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羊膜移植治疗翼状胬肉的临床疗效
目的 探讨新鲜羊膜与保存羊膜移植治疗翼状胬肉的临床疗效.方法对50例(60眼),分两组,分别采取新鲜羊膜移植和保存羊膜移植治疗翼状胬肉.结果 术后随访平均20个月,新鲜羊膜移植翼状胬肉复发率为3.3%;保存羊膜移植,翼状胬肉复发率为6.7%.结论 翼状胬肉切除联合新鲜羊膜移植治疗翼状胬肉复发率低于保存羊膜移植,治愈率高,是目前较好的理想手术方法.
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深低温+100%甘油+RPMI 1640合成细胞培养液保存羊膜联合角膜缘干细胞移植在眼表重建中的应用
目的:评价深低温+100%甘油+RPMI 1640合成细胞培养液保存羊膜联合角膜缘干细胞移植在重建眼表结构中的治疗效果.方法:①实验对象:选取解放军南京军区福州总医院眼科中心2000～2006年收治的严重眼表烧伤患者29例34眼.实验经医学伦理委员会批准,剖腹产孕妇的胎盘由本院妇产科提供,孕妇均签署知情同意书.离体6 h以内的同种异体新鲜角膜由福建省红十字会提供.②实验方法:钝性分离羊膜与绒毛膜,将羊膜上皮面朝上平铺于去除胶面的眼科手术薄膜纸片上,剪成3 cm×4 cm大小,置于100%甘油+RPMI 1640合成细胞培养液各5 mL的无菌小瓶中,-80℃冷藏备用.在供体眼球角膜缘前1 mm处透明角膜上、角膜缘后2 mm处巩膜上作适当深度的环形划界,然后剖出带有浅层基质的角膜缘上皮移植片备用.严重眼表烧伤组织,将备好的羊膜植片上皮面朝上平铺于眼表面,依结膜缺损区大小修剪,缝合固定于近角膜缘的浅层巩膜上,使羊膜紧贴于角膜表面,然后将羊膜边缘与球结膜对位缝合.再将备好的角膜缘上皮移植片与植床角膜缘对位固定缝合.此外,4眼伴轻度眼睑闭合不全者同时行眼睑缘粘连性缝合.结果:严重眼表烧伤患者29例34眼中,除眼睑缘粘连性缝合的4眼外,余30眼(88.24%)术后7～14 d角膜水肿消退,14～21 d上皮修复角膜全表面,结膜表面光滑,无感染发生;术后3～6个月角膜新生血管明显减少,角膜透明度改善,视力提高3～5行;经过22.8个月随访,眼表面稳定.睑缘粘连性缝合的4眼(11.76%)发生羊膜植片急性排斥反应,羊膜融解,改行深板层角膜移植,2个月后观察眼表亦光滑,无睑球粘连发生.结论:深低温+100%甘油+RPMI 1640合成细胞培养液保存羊膜联合角膜缘干细胞移植手术,既发挥了羊膜的生物学特性,又提供了角膜缘活性细胞,能快速、稳定促进角膜更新机制的恢复,加速角膜表面重新上皮化,是治疗严重眼表烧伤有效、可行的手术方式.
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羊膜对多形核白细胞调亡的影响
目的:探讨羊膜对多形核白细胞凋亡的影响,同时比较新鲜羊膜和保存羊膜对其影响的差异,以初步揭示羊膜移植减轻炎症等作用的有关机制.方法:先将新鲜羊膜和保存羊膜进行组织块培养2天后收集条件培养基,然后将其加入已分离好的多形核白细胞中继续进行培养(DMEM培养基作对照组),培养后6、9、12、15小时分别应用Dapi荧光染色和流式细胞仪的方法进行凋亡的研究.结果:每组在各时间点均可见到凋亡细胞,凋亡细胞的数量(流式细胞仪)随时间的延长而逐渐增多.新鲜羊膜组、保存羊膜组和对照组在6、9、12、15小时多形核白细胞的凋亡百分比分别为17.3%、24.4%、29.8%、37.1%,16.2%、20.1%、23.7%、27.7%和10.2%、13.7%、21.1%、26.4%.统计学上三组间的差异具有显著性(组间差值t检验,P1＜0.01,P2＜0.01,P3＜0.01).结论:羊膜可以促进多形核白细胞的凋亡,进而影响其功能的变化,从而减轻炎症和阻止眼表面基质的溶解.新鲜羊膜比保存羊膜更能促进其凋亡,这提示其可以发挥比保存羊膜更加强大的效果.
