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灵杆菌LPS的抑瘤作用研究
灵杆菌LPS(Bacterium Prodigiosum LPS, BP-LPS)是从非致病性革兰氏阴性菌(产色型灵杆菌BP-S003号)中提取的一种活性物质。以三氯乙酸法(Trichloroacetic Acid, TCA)及酚水法(Phonel Water, PW)两种不同工艺提取的BP-LPS，进行了抑瘤试验。产色型灵杆菌BP-S003号(来源于黑龙江省应用微生物研究所)作为菌种，经发酵后收集菌体，分别经TCA法与PW法提取纯化得BP-LPS。TCA法提取物简称BP(T)-LPS；PW法提取物简称BP(P)-LPS。
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紫杉醇自组装核壳型纳米胶束的制备与性能
本文合成了聚乙二醇一聚谷氨酸苄酯(polyethylene glycol-polybenzyl-L-glutamate,PEG-PBLG)两亲嵌段共聚物,并采用超微透析法制备了紫杉醇/PEG-PBLG核壳型纳米胶柬.通过高效液相色谱测定了胶束的载药量及药物包封率;采用动态光散射法测定了胶束的粒径及分布;通过体外试验研究了紫杉醇/PEG-PBLG胶束的释药特性;采用四噻唑蓝法考察了紫杉醇/PEG-PBLG胶束的体外细胞毒性;通过裸鼠的抑瘤试验评价了紫杉醇胶束对人肝癌细胞的疗效.结果表明,PEG-PBLG胶束能包埋疏水性药物紫杉醇;紫杉醇/PEG-PBLG胶柬的粒径为80～265 nm,且随着载体共聚物PBLG嵌段相对分子质量的升高而增大;紫杉醇/PEG-PBLG胶束的体外释放具有缓释特性;当紫杉醇浓度大于20 μg·mL-1时,紫杉醇/PEG-PBLG胶束的细胞毒性低于相应浓度的紫杉醇/聚氧乙烯蓖麻油注射剂(P＜0.05),紫杉醇/PEG-PBLG胶柬具有与紫杉醇/聚氧乙烯蓖麻油注射剂相似的抑制肿瘤作用.综上所述,紫杉醇/PEG-PBLG纳米胶束具有较均匀的粒径及粒径分布、缓释特性、低毒和较好的抗肿瘤作用.
关键词： 紫杉醇 聚乙二醇-聚谷氨酸苄酯嵌段共聚物 纳米胶柬 细胞毒性 抑瘤试验 -
九州虫草中核苷类成分的HPLC法测定
虫草属[Cordyceps(Fr.)Link]真菌是一大类昆虫病原真菌,迄今记载的已有360多种,在我国分布的有70多种[1].冬虫夏草为我国传统的名贵药材,具有很好的强壮滋补功效和多种医疗保健作用.由于其生长环境独特,加之人们盲目挖采,资源已临近枯竭.因此寻找冬虫夏草的替代品以满足市场需求已刻不容缓.九州虫草Cordyceps kyushuensis Kob.采自山东蒙山,现已通过无性型菌株回接天然寄主获得了人工栽培成功[2].根据现有的对该虫草与冬虫夏草的化学成分监测、生物药效、体外抑瘤试验及抗氧化性能研究,表明其具有较高的药用价值,有望替代价格昂贵的冬虫夏草应用于临床[3,4].
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硒蛋白抑制肿瘤的动物试验
目的采用自富硒豌豆中提取的硒蛋白进行抑瘤试验.方法受试硒蛋白制成经酶解和非酶解两种形式,给接种了小鼠肉瘤S180和小鼠肝癌HAC的ICR纯系小鼠分组饲以不同剂量和两种形式的硒蛋白口服液.结果两种硒蛋白液对S180的生长均有一定的抑制作用,大剂量组的抑制率分别达52.24%和55.88%,与对照组有显著差异(P＜0.001).两种硒蛋白使HAC荷瘤鼠的存活期分别可延长37.30%和27.78%.与对照组相比有显著差异(P＜0.001).结论饲用酶解硒蛋白的HAC荷瘤鼠其存活期高于饲用非酶解硒蛋白而与5-Fu相当.
