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Ngn2和Math6在小鼠内耳不同时期表达的初步研究
目的 研究neurogenin2(ngn2)和math6在不同时期小鼠内耳的表达变化,并初步探讨其对螺旋神经元发育的调控作用.方法 本实验选取不同时期健康的BALB/c小鼠,以E12.5、E13.5、E14.5、E17.5、P1、P7和成年为观察时间点,应用real-time PCR、免疫组织化学方法检测ngn2、math6在耳蜗中mRNA和蛋白的表达.结果 (1)real-time PCR结果提示ngn2在E12.5d呈高表达,随后在E13.5d表达量下调,直至成年呈低水平表达；math6在E12.5-P1都呈较高水平表达,其中在P1达到高峰,随后于P7至成年表达量下调.(2)免疫组织化学结果提示,在E13.5、E14.5和P1,ngn2和math6在螺旋神经节处(或螺旋神经元细胞核处)有不同程度的阳性表达；在成年期,math6在细胞核有弱表达,但ngn2几乎不表达,各组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 (1)ngn2在E12.5d表达呈高峰,提示其在有增殖能力的神经祖细胞中起作用；math6在E12.5d-P1呈高表达,提示其在神经祖细胞的增殖以及分化中其起重要作用；(2)ngn2和math6在耳蜗中表达的空间和时间模式的重叠和差异,提示它们在调控通路中可能受到共同的分子调控.
关键词： bHLH neurogenin2 math6 螺旋神经节 内耳发育 -
P19细胞神经分化研究进展
哺乳动物神经系统的发育是一个复杂的过程,包含有多层次基因的表达与调节.P19胚胎瘤细胞系具有正常雄性小鼠染色体核型,在维甲酸的诱导下可向神经细胞方向分化,是研究神经发育机制的一个理想的细胞模型.本文就P19细胞﹑P19细胞的诱导、分化及参与P19细胞神经分化的相关因素做一综述.
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bHLH转录因子调控植物活性成分生物合成的研究进展
转录因子是在转录水平上调控基因表达的关键因素之一,在植物生长发育、活性成分合成和环境变化响应中起着重要作用.本文对植物中bHLH转录因子的结构和分类进行了概述,并详细阐述了bHLH转录因子调控植物中类黄酮、生物碱、萜类等活性成分生物合成的研究进展,探索利用bHLH转录因子提高药用植物有效物质的生物学基础.文章强调模式植物的参考作用,突出现代基因组学、转录组学、代谢组学和生物信息学等多学科理论的交叉与融合对bHLH转录因子发掘和准确功能鉴定的促进作用.加速研究bHLH转录因子调控活性成分生物合成机制,对促进中药材育种和品种改良技术的发展,缓解国内外中草药资源枯竭的境况具有重要意义.
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分化抑制因子在神经系统肿瘤中的调控作用
分化抑制因子(inhibitor of DNA binding and/or differentiation,Id)是1990 年Robert Benezra 等人首先从鼠红白血病(murine erythro leukemia,MEL)细胞cDNA 文库中克隆出来[1]的一种基因,其表达产物Id 蛋白属于螺旋-环-螺旋(helix-loop-helix,HLH)转录因子家族成员.大部分HLH 蛋白有一个与之相邻的强碱性区域,为HLH 蛋白与DNA 结合所必需,能与E2 框基序(CANNTG)或相关N2 框基序(CACNAG)结合,含有此区的HLH 蛋白称为碱性HLH (basic helix-loop-helix,bHLH)蛋白,大部分bHLH 蛋白参与细胞命运和细胞分化过程的基因调控.Id 蛋白因缺乏与DNA 结合的碱性结构域,故Id 蛋白与bHLH 结合形成的异二聚体不能与DNA 结合,对bHLH 转录因子活性起负调节,从而抑制细胞分化,被称为分化抑制因子.
