05,P＜0.01),抑制酪氨酸酶活性(P＜0.01),并下调酪氨酸酶mRNA表达(P＜0.05,P＜0.01),且剂量效应关系明显.结论 不同分子量鱿鱼皮胶原蛋白多肽均具有明显抑制B16黑素瘤细胞黑素合成的作用,其中SP2的抑制效果较SP1、SP3明显(P＜0.05).
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氢化可的松对B-16黑素瘤细胞酪氨酸酶及黑素生成影响研究
目的探讨氢化可的松体外对酪氨酸酶活性影响,以及对小鼠B-16黑素瘤细胞株细胞增殖、黑素合成以及细胞内酪氨酸酶活性的作用.方法利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定药物对细胞增殖的影响;采用酶学方法研究药物对酪氨酸酶活性的影响;用570 nm比色法测定黑素含量.结果氢化可的松体外可激活酪氨酸酶活性,增强B16鼠黑素瘤细胞增殖,提高酪氨酸酶和黑色素合成能力.结论氢化可的松可增强酪氨酸酶活性,进而促进黑素合成.
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基于美白功效研究苓术芍丹汤的提取工艺
目的 优选苓术芍丹汤的佳提取工艺.方法 以酪氨酸酶抑制率和1,1-二苯基-2-苦基肼自由基清除率的综合评分为评价指标,采用L9(34)正交试验法优选苓术芍丹汤的佳提取工艺.结果 苓术芍丹汤的佳提取工艺:料液比为1∶7 g/mL,提取时间为1.5h,提取温度为80℃,提取次数为1次.结论 基于美白功效优选得到的苓术芍丹汤的提取工艺稳定可行,可为以苓术芍丹汤为基础的相关美白化妆品的研制和开发奠定基础.
关键词： 苓术芍丹汤 美白功效 酪氨酸酶 1 1-二苯基-2-苦基肼 -
铜代谢障碍性疾病的研究进展
机体内许多酶正常发挥作用都需要铜,如细胞色素C氧化酶、赖氨酰氧化酶、多巴胺β羟化酶、超氧化物歧化酶、酪氨酸酶等,所以铜是机体必需的微量元素.
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地骨皮总黄酮的提取及酪氨酸酶活性抑制研究
目的 优选地骨皮总黄酮的提取工艺及其对酪氨酸酶活性的抑制. 方法 采用L9(34)正交表设计实验,以地骨皮总黄酮为考察指标,采用紫外分光光度法测定其含量,优选提取工艺;采用多巴速率氧化法,测定其对酪氨酸酶活性的影响. 结果 乙醇浓度对提取效果具有显著性影响(P＜0.05),经优化后的佳提取工艺条件为:4倍量50％乙醇,提取3次,每次1h. 结论 优选工艺得到的地骨皮总黄酮含量高,且总黄酮具有较强的酪氨酸酶活性抑制作用.
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山茱萸总黄酮的提取及酪氨酸酶活性抑制研究
目的 优选山茱萸总黄酮的提取工艺及其对酪氨酸酶活性的抑制.方法 采用L9(34)正交表设计实验,以山茱萸总黄酮为考察指标,采用紫外分光光度法测定其含量,优选提取工艺；采用多巴速率氧化法,测定其对酪氨酸酶活性的影响.结果 乙醇浓度对提取效果具有显著性影响(P＜0.05),经优化后的佳提取工艺条件为:6倍量50％乙醇,提取3次,每次1h.结论 优选工艺得到的山茱萸总黄酮含量高,且其具较强的酪氨酸酶活性抑制作用.
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5种酸味中药抑制酪氨酸酶活性实验研究
目的 研究5种酸味中药对酪氨酸酶活性的抑制作用. 方法 采用碱提酸沉法提取5种酸味中药的酸性成分,多巴速率氧化法检测提取物对酪氨酸酶的抑制率. 结果 5种酸味中药的碱提酸沉溶液中,枳椇子、金樱子、木瓜、地榆、绿萼梅对酪氨酸酶的抑制率分别达到81.66％、68.53％、59.73％、54.28％和39.36％. 结论 5种酸味中药对酪氨酸酶均有明显的抑制作用,其中以枳棋子作用强,对治疗黑色素增多性疾病有潜在的应用价值.
