首页 > 文献资料
-
人成骨细胞与外周血单核细胞共同培养诱导破骨细胞样细胞
目的探讨人外周血单核细胞与原代人成骨细胞共同培养体外转化为破骨细胞样细胞的条件,并观察其体外生长、功能情况.方法分别分离培养人成骨细胞,外周血单核细胞,并在含1,25(OH)2D3(10-7 mol/L),地塞米松(10-8 mol/L)及巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)(25 ng/ml)的条件液中共同培养,用相差显微镜,抗酒石酸酸性磷酸酶染色(TRAP)观察破骨细胞样细胞生长情况,应用扫描电镜(SEM)观察骨片陷窝以反映其功能.结果共同培养中的单核细胞逐渐融合;TRAP染色阳性多核细胞在第7天明显增多;骨片陷窝呈现多种形态.结论人原代成骨细胞与人外周血单核细胞共同培养可以诱导出破骨细胞样细胞,但应该选择分化程度较低的细胞以及控制接种密度.
-
阿仑膦酸钠对1型糖尿病骨质疏松大鼠体外培养的破骨细胞作用
目的 研究第三代二膦酸盐类药物阿仑膦酸钠(alendronate,固邦)对体外培养的1型糖尿病骨质疏松大鼠的破骨细胞的作用.方法 建立1型糖尿病骨质疏松大鼠模型,于0、2、4和8周进行体外骨髓破骨细胞样细胞(OLC)培养,并进行阿仑膦酸钠干预,观察OLC数量变化.结果 1型糖尿病组大鼠OLC高于正常对照组;1型糖尿病骨质疏松组大鼠OLC高于1型糖尿病组;在所有干预组中,阿仑膦酸钠显著减少OLC(P＜0.01).结论 破骨细胞形成增加可能是1型糖尿病骨质疏松的原因之一,阿仑膦酸钠抑制1型糖尿病骨质疏松大鼠体外培养的OLC的形成.
关键词： 1型糖尿病骨质疏松大鼠 破骨细胞样细胞 体外骨髓细胞培养 阿仑膦酸钠 -
水溶性大豆异黄酮对破骨细胞分化和功能的影响
目的:研究水溶性大豆异黄酮(WSSI)对1,25-二羟基维生素D3诱导兔骨髓细胞分化形成破骨细胞样细胞以及兔成熟破骨细胞骨吸收功能的影响.方法:通过TRAP染色对骨髓细胞诱导分化形成的TRAP日性多核巨细胞计数;用显微摄影结合计算机图像分析测定骨吸收造成的陷窝数目及表面积,以评价破骨细胞活性;用扫描电镜观察骨吸收陷窝的形态.结果:浓度为20.0、4.0、2.0和0.4μg/ml的水溶性大豆异黄酮既能抑制破骨细胞样细胞的形成(P＜0.001),还能抑制成熟破骨细胞的骨吸收功能(P＜0.001),具体表现在随着浓度的升高骨吸收陷窝数目及表面积减少.结论:WS8I可以明显抑制破骨细胞样细胞的形成和成熟破骨细胞的骨吸收功能.
-
动脉钙化及其调节机制:与骨代谢的关系(一)
心血管疾病是我国人群死亡的重要原因.大约75%的糖尿病和代谢综合征患者死于心血管疾病.近些年来人们再度对动脉粥样硬化斑块产生了兴趣,因为它很容易使用非介入性的放射影像技术定量.特别令人感兴趣的是动脉钙化的细胞和分子特征与骨生物学特征之间越来越一致和平行,从而促使人们去探讨骨样矿物质在动脉中怎样形成以及为何形成.动脉钙化分两种类型,动脉中层钙化和动脉内膜斑块的钙化.本综述讨论了两种不同病理类型的钙化以及两者相似和不同之处.论述了钙化形成的模式(综述1)和影响动脉钙化的内分泌、遗传决定因子(综述2).
-
吡格列酮对破骨细胞样细胞整合素β3 表达的影响
目的观察吡格列酮对培养的大鼠破骨细胞样细胞(OLC)活性的影响,探讨过氧化物酶体增殖剂激活受体(PPAR)γ2活化与破骨细胞之间的关系.方法用核因子κB受体活化因子配体(RANKL)及巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)诱导大鼠骨髓单个核细胞向OLC分化,同时加入不同浓度盐酸吡格列酮(终浓度0、1、5、10 μmol/L)干预,用流式细胞仪(FCM)检测培养3、5及7 d OLC整合素β3(CD61)表达量,比较不同浓度吡格列酮对OLC活性的影响.结果培养早期(3及5 d)吡格列酮10μmol/L及5 μmol/L干预组OLC CD61表达量及平均荧光强度明显下调(P＜0.05,P＜0.01),表明吡格列酮在OLC分化早期可抑制其骨吸收活性.结论吡格列酮激活PPARγ2转录活性可部分抑制大鼠骨髓破骨细胞早期的融合聚集活性,这对骨质疏松具有潜在的治疗价值.
