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冠心病患者颈动脉-股动脉脉搏波传导速度与升主动脉组织结构成分的相关性研究
目的 探讨冠心病患者动脉弹性功能指标颈动脉-股动脉脉搏波传导速度(cfPWV)与升主动脉组织结构成分的相关性. 方法 入选在我院行冠状动脉旁路移植术(CABG)的老年冠心病患者60例,应用法国Artech-Medical公司生产的脉搏波速度测定仪测定cfPWV.将CABG术中从升主动脉前壁取下的组织进行病理切片,分别用Masson染色平滑肌和胶原纤维,Weigert 's间苯二酚复红法染弹性纤维.光镜下以计算机图像分析系统分别定量测定血管平滑肌、胶原纤维和弹性纤维的相对面积.cfPWV与升主动脉组织结构成分间的相关性应用直线相关分析. 结果 冠心病患者cfPWV高于正常范围为(14.2±2.0)m/s,升主动脉壁中膜胶原纤维增多为(44.1±3.9)％,弹性纤维减少为(18.4±3.2)％,胶原纤维、弹性纤维和平滑肌排列紊乱.cfPWV与升主动脉中膜胶原纤维的相对含量呈正相关(r=0.68,P＜0,01),与弹性纤维的相对含量呈负相关(r=0.59,P＜0.01),而与平滑肌的相对含量无相关性(r=0.01,P＞0.05). 结论 冠心病患者大动脉弹性下降,其主要病理基础是胶原纤维增多和弹性纤维减少及这两种主要成分的排列紊乱.cfPWV随着升主动脉中膜胶原纤维的增多和(或)弹性纤维的减少而升高.
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妊娠期发生盆底功能障碍的影响因素分析
目的：探讨阴道壁组织中弹力纤维、胶原纤维、fibulin-5和转化生长因子β（TGF-β）与初产妇妊娠晚期盆底功能障碍的关系。方法：选取阴道分娩并行会阴侧切的初产妇40例，无妊娠期高血压、妊娠期糖尿病、胎儿生长受限（FGR）和巨大儿。将既无阴道前壁脱垂也无压力性尿失禁（SUI）初产妇设为对照组（20例），将阴道前壁脱垂（包括Ⅰ度和Ⅱ度脱垂的）合并SUI初产妇设为病例组（20例）。所有研究对象阴道分娩行会阴侧切时取少许阴道壁组织行Masson染色检测弹力纤维和胶原纤维的差异，免疫组织化学检测fibulin-5和TGF-β的表达情况，免疫组化结果使用Image-Pro Plus软件分析。结果：2组患者TGF-β蛋白表达量差异无统计学意义（t=1.670，P=0.098），对照组fibulin-5蛋白表达量高于病例组（t=3.062，P=0.005）。病例组胶原纤维和弹力纤维排列稀疏、紊乱，且纤维之间出现断裂，对照组纤维排列致密，形态完整。结论：妊娠期盆底弹力纤维和胶原纤维的异常以及fibulin-5表达减少可能与妊娠期盆底功能障碍发病有关。
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芪麝丸对直立大鼠腰椎骨质增生的影响
目的:观察芪麝丸对长期直立大鼠腰椎骨质增生的影响,探讨其可能的作用机制.方法:30只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和芪麝丸组.正常对照组不进行处理,普通饲养笼喂养.模型组和芪麝丸组大鼠行手术截断前肢配合强迫站立建立长期直立大鼠模型.芪麝丸组于术后8个月开始予芪麝丸5 g/(kg·d)灌胃,连续灌胃1个月.所有大鼠术后9个月处死并取材,第5腰椎椎体行藏红-固绿染色、天狼星红染色观察病理学改变,免疫组织化学法检测Ⅰ型胶原、Ⅹ型胶原、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)表达;应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应技术检测第1～3腰椎生长板及椎间盘Ⅰ型胶原α2(type Ⅰ collagen α2,Col 1α2)、Ⅹ型胶原α1(type Ⅹ collagen α1,Col 10α1)、TGF-β1、VEGF和runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)基因的表达.结果:藏红-固绿染色显示模型组椎体边缘-椎间盘连接处非基质成分增加,发生骨质增生;正常对照组改变不明显;芪麝丸组与模型组比,相同部位非基质成分较少.天狼星红染色示正常对照组椎体边缘-椎间盘连接处胶原排列致密,模型组该处Ⅰ型和Ⅲ型胶原增加,芪麝丸组椎体边缘-椎间盘连接处胶原致密,以Ⅰ型胶原为主.免疫组织化学检测提示模型组骨质增生形成部位Ⅹ型胶原、VEGF和TGF-β1表达均较正常对照组增加,芪麝丸组Ⅹ型胶原和VEGF表达均较模型组减少,而TGF-β1表达无明显改变.实时荧光定量逆转录聚合酶链反应示芪麝丸组Col10α1和Runx2基因表达较模型组下降(P<0.01).结论:芪麝丸能延缓腰椎边缘-椎间盘连接处骨质增生形成,其机制可能与减少增生骨质中细胞外基质Ⅹ型胶原的含量和椎间盘Ⅹ型胶原及Runx2基因表达有关.
