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筋膜囊下浸润麻醉对视网膜脱离患者术中视觉影响的研究
目的 研究筋膜囊下浸润麻醉对视网膜脱离患者在玻璃体切除术或超声乳化白内障吸除联合玻璃体切除术过程中的视觉影响及其影响因素.方法 前瞻性病例系列研究.2012年10月至2013年12月于汕头国际眼科中心就诊的视网膜脱离患者104例(104只眼),于筋膜囊下浸润麻醉后行玻璃体手术或前后段联合手术.在麻醉后的5 min、超声乳化白内障吸除后、核心部玻璃体切除后、周边玻璃体切除后和手术结束时,排除对侧眼的影响和显微镜的光漂白作用,实时调查患者能否看到显微镜的亮光.并在术前1天、术后1.5个月和3个月分别检查术眼佳矫正视力和视觉诱发电位(VEP)并进行对比.不同手术方式,是否去光漂白效应的黑矇检出率比较采用卡方检验;黑矇与无发生黑矇患者的年龄、术眼术前视力比较采用独立样本t检验.手术前后视力比较采用单因素方差分析;VEP振幅比较采用配对t检验.结果 未排除对侧眼影响时,在各个检查点黑矇发生率均为0.严密遮盖排除对侧眼影响后,麻醉后5 min、白内障摘除术后、核心部玻璃体切除术后、周边部玻璃体切除术后及术毕时,术眼黑矇检出率分别为72.1%(75/104)、93.8%(75/80)、96.2%(100/104)、96.2%(100/104)及86.5%(90/104).排除光漂白影响后,各相应检查点黑矇检出率分别为51.9%(54/104)、85.0%(68/80)、85.6%(89/104)、84.6%(88/104)及66.3%(69/104).严密遮盖对侧眼及排除光漂白作用后,至少在术中某个阶段出现黑矇的发生率为95.2%(99/104).去漂白后真正黑矇的99例患者中,54.5%(54/99)患者黑矇发生在筋膜囊下浸润麻醉后的5 min内.30.3%(30/99)术中黑矇的患者在手术结束时恢复光感,所有患者在术后第1天均恢复光感以上视力.术前、术后1.5和3个月患者平均佳矫正视力分别为1.75±0.78、0.96±0.63、0.92±0.57,差异有统计学意义(F=50.61,P<0.01).术前图形VEP未能引出波形者,分别有43.6%(24/55)和61.4%(35/57)的患者于术后1.5和3个月复查时重新引出波形;术前顺利引出波形者,术后图形VEP振幅较术前显著提高(t1.5个月=-2.69,t3个月=-2.97;P<0.05).结论 大部分患者于筋膜囊下浸润麻醉后行玻璃体切除术或前后段联合手术的不同阶段可出现黑矇.推测麻醉剂对视觉冲动传导的阻断作用是导致术眼黑矇的主要原因,光漂白作用也有一定影响.黑矇为一过性,对视功能的恢复无明显影响.
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钙调蛋白拮抗剂W-7对人Tenon囊成纤维细胞的抑制实验
目的观察钙调蛋白拮抗剂W-7对培养的人Tenon囊成纤维细胞的抑制作用.方法 1)人Tenon囊成纤维细胞离体培养及生长抑制实验:取对数生长期的Tenon囊成纤维细胞接种于96孔培养板中,分别加入不同浓度的W-7及丝裂霉素C(MMC),培养不同时间,用MTT法检测细胞增生抑制情况.2)药物对人Tenon囊成纤维细胞形态及线粒体代谢的影响:将人Tenon囊成纤维细胞接种在96孔培养板中,同时加入不同浓度的W-7及MMC,分别培养不同时间,观察细胞形态变化;同时加入MTT,观察细胞线粒体代谢变化.结果 1)W-7依剂量及时间依赖方式明显抑制离体培养的人Tenon囊成纤维细胞增生.2)MTT显示W-7作用的细胞线粒体代谢存在,而MMC作用后细胞死亡,线粒体代谢消失.结论 W-7可抑制人Tenon囊成纤维细胞增生.其对细胞线粒体代谢的影响较MMC小,不引起细胞膜完整性的破坏,可减轻炎症反应,是具有良好应用前景的抗斑痕药物.
