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大豆苷原对成骨细胞MC3T3-E1甾体激素受体辅激活因子1表达的调节作用及其机制
目的:研究大豆苷原对成骨细胞MC3T3-E1甾体激素受体辅激活因子1(steroid receptor coactivator-1,SRC-1)和核受体辅抑制因子(nuclear receptor corepressor,NcoR)表达的调节作用及其机制.方法:体外培养MC3T3-E1细胞于含2％胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的α低必须培养基(α-minimal essential medium,α-MEM)中,给予不同浓度大豆苷原或10-8mol/L的雌二醇作用3d后收获细胞,采用蛋白质印迹法观察SRC-1和NcoR蛋白的表达水平.分别应用雌激素受体(estrogen receptor,ER)拮抗剂ICI182780 (Faslodex,ICI,10-7 mol/L)和雌激素受体α(estrogen receptor α,ERα)特异性拮抗剂(methyl piperidino-pyrazole,MPP,10-6 mol/L)干预,观察大豆苷原对细胞SRC-1和NcoR蛋白表达水平的影响.结果:大豆苷原可上调MC3T3-E1细胞SRC-1的表达,10-7mol/L和10-5 mol/L大豆苷原组SRC-1的蛋白水平分别增加至对照组的2.5倍(P＜0.05)和2倍(P＜0.05).各剂量组NcoR表达水平与对照组比较差异无统计学意义.雌二醇组SRC-1水平与对照组比较未见明显变化,而其NcoR表达水平较对照组下调35％(P＜0.05).ICI182780可拮抗大豆苷原对SRC-1的上调作用.在IC1182780作用下,各剂量组SRC-1蛋白水平与对照组比较差异无统计学意义;MPP干预下,10-7 mol/L和10-5 mol/I大豆苷原组SRC-1的蛋白水平分别为对照组的1.8倍(P＜0.05)和2.4倍(P＜0.05).结论:大豆苷原可增加成骨细胞SRC-1的蛋白表达水平,提高细胞SRC-1/NcoR比值.ER β参与了大豆苷原对SRC-1的调节过程.成骨细胞内SRC-1蛋白的增加和SRC-1/NcoR比值的提高是大豆苷原促进成骨细胞分化的机制之一.