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乌蕨的生物活性研究进展
乌蕨是一种民间中草药,有"万能解毒药"之美称,具有解毒、抗肝炎、抗肾衰竭和抗菌等生物活性作用.大量研究表明,乌蕨具有良好的抗氧化、抗酪氨酸酶及抗肿瘤等活性,这与其主要成分黄酮类化合物有关.本文对乌蕨的抗氧化、抗酪氨酸酶、抗肿瘤等作用进行了综述,以期更加全面和深入了解乌蕨的生物活性.
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PRAME与白血病
过去,已证实某些肿瘤相关抗原能被细胞毒性T淋巴细胞(CTL)识别而成为肿瘤免疫治疗的靶抗原且取得较好的临床疗效,因此近年来肿瘤相关抗原引起了人们的广泛关注.肿瘤相关抗原可分成四类:1通过突破免疫耐受阈值而引发免疫应答的抗原[1],如HER-2/NEU和碳酸酐酶[2,3].2、基因突变的抗原,如MUM-1(Melanoma Ubiquitous Mutated 1)[4],CDK4(mutated cyclin-dependent kinase 4)[5],通过改变蛋白质表达和构象而引发免疫应答.3、肿瘤/睾丸抗原,如PRAME(preferentially expressed antigen of melanoma)[6],MAGE(melanoma antigen)[7],是表达在某些肿瘤和睾丸细胞中的肿瘤基因家族的成员;4、肿瘤中特定谱系表达的分化抗原,如酪氨酸酶在黑色素瘤具有抗原性,但在黑色细胞中也有表达.PRAME初是由黑色素瘤细胞中分离出来的,是黑色素瘤特异性抗原,近年来发现其在恶性血液病中高度表达而受到重视.
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六味地黄丸对体外培养黑素细胞的抑制作用
目的:研究六味地黄丸对体外培养的黑素细胞的抑制作用.方法:采用MTT法测定细胞增殖情况;NaOH裂解法测定黑素合成;Takahashi法测定酪氨酸酶含量.结果:六味地黄丸对黑素细胞的增殖有抑制作用,能使细胞数明显减少(P＜0.05),并能使黑素合成显著下降(P＜0.01),使酪氨酸酶活性逐渐减弱(P＜0.01).结论:六味地黄丸能抑制黑素细胞增殖、黑素合成、酪氨酸酶活性,这可能是临床应用六味地黄丸治疗皮肤色素性疾病的机制.
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抗白灵霜在黑素合成中对 TYR 和MITF的调节作用
目的：：明确抗白灵霜( KBL)在黑素合成中对TYR和MITF的调节作用。方法：体外培养小鼠B16黑素瘤细胞,分为空白对照组和不同浓度KBL(5 mg/mL,10 mg/mL和15 mg/mL)用NaOH溶解法检测黑素合成量,Real time－PCR检测TYR和MITF基因mRNA表达,Western Blot检测KBL组TYR和MITF蛋白的表达。结果：各浓度KBL组黑素合成量及TYR和MITF基因的mRNA和蛋白表达的水平均高于空白对照组,且呈浓度依赖性。结论： KBL可能通过上调MITF基因的表达,激活参与黑素合成的TYR以促黑素合成。
关键词： 抗白灵霜 小鼠B16黑素瘤细胞 酪氨酸酶 小眼畸形相关转录因子 黑素合成 -
复方甘草酸苷注射液对B16鼠黑素瘤细胞黑素生成的影响
目的：：研究复方甘草酸苷注射液对B16鼠黑素瘤细胞黑素的影响及其机制。方法：通过CCK8、流式细胞术、NaOH裂解法、多巴氧化法和Western－blotting技术检测复方甘草酸苷对B16鼠黑素瘤细胞生长,黑素合成与转运及酪氨酸酶活性和蛋白含量的影响。结果：(1)复方甘草酸苷注射液浓度低于30μL/mL,对B16鼠黑素瘤细胞生长无明显影响；浓度大于50μL/mL,细胞生长速率减慢；浓度达到500μL/mL,细胞生长明显受抑制。(2)浓度在10μL/mL到200μL/mL,黑素的合成和酪氨酸酶的活性均增加。黑素的合成在复方甘草酸苷注射液浓度为50μL/mL时增加明显；且酪氨酸酶活性呈浓度依赖性增加,在浓度为100μL/mL和150μL/mL时达到高。结论：复方甘草酸苷注射液有促进黑素瘤细胞黑素的合成与转运及增加酪氨酸酶活性的作用。