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封闭结膜与Tenon囊间隙治疗翼状胬肉疗效观察
①目的 探讨翼状胬肉切除术中封闭结膜与Tenon囊之间间隙的临床治疗效果.②方法 选择原发性翼状胬肉24只眼,复发翼状胬肉17只眼.翼状胬肉切除术采用丝裂霉素C联合羊膜移植,同时在术中重视封闭结膜与Tenon囊间隙,术后观察随访6～24个月.③结果 在观察随访中,有1只眼复发,且无明显的并发症.④结论 翼状胬肉术中封闭结膜与Tenon囊间隙,对减少胬肉复发有效.
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Tenon囊下注射曲安奈德治疗黄斑水肿的临床研究
曲安奈德(triamcinolone acetonide, TA)是一种长效的糖皮质激素,为乳白色混悬液,不溶于水,具有消炎、抑制细胞增生和抗新生血管生成作用,经玻璃体腔注射治疗黄斑水肿取得了满意的疗效,且无明显的视网膜毒性作用.我们于2009年12月至2010年11月对由多种原因引起的黄斑水肿60例(60眼)患者,经散瞳后眼底检查和OCT检查确诊后,采用经Tenon囊下注射曲安奈德治疗,旨在观察曲安奈德注射液(TA)Tenon囊下注射治疗黄斑水肿的临床疗效和临床治疗的安全性、可行性.现报告如下.
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Tenon囊间隙封闭联合新鲜羊膜移植治疗睑球粘连
目的 观察比较封闭Tenon囊与结膜囊之间间隙联合新鲜羊膜移植与单纯新鲜羊膜移植治疗睑球粘连两种手术方法对减少术后复发率、眼表炎症等的疗效差异.方法 选取自2012年1月至2015年1月收治的120例睑球粘连患者,均为单眼患病,采取随机数字表法分为对照组与观察组,每组各60例.对照组给予单纯松解粘连+新鲜羊膜移植术,观察组给予新鲜羊膜移植术联合Tenon囊与结膜囊之间间隙封闭,对比两组患者术后植片成活情况、手术后眼球运动和眼表炎症变化,睑球粘连复发率及术后视功能变化情况.结果 观察组较对照组相比手术后眼球运动改善和眼表炎症相比差异有统计学意义(P＜0.05),观察组睑球粘连复发率明显低于对照组差异有统计学意义(P＜0.05).两组患者羊膜植片全部成活,无明显差异.结论 通过封闭Tenon囊与结膜囊之间间隙联合羊膜移植治疗睑球粘连疗效显著,可以成功重建眼表,减少睑球粘连复发,改善眼球运动,减轻术后眼表炎症.
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曲安奈德球筋膜下注射治疗Vogt-小柳-原田病黄斑区浆液性视网膜脱离临床研究
目的 观察曲安奈德(TA)球筋膜下(Tenon囊)注射联合全身糖皮质激素治疗Vogt-小柳-原田氏病(VKH)的浆液性视网膜脱离的效果.方法 于2010年5月至2011年10月在眼科门诊就诊的Vogt-小柳-原田病患者23例46只眼,随机分为两组,对照组(22只眼)单纯给予糖皮质激素治疗；观察组(24只眼)糖皮质激素联合曲安奈德球筋膜下注射治疗.两组患者分别在治疗前及治疗后1周、1个月、3个月、6个月常规检查裸眼视力、佳矫正视力、眼前节检查、眼底荧光血管造影(FFA)和光学相干断层扫描(OCT)检查,并对数据进行分析.结果 治疗后不同时期,观察组视力提高水平均较对照组高；治疗3个月后两组患者荧光血管造影图像的比较,观察组有效率(91.6％)高于对照组(63.6％),差异有统计学意义(x2=5.3008,P=0.021).治疗后黄斑区视网膜神经上皮层的厚度,观察组为(151±53) μm,对照组为(283±67) μm,两组差别有统计学意义(P =0.000).患者视力和视网膜神经上皮层厚度进行相关性分析(r=-0.897,P=0.000)；视力水平和神经上皮层厚度呈显著负相关.结论 全身大剂量糖皮质激素联合曲安奈德球筋膜下注射可以促进黄斑区视网膜下积液迅速吸收,恢复视功能,缩短治疗时间.
