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富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白与2型糖尿病动脉硬化的关系
SPARC(secreted protein,acidic and rich in cysteine)即富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白,由于它先发现是骨基质中的一种主要的非胶质蛋白,因此又被称作骨连接素(Osteonectin)、基底膜40蛋白(BM40).SPARC是由多种细胞分泌的小分子钙结合糖蛋白,通过与胞外基质蛋白相互作用而表现出多种生物活性,与胚胎发育、血管形成、组织重塑及修复、细胞更新等均密切相关[1].
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组织蛋白酶K与骨质疏松的研究进展
骨质疏松是以骨量减少,骨组织显微结构退化(松质骨骨小梁变细、断裂、数量减少,皮质骨多孔、变薄)为特征,以致骨的脆性增高及骨折危险性明显增加的一种全身性疾病[1].骨量的丢失是由于骨吸收对骨的破坏作用超过了骨形成,由此造成骨破坏活动绝对或相对增加,从而破坏了骨重建的动态平衡过程.组织蛋白酶K是一种半胱氨酸蛋白酶,当破骨细胞施行骨吸收时会大量表达,该酶具有分解多种骨基质的作用:如对Ⅰ型胶原,Ⅱ型胶原,骨桥蛋白及骨连接素等.组织蛋白酶K在骨重建中具有重要作用.笔者对组织蛋白酶K与骨质疏松相关研究的进展作一综述.
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天鹅记忆接骨器对实验性骨折愈合时骨桥素和骨连接素mRNA表达的影响
目的:探讨天鹅记忆接骨器对实验性骨折愈合中骨桥素和骨连接素mRNA表达的影响.方法:30只新西兰兔双侧肱骨干横断截骨,随机选一侧以天鹅记忆接骨器内固定作为实验组,对侧以4孔加压钢板固定作为对照组.分别于术后第2、7、14、28、56天时,在骨折间隙取材,行组织学观察及半定量RT-PCR检测骨桥素和骨连接素mRNA的表达.结果:实验组骨折间隙软骨内成骨和编织骨向板层骨的改建均早于对照组;相应地,实验组的骨桥素和骨连接素mRNA分别在术后第14天和28天时达峰值,早于对照组,且其愈合进程也明显提前.结论:天鹅记忆接骨器产生的持续动态压应力可能促进了骨折愈合.
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骨连接素对角质形成细胞的增殖抑制作用
目的:观察骨连接素对体外培养人角质形成细胞(HaCaT)的细胞增殖、细胞周期及相关基因表达的影响,初步探讨骨连接素对人角质形成细胞的作用机制.方法:用不同浓度骨连接素处理HaCaT细胞,MTT法检测HaCaT细胞增殖;流式细胞术测定细胞周期;实时定量RT-PCR方法检测CCND1和PCNA mRNA表达水平的变化.结果:与未加入骨连接素的HaCaT细胞相比,5 μg/ml以上浓度骨连接素作用的细胞增殖率明显下降(P<0.05), 10 μg/ml骨连接素作用的细胞G0/G1期细胞明显增多.10 μg/ml以上浓度的骨连接素作用后,HaCaT细胞CCND1和PCNA的mRNA水平显著减弱(P<0.05,P<0.01).结论:骨连接素可能是通过抑制CCND1和PCNA的表达,从而发挥抑制细胞增殖的作用.
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组织蛋白酶K在口腔疾病中的研究进展
组织蛋白酶K(cathepsin K)是一种半胱氨酸蛋白酶,主要存在于破骨细胞、破牙细胞中,该酶主要降解胶原纤维、骨连接素等多种骨基质蛋白.1组织蛋白酶K结构及功能组织蛋白酶是番木瓜家族的成员,由超过21种的蛋白酶构成,他们被分成4个家族:半胱氨酸蛋白酶,天门冬氨酸蛋白酶,丝氨酸蛋白酶及三肽酶[1].其中CK属于半胱氨酸蛋白酶,在卵巢、心脏、胎盘、肺、骨骼肌、结肠、小肠等多组织中表达,免疫组织化学证明其在破骨细胞和破骨细胞样细胞(大的多核细胞)中的浓度较高[2].
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氟对人成骨细胞氧化应激和骨连接素表达的影响
目的 观察氟对体外培养人成骨肉瘤细胞内骨粘连蛋白/骨连接素(osteonectin,ON)基因表达及氧化应激状态的影响.方法 采用McCOY's 5A培养基培养人成骨肉瘤细胞Saos-2.按照染氟剂量将骨肉瘤细胞Saos-2分为0(对照组)、0.625、1.250、2.500、5.000、10.000、20.000、40.000、80.000 mg/L组.培养24 h后收集细胞,实时荧光定量PCR(real-time RT-PCR)测定成骨细胞成骨相关基因ON mRNA的表达,用双标准曲线法计算基因表达的相对比值.氧化应激状态用化学比色法分别测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)及丙二醛(malondialdehyde,MDA)的活性.结果 0.625、1.250、2.500、5.000 mg/L组成骨肉瘤细胞ON mRNA表达分别为(0.014 3±0.032)、(0.057 3±0.02)、(0.042 8±0.017 7)、(0.076 2±0.005),低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.01),但10.000 、20.000 mg/L组成骨肉瘤细胞ON mRNA表达分别为(11.6±1.01)、(12.7±1.18)、(1.65±0.00)、(1.97±0.46),明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01),组间比较差异有统计学意义(F=305.842,P<0.01).5.000~80.000 mg/L组SOD的活性分别为(94.14±3.16)、(63.36±3.63)、(53.00±4.26)、(55.50±5.89)、(53.46±6.40)×103U/g,与对照组[(122.34±6.99)×103U/g]比较明显降低,组间比较差异有统计学意义(F=21.734,P<0.01).10.00 mg/L组MDA的活性为(7.74±1.43)μmol/g,与对照组[(4.99±0.65)μmol/g]比较明显升高,组间比较差异有统计学意义(F=3.067,P<0.05).成骨细胞内ON表达水平与SOD活力呈明显负相关.结论 氟可能通过影响成骨细胞内骨连接素基因的表达和氧化应激状态而改变正常的成骨分化.