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抗人VEGF单抗的研制及对肿瘤生长及转移的抑制作用
目的:为了确定人血管内皮细胞生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)在肿瘤生长及转移中的作用.方法:利用DNA重组技术表达人VEGF,以其为抗原免疫Balb/c小鼠,应用杂交瘤技术获得14株稳定分泌抗VEGF单抗的杂交瘤细胞株.结果:ELISA测定所分泌的单抗只与VEGF特异结合,与EGF、FGF、PDGF、TGFα及TNF等均无交叉反应.以豚鼠皮肤血管通透性实验(Miles)、鸡胚绒毛尿囊膜血管形成实验(CAM)及人脐带静脉血管内皮细胞增殖实验(HuVEC)鉴定单抗的中和活性,其中9株具有中和活性.在小鼠自发乳癌肺转移模型中进行的抑瘤试验显示,单抗D11对乳癌原发瘤的抑制率达83.4%,对肺转移的抑制率为71.9%.结论:具有中和活性的VEGF单抗能抑制肿瘤的生长和转移.
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肝癌组织中内质网蛋白基因表达及其功能的初步研究
为研究肝癌中内质网蛋白基因(RTN)表达及初步功能.利用免疫组化、真核转染、体内外抑瘤试验等方法.结果显示肝癌中RTN呈下调表达,RTN蛋白主要定位于细胞浆和细胞膜,并且与肝癌的淋巴结转移有关.转染RTN后,体外肝癌细胞生长率明显减少,一些基因表达发生改变,体内肿瘤抑制率为85.64%.转染RTN细胞产生肿瘤的坏死级别较高于其它两组.RTN可能作为候选抑癌基因在肝癌发生中起重要作用.
关键词： 内质网蛋白基因 肝癌 SMMC7721细胞系 抑瘤试验 -
冻存H22细胞在卡介苗抑瘤小鼠模型中的应用
目的 探讨冻存H22肝癌细胞应用于卡介苗抑瘤小鼠模型的可行性.方法 制备冻存H22细胞,分别将冻存10和83 d的H22细胞复苏,计算细胞存活率；将高(7.5×106个/ml)、中(5.0×106个/ml)、低(2.5×106个/ml)剂量的新复苏的H22细胞与1 mg/ml治疗用卡介苗混合后经左侧背部皮下免疫BALB/c小鼠,0.1 ml/只,对照组只接种相应浓度的H22细胞,接种后30 d,称量小鼠皮下瘤体重量,并计算试验组的抑瘤率,试验重复2次.结果 冻存10和83 d的H22细胞复苏后的存活率分别为85.45％和82.25％.所有对照组小鼠接种H22细胞后均有肿瘤形成,成瘤率均为100％;同一次试验中,各试验组瘤体重量均明显小于同剂量对照组(P＜0.05)；同一次试验中,各试验组间瘤体重量差异无统计学意义(P＞0.05)；不同次试验中,同剂量对照组间瘤体重量差异均有统计学意义(P＜0.05)；各试验组的抑瘤率均大于60％.结论 冻存H22细胞可满足抑瘤试验需要,但试验稳定性仍需改进.
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丙酮法处理短棒状杆菌制剂的效果
目的观察丙酮处理的短棒状杆菌制剂的毒性和免疫激活功能.方法用丙酮脱脂方法去掉短棒状菌的部分外膜蛋白及附着在菌体上的杂蛋白,制成制剂,与现用短棒制剂同时进行异常毒性试验、毒性试验、脾激活试验、抑瘤试验.结果丙酮处理后短棒状制剂比原短棒状制剂的毒性反应明显降低,免疫激活功能明显提高.结论丙酮处理后的短棒状制剂质量明显提高.
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A群链球菌制剂抑瘤试验中荷瘤细胞数量对生命延长率的影响
探讨A群链球菌制剂抑瘤试验中,荷瘤细胞(艾氏腹水癌细胞)的接种数量对试验结果的影响,选用接种不同数量艾氏腹水癌细胞的KM小鼠,进行A群链球菌制剂的抑瘤试验.结果显示,每只小鼠的癌细胞接种数量由100万下降至10万,抑瘤试验结果中小鼠的生命延长率呈上升趋势.
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N-CWS-PG的分离鉴定及抑瘤实验研究
为探索红色诺卡氏菌细胞壁骨架中肽聚糖成分的抑瘤作用,通过超声波法碎红色诺卡氏菌细胞获得细胞壁,获得的细胞壁经过酶解、有机溶剂提取去除色素,得到细胞壁骨架(N-CWS),N-CWS再经去脂、酸解处理得到肽聚糖(N-CWS-PG).对实验得到的提取物进行包括溶菌酶酶解处理、氨基酸分析、蛋白质含量的测定、脂类含量的测定、总糖含量的测定、氨基己糖的测定等化学鉴定.用实验提取的N-CWS-PG进行血清体外抑瘤试验,利用CCK-8法检测抑制效果;同时研究实验提取的N-CWS-PG对实体瘤小鼠的肿瘤抑制效果.实验结果表明;溶菌酶溶解实验和氨基酸分析结果证实所获取的目标物为肽聚糖,化学成分的测定结果表明其纯度达到97.20％;与对照组比较,血清学实验表明N-CWS-PG对S180细胞24,48 h的抑制率分别为9.72％,18.01％,实体瘤的抑制率为30.0％,实验结果证实N-CWS-PG具有抑制肿瘤细胞增殖的作用.
