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白藜三醇对人脐静脉内皮细胞血管生成的影响及其可能机制
目的：探究白藜三醇（Res）对正常状态下人脐静脉内皮细胞（HUVEC）血管生成的影响及其可能机制。
方法：体外培养HUVEC，实验分为：DMEM高糖（<4500 mg/L）培养基培养组（正常组）、白藜三醇组（药物组）、白藜三醇+磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）阻断剂组（LY294002，药物阻断剂组1）、LY294002组（阻断剂组1）、白藜三醇+NG-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐组（一氧化氮合酶阻断剂L-NAME，药物阻断剂组2）、L-NAME组（阻断剂组2），其中LY294002为磷脂酰肌醇3-激酶阻断剂。采用CCK-8法检测细胞增殖情况；免疫印迹（Western blot）法检测蛋白激酶B（Akt）、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、磷酸化内皮型一氧化氮合酶（p-eNOS）蛋白的表达；亚硝酸还原酶法检测一氧化氮（NO）的水平；迁移小室（transwell chamber）检测内皮细胞的迁移能力；小管形成实验检测内皮细胞的体外小管形成能力。
结果：①药物组（1、5μmol/L）与正常组相比细胞增殖增加（P<0.01）；药物组（5μmol/L）与药物组（0.2、10、20μmol/L）相比细胞增殖增加（P<0.01）；药物组（20μmol/L）对细胞增殖有抑制作用（P<0.01），差异均有统计学意义。②药物组（5μmol/L ）较正常组p-Akt、p-eNOS蛋白表达增加（P<0.05~0.01），NO水平增加（P<0.05），差异均有统计学意义；药物阻断剂组1 p-Akt、p-eNOS蛋白表达与药物组比较均减低（P均<0.01），NO水平减低（P<0.05）；药物阻断剂组1（5μmol/L）较阻断剂组1 p-Akt蛋白、p-eNOS蛋白及NO差异均无统计学意义（P均>0.05）。③细胞迁移及小管形成实验：药物组（5μmol/L）内皮细胞迁移率及体外小管形成数量大于正常组（P<0.01），药物阻断剂组2内皮细胞迁移率及体外小管形成数量小于药物组（P<0.01）。
结论：白藜三醇可能通过激活PI3K/Akt/eNOS信号通路诱导正常状态下内皮细胞NO水平的增加，从而促进内皮细胞增殖、迁移及体外小管形成。关键词： 白藜三醇 磷酸化蛋白激酶B 磷酸化内皮型一氧化氮合酶 一氧化氮 血管生成 -
白藜三醇对兔心肌梗死后血管新生的诱导作用
目的:探讨白藜三醇对兔心肌梗死后血管新生的诱导作用及可能机制.方法:32只新西兰白兔随机分为假手术组、手术对照组、白藜三醇组、消心痛组,每组8只.除假手术组,其余兔建立心肌梗死模型.术后予溶剂、白藜三醇或消心痛不同药物喂养.两周后,检测各组心肌梗死面积及梗死边缘区微血管密度(microvessel density,MVD)、血管内皮生长因子-A(VEGF-A)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达水平.结果:白藜三醇组、消心痛组较假手术组、手术对照组能明显增加梗死边缘区微血管密度及VEGF-A、IGF-1、bFGF的表达(P<0.05),白藜三醇组、消心痛组梗死面积小于手术对照组(P<0.05).手术对照组较假手术组VEGF-A、IGF-1表达增加(P<0.05),但bFGF表达两组之间无明显变化(P>0.05);白藜三醇组IGF-1的表达水平较消心痛组明显增加(P<0.05),VEGF-A、bFGF两组之间无统计学差异(P>0.05).结论:在缺血缺氧环境下,机体可启动心肌梗死边缘区的血管生成,但作用强度有限;白藜三醇与消心痛均可促进心肌梗死后边缘区血管生成,有利于冠状动脉侧支循环的建立,减小心肌梗死面积;白藜三醇诱导血管发生与多种血管生长因子表达增多相关,主要与介导IGF-1高表达相关.