关键词： Vogt-小柳-原田病 曲安奈德 糖皮质激素 Tenon囊 -
全反式维甲酸对体外培养的人Tenon囊成纤维细胞增殖及凋亡的影响
目的:观察全反式维甲酸(ATRA)对体外培养的人Tenon囊成纤维细胞(HTCFs)增殖及凋亡的影响.方法:体外培养HTCFs,采用流式细胞仪检测细胞周期改变、细胞凋亡率、抗凋亡基因bcl-2的水平,琼眄脂糖凝胶电泳检测细胞DNA,研究不同浓度的ATRA对体外培养的HTCFs增殖及凋亡的影响,同时与丝裂霉素C(MMC)作比较.结果:用ATRA和MMC处理后,HTCFs细胞周期的分布发生了明显的变化,表现为G0/G1期细胞数增多,S期细胞数减少;1×10-9 mol/L的ATRA即可诱导细胞的凋亡,随着浓度的增加,凋亡率显著增高;ATRA组bcl-2的水平比空白对照组大约低了一倍;DNA琼脂糖凝胶电泳结果显示:ATRA组为呈一定间隔的DNA梯形条带,MMC组呈现弥漫的片状图谱,无明显的条带.结论:ATRA可有效抑制体外培养的HTCFs的增殖,但与MMC的作用方式不同.MMC主要造成细胞坏死,而ATRA则主要诱导细胞凋亡,无明显细胞毒作用.
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封闭结膜和Tenon囊间隙联合羊膜移植及纤维蛋白胶治疗睑球粘连的疗效观察
目的 研究封闭结膜和Tenon囊间隙技术联合羊膜移植及纤维蛋白胶治疗睑球粘连的临床疗效.方法 对31例(34眼)睑球粘连患者进行睑球粘连松解并切除异常纤维血管组织后,采用连续缝线封闭结膜和Tenon囊间隙技术联合羊膜移植进行治疗,术中辅以纤维蛋白胶固定羊膜.对结膜不足的重度睑球粘连病例使用自体唇黏膜移植封闭间隙.观察眼表重建效果、眼表炎症、眼球活动度、视力、移植材料情况及并发症等.结果 术后12个月34眼中完全成功25眼、部分成功6眼、失败3眼.术后疗效和术前睑球粘连的长度、宽度以及炎症活动度均有相关性(均为P<0.05).术后眼球活动度及炎症活动度得到显著改善(P<0.05),6眼视力提高.结论 封闭结膜和Tenon囊间隙联合羊膜移植及纤维蛋白胶治疗睑球粘连疗效显著,其中使用连续缝线封闭结膜和Tenon囊技术是手术治疗睑球粘连的一个重要步骤.