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基层医院的羊膜制取与保存
目前,羊膜移植治疗眼表疾病已经广泛开展,其治疗效果是肯定的.但基层医院此项工作开展的不尽人意,其主要原因是羊膜的制取与保存受条件所限难以顺利进行.本人在工作中采用简单方法制取与保存羊膜取得较好的效果,报告如下.
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翼状胬肉切除联合生物羊膜或保存羊膜移植治疗翼状胬肉
目的 探讨并比较翼状胬肉切除联合生物羊膜移植和翼状胬肉切除联合保存羊膜移植在治疗翼状胬肉中的治疗效果.方法 对100例翼状胬肉患者,随机行翼状胬肉切除联合生物羊膜移植(n=57)或翼状胬肉切除联合保存羊膜移植(n=56),随访6个月,观察手术治疗效果.结果 手术治疗后6个月,翼状胬肉切除联合生物羊膜移植组有6只眼(10.5％)复发,翼状胬肉切除联合保存羊膜移植组有5只眼(8.9％)复发.两组相比较,差异无统计学意义(P＞0.05).翼状胬肉切除联合保存羊膜移植组患者术后恢复较快,异物感、不适感较轻微.所有患者无感染、排斥及其他并发症.结论 翼状胬肉切除联合生物羊膜移植或翼状胬肉切除联合保存羊膜移植手术均能有效地治疗翼状胬肉,两者有着相似的复发率.翼状胬肉切除联合保存羊膜移植组患者术后相对恢复较快,自觉异物感、不适感较轻微.
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保存羊膜移植治疗翼状胬肉的临床观察
目的 探讨保存羊膜治疗翼状胬肉的临床效果.方法 对 35 例 38 眼翼状胬肉患者进行保存羊膜移植.结果 术后随访 6 个月～2年,有 4 例 4 眼复发,复发率为 10.5%.结论 保存羊膜移植是一种理想的治疗翼状胬肉的方法.
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羊膜移植治疗翼状胬肉的临床观察
自Kim等[1]报道利用保存羊膜移植治疗眼表疾病取得成功后,人们对羊膜在眼表疾病的治疗中有了新认识,羊膜移植治疗翼状胬肉得到广泛开展,并取得良好疗效.我院自2000年以来行胬肉切除联合保存羊膜移植术63例,术后随访1年,获得满意效果,报告如下.
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保存羊膜联合自体球结膜移植治疗复发性睑球粘连
目的:观察和探讨保存羊膜联合自体球结膜移植治疗复发性睑球粘连的临床效果和价值.方法:采用保存羊膜联合自体球结膜移植,治疗复发性胬肉、化学烧伤等原因所致的睑球粘连患者38例共38只眼.观察6～36个月.结果:38例患者38只眼术后无一例感染,10d后移植的羊膜变透明,并在结膜表面爬行,3个月后的结膜蛋白印迹法显示,羊膜上结膜上皮生长良好.34只眼(89.5%)术后眼球运动功能恢复良好,4只眼(10.5%)再次复发部分睑球粘连.结论:保存羊膜联合自体球结膜移植治疗复发性睑球粘连,是一种有效可行的方法.
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保存羊膜与生物羊膜在眼表碱烧伤中应用的疗效比较
目的 比较生物羊膜及保存羊膜移植在眼表碱烧伤治疗中的效果.方法 48例(60眼)患者随机分为两组.术后随访4～13个月.观察其临床疗效、并发症.结果 保存组31眼,角膜上皮修复,28眼视力＞0.1;生物组29例,角膜上皮修复,25眼视力＞0.1.结论 在眼表修复与重建过程中生物羊膜与保存羊膜的疗效、预后基本一致.
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中低温保存羊膜在复杂眼表疾病中的应用
目的探讨中低温(-25℃)保存同种异体羊膜在复杂眼表疾病中的治疗作用和治疗方法.方法采用中低温(-25℃)保存同种异体羊膜移植或覆盖治疗复杂眼表疾病(复发性翼状胬肉、眼化学烧伤、眼表肿瘤、睑球粘连、角膜溃疡及穿孔,其中复发性翼状胬肉术中联合使用丝裂霉素C,角膜溃疡穿孔行大小双层羊膜覆盖,所有病例均观察记录临床结果,随访2个月以上.结果完成手术46例(50只眼),其中复发性翼状胬肉11只眼,化学烧伤14只眼,眼表肿瘤9只眼,睑球粘连6只眼,角膜溃疡10只眼(眼穿孔4只眼),治愈48只眼,治愈率96%.结论中低温保存同种异体羊膜应用于眼表疾病性状良好,羊膜移植联合丝裂霉素C治疗复发性翼状胬肉疗效好,大小双层羊膜覆盖治疗角膜穿孔效果显著.