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探讨白藜三醇抑制快速电刺激乳鼠心肌细胞氧化应激损伤及其机制
目的：探讨白藜三醇（Resveratrol，RSV）对快速刺激乳鼠心肌细胞氧化应激损伤的保护机制。方法：本实验采用胰酶和胶原酶双酶法及差速贴壁法分离新生大鼠心肌细胞和成纤维细胞。心肌细胞随机分为5组：空白对照组、快速电刺激组（RES组）、快速电刺激+烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化酶抑制剂夹竹桃麻素组（RES+APO组）、快速电刺激+白藜三醇组（RES+RSV组）、快速电刺激+钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶抑制剂组（RES+AIP组）。为了证实白藜三醇是否还通过蛋氨酸亚砜还原酶—氧化型钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶（MsrA-OX-CaMKⅡ）途径对心肌细胞产生保护作用。除了上述5组，另设了MsrA竞争性阻断剂0.5%二甲基亚砜（DMSO）对照组（DMSO对照组）和RSV+DMSO组，RES+RSV+DMSO组。细胞计数Kit-8（CCK-8）法检测心肌细胞活性以确定白藜三醇的佳浓度，采用酶联免疫吸附检测法（ELISA）检测细胞培养液中AngⅡ水平以选择佳心肌细胞电刺激时间。流式细胞仪检测心肌细胞内活性氧水平；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测心肌细胞MsrA、NADPH氧化酶4（Nox4）、NADPH氧化酶2（Nox2）、NADPH氧化酶p22phox亚基（P22phox）、OX-CaMKⅡ、凋亡相关激酶半胱氨酸蛋白酶3（Caspase-3）、Caspase-3剪切蛋白表达。结果（：1）与空白对照组比，RES组心肌细胞AngⅡ分泌显著增加，同时Nox4、Nox2及P22phox、OX-CaMKⅡ、Caspase-3剪切蛋白的表达水平显著增加。（2）与RES组比，RES+APO组、RES+RSV组和RES+AIP组的活性氧水平降低， RES+RSV组降低更明显。（3）与RES组比较，RES+APO组、RES+RSV组的Nox4、Nox2及P22phox、OX-CaMKⅡ、Caspase-3剪切蛋白的表达水平降低，RES+AIP组仅Nox2、OX-CaMKⅡ及Caspase-3剪切蛋白表达水平降低。（4）加入MsrA抑制剂二甲基亚枫（DMSO）后，白藜三醇抑制快速电刺激导致的Caspase-3剪切蛋白表达作用减弱。结论：白藜三醇对快速电刺激乳鼠心肌细胞具有保护作用，其机制可能是抑制NADPH氧化酶及增加MsrA表达，从而减少乳鼠心肌细胞氧化应激损伤。
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白藜三醇促进缺氧条件下人脐静脉内皮细胞的血管生成作用
目的:探讨白藜三醇(Res)对氯化钴(CoCl2)诱导缺氧的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的血管生成作用的影响及可能机制.方法:体外培养HUVEC分5组:DMEM高糖(＜4500 mg/L)培养基培养细胞组(正常组)、CoCl2+DMEM高糖培养基(缺氧组)、缺氧+LY294002(阻断剂组)、缺氧+白藜三醇(药物组)、缺氧+白藜三醇+LY294002(药物阻断剂组).采用CCK-8法检测细胞增殖情况;采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测低氧诱导因子1 α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)的表达;免疫细胞化学的方法检测HIF-1α的蛋白表达;采用transwell chamber(迁移小室)检测内皮细胞的迁移能力;体外血管形成实验检测内皮细胞的体外血管形成能力.结果:①CCK-8:缺氧组及药物组(0.1、1、5、10 μmol/L)与正常组相比A490值升高(P均＜0.01);药物组(1、5μmol/L)与缺氧组比A490值升高(P均＜0.01).尤其药物组5μmol/L A490值明显升高(P＜0.01).②蛋白免疫印迹:缺氧组较正常组HIF-1 α、VEGF、p-Akt蛋白表达均增加(P均＜0.05);药物组(5 μmol/L)与缺氧组相比H1F-1α、VEGF、p-Akt蛋白表达均增加(P均＜0.01);药物阻断剂组(5μmol/L)较阻断剂组HIF-1 α、VEGF、p-Akt蛋白表达比较差异均无统计学意义(P均＞0.05).③免疫细胞化学:缺氧组胞内HIF-1 α阳性表达,显色呈黄褐色;药物组(5μmol/L)胞内HIF-1 α强阳性表达,显色呈深黄褐色.④transwell chamber:药物组(5 μmol/L)内皮细胞迁移率大于缺氧组(P＜0.01).⑤体外血管形成实验:药物组(5 μmol/L)在体外的血管形成数量明显大于缺氧组(P＜0.01).结论:白藜三醇可能是激活磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI-3K)/Akt通路促进HIF-1 α聚集,从而促进血管的新生.