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转化生长因子β2对人眼Tenon囊成纤维细胞中赖氨酰氧化酶家族表达的诱导作用
背景 研究表明,转化生长因子β2(TGF-β2)促进Tenon囊成纤维细胞(TFs)的活化,在青光眼滤过术后结膜下纤维化过程中发挥作用,但其作用机制尚未完全明了.赖氨酰氧化酶家族(LOXs)与细胞外基质重塑有关,了解青光眼术后滤过泡的纤维化过程中TGF-β2与LOXs活化的关系对青光眼滤过术后滤过泡瘢痕化的防治具有重要意义. 目的 观察TGF-β2对体外培养的人眼TFs中LOXs蛋白表达变化的影响.方法 将培养的第4～8代人TFs分为正常对照组和不同质量浓度TGF-β2培养组,分别在细胞培养液中添加终质量浓度为2、4、8和16 ng/ml TGF-β2继续培养24 h,采用Western blot法测定不同质量浓度TGF-β2培养组细胞中LOXs蛋白表达的变化,确定适TGF-β2刺激质量浓度.用4 ng/ml TGF-β2分别处理培养的TFs 6、12、24和48 h,采用Western blot法测定各时间点细胞中LOXs蛋白表达的变化.采用细胞免疫荧光法分别检测正常对照组和4 ng/ml TGF-β2培养组TFs中LOX蛋白的表达及其在细胞中的分布. 结果 Western blot 法检测显示,正常对照组及2、4、8和16 ng/ml TGF-β2培养组人TFs中LOX、LOXL1、LOXL2、LOXL3及LOXL4蛋白的表达强度均随TGF-β2质量浓度的升高而增加,各组间细胞中LOX、LOXL1、LOXL2、LOXL3和LOXL4蛋白相对表达量的总体比较,差异均有统计学意义(F=37.338、13.438、31.067、11.767、15.167,均P＜0.01),细胞中LOX、LOXL1、LOXL2、LOXL3及LOXL4蛋白相对表达量的升高呈TGF-β2剂量依赖性.正常对照组及4 ng/ml TGF-β2刺激人TFs后6、12、24和48 h组,细胞中LOXL2蛋白的相对表达量分别为0.68±0.07、1.09±0.10、1.32±0.07、1.50±0.06和1.89±0.12,其表达强度呈时间依赖性,总体比较差异有统计学意义(F=82.832,P=0.000).正常对照组人TFs中LOX蛋白表达强度较弱,主要位于细胞质中,TGF-β2培养组细胞中LOX蛋白的表达强度明显强于正常对照组,且表达LOX蛋白的细胞增多. 结论 正常人TFs中可见LOXs呈低表达,TGF-β2以剂量和时间依赖的方式上调人TFs中LOXs蛋白的表达.这个结果为青光眼术后滤过泡纤维化的相关防治研究提供了实验依据.
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结缔组织生长因子对人Tenon囊成纤维细胞中E-cadherin蛋白表达的促进作用
背景 青光眼滤过手术后滤过通道的瘢痕化是手术失败的主要原因,其主要病理机制是成纤维细胞的异常增生、间质-上皮转分化及细胞外基质的重塑.结缔组织生长因子(CTGF)是促进瘢痕形成的关键因子,而CTGF是否能促进人Tenon囊成纤维细胞(HTFs)的间质-上皮转分化尚不清楚.目的 观察CTGF对HTFs间质-上皮转分化的影响.方法 用体积分数10％胎牛血清的DMEM高糖型培养液进行HTFs体外常规培养和传代,取3～6代细胞用于实验.将培养的HTFs分为空白对照组和CTGF处理组,空白对照组用DMEM完全培养液培养细胞,CTGF处理组在培养液中加入CTGF,使终质量浓度为50 ng/ml.细胞培养后48 h,采用细胞免疫荧光染色技术鉴定HTFs中上皮钙黏素(E-cadherin)蛋白的表达,采用Western blot法对HTFs中E-cadherin蛋白的表达量进行检测.结果 空白对照组及CTGF处理组HTFs均生长良好,呈长梭形,漩涡状排列.细胞免疫荧光染色显示,CTGF处理组HTFs细胞质呈红色荧光,细胞核呈蓝色荧光;空白对照组HTFs仅见DAPI蓝染的细胞核,无E-cadherin表达的红色荧光.Western blot法检测结果显示,空白对照组HTFs中E-cadherin蛋白无表达,而CTGF处理组HTFs中E-cadherin蛋白的相对表达量为0.63±0.08.结论 间叶组织来源的成纤维细胞本身不表达E-cadherin,在CTGF的刺激下成纤维细胞能够表达E-cadherin,CTGF促进HTFs的间质-上皮转分化.
