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大豆苷原防治去卵巢大鼠骨质疏松症的量效作用
目的 观察不同剂量大豆苷原对去卵巢大鼠血清骨代谢生化指标、骨密度、骨生物力学和骨形态学的影响.方法 选用4月龄Sprague-Dawley 雌性大鼠60只,随机分6组:假手术组(Sham)、去势组(OVX)、戊酸雌二醇手术组(E2)、高剂量大豆苷原手术组(H-Dai)、中剂量大豆苷原手术组(M-Dai)和低剂量大豆苷原手术组(L-Dai).于术后4周开始分别给予相应的药物灌胃,治疗3个月后处死大鼠,进行相关的检测.结果 去卵巢大鼠的雌二醇水平显著低于其余各组,而碱性磷酸酶和骨钙素活性明显高于其余各组(P<0.05、P<0.01).去卵巢后大鼠腰椎的骨密度、大压缩载荷、骨小梁与椎体总面积比值以及股骨骨密度和大三点弯曲载荷均比Sham组降低,经过大豆苷原治疗后各项指标有不同程度的提高,但是50和200/(kg·d)的大豆苷原组不及10/(kg·d)大豆苷原组效果显著(P<0.05、P<0.01).结论 大豆苷原对去卵巢大鼠骨质疏松有防治作用,呈现剂量依赖性方式,低剂量时作用更为显著.
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雌激素受体和过氧化物酶增殖子激活受体γ交叉对话对大豆苷原骨的保护作用
目的 探讨雌激素受体(ERs)和过氧化物酶增殖子激活受体γ(PPARγ)交叉对话对大豆苷原防治去势大鼠骨质疏松的作用.方法 将4个月龄大鼠随机分为6组:假手术组、去势组、去势+戊酸雌二醇组(E2)、去势+高剂量大豆苷原组(H-Dai,200 mg·kg~(-1)·d~(-1))、去势+中剂量大豆苷原组(M-Dai,50 mg·kg~(-1)·d~(-1))和去势+低剂量大豆苷原组(L-Dai,10 mg·kg~(-1)·d~(-1)),造模成功后,灌胃3个月后处死大鼠.以腰椎L_6和右股骨提取总RNA,RT-PCR方法检测ERα、ERβ和PPARγ mRNA表达;免疫组化检测腰椎L_4与左股骨3种蛋白表达.结果 不同剂量大鼠ERα mRNA和蛋白表达水平均显著低于ERβ.除H-Dai组大鼠股骨之外,ERβ mRNA在M-Dai组大鼠腰椎和股骨(0.0177±0.0010,0.0245±0.0013)和L-Dai组大鼠的腰椎及股骨(0.0276±0.0027,0.0278±0.0044)以及H-Dai组大鼠腰椎(0.0163±0.0037)的表达水平均显著高于去势组(0.0016±0.0005,0.0041±0.0014),且与E_2组差异无统计学意义,ERB蛋白的表达情况与之类似.组间比较显示随着大豆苷原剂量降低,ERβ mRNA及蛋白表达水平有增高的趋势,而PPARγ mRNA及蛋白表达水平则降低.结论 ERβ和PPARγ之间存在此消彼涨的交叉对话关系,可能参予介导大豆苷原防治去势大鼠骨质疏松症的量效作用.
关键词： 骨质疏松 大豆苷原 受体 雌激素 过氧化物酶增殖子激活受体γ -
大豆异黄酮的抗病机制
大豆及其制品具有降血脂、抗氧化、抗癌、抗动脉粥样硬化等生理作用,主要应归功于大豆异黄酮.大豆经加工或微生物发酵经人体摄入后,在肠道细菌葡萄糖苷酶的作用下,异黄酮的糖苷配基脱离,释放出有生物活性的三羟异黄酮或称染料木黄酮(genistein,G)、二羟异黄酮或称大豆苷原(daidzein,D)和6-甲基大豆素(glycitein).
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大豆异黄酮与肝病
大豆异黄酮(soybean isoflavones)是大豆中重要的非营养成分,它主要包括染料木苷(genistin)、大豆苷(daidzin)和6甲基大豆苷(glicitin).大豆经加工、微生物发酵或体外酸水解作用后,释放出游离形式的三羟异黄酮(即金雀异黄酮,genistein)和二羟异黄酮(大豆苷原,daidzein),它们可被肠道有效吸收入血从而发挥作用,金雀异黄酮经反复肝肠循环后,大部分在肝内与葡萄糖醛酸结合,其余以硫酸脂等形式经肾排出.研究发现大豆异黄酮有许多功效,如改善妇女更年期综合征症状、防治老年人的骨质疏松、预防早期动脉粥样硬化、抗氧化作用及对多种肿瘤的抑癌作用[1].随着大豆异黄酮生物功效的研究进展,其与肝病的关系日益受到重视,本文就近年来它对各种肝病的作用做一综述.