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白藜芦醇对快速起搏右心房诱发的持续性心房颤动猪心房结构重构的影响
目的 观察快速起搏猪右心房制备持续性心房颤动(AF)的效果,探讨白藜芦醇(RES)干预对持续性AF猪的心房结构重构的影响.方法 18只小家猪(雌雄不拘)按完全随机设计的分组方法(采用动物编号和随机分组表)分为起搏组(ATP组)、假手术组(Sham组)和RES干预组各6只,采用Seldinger血管穿刺技术送入双极电极至右心房并连接实验用起搏器(AOO),ATP组和RES干预组的右心房快速起搏(500次/min)2周,制备持续性AF实验模型.3组猪分别于起搏前和起搏2周后进行电生理和经胸壁超声心动图检查,以检测AF的持续时间、左右心房大小及左心房收缩末面积.RES干预组猪于起搏前1周开始服用RES(2.5 mg·kg-1·d-1).起搏2周后取各组猪的左右心房组织标本,观察心房组织形态学和间质纤维化的改变,用免疫组织化学分析软件计算胶原容积分数(CVF)来反映间质纤维化程度.结果 (1)起搏2周后,ATP组AF的发生率较RES干预组明显升高(100％比66.7％,x2=10,P＜0.01)、持续时间延长[(26.41±9.89)min比(9.56±1.36) min,F=10.7,P=0.01].(2)起搏2周后,ATP组和RES干预组猪的左右心房明显比起搏前增大;但RES干预组的左心房收缩末面积明显低于ATP组[(599.2±8.7) mm2比(744.3±29.9) mm2,F=130.61,P＜0.01].(3)RES干预组左右心房组织CVF明显低于ATP组(56％±6％比73％±7％;59％±6％比75％±7％,均为P＜0.01).结论 快速起搏猪右心房可成功制备持续性AF模型;RES干预可以明显抑制快速起搏右心房诱发的持续性AF猪的心房结构重构,减少AF的发生.
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白藜三醇对血小板聚集反应的影响
目的 据报道,适量饮用红葡萄酒比其他酒精饮料更有益于预防动脉粥样硬化和冠心病,这种有益作用越来越多地被归功于红葡萄酒中的多酚类化合物,如白藜三醇,本研究旨在观察白藜三醇对离体和在体条件下血小板聚集反应的影响.方法 以凝血酶、二磷酸腺苷(adenosine diphosphate, ADP)、和胶原为诱导剂,采用Born氏法测定血小板聚集率.结果 离体条件下白藜三醇明显抑制凝血酶、ADP或胶原诱导的健康人的血小板聚集反应,作用呈剂量依赖性；高脂饮食造成的高胆固醇血症增强了ADP诱导的血小板的聚集反应；同时给予白藜三醇(4?mg*kg-1*d-1)虽未能降低血脂水平,但可以抑制高脂饮食对兔血小板聚集的增强作用.结论 白藜三醇在离体或在体条件下均具有抑制血小板聚集的作用,此作用可能为白藜三醇抗动脉粥样硬化的机制之一.
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白藜三醇对血小板聚集反应的影响
目的 据报道,适量饮用红葡萄酒比其他酒精饮料更有益于预防动脉粥样硬化和冠心病,这种有益作用越来越多地被归功于红葡萄酒中的多酚类化合物,如白藜三醇,本研究旨在观察白藜三醇对离体和在体条件下血小板聚集反应的影响.方法 以凝血酶、二磷酸腺苷(adenosine diphosphate, ADP)、和胶原为诱导剂,采用Born氏法测定血小板聚集率.结果 离体条件下白藜三醇明显抑制凝血酶、ADP或胶原诱导的健康人的血小板聚集反应,作用呈剂量依赖性；高脂饮食造成的高胆固醇血症增强了ADP诱导的血小板的聚集反应；同时给予白藜三醇(4?mg*kg-1*d-1)虽未能降低血脂水平,但可以抑制高脂饮食对兔血小板聚集的增强作用.结论 白藜三醇在离体或在体条件下均具有抑制血小板聚集的作用,此作用可能为白藜三醇抗动脉粥样硬化的机制之一.