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结膜松弛症患者结膜成纤维细胞中穿透素3和肿瘤坏死因子-α刺激基因6的表达
背景 结膜松弛症是老年人中常见的眼表疾病,目前发病机制尚未明确,研究表明结膜松弛症常伴有局部炎症反应,炎性细胞因子在其发生和发展过程中发挥一定的作用. 目的 探讨穿透素3(PTX-3)和肿瘤坏死因子-α刺激基因6(TSG-6)在结膜松弛症患者结膜成纤维细胞中的表达. 方法 纳入2011年1月至2012年6月在上海中医药大学附属普陀医院确诊的结膜松弛症患者13例13眼、年龄相关性白内障患者16例16眼及翼状胬肉患者15例16眼,在相应的手术治疗过程中收集结膜组织标本进行成纤维细胞的原代培养和传代.选取3～6代对数生长期细胞用于实验,采用(ELISA)法检测并比较3种细胞培养液上清中PTX-3和TSG-6蛋白的质量浓度.结果 倒置显微镜下观察组织块透亮性差,呈暗黑色区域,周围有细胞溢出,传至第3代,为形态一致的纤维样细胞,大小均一,呈放射状排列,长梭形或两头尖的长条状,细胞质中有一个卵圆形的细胞核,周围有长短不等的细胞突起相互交联.结膜松弛症组患者成纤维细胞培养液上清中PTX-3的质量浓度为(2 182.33±738.68) pg/ml,明显高于年龄相关性白内障组的(738.32±335.00) pg/ml和翼状胬肉组的(981.37±416.04) pg/ml,3个组间总体差异有统计学意义(F=6.474,P=0.032);结膜松弛症组、翼状胬肉组和年龄相关性白内障组患者成纤维细胞培养液上清中的TSG-6的质量浓度分别为(59.10±6.52)、(53.99±11.16)和(35.01 ±5.33) pg/ml,3个组间总体比较差异有统计学意义(F=7.421,P=0.024),其中年龄相关性白内障组患者成纤维细胞培养液上清中TSG-6的质量浓度明显低于结膜松弛症组和翼状胬肉组,差异均有统计学意义(均P＜0.05),但结膜松弛症组与翼状胬肉组间TSG-6的质量浓度差异无统计学意义(P＞0.05).结论 炎症反应参与结膜松弛症的发生和发展过程,PTX-3、TSG-6在局部组织中的表达上调发挥一定作用.
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羟喜树碱通过蛋白激酶R样内质网激酶途径促进人Tenon囊成纤维细胞自噬作用
背景 研究证实,羟喜树碱可通过蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)途径引起人Tenon囊成纤维细胞(HTFs)凋亡,细胞自噬与凋亡均为细胞在外界压力下产生的程序性死亡反应,二者关系密切,但羟喜树碱与HTFs自噬之间的关系尚不明确. 目的 探讨羟喜树碱对HTFs自噬的作用及其机制.方法 从健康成年眼球供体中取人Tenon囊组织,经组织块培养法培养细胞,并用免疫组织化学法检测细胞中波形蛋白和角蛋白的表达以鉴定培养的细胞.利用293T细胞包装pLVX-PERK慢病毒,将慢病毒转染入HTFs,通过嘌呤霉素筛选出稳定的PERK敲除细胞系.用质量浓度为0.10 g/L的羟喜树碱处理细胞5 min后继续培养24h作为实验组,未用羟喜树碱处理的细胞作为对照组.采用Western blot法检测各组HTFs中自噬相关蛋白Beclin-1、自噬相关基因5(ATG-5)、微管相关蛋白1轻链3(LC-3)表达的灰度值;采用Cyto-ID荧光染色法检测各组HTFs中自噬小体的荧光强度及数量,将各实验结果进行分析比较. 结果 0.10 g/L羟喜树碱处理组HTFs中Beclin-1、ATG-5、LC-3-Ⅰ和LC-3-Ⅱ蛋白表达的灰度值分别为0.980±0.070、1.495±0.095、0.585±0.025和0.785±0.055,明显高于对照组的0.365 ±0.045、0.765 ±0.055、0.120±0.030和0.215±0.035,差异均有统计学意义(Beclin-1:P=0.018;ATG-5:P=0.022;LC-3-Ⅰ:P=0.007;LC-3-Ⅱ:P=0.013).