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紫杉醇纳米胶束冻干粉针剂的药效评价
目的 对紫杉醇/聚乙二醇-聚谷氨酸苄酯(PEG-PBLG)纳米胶束冻干粉针剂的抗肿瘤药效学进行考察.方法 采用MTT比色法、荷瘤裸鼠模型,对紫杉醇/PEG-PBLG纳米胶束冻干粉针剂在体内外的抗肿瘤效果进行研究,并与市售紫杉醇聚氧乙烯蓖麻油注射液进行比较.结果 当紫杉醇浓度≤10μg/ml时,紫杉醇/PEG-PBLG冻干粉针剂对体外HepG-2肝癌细胞的毒性低于相应浓度的市售紫杉醇注射剂(P＜0.01);而冻干粉针剂在移植瘤的肝癌裸鼠模型中,具有与市售紫杉醇注射剂相当的抑制肿瘤疗效(P＞0.05).结论 紫杉醇/PEG-PBLG冻干粉针剂具有与市售紫杉醇注射液相当的抗肿瘤作用,并且细胞毒性降低,有较为广阔的临床应用前景.
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胆甾醇基γ-聚谷氨酸载紫杉醇自组装纳米胶束的制备与性能
本文采用两亲性胆甾醇基γ-聚谷氨酸纳米胶束(γ-PGA-graft-CH NMs)负载紫杉醇(PTX),考察了该胶束体系的载药性能与体内外特性.研究结果表明,γ-PGA-graft-CH NMs对PTX体现了良好的负载性能,佳药载比为1/10,载药量达26.9％±0.8％,包封率88.6％±1.7％,对应载药纳米胶束(PTX/NMs)的粒径为(343.5±7.3) nm;体外释药结果显示,PTX/NMs能延缓PTX的释放,并具有pH敏感的释药特性和较低的细胞毒性;药代动力学研究表明,PTX/NMs在小鼠体内的消除半衰期(t1/2β)、血药浓度-时间曲线下面积(AUC)均明显大于PTX/聚氧乙烯蓖麻油注射剂(PTX/PCO),并具有较低的清除率(CL);PTX/NMs在肝脏和瘤体分布高于PTX/PCO,且对荷瘤小鼠具有良好的抑瘤效果.本研究针对将γ-PGA-grafi-CH NMs用于抗肿瘤给药系统奠定了一定的基础.
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六种中草药抗突变及抗肿瘤活性的实验报告
目的:探讨仙鹤草、山楂、香菇、杏仁、大枣、板蓝根等6种中草药的抗突变抗肿瘤作用及其机制.方法:采用抗突变和致突变同步快速试验研究了6种中草药的抗突变和致突变性;采用体外抑瘤试验研究了6种中草药的4个浓度组对4种肿瘤细胞的抑制作用.结果:经加和不加大鼠肝脏微粒体酶 (S9) 2种试验,6种中草药均未显示有致突变毒性,香菇、山楂、杏仁、大枣显示对MMC引起的致突变作用有拮抗效应;仙鹤草、山楂、香菇水溶性提取液的各浓度组对4种肿瘤细胞的3H-TdR掺入均有抑制作用,且随浓度的增加,抑制作用有增强趋势.结论:香菇、山楂、杏仁、大枣具有抗突变活性,仙鹤草、山楂、香菇对MT-Ⅱ、L929、SK、K562 4种细胞的DNA合成有明显抑制作用.
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苦马豆素的抑瘤作用
目的观察不同浓度的苦马豆素(Swainsonine,SW)对S180、EMT6瘤株的体内、体外抑瘤作用.方法体外抑瘤试验采用MTT法,体内试验采用小鼠移植瘤法,瘤株为鼠源性S180肉瘤及EMT6乳腺癌细胞株.结果MTT试验显示SW(纯度≥98%)对EMT6细胞株的EC50为1.2(0.8～1.6)mg@L-1;完全致死剂量为6.4mg@L-1.灌胃剂量为4、8、16mg@kg-1的SW(粗提物),给药12d后,对S180和EMT6荷瘤小鼠的肿瘤生长的抑制作用具有明显量效关系,其抑制率分别为30.9%、44.0%、49.7%和28.2%、42.3%、49.4%(P＜0.01),合并放疗对S180瘤株抑制率达64.5%(P＜0.01),并维持外周血WBC及脾重在正常水平.结论SW有明显抗癌及免疫促进作用.