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白藜三醇对黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶所致平滑机细胞增殖的干预作用
目的探讨红葡萄酒( RW)是否对血管 SMC增殖具有抑制作用.方法以培养幼兔主动脉平滑肌细胞为研究对象,分别给予不同浓度黄嘌呤 /黄嘌呤氧化酶和 /或白藜三醇,采用免疫组织化学、 3H- TdR掺入试验和 MTT法技术检测不同处理对平滑肌细胞的增殖作用.结果 RES呈剂量依赖性拮抗 X/XO对 VSMC的促增生效应;终浓度 50 umol/L的 RES对 X 200 umol/L/XO 200 u/L所致促 VSMC的增殖效应即有抑制作用 (P< 0.05);终浓度 200 umol/L的 RES对 X 200 umol/L/XO 200 u/L所致促 VSMC的增殖效应则具有极显著的抑制作用( P<0.001).结论红葡萄酒中的有效成份白藜三醇可拮抗黄嘌呤 /黄嘌呤氧化酶所致平滑肌细胞的作用,这可能有助于减轻或防治氧化损伤对血管平滑肌细胞增殖的影响.
关键词： 血管 平滑肌 增殖 黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶 白藜三醇 -
红葡萄酒抗动脉粥样硬化的效应及机理
红葡萄酒对心血管疾病有保护作用的研究成果已引起了人们的极大关注.近年来,大量流行病学资料有证据支持适量饮用红葡萄酒与冠心病的发病率呈负相关,能够明显减少其死亡率.红葡萄酒的主要有效成份有六种,乙醇、酚酸、黄酮醇、白藜三醇(resveratrol)、多聚花色素、单聚儿茶酸.这些酚类化合物中含量多、活性强的是白藜三醇.它们在脂蛋白代谢及氧化修饰、血小板粘附与聚集、白细胞粘附、改善血管舒张功能及与内膜有关的组织因子和细胞因子的调节等方面的作用为动脉粥样硬化的防治提供了一个崭新的领域.
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白藜三醇对血管内皮剥脱术后内膜增殖的影响
目的:观察白藜三醇对兔髂动脉内皮剥脱后血管内膜增殖的作用.方法:建立兔髂动脉内皮剥脱后血管内膜增殖模型,从术前1周至术后4周,给予2～4 mg/(kg@d)的白藜三醇.结果:白藜三醇高剂量可有效地抑制血管内膜的增生,使内膜增生指数从模型组(M组)的0.41降低到白藜三醇高剂量组(H组)的0.28(P＜0.01);相对管腔面积从M组的0.39增加到H组的0.53(P＜0.001);相同管腔直径的增殖内膜中平滑肌细胞(SMC)数目从M组的1 935减少到H组的1 115(11＜0.05).结论:提示白藜三醇可抑制血管内膜的增殖,对于预防血管成形术后再狭窄可能具有潜在的临床应用价值.
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白藜三醇抑制血管平滑肌细胞增殖及其相关机制
目的 探讨白藜三醇(RSV)对大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的调控及其相关机制.方法 采用组织块贴壁法体外培养VSMCs,细胞分为3组:空白组(CON组)、FBS组(含20％胎牛血清的培养基)、RSV组.CCK-8法检测血管平滑肌细胞活性以确定RSV佳作用浓度及时间,qPCR法检测各组细胞内microRNAs的表达水平.为了证实RSV是否通过调控miR-21的表达发挥抗VSMCs增殖作用,除了上述3组,另增加miR-21过表达组(miR-21 mimics组)和沉默组(miR-21 inhibitor组):miR-21 mimics+ RSV组、miR-21 inhibitor组、miR-21 mimics组和miR-21转染阴性对照组(NC组),Western blot检测各组人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN)、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达水平,流式细胞术(FCM)检测各组细胞周期明确细胞增殖状况.结果 与CON组相比,FBS组miR-21表达明显上调(P＜0.05),RSV组miR-21表达明显下调(P＜0.05).与CON组相比,FBS组和miR-21 mimics组PTEN蛋白表达量下降(P＜0.05),而细胞明显增殖(P＜0.05);RSV组和miR-21 inhibitor组PTEN蛋白表达量升高(P＜0.05),PCNA蛋白表达下降,细胞增殖明显抑制(P＜0.05).与miR-21 mimics+ RSV组相比,miR-21 mimics组PTEN蛋白表达量下降,而PCNA蛋白表达增多,细胞明显增殖(P＜0.05),RSV组则相反(P＜0.05).结论 RSV通过抑制miR-21表达而调控其下游靶基因这一途径在大鼠VSMCs中发挥抗增殖作用.