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转录因子HAND2在中国散发先天性心脏病患者中的突变情况研究
目的 探讨转录因子HAND2基因在先天性心脏病患者中的突变率及其基因型与先天性心脏病表型的相关性研究.方法 选择131例先天性心脏病患儿作为实验对象,其心脏畸形与HAND2表达节段相关,同时选取250例健康儿童作为对照组,扩增其HAND2基因的外显子及侧翼内含子,并进一步测序检测突变情况.结果 在编码区中,我们在实验组编码区中发现4例3种错义突变(P11R、S36N和V83L)及1例同义突变(H14H),这3种错义突变中的S36N在250例正常儿童对照组中也检测到1例,编码区的突变情况在两组间不存在统计学差异.在实验组7例患者的非转录区中还发现了3种不同的突变(+241A/G1例、+604A/G1例及+3237T/A 5例),该3种突变在对照组中未检测到,其中+ 3237T/A突变在两组间存在统计学差异.结论 HAND2基因可能在先心病患者的发病机制中发挥一定的作用.
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Hes1蛋白在神经细胞生成中的作用
Hes1蛋白被广泛地表达于哺乳动物体内,并在生物进化过程中高度保守.其表达受Notch、Hedgehog信号系统等多种机制的调控,而且研究发现,Hes1蛋白表达量的高低与其功能有密切的关系.在神经系统发育过程巾,Hes1蛋白功能的缺失可造成胚胎的无脑畸形,而其过高表达则可抑制神经祖细胞的增殖和分化,使神经祖细胞保持在未分化状态.由此可见,Hes1蛋白表达量的精确调控在神经细胞生成、神经系统发育过程中具有重要作用.
关键词： HES1 Neurogenesi Notch bHLH 神经干细胞 -
Notch信号对视网膜前体细胞分化的作用
目的:观察Notch信号对体外培养的SD大鼠视网膜前体细胞分化的影响.方法:从胎龄16 d的SD大鼠分离视网膜神经上皮,采用悬浮法培养视网膜前体细胞.实验分Notch信号抑制组和对照组两组.第14天行免疫细胞化学法分析细胞类型、Notch信号的表达及变化.结果:视网膜前体细胞大部分表达Notch1胞内段及其下游转录因子Hes1,少量细胞表达bHLH转录因子NeuroD和Mash1;自发分化后大量细胞表达bHLH转录因子NeuroD和Mash1,少量细胞表达Notch 1胞内段和Hes1.Notch信号抑制组Nestin,GFAP阳性率显著低于对照组,β-tubulin阳性率显著高于对照组,而Recoverin阳性率与对照组差异无统计学意义.结论:Notch1信号在体外可能参与了对视网膜前体细胞分化的抑制,抑制Notch信号可部分促进视网膜前体细胞向神经元分化,同时抑制了神经胶质细胞的分化.
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神经干细胞增殖分化相关蛋白在左旋单钠谷氨酸大鼠中的变化
目的观察神经干细胞(neural stem cell,NSC)增殖分化相关蛋白在左旋单钠谷氨酸(monosodiumglutamate,MSG)大鼠NSC增殖分化中的作用.方法提取前脑组织蛋白、利用Western blot方法检测NSC增殖分化相关蛋白变化.结果与正常对照组比较,造模后30、60d、MSG大鼠NSC增殖分化相关蛋白Notch1、hes5、Mash1、NeuroD表达水平显著降低,尤以Notch1和hes5更显著(P＜0.01);与实验组比较,左归丸可明显增加Notch1、hes5、Mash1、NeuroD表达水平(P＜0.01).结论MSG显著抑制NSC增殖分化相关蛋白表达水平,左归丸能部份拮抗MSG对NSC增殖分化相关蛋白表达的抑制.Notch和bHLH家族可能与左归丸促进NSC增殖分化作用有关.
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bHLH转录因子对视网膜细胞命运决定的作用
在视网膜发育过程中,bHLH转录因子起到了相当重要的作用.抑制型bHLH转录因子促进视网膜干细胞状态的维持和出生后视网膜胶质细胞的分化.而活化型bHLH转录因子的激活则促进神经元细胞的分化.另外,同源结构域转录因子也参与到这一过程.本文将对这些方面作一综述.
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Mash-1基因对神经干细胞分化与神经发育的影响研究进展
Mash-1基因属于碱性螺旋-环-螺旋基因(basic helix-loop-helex,bHLH)家族,其存在对于神经发育有重大影响作用,其作用机制同Hes基因及Notch通路有复杂而紧密的联系.Hes基因可以拮抗Mash-1基因表达,Notch通路可通过不同方式起调控二者作用.Mash-1对于神经干细胞分化和决定细胞命运以及神经发育具有重大作用.