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β-CTX和N-MID对预测老年肺癌骨转移患者发生骨相关事件和总生存的临床价值
目的:分析血清骨代谢标志物Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列(β isomer of the C-terminal telopeptide of type Ⅰ collagen,β-CTX)和骨钙素N-端中分子片段(N-terminal midragment of osteocalcin,N-MID)在老年肺癌骨转移患者接受唑来膦酸治疗过程中的变化情况,探讨二者对老年肺癌骨转移患者临床预后的预测价值.方法:在本项前瞻性研究中,选取年龄＞ 60岁的肺癌骨转移患者126例,肺癌无骨转移患者110例,同时入组的正常对照为89例.所有肺癌骨转移患者均应用唑来膦酸治疗,每4周1次(4 mg静脉滴注).采用放射免疫法动态监测肺癌骨转移患者在治疗前和唑来膦酸治疗后2、4、6、8、10和12个月的血清β-CTX和N-MID水平,并记录研究期间患者发生骨相关事件(skeletal-related events,SREs)和总生存的情况.结果:肺癌骨转移组血清β-CTX和N-MID基线水平明显高于肺癌无骨转移组及正常对照组(P值均＜ 0.001),而唑来膦酸治疗后肺癌骨转移组的β-CTX和N-MID水平较治疗前基线水平明显下降(P值均＜0.01).多因素分析结果显示,β-CTX和N-MID是影响SREs发生的独立危险因素[比值比(odds ratio,OR)=6.367,P=0.001;OR=3.015,P=0.025).高水平β-CTX组发生SREs的中位时间和中位生存时间均短于低水平β-CTX组,差异均有统计学意义(6.0个月vs10.5个月,P=0.031;13.0个月vs16.5个月,P=0.028);高水平N-MID组发生SREs的中位时间也低于低水平N-MID组(6.5个月vs10.5个月,P=0.046),但是二者的中位生存时间无明显差异(14.5个月vs 17.0个月,P=0.226).结论:血清β-CTX和N-MID是预测老年肺癌骨转移患者发生SREs的有效指标,同时β-CTX可能对评估老年肺癌骨转移患者的预后有一定价值.
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点阵Er:YAG激光对光老化豚鼠皮肤胶原纤维和弹性纤维的影响
目的 探讨点阵Er:YAG激光照射对紫外线所致豚鼠光老化皮肤胶原纤维和弹性纤维的影响.方法 随机数字表法将60只豚鼠分为无处理组10只和模型组50只,中波紫外线(UVB)和长波紫外线(UVA)照射模型组豚鼠皮肤构建光老化模型,随机选择10只作为光老化模型组,余40只豚鼠分为2周、4周、8周、12周治疗组.点阵Er:YAG激光连续多脉冲照射治疗组豚鼠左侧背部(治疗侧)皮肤,HE染色、Masson染色、Weigert-van Gieson染色和碱水解-分光光度法比较照射后,治疗侧和对照侧皮肤组织学改变、胶原纤维、弹性纤维和羟脯氨酸含量.结果 UVA和UVB的小红斑量4224 mJ/cm2和504 mJ/cm2隔日照射豚鼠背部皮肤,累积照射UVA 459.36 J/cm2和UVB 54.81 J/cm2,成功获得光老化模型.HE染色显示,治疗组治疗侧皮肤真皮浅层激光刺激区新生的胶原纤维和弹性纤维增加、排列致密.12周组Masson染色胶原面积比值治疗侧(0.70±0.12)较对照侧(0.63±0.08)均有增加,差异有统计学意义(f=1.18,P＜0.05)；羟脯氨酸含量治疗侧[(4.73±0.39) mg/g]较对照侧[(3.66±0.85) mg/g]亦有增加,差异有统计学意义(t=3.40,P＜ 0.05).结论 点阵Er:YAG激光连续多脉冲照射可以刺激光老化豚鼠皮肤真皮浅层胶原纤维含量增加,纤细的弹性纤维新生.