荧光显微镜检测发现,羟喜树碱处理组中自噬小体的绿色荧光强于对照组.Western blot检测结果显示,PERK敲除的细胞中PERK蛋白灰度值为0.130±0.030,明显低于对照组的0.765 ±0.055,差异有统计学意义(P=0.010),而2个组间细胞中Beclin-1、ATG-5和LC-3蛋白反应条带强度无明显差别.0.10 g/L羟喜树碱处理组HTFs中PERK蛋白表达的灰度值为1.790±0.060,较对照组的0.880±0.070明显升高,差异有统计学意义(P=0.010).PERK敲除±0.10 g/L羟喜树碱处理组HTFs中Beclin-1、ATG-5、LC-3-Ⅰ和LC-3-Ⅱ蛋白表达的灰度值分别为0.475 ±0.045、0.390±0.040、0.055±0.015和0.075±0.025,明显低于对照±0.10 g/L羟喜树碱处理组的0.955±0.065、0.765±0.055、0.155±0.015和0.280±0.030,差异均有统计学意义(Beclin-1:P=0.026;ATG-5:P=0.031;LC-3-Ⅰ:P=0.042;LC-3-Ⅱ:P=0.034).PERK敲除+0.10 g/L羟喜树碱处理组细胞中自噬小体的绿色荧光强度明显低于对照+0.10 g/L羟喜树碱处理组. 结论 羟喜树碱可能通过PERK途径诱导HTFs的自噬.
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羟喜树碱对体外培养的人Tenon囊成纤维细胞自噬的诱导作用
背景 滤过道瘢痕化及人Tenon囊成纤维细胞(HTFs)增生是抗青光眼滤过手术失败的主要原因.目前已有羟喜树碱诱导成纤维细胞凋亡及其机制的相关报道,但是羟喜树碱对HTFs自噬的影响鲜见报道. 目的 探讨羟喜树碱对体外培养的HTFs自噬的影响.方法 收集3例接受斜视手术患者的Tenon囊组织,以组织块培养法,用含体积分数10％胎牛血清(FBS)的DMEM培养基原代培养HTFs并传代,取第3～6代细胞进行培养.分别在培养基中加入0.0、0.5、1.0、4.0、10.0 mg/L羟喜树碱,继续培养HTFs 24 h,以细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测各组细胞的增生情况.选取4.0 mg/L羟喜树碱作用HTFs 24 h,用Cyto-ID自噬检测试剂盒进行荧光染色,观察各组细胞中自噬小体和自噬溶酶体成分的分布,用荧光显微镜和流式细胞仪分别对Cyto-ID染色阳性细胞数量及其荧光强度进行测定,并与对照组比较.用逆转录定量检测PCR(qRT-PCR)和Western blot法分别检测各组HTFs中自噬相关蛋白Beclin-1、自噬相关基因5(ATG-5)和微管相关蛋白1轻链3(LC-3)蛋白及其mRNA的相对表达水平.结果 随着羟喜树碱质量浓度的增加,HTFs细胞活力逐渐下降,0.0、0.5、1.0、4.0、10.0 mg/L羟喜树碱组HTFs细胞活力的总体差异有统计学意义(F=19.040,P＜0.001),1.0、4.0、10.0 mg/L羟喜树碱组HTFs的细胞活力均低于对照组,以10.0mg/L组低,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01).qRT-PCR检测显示,4.0 mg/L羟喜树碱组HTFs中Beclin-1 mRNA、ATG-5mRNA和LC-3 mRNA的相对表达量分别是对照组的(3.225±0.346)、(2.839±0.418)和(3.761±0.224)倍,与对照组比较差异均有统计学意义(P=0.020、0.027、0.007).Western blot检测表明,4.0 mg/L羟喜树碱组HTFs中Beclin-1、ATG-5和LC-3蛋白表达的灰度值较对照组明显上升,LC-3Ⅱ/Ⅰ灰度值比值分别为0.965±0.159和0.275±0.860,差异均有统计学意义(P=0.003).Cyto-ID染色结果显示,4.0 mg/L羟喜树碱处理后,HTFs自噬阳性细胞的比例由未处理的(11.333±4.010)％上升到(55.000±9.013)％,差异有统计学意义(P=0.002).流式细胞仪检测表明,4.0 mg/L羟喜树碱处理后24 h Cyto-ID染色的平均荧光强度是对照组的(3.037±0.513)倍,差异有统计学意义(P=0.003).结论 羟喜树碱能诱导体外培养的HTFs发生自噬.