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四种方法保存羊膜的组织形态学研究
目的 观察4种常用的保存羊膜在不同保存期组织形态和超微结构的改变,为临床应用提供依据.方法 取健康剖宫产产妇胎盘羊膜,随机分成4组保存:DMEM/甘油深低温组、纯甘油4℃组、无水酒精组、真空干燥组.于保存后1个月、3个月、12个月(DMEM/甘油组和纯甘油组),行HE染色光镜及透射电镜检查,观察其组织形态结构变化,以新鲜羊膜作为对照.结果 (1)DMEM/甘油深低温保存组:光镜示保存1个月、3个月时羊膜组织结构基本完整,12个月时上皮细胞轻度破坏;透射电镜示在保存的各个时段羊膜上皮细胞完整,胞核局部溶解,线粒体肿胀,基底膜正常;(2)纯甘油4℃保存组:光镜观察保存1个月、3个月、12个月羊膜上皮细胞结构破坏,12个月基质层结构轻度破坏;透射电镜示保存各时段羊膜上皮细胞破坏明显,但基底膜基本正常;(3)无水酒精保存组:光镜示保存1个月、3个月时羊膜组织结构较完整;透射电镜示羊膜上皮细胞胞膜破坏,胞质、胞核溶解,基底膜变薄;(4)真空干燥保存组:光镜示保存1个月、3个月羊膜上皮细胞和部分基质层结构破坏明显;透射电镜示1个月、3个月时羊膜上皮细胞胞膜完整,核均质化与溶解并存,基底膜变薄.结论 4种方法中,就组织形态和超微结构而言,以DMEM/甘油深低温保存法保存效果好,纯甘油保存法次之,无水酒精和干燥保存法差.
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HGF、bFGF、ColⅣ、LN在保存羊膜中的表达
目的 研究肝细胞生长因子(HGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)、层粘连蛋白(LN)在不同保存方法 和保存时间的羊膜中的表达,探讨保存羊膜的生物学活性.方法 取健康剖宫产产妇胎盘羊膜,随机分成两组保存:DMEM/甘油-80℃组、纯甘油4℃组.保存后1个月、3个月应用免疫组织化学方法,检测HGF、bFGF、ColⅣ和LN在羊膜中的表达,并以新鲜羊膜作对照.结果 (1)HGF、bFGF主要分布于羊膜上皮层.HGF在DMEM/甘油组和纯甘油组保存1个月、3个月和bFGF在两组保存3个月时的表达明显低于新鲜羊膜组,有显著统计学意义(P＜0.01).(2)ColⅣ和LN主要分布于羊膜基底膜.ColⅣ、LN在DMEM/甘油组和纯甘油组保存1个月、3个月时的表达与新鲜羊膜组相比无统计学意义(P＞0.05).结论 羊膜经DMEM/甘油-80℃、纯甘油4℃保存后,其上皮生长因子减少,并随保存时间的延长活性逐渐下降,但羊膜基底膜成分并无明显变化.
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新鲜羊膜移植治疗早期角膜碱烧伤的实验研究
本实验建立兔早期碱烧伤模型,探讨新鲜羊膜移植手术治疗早期角膜碱烧伤的效果.1 材料与方法1.1烧伤模型与手术实验中所用的羊膜取自无传染性疾病剖宫产妇的胎盘,新鲜羊膜在4℃保存6h内使用;保存羊膜置于含DMEM与甘油的保存液无菌瓶内于-80℃冻存.
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保存羊膜移植在治疗严重眼表疾病中的应用及护理
总结了84眼因各种严重眼表疾病而施行保存羊膜移植手术重建角膜、结膜眼表的护理经验.术前做好患者心理护理、预防感染,术中器械准备齐全、手术配合熟练,术后注意局部观察、眼部护理、给予患者正确指导是手术成功的重要环节.