关键词： 血管平滑肌细胞 白藜三醇 MicroRNA-21 PTEN 增殖细胞核抗原 -
白藜三醇对人脐静脉内皮细胞增殖及NO表达的影响
目的：观察白藜三醇对正常状态下人脐静脉内皮细胞（ human umbilical vein endothelial cells ， HU-VECs）磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）、磷酸化内皮型一氧化氮合酶（p-eNOS）及一氧化氮（NO）表达的调节作用，探讨白藜三醇对HUVECs增殖的影响及可能机制。方法实验分组：DMEM高糖（＜4．5 mg/L）培养基培养组（正常组）、白藜三醇组（分为0．2、1、5、10、20μmol/L 5个剂量亚组）、白藜三醇＋LY294002组、LY294002组（阻断剂组）。其中LY294002为磷脂酰肌醇3-激酶（ phosphatidylinositol 3-kinase，PI3-K）抑制剂。应用CCK-8法检测细胞增殖情况；Western blot检测各组细胞内蛋白激酶B（ Akt）、p-Akt、内皮型一氧化氮合酶（ eNOS）、p-eNOS蛋白的表达；硝酸还原酶法检测细胞培养液中NO的浓度。结果①白藜三醇组1、5μmol/L 2个剂量亚组与正常组相比细胞增殖增加（P＜0．01），5μmol/L亚组与0．2、10、20μmol/L亚组相比细胞增殖增加（P＜0．01）；白藜三醇20μmol/L对细胞增殖有抑制作用（P＜0．01）。②与对照组比较，白藜三醇组p-Akt（P＜0．01）、p-eNOS（P＜0．05）蛋白表达增加；与白藜三醇组比较，白藜三醇＋LY294002组p-Akt、p-eNOS蛋白表达降低（P＜0．01）。③与对照组比较，白藜三醇组NO表达增加（P＜0．05）；与白藜三醇组比较，白藜三醇＋LY294002组NO表达降低（ P＜0．01）。结论白藜三醇可能通过PI3-K/Akt/eNOS信号通路诱导正常状态下内皮细胞NO表达的增加，从而促进内皮细胞增殖。
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白藜三醇通过HIF途径对快速心房起搏猪心房结构重构的抑制作用
目的 探讨白藜三醇(resveratrol,Res)对快速心房起搏引起的猪右心房结构重构的影响以及作用机制.方法 快速右心房起搏建立猪慢性心房纤颤模型.实验分为假手术(sham)组、快速心房起搏(RAP)组和RAP+白藜三醇干预组(Res组).2周后取右心房心肌组织,Masson三色染色法比较各组心肌间质胶原沉积,Western blot和RT-PCR法检测各组心肌组织中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白和mRNA表达水平.结果 RAP组HIF-1α、VEGF、MMP-9蛋白及mRNA含量明显高于sham组(P<0.05)和Res组(P<0.05).结论 白藜三醇可能通过降低HIF-1α的表达这一途径来改善猪心房纤颤心肌纤维化,减轻心房结构重构.
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白藜三醇对缺氧状态下人脐静脉内皮细胞增殖及HIF-1α表达的影响
目的 研究白藜三醇(resveratrol,Res)对缺氧状态下人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)增殖及低氧诱导因子(hypoxia-inducible factor 1,HIF-1 α)表达的影响.方法 白藜三醇预孵育HUVEC 2 h后,采用氯化钴(CoCl2)化学方法制作缺氧模型,实验分为3组进行:正常组(NC)、缺氧组(HY)、药物组(0.1、1、5、10、50 μmol/L Res).应用CCK-8法检测各组HUVEC增殖情况,免疫细胞化学法和Western blot检测各组细胞内HIF-1 α的表达.结果 ①缺氧组及药物组(0.1、1、5、10 μmol/L)与正常组相比细胞增殖增加(P＜0.01)；1、5μmol/L药物组与缺氧组比较细胞增殖增加(P＜0.01),5μmol/L药物组与其他各浓度组比较细胞增殖增加(P＜0.01).②正常组HUVEC胞质内HIF-1α仅微量表达；缺氧组胞质内HIF-1α阳性表达,较正常组增多,显色呈黄褐色；药物组(5 μmol/L)胞质内HIF-1 α强阳性表达,显色呈深黄褐色.③缺氧组与正常组相比HIF-1 α蛋白表达增加(P＜0.05),药物组(1、5 μmol/L)与正常组相比HIF-1 α蛋白表达增加(P＜0.01)；1 μmol/L药物组与缺氧组相比HIF-1α蛋白表达增加(P＜0.05),5μmol/L药物组明显增加(P＜0.01).结论 白藜三醇可能通过促进HIF-1α的表达而促进血管内皮细胞增殖,从而对新生血管的形成起到一定促进作用.