-
吡格列酮对体外培养大鼠破骨细胞样细胞分化及活性的影响
目的 观察吡格列酮对大鼠破骨细胞样细胞(OLC)分化及活性的影响,探讨PPARγ2活化与破骨细胞之间的关系.方法 用NF-кB受体活化因子配体(RANKL)及巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)协同诱导大鼠骨髓单个核细胞(BMC)向OLC分化,同时加入1、5、10μmol/L盐酸吡格列酮干预.应用RT-PCR分析OLC分化过程中PPARγ2及NF-кB受体活化因子(RANK)mRNA的表达,结合细胞染色及抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性观察吡格列酮对OLC分化的影响,通过骨吸收陷窝分析及整合素β3(CD61)平均荧光强度的检测比较吡格列酮对OLC活性的影响.结果 (1)对OLC分化的影响:培养7 d时10μmol/L吡格列酮组与其它组相比OLC数量及TRAP活性明显减少(P<0.01或P<0.05),表明吡格列酮部分抑制OLC分化且此作用与剂量相关;RT-PCR结果显示在诱导分化早期,不同浓度吡格列酮呈剂量依赖性上调PPARγ2的表达水平,但随OLC的成熟其表达渐减弱,而RANK表达在5及10 p,mol/L吡格列酮干预组培养的各时间点均明显下调,与对照及1μmol/L干预组相比有显著差异(P<0.05或P<0.01);(2)对OLC活性的影响:骨吸收陷窝数量及吸收面积在吡格列酮5、10μmol/L组明显减少,与另两组相比差异显著(P<0.05或P<0.01),培养早期这两组细胞CD61平均荧光强度均明显下调(P<0.05或P<0.01).结论 吡格列酮激活PPAR田γ2转录活性可部分抑制大鼠骨髓OLC的分化及活性.
-
淫羊藿苷对破骨细胞的分化及骨吸收功能的影响
目的 研究淫羊藿苷对破骨细胞的分化及骨吸收功能的影响,评价淫羊藿苷对骨质疏松的预防及治疗作用.方法 采用1,25-(OH)2D3诱导兔骨髓单核细胞形成破骨细胞样细胞以及原代分离的乳兔成熟破骨细胞与骨片共培养的方法,考察淫羊藿苷对破骨细胞的分化及骨吸收功能的影响.结果 浓度为100、50 μmol·L-1的淫羊藿苷明显抑制1,25-(OH)2D3诱导兔骨髓单核细胞形成破骨细胞样细胞的数目, 当其浓度为100、50、10 μmol·L-1时,明显抑制破骨细胞的骨吸收功能,具体表现在吸收陷窝数目及表面积均明显减少.结论 淫羊藿苷不仅可以明显抑制破骨细胞的分化,同时具有抑制破骨细胞的骨吸收功能的作用,提示淫羊藿苷具有改善骨吸收功能亢进的潜力.
-
RANKL和M-CSF诱导THP-1细胞向破骨细胞样细胞分化的研究
目的 探讨建立有效诱导THP-1细胞分化为破骨细胞样细胞的方法.方法 THP-1细胞首先在TPA的刺激下分化为贴壁细胞,然后在破骨细胞生成因子(RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)的联合诱导下向破骨细胞样细胞分化.通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测分化来的细胞是否为破骨细胞样细胞.结果 THP-1在RANKL和M-CSF的作用下分化为TRAP阳性的破骨细胞样细胞.结论 RANKL和M-CSF可联合诱导THP-1细胞分化为破骨细胞样细胞.
关键词： THP-1 破骨细胞生成因子 巨噬细胞集落刺激因子 破骨细胞样细胞 -
组织蛋白酶K在口腔疾病中的研究进展
组织蛋白酶K(cathepsin K)是一种半胱氨酸蛋白酶,主要存在于破骨细胞、破牙细胞中,该酶主要降解胶原纤维、骨连接素等多种骨基质蛋白.1组织蛋白酶K结构及功能组织蛋白酶是番木瓜家族的成员,由超过21种的蛋白酶构成,他们被分成4个家族:半胱氨酸蛋白酶,天门冬氨酸蛋白酶,丝氨酸蛋白酶及三肽酶[1].其中CK属于半胱氨酸蛋白酶,在卵巢、心脏、胎盘、肺、骨骼肌、结肠、小肠等多组织中表达,免疫组织化学证明其在破骨细胞和破骨细胞样细胞(大的多核细胞)中的浓度较高[2].
-
血小板衍生生长因子-BB体外促进破骨细胞样细胞形成
目的获得大量和高纯度破骨细胞样细胞.方法从急性单核细胞性白血病(M5a亚型)患者骨髓中分离前体单核细胞,与血小板衍生生长因子(PDGF)-BB共同培养,获得多核细胞;利用免疫电镜、免疫荧光、扫描电镜等技术鉴定多核细胞的生物学特性.结果多核细胞表达抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP),细胞膜具有Vitronectin受体,能够形成骨吸收陷窝.结论所获得的多核细胞是破骨细胞样细胞,PDGF-BB能够促进前体破骨细胞向破骨细胞转化.
-
体外诱导培养人破骨细胞样细胞的研究
目的:通过多因子诱导人外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell, PBMC),培养人破骨细胞样细胞(Osteoclast-like cell, OLC).方法:分离人PBMCs,加入不同浓度核因子-κB受体活化剂配体(Receptor activator of NF-κB ligand, RANKL)、巨噬细胞集落刺激因子(Macrophage colony stimulating factor, M-CSF)和1α,25(OH)2D3诱导培养.结果:诱导培养14 d后,部分PBMCs分化为多核、抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色阳性并具有骨吸收功能的破骨细胞样细胞.结论:多因子诱导人PBMCs是培养人OLC的好方法.
