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重症感染时下丘脑-垂体-肾上腺轴功能的临床意义及激素的应用问题
重症感染是ICU的主要问题之一,具有很高的发病率和死亡率.重症感染时下丘脑-垂体-肾上腺轴(hypothalamic-pituitary-adrenalaxis,HPAA)的激活是机体防御反应的主要决定因素,肾上腺皮质作为HPAA的主要功能器官,其产生和分泌的皮质醇对于机体应激和维持机体稳态具有重要意义.
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阿尔茨海默病、血管性痴呆与垂体-肾上腺轴功能关系的研究
为探讨阿尔茨海默病(AD)、血管性痴呆(VD)患者垂体-肾上腺轴功能的变化及其与疾病发病机制之间的关系,我们分别对AD、VD、不伴痴呆的多发性脑梗死(MCI)及健康对照者血皮质醇、促肾上腺皮质激素(ACTH)的含量进行了检测,并对AD、VD及MCI患者进行了小剂量地塞米松抑制试验,并就实验结果与AD、VD、MCI的相关性及意义进行分析,报道如下.
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哮喘并反复呼吸道感染患儿垂体-肾上腺轴功能检测及分析
1996年1月至1998年12月,我们对哮喘并反复呼吸道感染(RRI)患儿垂体-肾上腺轴功能的变化进行观察,以进一步指导临床治疗.
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ACTH单克隆抗体的制备和鉴定
ACTH是垂体分泌的重要激素之一,测定血浆ACTH对下丘脑-垂体-肾上腺轴功能的评 价 具有重要意义。制备ACTH单克隆抗体,以期建立ACTH-IRMA方法。 ACTH或其片段与BSA经碳化二亚 胺偶联剂联接后制备免疫原,初次免疫为完全福氏佐剂乳化后在背部皮下多点注射,ACTH剂 量约40 μg,以后每隔4 w以不完全福氏佐剂乳化后在背部或腹腔交替注射4~6次,剂量减 半 。融合前3 d每天以无佐剂的ACTH联接物行腹腔注射,总剂量为60 μg。按常规方法进行细 胞融合,每周换液2至3次。阳性克隆的筛选:培养上清液抗体检测按常规RIA进行,计算结 合率,以结合率大于3倍的非特异结合率为阳性。阳性孔经有限稀释法亚克隆3~4次后获得 2株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株,5G2为ACTH1-28片段所得,D3为ACTH1-13片 段所得。扩增 细胞,一部分冻存,另一部分种于已致敏的BALB/c小鼠腹腔产生含抗体的腹水。收集的腹水 稀释后,以RIA法测定各稀释点抗体的结合率,计算5G2和D3腹水抗体在50%结合率时的终稀 释度分别可达1:5 000和1:2 000。以 1%琼脂双扩(梅花孔)法作抗体亚类鉴定,5G2和D3抗 体 均为IgG1类型,轻链为λ链。根据标准曲线参数,通过公式6y0/(1- y0)(2- y0)(4- y0)( 3ED50-ED25) 计算5G2和D3抗体的亲和常数分别为5.1×109和4.9 ×107 M-1。以ACT H不同片段作 交叉反应试验,进行特异性鉴定。5G2和D3抗体与ACTH1-10、ACTH1-17、 ACTH1-24的交叉反 应率分别为0.04%、8.70%、100.00%和0、35.30%、69.30%。据此推断5G2抗体识别ACTH 氨基酸序列 的17~28片段,D3抗体识别ACTH氨基酸序列的10~13片段。 以羊抗鼠IgG-Sephadex G75偶 联 物层析柱,进行腹水抗体的亲和纯化。按本室的方法将纯化的5G2和D3抗体分别包被马来酸酐 -苯乙烯共聚物塑料管,制备固化抗体管,以125I-ACTH做固相放免, 通过大结合率 确定5G2和D3抗体的饱和结合量分别为5 μg和20 μg,为建立固相IRMA奠定了基础。 ACTH是 垂体分泌的39肽分子,由于ACTH分子量小,在体内半衰期短;ACTH氨基酸序列只在第26至 33之间有3个氨基酸残基有种属差异,小鼠的免疫细胞不易识别,终导致小鼠不易产生抗 体。在本实验中只有18.3%的小鼠血清抗体阳性,而且抗体滴度不高。我们经过反复筛选获 得的2株抗体分别识别ACTH氨基酸序列的第17~28片段和第10~13片段,其亲和常数分别达 109和107 M-1, 用于液相放射免疫分析不足以达到理想的灵敏度,据文 献报道使用2个单 克隆抗体,建立IRMA方法,则灵敏度可显著提高。由于这2株单抗识别的位点不同,有望建 立ACTH-IRMA方法。
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甲状腺内注射地塞米松对桥本甲状腺炎患者垂体-肾上腺轴功能的影响
地塞米松(Dex)是人工合成的糖皮质激素,在自身免疫性疾病的治疗中具有独特的功效.我们曾应用甲状腺内注射Dex联合口服甲状腺素(T4)治疗伴亚临床甲状腺功能减退(SCH)的桥本甲状腺炎(HT),疗效好,不良反应少[1].但该治疗是否会对垂体一肾上腺轴产生抑制作用,国内、外尚未见报道.本研究旨在观察甲状腺内注射Dex对伴SCH的HT患者垂体-肾上腺轴功能的影响.