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芍药苷对黑素细胞生物活性的影响
目的：检测芍药苷对体外培养正常人表皮黑素细胞增殖活性、酪氨酸酶活性及黑素合成的影响。方法：建立正常人表皮黑素细胞培养体系，加入不同浓度(5~640μg/mL)芍药苷并作用一定时间后，采用MTT法、体外氧化DOPA反应法、NaOH法等分别测定黑素细胞增殖活性、酪氨酸酶活性及黑素含量的变化。结果：40~160μg/mL芍药苷呈剂量依赖性抑制黑素细胞增殖，与对照组比较差异有统计学意义( P<0.05)；5~20μg/mL芍药苷对酪氨酸酶活性呈剂量依赖性促进作用，与对照组比较差异有统计学意义( P<0.05)；10~20μg/mL芍药苷对黑素细胞黑素合成起促进作用，与对照组比较差异有统计学意义( P<0.05)。结论：芍药苷在较高浓度范围内(40~160μg/mL)对体外培养正常人表皮黑素细胞增殖有剂量依赖性抑制作用；在较低浓度范围内(10~20μg/mL)对其黑素合成有促进作用。
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欧前胡素抑制人表皮黑素细胞黑素生成
目的:评价欧前胡素对培养人表皮黑素细胞黑素生成的作用.方法:体外分离、纯化培养人表皮黑素细胞.随机分为空白组、熊果苷组和欧前胡素组(12.5 μM,25 μM和50 μM),作用48 h,观察黑素细胞形态,检测黑素细胞活力、酪氨酸酶活性和黑素含量,免疫荧光显微镜观察欧前胡素对黑素细胞酪氨酸酶的影响.结果:不同浓度(0、12.5 μM、25 μM和50 μM)欧前胡素作用于黑素细胞48 h后,细胞活力分别为100%、107.8%、87.5%和59.7%.低浓度欧前胡素不影响黑素细胞形态,高浓度(50 μM)对黑素细胞活力、酪氨酸酶活性、黑素含量有抑制作用,呈剂量依赖性.欧前胡素对酪氨酸酶蛋白在细胞内定位未见明显影响,但酪氨酸酶荧光强度降低.结论:欧前胡素抑制体外培养人表皮黑素细胞酪氨酸酶活性而降低黑素生成.
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七白膏方剂中药提取物对离体人黑素细胞的作用
目的:评价七白膏方剂中的药物对离体培养人黑素细胞的作用.方法:建立体外人表皮黑素细胞模型.醇提法提取各种中药活性成分.以熊果苷为实验对照,检测各种中药提取液对于离体培养人黑素细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑素合成的干预作用.结果:低浓度白芷对黑素细胞增殖呈抑制作用(P＜0.05),但高浓度时略呈激活作用.其它中药对黑素细胞增殖和酪氨酸酶活性有抑制作用.不同中药提取液对于黑素合成抑制作用不同.结论:各种中药提取液可影响黑素细胞增殖、酪氨酸酶活性和黑素合成,从而干预体外人黑素细胞的代谢.
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甘草提取物对人黑素细胞黑素合成的影响
目的: 评价甘草提取物对人原代黑素细胞酪氨酸酶及黑素合成的影响.方法:选择2.5、5.0、10.0、15.0、20.0、30.0 mg/L6个浓度的甘草作用于体外培养的人表皮黑素细胞72 h,分别测定细胞增殖活性、酪氨酸酶活性和黑素含量,western blot方法检测甘草作用后黑素细胞中酪氨酸酶蛋白的表达.结果: 甘草显著抑制黑素合成和酪氨酸酶活性,且呈浓度依赖性.结论: 甘草通过下调酪氨酸酶的表达抑制黑素合成和酪氨酸酶活性.