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白藜三醇抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用机制
目的 探讨植物雌激素白藜三醇(RV)对大鼠血管平滑肌细胞增殖的调控及可能机制.方法 用植块贴壁法体外培养大鼠血管平滑肌细胞,使用Western blotting检测各组雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)、P38、P-P38、C-myc蛋白的表达水平.实验分为6组(每组n=6):正常对照组(NC组),含10% 胎牛血清(FBS)的DMEM; RV干预组(RV组),50 μmol/L RV干预24 h; 血管紧张素Ⅱ组(AngⅡ组),1 μmol/L AngⅡ干预12 h;RV+ AngⅡ组,1 μmol/L AngⅡ干预12 h,然后加入50 μmol/L RV干预24 h;RV+ICI182780组,1 μmol/L ICI182780干预2 h,然后加入50 μmol/L RV干预24 h;RV+ICI182780+AngⅡ组,1 μmol/L ICI182780干预2 h,然后加入1 μmol/L AngⅡ干预12 h,后加入50 μmol/L RV干预24 h.结果 各组P38蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05);ERα、ERβ蛋白的表达:RV组ERα、ERβ蛋白的表达水平较正常对照组增高(P＜0.01),而RV+ICI182780组与RV组比较表达降低(P＜0.01);C-myc蛋白的表达:RV组与NC组比较表达降低(P＜0.01),AngⅡ组与NC组比较表达增高(P＜0.01),AngⅡ组与RV组比较表达增高(P＜0.01),RV+AngⅡ组与RV组比较表达增高(P＜0.01),RV+ICI182780+AngⅡ组与RV+AngⅡ组比较表达降低(P＜0.05);P-P38蛋白的表达:RV组与NC组比较表达降低(P＜0.01),AngⅡ组与NC组比较表达增高(P＜0.01),AngⅡ组与RV组比较表达增高(P＜0.01),RV+AngⅡ组与RV组比较表达增高(P＜0.01),RV+ICI182780+AngⅡ组与RV+AngⅡ组比较表达降低(P＜0.01).结论 白藜三醇可以抑制C-myc的表达,抑制P38的磷酸化,此作用可被ICI182780阻断,说明白藜三醇可能是通过ER进而抑制C-myc的表达和P38的磷酸化发挥抗平滑肌细胞增殖的作用.
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白藜三醇对房颤所致猪心房组织中MMP-1、MMP-9、TIMP-1表达的影响
目的 研究白藜三醇对心房纤颤(简称房颤)猪心房组织基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)蛋白表达的影响,探讨白藜三醇抗心肌纤维化作用及可能机制.方法 18只小家猪通过起搏器植入法建立猪房颤模型,随机分为3组(每组6只):对照组、房颤组、白藜三醇干预组(2.5 mg·kg-1·d-1).苏木精-伊红染色、Masson染色法观察心房组织形态学和间质纤维化,Western blotting法检测心房组织中MMP-1、MMP-9、TIMP-1蛋白表达水平.结果 与对照组相比,房颤组MMP-1、MMP-9显著增加(P＜0.05),而TIMP-1则显著降低(P＜0.05);与房颤组相比,白藜三醇干预组MMP-1、MMP-9显著降低(P＜0.05),而TIMP-1则显著增加(P＜0.05).结论 白藜三醇可能通过调节心肌组织中MMP-1、MMP-9、TIMP-1的表达而发挥抗心肌纤维化的作用.