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鼠尾Ⅰ型胶原的酸解、纤维重构和仿骨生物矿化研究
目的：：利用鼠尾Ⅰ型胶原构建与人类自体骨组织化学成分和分子结构相近的仿生骨材料。方法：通过醋酸酸解提取鼠尾Ⅰ型胶原蛋白,并重构成胶原纤维。然后,将重构后的胶原纤维放置在矿化液中模仿骨生物矿化2~6 d,通过透射电子显微镜和电子衍射观察骨生物矿化。结果：酸解提取的鼠尾Ⅰ型胶原蛋白能够重构成胶原纤维,并且具有特征性的D-Band结构。透射电子显微镜和电子衍射显示：矿化2d后,羟基磷灰石钙前体渗入胶原纤维,胶原纤维部分矿化；矿化6d后,胶原纤维内部完全矿化,形成Ⅰ型胶原蛋白/羟基磷灰石钙的仿生骨材料。结论：利用酸解法提取的鼠尾Ⅰ型胶原蛋白可以重构成胶原纤维,经矿化可形成与人类自体骨组织化学成分和分子结构一致的仿生骨材料。
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白介素-1受体拮抗剂对椎间盘纤维环胶原纤维代谢的影响
目的 探讨白介素-1受体拮抗剂(IL-1Ra)对双后肢大鼠椎间盘纤维环胶原代谢的影响.方法 建立双后肢大鼠模型36只,随机分为试验组和对照组,每组18只.试验组从造模当天即予腹腔注射IL-1Ra(50ng/kg体重),隔天重复注射至处死;对照组18只不予任何处理.于造模后1、3、6个月每组分别处死6只,完整取出L3～4椎间盘固定、切片,予SABC法进行免疫组化,使用图像分析系统对髓核中Ⅰ、Ⅱ型胶原染色进行面积扫描,并使用扫描电镜观察纤维环胶原纤维超微结构.结果 术后第1个月试验组与对照组椎间盘纤维环中Ⅰ、Ⅱ型胶原面积差异无显著性(P＞0.05),第3个月及第6个月试验组与对照组Ⅰ、Ⅱ型胶原面积相比差异有显著性(P＜0.01).结论 IL-1Ra对双后肢大鼠椎间盘纤维环中Ⅰ、Ⅱ型胶原的代谢有重要的作用.
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慢性冬眠心肌的间质重塑
目的:观察慢性冬眠心肌(CHM)间质变化及其对心功能的影响. 方法:对小型猪采用球囊扩张及内膜剥脱术,造成心脏左前降支中段狭窄、心肌慢性缺血,建立CHM模型.24只小型猪被分成:CHM组和假手术组,于模型建立后4周、12周终止实验.心脏切片以HE染色,透射电镜观察组织形态学;以苦味酸天狼星红(PSR)染色,偏光镜观察间质胶原纤维类型和比例;以免疫组化法测定间质糖蛋白、纤维结合蛋白(FN)和骨桥蛋白(OPN);以超声心动图观察左室收缩功能.结果:较之假手术组(1)CHM的间质空间扩大,成纤维细胞增多,胶原增生;(2)CHM的间质胶原容积分数(ICVF)、血管周围胶原容积分数(PCVF)及光密度积分(IOD)、FN和OPN均明显增加,并随时间延长而增加(P<0.01);(3)PSR染色偏光镜观察示CHM组Ⅰ型胶原大量聚集,排列紊乱,Ⅲ型胶原少量,Ⅰ/Ⅲ胶原比例增高;(4)CHM组的左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)、室壁增厚率(%WT)显著降低(P<0.01);(5)胶原纤维含量与LVFS、LVEF和%WT呈高度负相关(r=-0.754～-0.872,P<0.01).结论:慢性冬眠心肌出现间质重塑.
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阿魏酸钠对大鼠肺纤维化的预防作用
目的:探讨阿魏酸钠对博莱霉素所致大鼠肺纤维化的预防作用.方法:30只SD大鼠随机分为对照组,肺纤维化模型组和阿魏酸钠预防组,每组10只;模型组和预防组以气管内滴入博来霉素(5 mg/kg)建立肺纤维化动物模型,预防组采用阿魏酸钠(150 mg/kg)灌胃治疗;HE染色检测肺组织病理改变及细胞计数,胶原纤维染色检测总胶原纤维表达,免疫组织化学检测Ⅰ型胶原纤维.结果:与对照组比较,肺纤维化模型组肺组织内细胞数、肺内总胶原纤维及Ⅰ型胶原纤维均显著增加;阿魏酸钠预防组与肺纤维化模型组比较,肺组织内细胞数、肺内总胶原纤维及Ⅰ型胶原纤维均显著降低. 结论:阿魏酸钠能有效地减轻肺纤维化大鼠肺组织的炎症和纤维化程度,对肺纤维化有一定的预防作用.
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Col24α1基因低表达对成骨细胞碱性磷酸酶及矿化作用的影响
目的:探讨细胞外基质基因Col24α1在MC3T3-E1细胞成骨样分化过程中的表达情况,及其对分化过程中碱性磷酸酶活性和细胞矿化作用的影响.方法:培养MC3T3-E1细胞并诱导成骨分化,从基因及蛋白水平观察Col24α1在成骨细胞分化过程中的表达情况;构建Col24α1低表达慢病毒载体包装,滴度测定,细胞转染效率的验证;分别转染MC3T3-E1细胞,与空白组对照观察Col24α1沉默后碱性磷酸酶活性变化,细胞成骨矿化的影响.结果:Col24α1在成骨细胞在分化过程中表达随着矿化过程的进展而增加.使用慢病毒介导的RNA干扰(RNAi)技术,可以在MC3T3-E1成骨细胞中成功降低Col24α1表达,发现沉默Col24α1表达显著降低ALP活性和细胞矿化作用.结论:Col24α1可以调节成骨细胞的ALP活性和细胞矿化作用,其异常表达可能与骨骼病变相关.