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中药单体芍药甙促进黑素合成的机制研究
目的:确定芍药甙(paeoniflorin)对促进黑素合成的作用.方法:MTT法测定芍药甙对黑素细胞增殖影响,多巴氧化法和NaOH法测定黑素细胞内酪氨酸酶活性和黑素合成, 定量定时RT-PCR和蛋白印迹法测定酪氨酸酶、酪氨酸酶相关蛋白-1 mRNA表达.结果:100 μg/mL芍药甙对细胞的生长有抑制作用;5～10 μg/mL浓度可促进促黑素细胞的增殖;芍药甙增强酪氨酸酶的活性,增加黑素合成;上调TYR,TRP-1 mRNA表达.结论:芍药甙可促进黑素细胞增殖,通过上调酪氨酸酶的活性促进黑素合成.
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5-甲氧补骨脂素及山柰素对黑素细胞的酪氨酸酶活性和增殖的影响
目的:探讨5-甲氧补骨脂素(5-MOP)、山柰素人正常黑素细胞(MC)酪氨酸酶(TYR)活性、增殖以及对细胞形态的影响.方法:采用多巴氧化法分别检测5-MOP、山柰素对培养的人正常黑素细胞TYR活性及对黑素细胞增殖的影响.结果:5-MOP随浓度增加,对黑素细胞的增殖率及TYR激活率呈剂量-时间依赖性的上调,以72h作用强.与空白对照相比,差异均非常显著;山柰素对TYR活性有抑制作用,呈现明显的量效和时效关系,与对照组相比,10μM、μM及100μM的山柰素作用48、72 h,对TYR的抑制作用明显加强,以72h抑制率为大.山柰素对黑素细胞的促增殖作用在1μM作用强,随着浓度增加及作用时间的延长,增殖率呈下降之势.发现5-MOP作用的黑素细胞组,细胞树突增多,多为3、4极以上,而山柰素组2极细胞则明显增多.结论:山柰素是一种有应用前景的TYR抑制剂.MC树突的变化可能与MC内TYR的功能及黑素合成有关,在黑素合成过程中,TYR可能发挥着更为关键的作用,而MC增殖对黑素产生只起相对辅助作用.
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山奈素对melan-a黑素细胞株黑素生成的影响
目的:观察山奈素对melan-a黑素细胞株黑素生成的影响.方法:山奈素干预melan-a后,观察对黑素细胞增殖率的影响并测定各组酪氨酸酶活性大小及黑素量.结果:山奈素表现出轻度的促melan-a增殖作用(P＜0.01),当山奈素浓度在0.001 mmol/L至0.1 mmol/L之间时,细胞增殖率和浓度呈指数关系,而浓度高于0.1 mmol/L后进入平台期.山奈素在1 mmol/L浓度时,促黑素合成的作用与同浓度8-MOP类似(P＞0.05).Fontana-Masson染色后与空白对照比较,经山奈素干预的细胞内,黑素颗粒染成黑色,融合成片,明显多于空白对照.结论:山奈素能够激活melan-a黑素细胞酪氨酸酶的活性,并具有促进黑素细胞增殖、使黑素合成量增加的作用.
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桃红四物汤对酪氨酸酶活性与黑素生成的影响
目的:观察桃红四物汤对酪氨酸酶活性与黑素生成的影响.方法:采用直接添加法和血清药理学方法,观察待测物对酪氨酸酶活性及黑素生成的影响;蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法体外测定酪氨酸酶活性,氢氧化钠溶解法检测黑素生成量.结果:桃红四物汤加减水煎剂和药物血清均有明显激活酪氨酸酶活性的作用,并呈剂量依赖性.水煎剂呈现明显的促黑素生成活性.结论:桃红四物汤加减在体内外均具有激活酪氨酸酶作用,且体外有促黑素生成活性.