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汉防己甲素诱导人眼Tenon囊成纤维细胞的凋亡效应
目的 研究汉防己甲素(Tet)抑制人眼Tenon囊成纤维细胞(TCFs)的凋亡效应.方法 用组织块混合消化液培养法体外培养人眼TCFs,并对培养的传代细胞进行形态学鉴定.通过透射电镜、TUNEL法和流式细胞仪观察Tet抑制人眼TCFs的凋亡作用.结果 人眼TCFs体外生长良好.透射电镜下见Tet处理后的人眼TCFs细胞质固缩,呈现凋亡表现;TUNEL法可见Tet组出现大量的阳性凋亡细胞;流式细胞仪检测TCFs经Tet作用后G_0/G_1期细胞减少22.2%,S期细胞增加20.53%,G_2/M期细胞增加1.6%,Tet抑制TCFs细胞周期于G1期,Tet组凋亡率明显高于对照组(P=0.000).结论 Tet可以诱导人眼TCFs发生凋亡,进而发挥其抑制增生的作用.
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后Tenon囊下注射曲安奈德后玻璃体腔内药物质量浓度的测定
目的 探讨后Tenon囊下注射曲安奈德(TA)后玻璃体腔内的药物质量浓度及代谢情况.方法 32只健康成年有色家兔,右眼为实验眼,给予后Tenon囊下注射TA 20mg(0.1mL);左眼为对照眼,给予后Tenon囊下注射生理盐水0.1mL,依据注射后不同时间点分为第1、3、7天,2、3、4、6、8周8个亚组,于注药前及注药后各时间点行裂隙灯检查、眼压测量并处死1组家兔,取玻璃体样本,用高效液相色谱法测定药物质量浓度并行药物代谢动力学分析.结果 所有家兔未见手术及药物所致的并发症.玻璃体腔内药物质量浓度于第2周达到高,为(1.91±0.13)μg/mL,以后逐渐下降.结论 后Tenon囊下注射TA,在玻璃体腔内可达到并维持一定的药物质量浓度.
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全反式维甲酸对Tenon囊成纤维细胞超微结构的影响
目的 观察全反式维甲酸(ATRA)对体外培养的人Tenon囊成纤维细胞(HTCFs)超微结构的影响.方法 取第3～6代HTCFs细胞,用1×10-5 mol/L的ATRA处理细胞3 d后,于扫描电镜下观察细胞表面结构,透射电镜下观察细胞超微结构的变化.结果 扫描电镜下经ATRA作用后人Tenon囊成纤维细胞趋于变圆,表面微绒毛几乎消失,可见起泡现象;透射电镜下细胞微绒毛消失,胞内大量空泡形成,胞质浓缩,核仁消失,核染色质固缩、边集,呈境界分明的新月形、块形,聚集于核膜下,线粒体肿胀、内质网扩张呈空泡状,但胞膜、核膜及各细胞器膜均保持完整,呈典型的凋亡特征.结论 ATRA可明显影响HTCFs的超微结构,并出现细胞凋亡的特征性改变.