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大豆苷原对成骨细胞MC3T3-E1甾体激素受体辅激活因子1表达的调节作用及其机制
目的:研究大豆苷原对成骨细胞MC3T3-E1甾体激素受体辅激活因子1(steroid receptor coactivator-1,SRC-1)和核受体辅抑制因子(nuclear receptor corepressor,NcoR)表达的调节作用及其机制.方法:体外培养MC3T3-E1细胞于含2％胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的α低必须培养基(α-minimal essential medium,α-MEM)中,给予不同浓度大豆苷原或10-8mol/L的雌二醇作用3d后收获细胞,采用蛋白质印迹法观察SRC-1和NcoR蛋白的表达水平.分别应用雌激素受体(estrogen receptor,ER)拮抗剂ICI182780 (Faslodex,ICI,10-7 mol/L)和雌激素受体α(estrogen receptor α,ERα)特异性拮抗剂(methyl piperidino-pyrazole,MPP,10-6 mol/L)干预,观察大豆苷原对细胞SRC-1和NcoR蛋白表达水平的影响.结果:大豆苷原可上调MC3T3-E1细胞SRC-1的表达,10-7mol/L和10-5 mol/L大豆苷原组SRC-1的蛋白水平分别增加至对照组的2.5倍(P＜0.05)和2倍(P＜0.05).各剂量组NcoR表达水平与对照组比较差异无统计学意义.雌二醇组SRC-1水平与对照组比较未见明显变化,而其NcoR表达水平较对照组下调35％(P＜0.05).ICI182780可拮抗大豆苷原对SRC-1的上调作用.在IC1182780作用下,各剂量组SRC-1蛋白水平与对照组比较差异无统计学意义;MPP干预下,10-7 mol/L和10-5 mol/I大豆苷原组SRC-1的蛋白水平分别为对照组的1.8倍(P＜0.05)和2.4倍(P＜0.05).结论:大豆苷原可增加成骨细胞SRC-1的蛋白表达水平,提高细胞SRC-1/NcoR比值.ER β参与了大豆苷原对SRC-1的调节过程.成骨细胞内SRC-1蛋白的增加和SRC-1/NcoR比值的提高是大豆苷原促进成骨细胞分化的机制之一.
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植物雌激素大豆苷原(daidzein)对结肠癌LoVo细胞生长的影响
目的了解植物雌激素大豆苷原(daidzein)对结肠癌细胞生长的影响.方法取对数生长期的人结肠癌细胞株LoVo细胞,以不同浓度的大豆苷原处理细胞2,3,4和6d, 然后应用MTT法测定细胞的生长率.结果大豆苷原在高浓度100μmol/L时在体外对LoVo有明显的抑制作用(P<0.01),而在低浓度<5μmol/L时对LoVo细胞又具有促增殖作用.结论大豆苷原在体外对LoVo细胞的生长具有促进和抑制的双向作用.
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薄层扫描法测定染料木素和大豆苷原的含量
目的建立染料木素和大豆苷原的薄层扫描测定方法.方法薄层色谱条件是:吸附剂:聚酰胺-6薄膜,展开剂:苯-丁酮-甲醇(3:1;0.5),结果染料木素和大豆苷原均在250nm处有大吸收,本法线性关系良好(染料木素:r=0.9993;大豆苷原:r=0.9995).染料木素的平均回收率98.52%(n=5);大豆苷原的平均回收率99.45%(n=5).结论方法简便,准确,重现性好,可用于测定染料木素和大豆苷原的含量.
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大豆苷原和染料木黄酮对小鼠子宫内膜癌TN F-α、IL-1α及IL-6表达的影响
目的 探讨大豆苷原和染料木黄酮在雌二醇-17β(E2)所诱发的小鼠子宫内膜癌TNF-α、IL-1α、IL-6 mRNA表达变化中的作用.方法 利用定量RT-PCR法检测小鼠子宫内膜癌细胞TNF-α、IL-1α、IL-6 mRNA的表达量.结果 E2单独投与群TNF-α、IL-1α、IL-6 mRNA分别为(0.605±0.011)、(2.796±1.569)、(2.809±0.011).与E2单独投与群比较,E2和染料木黄酮和大豆苷原联合投与群,能够明显抑制E2刺激所诱发的TNF-α、IL-1α及IL-6表达的增强.结论 E2皮下注射的雌性ICR小鼠给予染料木黄酮和大豆苷原后,能够诱发TNF-α、IL-1α、IL-6 mtLNA的表达下调,对子宫内膜癌的预防有一定的意义.