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兔眼小梁切除术中应用新鲜与保存羊膜抗纤维增殖的对比研究
目的 探讨新鲜羊膜与保存羊膜在青光眼小梁切除术后滤过道中抗纤维增殖的能力,并进行对比研究.方法 将36只新西兰大白兔(72眼)随机分为新鲜羊膜组、保存羊膜组和对照组,行小梁切除术,分别在术中应用新鲜羊膜或保存羊膜,对照组无植入物.术后分别于7、14、30和60d对滤过区结膜组织行光学显微镜观察,应用链酶亲和素免疫组织化学法(SABC法)检测各组在结膜滤过泡中转化生长因子(Transforming growfacter-beta-2,TGF-β2)的含量.结果 病理切片结果显示,新鲜羊膜组与保存羊膜组滤过泡结膜下组织细胞数量减少,胶原形成减少,瘢痕组织较为疏松,可见大小不等、形态各异的空腔.新鲜羊膜组滤过泡持续时间较长.免疫组化染色显示,对照组TGF-β2的的表达强,其次为保存羊膜组;新鲜羊膜组表达弱,与各组与相比差异均有显著性(P<0.01).结论 在小梁切除手术中应用羊膜可能通过抑制TGF-β2表达而减少瘢痕形成,维持滤过道的畅通,新鲜羊膜的作用效果优于保存羊膜.
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保存与新鲜羊膜移植片在眼表重建患者中的治疗效果差异
目的 探讨保存与新鲜羊膜移植片在眼表重建患者中的治疗效果差异.方法 选取我院2010年2月至2016年6月行羊膜移植的眼表重建患者42例(54眼),根据患者采用的羊膜种类分为A组(保存羊膜,20例,26眼)和B组(新鲜羊膜,22例,28眼).比较两组患者治疗后的羊膜成活率、 疗效及视力恢复情况.结果 两组患者的羊膜成活率、 总有效率和视力恢复优良率比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论 保存与新鲜羊膜移植片治疗眼表重建患者均有显著的临床疗效,在羊膜成活、总有效率及视力恢复方面无显著差异.
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保存羊膜双层覆盖治疗角膜穿孔18例
角膜溃疡等致的角膜穿孔是常见而难治的眼表疾病,近年来,利用同种异体保存羊膜移植治疗眼表疾病取得了较好的临床效果.羊膜多在常温(4℃)湿房保存和深低温(-80℃)保存,我院于1999年以来使用深低温保存同种异体羊膜行大小双层羊膜覆盖治疗角膜穿孔18例,疗效满意,现报告如下.
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同种异体保存羊膜在复杂眼表疾病中的应用
目的:探讨同种异体保存羊膜移植在复杂眼表疾病中的治疗作用.方法:采用同种异体保存羊膜或联合角膜缘上皮移植治疗复杂性眼表疾病,并进行随访.结果:完成手术39例(40眼),均治愈,视力明显提高,减少了睑球粘连、角膜新生血管增生等并发症.结论:同种异体保存羊膜能有效地重建角膜表面,改善角膜缘基质,减轻炎症反应,从而阻止新生血管,利于眼表重建.
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新鲜羊膜与保存羊膜中HGF、bFGF表达的对照研究
目的:研究肝细胞生长因子(HGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在新鲜和两种保存羊膜中的表达,探讨新鲜和保存羊膜的生物学活性差异.方法:取健康剖宫产产妇胎盘羊膜,随机分成三组:新鲜组、DMEM/甘油-80℃保存组、纯甘油4℃保存组(保存1、3个月),应用免疫组织化学方法,检测HGF、bFGF在各组羊膜中的表达.结果:HGF、bFGF主要分布于羊膜上皮层.HGF在DMEM/甘油组和纯甘油组保存1、3个月时的表达明显低于新鲜羊膜组,统计学上差异有显著性(P＜0.0001),bFGF在两组保存3个月时的表达明显低于新鲜羊膜组,统计学上差异有显著性(P＜0.01).结论:羊膜经DMEM/甘油-80℃、纯甘油4℃保存后,HGF、bFGF减少,并随保存时间的延长活性逐渐下降.
关键词： 新鲜羊膜 保存羊膜 肝细胞生长因子 碱性成纤维细胞生长因子 免疫组织化学 -
甘油保存羊膜在眼表面重建术中的应用
眼表面重建术是一种通过移植手术的方法恢复眼表面正常机能的手术,包括角膜表面重建和结膜表面重建,其移植材料的来源以及术后病变的复发一直是困挠眼科医生的问题.自1999年4月以来,我们用甘油保存的羊膜移植重建眼表面,收到较好效果,特报道如下.