关键词： 心房纤颤 心肌纤维化 白藜三醇 基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶抑制剂 -
白藜三醇对快速刺激离体兔心房氧化应激的影响
目的 观察白藜三醇(RES)对快速刺激离体兔右房自由基代谢的影响,探讨其心脏保护作用的可能机制.方法 32只家兔建立离体心脏Langendorff灌流模型,电极放置右心耳处,利用BL-420S生物机能系统以电压4.0V,频率600次/分进行刺激,随机分为对照组(不起搏),快速起搏组(RAP组),还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶(NADPH)抑制剂夹竹桃麻素组(APO组),RES组,每组8只.对照组离体灌流70 min,不起搏;RAP组离体灌流30 min,快速起搏心房40 min;APO、RES组分别离体药物处理30 min,快速起搏心房40 min.灌流结束后,留存心房肌组织.比色法测定超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、体内活性氧(ROS)、NADPH活性,HE染色检测病理变化,免疫组化半定量分析calpain1的表达,用western blot方法检测calpain1、cTnT和gp91 phox蛋白的表达,逆转录聚合酶链式反应方法检测calapin1、p22phox和gp91phox的mRNA表达.结果 ①与对照组比较,RAP、APO、RES组MDA、ROS和NADPH的表达均增加,SOD含量减少;与RAP组比较,APO、RES组MDA、ROS和NADPH表达均降低,SOD含量增加(P均＜0.05);而APO组与RES组比较,相关氧化应激指标无差异;②对照组心肌细胞排列整齐;RAP组心肌细胞排列紊乱、稀疏,组织结构破坏;APO组心肌细胞排列较紧凑;RES组心肌细胞较APO组排列稍紊乱、稀疏;③与对照组比较,RAP、APO、RES组calpain1、gp91phox蛋白及mRNA表达和p22phox的mR-NA表达均增加,cTnT蛋白表达降低(P＜0.05);与RAP组比较,RES、APO组calpain1、gp91phox蛋白及mRNA表达和p22phox的mRNA表达均减低,cTnT蛋白表达增加(P＜0.05);但与APO组比较,RES组相关蛋白及mRNA表达无差异.结论 RES可能通过部分抑制NADPH氧化酶活性,从而减少氧自由基的生成,进而减轻快速起搏右房导致的氧化应激损伤.
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白藜三醇对黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶致平滑肌细胞核因子-κB活化及蛋白激酶Cα表达的干预
为探讨红葡萄酒的有效成分之一白藜三醇拮抗黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶对血管平滑肌细胞内核因子活性和蛋白激酶Cα表达的影响,以培养幼兔主动脉平滑肌细胞为研究对象,分别给予不同剂量的黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶和/或白藜三醇,采用噻唑蓝法、电泳迁移率改变分析法、免疫组织化学和原位杂交技术检测不同处理组平滑肌细胞增殖及核因子的活性和蛋白激酶Cα蛋白及其mRNA的表达变化.结果发现,不同浓度黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶的系统所产生的氧自由基可明显增加体外培养血管平滑肌细胞增殖及核因子的活性和蛋白激酶蛋白Cα及其mRNA的表达水平,白藜三醇呈剂量依赖性的抑制氧自由基对体外培养血管平滑肌细胞的增殖作用和核因子的活性,并下调蛋白激酶Cα的表达水平;其中以终浓度100μmol/L的白藜三醇对氧自由基介导的核因子活性的抑制作用强,终浓度200μmol/L的白藜三醇对血管平滑肌细胞的增殖作用及蛋白激酶Cα表达的抑制作用强.实验结果提示,红葡萄酒的有效成分白藜三醇可能是通过抑制核因子的诱导合成而阻断黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶系统所产生氧自由基的促蛋白激酶Cα的表达效应,进而抑制平滑肌细胞增殖,发挥其抗动脉粥样硬化的作用.
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红葡萄酒及白藜三醇对血小板聚集的影响
观察红葡萄酒及其提取物白藜三醇对离体和在体条件下血小板聚集的影响,以探讨它们对心血管系统的保护作用机制.以高胆固醇饮食造成实验性高脂血症,以凝血酶、二磷酸腺苷和胶原为诱导剂,采用Born氏法测定血小板聚集率.结果发现,高脂饮食明显增加兔血浆胆固醇水平,并伴有血小板聚集的明显增强.同时给予红葡萄酒、去酒精红葡萄酒和白藜三醇可以消除高脂饮食对兔血小板聚集的增强作用.离体条件下白藜三醇明显抑制凝血酶、二磷酸腺苷及胶原诱导的健康人的血小板聚集.结果提示,红葡萄酒及白藜三醇均具有抑制血小板聚集的作用,此作用可能为白藜三醇抗动脉粥样硬化的机制之一.