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HSV-tk/GCV系统对人Tenon囊成纤维细胞的旁观者效应及其机制研究
目的观察HSV-tk/GCV系统对人Tenon囊成纤维细胞(HTFs)的旁观者效应并研究其作用机制.方法将转HSV-tk基因HTFs(HTFs-tk)与正常HTFs于两种接种密度下以不同比例混合,加入5μg/ml更昔洛韦作用5 d,MTT法检测对HTFs的杀伤作用;染料传输法观察HTFs细胞间隙连接细胞间通讯(GJIC)的能力;免疫细胞化学检测Cx43分布;RT-PCR及Western blot检测Cx43表达.结果旁观者效应随HTFs-tk/HTFs比例增加而增强,高细胞接种密度组明显强于低密度组;染料通过GJIC传输6级以上;Cx43主要分布于HTFs细胞膜并检测到其mRNA与蛋白表达.结论旁观者效应需要细胞间密切接触,Cx43介导GJIC可能是HSV-TK/GCV系统对HTFs产生旁观者效应的主要机制,HTFs表达Cx43可能在结膜伤口愈合反应中发挥重要作用.
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角膜缘干细胞移植联合封闭筋膜囊间隙预防翼状胬肉术后复发
目的：：探讨翼状胬肉切除联合带自体角膜缘干细胞结膜瓣移植术辅以封闭球结膜与Tenon囊间隙的手术方式治疗翼状胬肉的临床疗效。方法：对110例128眼实施翼状胬肉切除联合带自体角膜缘干细胞结膜瓣移植术,辅以术中封闭球结膜与Tenon囊之间间隙,观察术后角膜上皮修复及翼状胬肉复发等情况。结果：随访观察术后12,24 mo 胬肉的复发率分别为2.3％,3.9％,角膜上皮恢复时间为2~3d,无其他并发症发生。结论：翼状胬肉切除联合带自体角膜缘干细胞结膜瓣移植术辅以封闭球结膜与Tenon囊间隙治疗翼状胬肉疗效可靠,该手术取材方便、术后恢复快、炎症反应轻、复发率低、泪阜形态及位置恢复正常,是治疗翼状胬肉比较理想的术式。
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不同术式治疗翼状胬肉的疗效分析
目的:比较巩膜暴露法、带球结膜瓣的角膜缘干细胞移植术、带球结膜瓣的角膜缘干细胞移植术联合术中封闭球结膜与Tenon囊之间间隙的手术方式治疗翼状胬肉的临床疗效.方法:翼状胬肉患者130例138眼,分为三组:A组(45例,48眼):采用巩膜暴露法行翼状胬肉切除术;B组(42例,45眼):带球结膜瓣的角膜缘干细胞移植术;C组(43例,45眼):翼状胬肉切除联合带球结膜瓣的角膜缘干细胞移植术及封闭球结膜与Tenon囊之间间隙.术后随访12mo.结果:三组复发率分别为27.1%,8.9%,4.4%.A组与其余两组比较存在显著差异(P<0.05),B组与C组存在差异,但无统计学意义.肉芽肿形成:A组3眼,B组2眼,C组未见.C组泪阜的形态及位置明显优于A组及B组.结论:带球结膜瓣的角膜缘干细胞移植术联合术中封闭球结膜与Tenon囊之间间隙能显著降低翼状胬肉术后复发率,减轻炎症反应,预防肉芽肿的形成,有助于恢复泪阜的正常形态及位置,是目前治疗翼状胬肉的较理想手术方式.
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汉防己甲素对体外人眼Tenon囊成纤维细胞的抑制效应
目的:研究汉防己甲素(tetrandrine ,Tet )对人眼Tenon囊成纤维细胞(Tenon's capsule fibroblasts,TCFs)的抑制效应.方法:用组织块和混合消化液培养法体外培养人眼Tenon囊成纤维细胞,并对培养的传代细胞进行形态学的鉴定.采用MTT法检测不同浓度的汉防己甲素（10- 4,10-5,10- 6,10-7mol/L）及0.2g/L丝裂霉素（MMC）对人眼Tenon囊成纤维细胞的抑制作用.结果:人眼Tenon成纤维细胞体外生长良好,经光镜和免疫组化观察证明该细胞为成纤维细胞.MTT法证实,随着Tet药物浓度的增大,TCFs增生活性降低,对应的TCFs抑制率升高.结论:Tet对人眼Tenon囊成纤维细胞的增殖具有明显的抑制作用.
